Qiguang Dejian Pharmaceutical Technology (Suzhou) Co., Ltd.

ADC（Antibody Drug Conjugate）药物源于 1913 年 Paul Ehrlich 提出的“魔法子弹”概念，即将细胞毒药物连接到靶向特定目标的抗体而构成复合体。由于兼具抗体和小分子药物性能，ADC 药物可以使细胞毒药物精准达到肿瘤细胞，发挥作用。延续 ADC 药物的设计思路，根据定位配体、连接臂和效应分子三类组成部分的不同，形成了“万物皆可偶联”的态势。除了 ADC 之外，还包括核素偶联药物（RDC）、小分子偶联药物（SMDC）、多肽偶联药物（PDC）、抗体免疫刺激偶联药物（ISAC）、抗体片段偶联药物（FDC）、抗体寡核苷酸偶联物（AOC）等。偶联药物可通过多种偶联技术制备，如基于氨基、巯基的非定点偶联技术，但其产物异质性高、工艺控制复杂。新兴的各种定点偶联技术，能够克服产品异质性缺陷，例如酶法偶联技术、THIOMAB 技术、非天然氨基酸偶联技术等。本文将结合迈百瑞的经验对酶法定点偶联技术进行介绍。酶法偶联在偶联工艺开发中的优势01提高产品均质性通过特异性识别特定序列（如：CXPXR 五肽序列）或修饰位点（如：Q295 谷氨酰胺），实现抗体与小分子药物的定点偶联，生成高均质性偶联产物，目标 DAR 值主峰 ≥ 80%，显著减少传统随机偶联中 DAR 分布过宽导致的可能的药效波动、体内代谢差异和毒副作用风险。02‌降低分析方法开发难度偶联位点固定，产品无其他非目标 DAR 值组分，且目标 DAR 值组分无多样异构体，可减小 DAR 值检测、电荷异构体检测等分析方法开发成本。03‌‌提高工艺稳健性酶法偶联反应条件温和（如接近中性 pH、室温），且酶具高特异性，传统化学偶联工艺中影响产品质量的反应浓度、投料比、反应温度和时间等参数对酶法偶联影响较小，规模放大及连续生产中稳健性强。04‌‌‌适配多类型靶向分子和 payload 支持多样化偶联策略，多种不同类型酶（谷氨酰胺转移酶、分选酶、PPTase 等）可供选择使用。适配不同类型靶向分子（抗体、纳米抗体、多肽等）和 payload 类型（小分子化药、核酸、PROTAC、分子胶等）。常用的酶法偶联技术及案例（以抗体为例）01‌‌‌谷氨酰胺转氨酶（TGase）法TGase 可催化去 N 糖抗体上特定谷氨酰胺（Q295 位点）与含伯胺的连接子反应，实现定点偶联。‌应用案例‌：利用微生物 TGase，在去糖基化抗体的 Q295 位点偶联 MMAE （单甲基奥瑞他汀 E），获得 DAR=2 的均一产物，显著提升肿瘤细胞杀伤效率。‌曲妥珠单抗通过 C 端融合 SPI7G 标签，利用 TGase 将 MMAE 偶联至抗体，产品 DAR 值1.81，对 SK-BR-3 乳腺癌细胞 IC₅₀ 为 151 pmol/L。02‌‌甲酰甘氨酸生成酶（FGE）法利用基因编码的五肽序列 CXPXR（X 表示任意一种氨基酸），序列中半胱氨酸被 FGE 识别，并将其 R 基替换为醛基形成为甲酰甘氨酸。通过 HIPS（hydrazino-Pictet–Spengler）化学方法与醛特异性连接子（2-（联氨甲基）-3-吲哚）选择性偶联。‌应用案例‌：SMARTag 技术‌（Redwood Bioscience）：Redwood Bioscience 公司的专利 SMARTag ™ 技术采用 FGE 实现抗体与药物的定点偶联。在抗体中引入 CXPXR 序列，经 FGE 处理后形成醛基，与毒素连接子稳定结合，生成 DAR=2 的 ADC，适用于实体瘤治疗。03‌分选酶 A 介导偶联‌分选酶 A（Sortase A）可以识别 LPXTG 氨基酸序列 （X 表示任意一种氨基酸），将 T-G 间肽键断裂形成 LPXT-Srt A，含亲核 oligo-G 的分子进入重构形成新的肽键。利用 Sortase A 的这个特性，可以在 oligo-G 上连接各种类型的分子，来实现与抗体特定位点的偶联。‌应用案例‌：NBE Therapeutics 公司利用这一方法，通过将 LPETG 标签融合到重链 C- 末端，然后与五甘氨酸修饰的细胞毒有效载荷蒽环类 PNU-159682 的衍生物连接，开发了ADCs 药物 NBE-002 (已进入临床)；启德医药开发了基于重链 C 端 LPGTG 的 GQ-1001。04‌类异戊二烯转移酶在抗体 C 端插入由若干甘氨酸序列连接的 CAAX 序列，利用类异戊二烯转移酶将异戊二烯基连接在 CAAX 序列的半胱氨酸残基上，再与连接子发生肟连接反应，从而实现抗体药物定点偶联。‌应用案例‌：LegoChem Biosciences 公司利用这一方法开发了新型 ADC 平台技术 ConjuAll，并与国内外多家企业达成合作开发协议。05‌‌酶工程糖基化偶联通过在糖基上引入一个新的反应基团，然后利用点击化学相关试剂进行定点偶联。‌应用案例‌：Synaffix 公司创建的 GlycoConnect™ 技术，包括用 EndoS 修剪 Fc 糖链，随后转移 GalNAz 或叠氮-半乳糖基团，以及最终点击连接子-载荷。结合多种连接子-载荷选项，这项技术已被多家合作公司用来生成 DAR 2/4 的均质 ADC。不同新药研发企业对上述工艺进行了进一步开发，比如康宁杰瑞利用特有的糖定点偶联平台自主研发的 HER2 双表位ADC 药物 JSKN003：将抗体分子 KN026 重链糖基经过酶催化和点击化学反应获得 DAR 值约为 4 的定点修饰ADC。JSKN003 目前在中国和澳大利亚正在进行多项不同阶段的临床研究，在 HER2 表达的乳腺癌、铂耐药卵巢癌以及 HER2 高表达的其他实体瘤患者中疗效尤为明显。【点击了解更多】中国科学院上海药物研究所黄蔚教授团队利用 EndoS2 的同时去糖基化/转糖基化活性，建立了一单酶法糖基化偶联技术，其中去糖基化和将叠氮二糖转移到去糖基化抗体在同一个反应系统中同时发生，仅用一种酶。由于二糖对 EndoS2 来说是一种非天然底物，由于糖链修饰的截短，叠氮功能化抗体的转糖基化产物对酶的水解具有高度抵抗力。叠氮抗体随后可以通过 SPAAC 与 DBCO-连接子-载荷偶联，产生位点特异性 gsADC。这种简洁的方法显示了对GlycoConnect™ Synaffix 技术的明显领先优势，因为它将两个酶两步反应减少到单酶一锅重塑。酶法偶联 ADC 的挑战与限制‌酶反应效率与条件限制酶法偶联高度依赖酶的催化活性及催化反应条件（如 pH、温度、离子强度等），反应参数偏差可能导致产品收率波动。‌‌残留物清除难题‌反应后需去除未偶联的游离药物、酶及副产物，但酶法产物的理化性质与传统方法不同，现有纯化技术（如亲和层析、疏水层析）效率有限，可能增加杂质残留风险。迈百瑞偶联工艺开发平台目前迈百瑞已完成一百多个综合性 ADC 项目，最大生产规模可以达到 300L。其中 40 多个 ADC 项目完成中、美 、欧、澳的 IND 申报以及临床样品的生产，3 个 ADC 项目完成 PC 研究及 PPQ 生产。迈百瑞在酶法偶联 ADC 开发领域拥有丰富经验，涵盖： 酶及底物的严格质量控制酶催化条件的开发与优化酶及底物等杂质的高效去除以及相关杂质的表征研究序列改造抗体工艺开发及大规模生产抗体及 ADC 分析方法开发以及表征研究抗体及 ADC 的制剂工艺开发迈百瑞部分酶法偶联项目某酶催化项目酶联效率及纯化后产品质量展示偶联后 DAR 2 组分占比 ＞ 80%纯化后 DAR 2 组分占比 ＞ 95%依托成熟的偶联工艺开发平台、多规模生产转化经验、稳定的抗体质量控制和物料质量控制策略，迈百瑞可以有效解决酶法偶联存在的问题和挑战，助力更多客户加速 ADC 药物的工艺开发与产业化进程！参考文献：1. Dominik Schumacher1 & Christian P. R. Hackenberger1 & Heinrich Leonhardt2 & Jonas Helma2, Current Status: Site-Specific Antibody Drug Conjugates,The Author(s) 2016.2. Alicja M. Sochaj, Karolina W. Świderska, Jacek Otlewski, Current methods for the synthesis of homogeneous antibody–drug conjugates, Biotechnology Advances 33 (2015) 775–784.3. Stephen J. Walsh, Jonathan D. Bargh, Friederike M. Dannheim, Abigail R. Hanby, Hikaru Seki, Andrew J. Counsell, Xiaoxu Ou, Elaine Fowler, Nicola Ashman, Yuri Takada, Albert Isidro-Llobet, Jeremy S. Parker, Jason S. Carroll and David R. Spring, Site-selective Modification Strategies in Antibody–Drug Conjugates, Chem. Soc. Rev.,2021,50, 1305—1353.4. Paresh Agarwal and Carolyn R. Bertozzi, Site-Specific Antibody−Drug Conjugates: The Nexus of Bioorthogonal Chemistry, Protein Engineering, and Drug Development, Bioconjugate Chem. 2015, 26, 176−192.5. Wei Shi, Wanzhen Li, Jianxin Zhang, Tiehai Li, Yakai Song,Yue Zeng, Qian Dong, Zeng Lin, Likun Gong, Shuquan Fan, Feng Tang, WeiHuang, One-step synthesis of site-specific antibody-drug conjugates by reprograming IgG glycoengineering with LacNAc-based substrates, Acta Pharmaceutica Sinica B 2022;12(5):2417-2428.6. 陈俞伽, 游子怡, 熊婵鹓等, 抗体偶联药物合成过程中定点偶联技术的前沿进展[J]. 中国现代应用药学, 2024, 41(2): 261-276.识别微信二维码，添加抗体圈小编，符合条件者即可加入抗体圈微信群！请注明：姓名+研究方向！本公众号所有转载文章系出于传递更多信息之目的，且明确注明来源和作者，不希望被转载的媒体或个人可与我们联系(cbplib@163.com)，我们将立即进行删除处理。所有文章仅代表作者观点，不代表本站立场。

据药时代不完全统计，2025年4月中国医药BD出海交易共计5笔，已披露首付款共计1.52亿美元，总金额28.4亿美元，环比3月份的121.25亿美元，显著降低。恒瑞医药4月7日，恒瑞与德国默克达成合作，后者获得SHR7280在中华人民共和国大陆地区（不包含香港、澳门特别行政区和台湾）商业化的独家权利以及SHR7280在授权区域之外区域的优先谈判权。恒瑞则获得1500万欧元的首付款，并且产品在获得中国药监局批准后，恒瑞有资格获得一定的里程碑付款，同时默克将向恒瑞支付达到实际年净销售额两位数的销售提成。兆科眼科4月16日，兆科眼科与Interpharma Public Company Limited就于泰国商业化NVK002（一种控制近视加深的创新疗法）；BRIMOCHOL™PF（一种治疗老花眼的创新药物）；以及六款针对青光眼的仿制药（贝美前列素、贝美素噻吗洛尔、拉坦前列素、拉坦噻吗、曲伏前列素及曲伏噻吗）分别订立三份分销及供应协议。根据协议条款，兆科眼科将授予Interpharma于泰国进口、分销、推广、营销及销售该等产品的独家权利。Interpharma将代表兆科眼科取得相关的当地药物注册。该等已签订的协议将让兆科眼科可获得不可退还、不可抵扣的预付款项及按照若干成就获得额外里程碑付款。华深智药4月17日，华深智药子公司Earendil Labs与赛诺菲就两种潜在的首创双特异性抗体达成许可协议，用于自身免疫性和炎症性肠病领域。根据协议，赛诺菲将获得两种双特异性抗体 HXN-1002 和 HXN-1003 的全球独家授权，这两种抗体均将利用 Earendil Labs 专有的人工智能和高通量发现与研究平台进行开发。作为协议的一部分，Earendil Labs 将获得 1.25 亿美元的预付款，并有资格获得总计高达 17.2 亿美元的开发和商业里程碑付款，其中包括 5000 万美元的近期付款。此外，Earendil Labs 有资格获得从高个位数到低两位数不等的产品销售额的分级版税。橙帆医药4月18日，橙帆医药与美国Ollin Biosciences就自主研发的双特异性抗体药物VBS-102达成全球独家授权协议。Ollin获得该药物在大中华区以外的全球开发、生产及商业化权益，橙帆医药保留大中华区权益。 根据协议条款，本次交易总金额最高可达4.4亿美元，包含首付款、开发、注册及商业化里程碑付款。此外，橙帆医药将获得授权区域销售的分级特许权使用费。荃信生物4月24日，荃信生物宣布与Caldera Therapeutics达成合作，后者获得临床前阶段长效自免双抗QX030N开发及商业化的全球独家许可。作为回报，荃信生物或其指定联属公司将获得1000万美元一次性、不可退还及不可抵扣的预付款及Caldera约24.88%的股权；在达成特定临床开发、监管及商业里程碑的前提下，荃信生物还可获得最多5.45亿美元的额外付款；此外，荃信生物有权在QX030N首次商业销售后的一段特定时间内收取销售净额的分级特许权使用费。海外获批上市概况据药时代不完全统计，4月共有14家药企宣布旗下产品实现海外获批上市，大部分仍是原料药出海。其中，正大天晴/康方生物的PD-1派安普利单抗为创新药出海。4月25日，安尼可（派安普利单抗注射液）已获得美国FDA批准上市，用于治疗复发或转移性鼻咽癌（NPC）的一线治疗和以铂类为基础的至少一线化疗治疗进展后治疗的2项适应证。截至日前，中国PD-1在美获批数量达到三款，分别来自百济、君实、正大天晴/康方。小结2025年一季度国内创新药企的出海表现令人瞩目，33笔交易，已披露金额超362亿美元。其中，单就启德医药的大宗商务战略合作（超130亿美元）就超过了本月授权出海总额。其次，第一季度中ADC为出海主力，8笔交易，已披露金额达165.27亿美元。而4月，双抗为出海主力，5笔交易中有3笔为双抗。值得一提的是，目前AACR年会正在举行，中国的多特异性抗体颇为亮眼，尤其是在2024年世界肺癌大会（WCLC）康方宣布旗下依沃西单抗（PD-1/VEGF双抗）在HARMONi-2研究中头对头击败药王K药之后，中国多抗的吸引力再度飙升。期待本届AACR年会结束后能有相关交易达成。图片来源：正文关税阴云下，大型药企并购热情不减，哪些中国药企可能被收购？2025-04-27脑癌无情，科学有爱：这位全球知名肿瘤医生以身试药，为革命性药物 “打样”2025-04-26FDA批准73款生物类似药，仅66%商业化！从修美乐看市场困境2025-04-25版权声明/免责声明本文为汇编文章。本文仅作信息交流之目的，不提供任何商用、医用、投资用建议。文中图片、视频、字体、音乐等素材或为药时代购买的授权正版作品，或来自微信公共图片库，或取自公司官网/网络，部分素材根据CC0协议使用，版权归拥有者，药时代尽力注明来源。如有任何问题，请与我们联系。衷心感谢!药时代官方网站:www.drugtimes.cn联系方式:电话:13651980212微信:27674131邮箱:contact@drugtimes.cn点击这里，查看更多精彩!

在美国芝加哥举办的2025年美国癌症研究协会（AACR）年会上，双载荷ADC成了新焦点。根据大会发布的摘要，至少14款双载荷ADC将亮相，国内药企相关产品占据了半壁江山，其中大多数项目此前从未披露过。而就在一年前的AACR大会，还仅仅只有4个双载荷ADC的身影。在ADC成为药物研发顶流的时代，双载荷前景极具想象力，或将成为ADC领域的下一个大爆点。1双载荷的魅力尽管ADC目前在多种肿瘤疾病中均展现出潜力，但肿瘤异质性和耐药仍是该领域目前最大的挑战，前者可导致肿瘤的持续复发与转移，而后者则会导致肿瘤的侵袭性生长和低生存率，所以如今绝大多数ADC研究目的均是为了克服这些障碍，而双载荷ADC或将成为潜在的解决方案。双载荷ADC通过在一种抗体上偶联两种或多种不同载荷或同一载荷的两种不同Linker，灵活调整药抗比（DAR）值，提高ADC活性，产生添加或协同效应，提高治疗效果，扩展适应症范围，并克服耐药性。然而，两种生物活性分子因作用机制不同、生物活性各异、药代性质差别，其起效剂量、毒性剂量均有不同，采用简单的1：1的比例与抗体偶联形成的ADC，难以保证分子有效且安全，成药的可能性较低。选择合适的荷载药物及其和抗体连接方式是成功的关键。双载荷ADC药物采取不同机制设计。毒素的组合方式决定了作用机制和疗效。在构建双载荷ADC方面，研究者们已经探索出多种方法：一种是利用两个反应位点分步进行构建，在抗体的不同位点引入单链Linker和有效载荷；另一种就是利用单一反应位点引入分支Linker，再通过点击化学反应引入有效载荷。尽管双载荷ADC构建方法目前已经较为成熟，但仍需进一步研究和改进。目前来看，双载荷ADC具备三大核心优势：1、协同增效：针对不同生物学通路（如微管破坏+DNA损伤）或同一通路的不同节点（如EGFR抑制+HER3阻断）进行联合打击，显著提升杀伤效率。例如，同时搭载拓扑异构酶抑制剂和PARP抑制剂的ADC，可针对HRR缺陷和同源重组正常肿瘤均产生强效杀伤。2、耐药预防：通过多机制联合作用降低耐药压力。例如，微管抑制剂与免疫调节剂（如STING激动剂）的组合，既能直接杀伤肿瘤细胞，又能激活抗肿瘤免疫，形成“杀伤－免疫”正反馈循环。3、旁观者效应：部分载荷（如RNA干扰分子）可靶向肿瘤相关成纤维细胞或免疫抑制细胞，重塑微环境以增强整体疗效。2热度拉满尽管就现阶段而言，全球双载荷ADC的研发仍处于早期探索阶段，但这一赛道如今却拥有前所未有的研发热度，以至于全球药企短时间内就掀起了一场“抢位赛”，其中国内康弘药业率先出线，其研发的KH815成为全球首个进入临床试验的新型双载荷（dual-payload）抗体偶联药物（ADC），并在此次AACR亮相备受业内关注。KH815是一种具有抗耐药潜力的靶向滋养层细胞表面抗原2（TROP2）的新型双载荷ADC，其双载荷能实现同时在RNA水平和DNA水平对肿瘤细胞的抑制，具有双效协同机制。此外，还能降低P-gp和HSP70蛋白的表达，克服耐药，增加细胞对化疗药物的敏感性。在双抗原+双载荷领域，杭州多禧的DXC018、上海亲和力生物的IMD2113、康宁杰瑞的JSKN021以及拓济的TJ102成为讨论焦点。前三者均围绕HER2/EGFR靶点展开，各有千秋；TJ102则另辟蹊径，剑走偏锋，选择靶向CDH6和叶酸受体α。作为连续两年参展AACR的全球双荷领域领先的瑞士公司Araris Biotech今年带来了一个靶向Nectin-4的三payload ADC，采用了两种不同的Topo1i加MMAE的组合，DAR值分别为Topo1i(2)+Topo1i(2)+MMAE(2)。在去年AACR上，Araris则公布了HER2 ADC（抗体为曲妥珠单抗，有效载荷是两种不同的TOP1i）和NaPi2b ADC（有效载荷是两种不同的TOP1i）的临床前数据，结果表明双TOP1i ADC可以最大限度地提高ADC的疗效并改善治疗指数，并且Araris的Linker非常稳定。Araris致力于开发一流的ADC，其专有连接子偶联平台AraLinQ无需对抗体进行改造，就可以在抗体的特定氨基酸上连接载荷，这一技术可通过高效的一步反应将多个协同抗癌载荷偶联到单一抗体上。这一独特的技术平台，让ADC领域老玩家罗氏心动不已，今年年初其子公司ChugaiPharmaceutical以总金额7.8亿美元达成与其共同开发下一代ADC的合作，两个月之后日本大鹏制药更是以4亿美元首付款,总金额11.4亿美元将Araris收入囊中。两项重磅交易也说明了双载荷ADC的未来前景巨大。据ApexOnco等公开数据显示，目前全球已有超20家制药企业已公布其双载荷ADC领域的布局情况，除Araris、Adcoris、GeneQuantum、Alphamab、Hummingbird、Sutro、BrickBio等海外Biotech外，国内也有多家药企涉足其中，如爱科瑞思、康宁杰瑞、百奥赛图、宜联生物、信达生物等。从靶点来看，主流的选择仍然是单靶，以较为成熟的HER2、TROP2为主，双靶点和双payload的选择或许难度更高但也是差异化的方向，而在payload的选择上则是在探索更多元化的组合，以求最大限度的发挥双payload的潜力。信达生物的双载荷ADC近日也传来好消息，其申报的1类新药靶向CEACAM5的双载荷抗体偶联药物（ADC）IBI3020在国内获批临床，拟开发治疗不可切除、局部晚期或转移性实体瘤。虽载荷暂未公开，预计不久将开启1期临床试验。虽然承诺会发布相关试验海报，但遗憾的是，并未出现在此次AACR摘要之中，大概率会在后续的ASCO等重要学术会议上展示。同样缺席本次AACR的还有美国生物技术公司CrossBridge Bio。这家公司去年11月刚刚完成1000万美元的私募融资，其主攻方向便是双荷载ADC。其管线中研发进度最快的为CB-120，为TROP-2双载荷ADC，载荷为exatecan和ATR抑制剂。3结语从当下局势来看，康弘的KH815和信达的IBI3020已率先叩响临床大门，但这场竞赛才刚刚拉开帷幕，未来充满诸多不确定性。首当其冲的就是疗效与安全的平衡问题。双载荷ADC的设计绝非简单的“1+1”模式，双载荷ADC需要同时携带两种不同机制的细胞毒性药物，导致体内代谢路径复杂化，两种载荷的释放动力学、协同效应及毒性叠加风险难以预测。双载荷ADC大热的背后，有着清晰且现实的临床需求。在实际治疗过程中，接受ADC治疗的患者出现复发的原因复杂多样，靶抗原丢失、对载荷产生耐药性等问题屡见不鲜。双载荷ADC能否成功突破这些困境，为肿瘤患者带来新的生机与希望，最终还得依靠严谨的临床来给出答案。参考来源1.各公司官网2.Fu,Z.,et al.,Antibody drug conjugate:the"biological missile"for targeted cancer therapy.Signal Transduct Target Ther,2022.7(1):p.93.声明：本内容仅用作医药行业信息传播，为作者独立观点，不代表药智网立场。如需转载，请务必注明文章作者和来源。对本文有异议或投诉，请联系maxuelian@yaozh.com。责任编辑 | 史蒂文合作、投稿、转载开白 | 马老师 18323856316（同微信） 阅读原文，是受欢迎的文章哦