疱疹病毒治疗新策略：探索治疗性疫苗

2024-06-28

疫苗信使RNA

综述：疱疹病毒建立潜伏感染，并且大多数频繁复发，在健康个体中导致症状和病毒脱落。在免疫受损的患者中，复活的病毒可能导致严重疾病。持续的EB病毒与免疫受损和非免疫受损人群中的几种恶性肿瘤有关。尽管在血液中测量到了强大的病毒特异性抗体和T细胞免疫，但大多数疱疹病毒仍然会发生复发和脱落。治疗性疫苗的批准用于减少带状疱疹表明，为其他疱疹病毒开发有效的治疗性疫苗应该是可行的。然而，水痘-带状疱疹病毒与其他人类疱疹病毒不同，因为它通常只在水痘和带状疱疹期间脱落。与预防性疫苗不同，其中免疫的相关性是抗体功能，T细胞免疫是唯一有效的治疗性疱疹病毒疫苗——带状疱疹疫苗的免疫相关性。尽管大多数治疗性疫苗的研究都测量了血液中的免疫，但对于某些病毒，复发部位的细胞免疫对于有效的治疗性疫苗至关重要。这篇综述总结了针对单纯疱疹病毒、巨细胞病毒和Epstein-Barr病毒的治疗性疫苗的现状，并提出了未来发展的方法。摘要：疱疹病毒会导致潜伏性感染，并且大多数会频繁复发，在健康个体中引起症状和病毒脱落。在免疫受损的患者中，病毒的复活可能导致严重疾病。持续的EB病毒与免疫受损和非免疫受损个体中的多种恶性肿瘤有关。尽管血液中检测到了强大的病毒特异性抗体和T细胞免疫，但大多数疱疹病毒仍会发生复发和脱落。批准用于减少带状疱疹的治疗性疫苗表明，为其他疱疹病毒开发有效的治疗性疫苗是可行的。然而，水痘-带状疱疹病毒与其他人类疱疹病毒不同，因为它通常只在水痘和带状疱疹期间脱落。与预防性疫苗不同，在预防性疫苗中，免疫的相关性是抗体功能，而T细胞免疫是唯一有效的治疗性疱疹病毒疫苗——带状疱疹疫苗的免疫相关性。虽然大多数治疗性疫苗的研究都测量了血液中的免疫反应，但对于某些病毒，复发部位的细胞免疫对于有效的治疗性疫苗至关重要。本综述总结了针对单纯疱疹病毒、巨细胞病毒和Epstein-Barr病毒的治疗性疫苗的现状，并提出了未来发展的方法。引言疱疹病毒感染会持续个体一生，并可能在复发或与恶性肿瘤相关时带来显著的发病率（见表1）。单纯疱疹病毒（HSV）的复发会导致生殖器或口腔HSV的复发和免疫受损患者的内脏疾病。水痘-带状疱疹病毒（VZV）的复发会导致带状疱疹和免疫受损患者的器官疾病。巨细胞病毒（CMV）的复发可在移植受者中引起严重的器官疾病。Epstein-Barr病毒（EBV）与多种上皮细胞癌和B细胞淋巴瘤有关；在这些癌症中，至少有一个病毒基因在每个肿瘤细胞中表达。已经为HSV、CMV和EBV进行了多次预防复发的治疗性疫苗的临床试验，但尚未有疫苗获得许可。治疗性疱疹病毒疫苗可能除了预防病毒复发或在EBV的情况下治疗与病毒相关的恶性肿瘤之外，还有额外的好处。慢性病毒感染可能会扰乱免疫系统，导致自身免疫疾病的风险增加。EBV是多发性硬化症的危险因素。慢性病毒感染还与持续炎症有关；一些研究报告称，患有慢性疱疹病毒感染的患者患痴呆症的风险增加。接种减毒带状疱疹疫苗病毒的人被报告患痴呆症的风险较低。本综述评估了人类疱疹病毒治疗性疫苗的历史，并提出了疫苗开发的原则。表 1. 与复发性和持续性选定疱疹病毒感染相关的疾病原则证明：治疗性疱疹病毒疫苗的可行性两种治疗性疫苗对带状疱疹的成功证明了治疗性疫苗对疱疹病毒是可能的。虽然抗体功能是预防初次感染的许可病毒疫苗的保护相关性，包括水痘疫苗，但VZV特异性CD4细胞被认为是VZV的保护机制相关性。减毒活带状疱疹疫苗（Zostavax）和亚单位带状疱疹疫苗（VZV糖蛋白E与AS01b佐剂配方，Shingrix）均降低了带状疱疹的发病率。这两种疫苗都诱导了针对VZV的病毒特异性CD4+和CD8+ T细胞反应以及介导抗体依赖性细胞毒性（ADCC）的抗体，这两者对杀死病毒感染的细胞都很重要。此外，VZV糖蛋白E作为病毒Fc受体，针对糖蛋白E的抗体可能阻断病毒Fc受体活性，从而增强ADCC。尚未为HSV、CMV或EBV批准治疗性疫苗。然而，HLA匹配的病毒特异性T细胞输注在减少CMV和EBV复发相关的病毒血症和治疗疾病方面的成功表明，如果疫苗能够诱导类似的病毒特异性T细胞反应，那么它应该是有效的。病毒特异性T细胞的几个特性被认为对其活性很重要，这些特性可能对治疗性疫苗也很重要。首先，应存在CD4+和CD8+效应T细胞，以确保最佳抗病毒活性。其次，应识别不止一种病毒表位，以减少因病毒抗原突变或多态性而导致效力受损的风险。第三，病毒特异性T细胞必须识别与I类和II类MHC抗原相关的病毒抗原。基于病毒特异性T细胞在减少与CMV和EBV相关的疾病方面的成功，疫苗诱导这些细胞应是治疗性疫苗的重要目标。 HSV、CMV和EBV治疗性疫苗的困难两种疫苗在预防带状疱疹方面的有效性表明，其他疱疹病毒的治疗性疫苗可能也是可能的。然而，VZV与其他人类疱疹病毒有几个不同之处，这些病毒的治疗性疫苗尚未获得批准。与其他人类疱疹病毒不同，VZV从没有症状的疾病（水痘或带状疱疹）的病毒感染者那里脱落和传播的频率要低得多。在没有接种疫苗的情况下，大约50%的80岁或以上的人一生中会有一次带状疱疹发作。因此，在没有重新接触VZV的老年未接种疫苗的个体中，免疫系统可能在初次感染后超过50年没有接触到VZV。因此，带状疱疹的治疗性疫苗可能在成人中诱导大量增加的VZV特异性免疫。 HSV、CMV和EBV在唾液中非常频繁地脱落，因此，免疫系统经常接触到复制病毒。在一项研究中，主要是无症状HSV患者的患者每天四次擦拭他们的口腔和生殖器粘膜，20.5%的生殖器拭子和11.6%的口腔拭子HSV检测呈阳性。因此，尽管HSV经常复发并使免疫系统接触到病毒蛋白，但免疫系统通常无法防止复发。CMV和EBV也经常在唾液中脱落。因此，这些病毒的治疗性疫苗可能需要诱导比自然免疫时更强大的免疫反应。 HSV、CMV和EBV与VZV不共有的一个共同特征是它们表达大量免疫逃逸基因，这些基因可能允许尽管有强大的免疫反应仍然发生复发。这些病毒编码的蛋白质能够抑制干扰素、抗体和补体功能、病毒抗原呈现给MHC I类和II类，以及NK细胞活性。相比之下，VZV是人体疱疹病毒中最小的，尽管它有一些免疫逃逸基因，但它缺乏其他疱疹病毒编码的许多免疫逃逸基因的同源物。因此，对于免疫系统和疫苗来说，预防VZV的复发可能比预防其他人体疱疹病毒的复发更容易。为疱疹病毒治疗性疫苗选择靶点从使用病毒特异性T细胞治疗中学到的教训，我们可能会选择相同的表位作为CMV和EBV治疗性疫苗的靶点表位。Psouleucel T细胞针对CMV的即刻早期1（IE1）和pp65的包裹蛋白，EBV的IE BZLF1，以及EBNA1和LMP2潜伏蛋白。已经使用了几种方法来选择治疗性疱疹病毒疫苗的靶点（表2）。表2. 选择治疗性疫苗病毒靶点的选项第一种方法是确定大多数人经常识别为T细胞靶标的病毒蛋白。早期研究表明，外周血液中HSV-2特异性CD8+ T细胞最频繁的靶标（按降序排列）是UL39（核苷酸还原酶的大亚基）、UL25衣壳蛋白、糖蛋白B（gB）、IE蛋白ICP0，以及包裹蛋白（UL46和UL47）。HSV糖蛋白（gD、gB）、包裹蛋白和IE蛋白一直是HSV治疗候选疫苗的主要焦点（图1A）。CMV的类似研究表明，病毒特异性CD8+ T细胞最频繁的靶标（按降序排列）是UL48和pp65包裹蛋白以及IE1和IE2蛋白，而最常见的CD4+ T细胞靶标（按降序排列）是gB、pp65、UL86衣壳蛋白、UL99包裹蛋白和IE2蛋白。pp65、IE1和IE2蛋白以及gB一直是CMV疫苗治疗试验中使用的主要免疫原（图1B）。对EBV的研究表明，CD8细胞最常见的靶标是IE蛋白BZLF1和BRLF1、BMRF1蛋白（聚合酶的一个组成部分）和EBNA3潜伏蛋白。EBV CD4细胞最常见的靶标是EBNA1、EBNA2和EBNA3潜伏蛋白。EBNA1和LMP2一直是治疗性EBV疫苗的主要靶标（图1C）。图 1. 受感染细胞上治疗性疫苗的病毒组分。(A) 单纯疱疹病毒（糖蛋白D [gD]、gB、即刻早期 [IE] ICP4、UL46 和 UL49 包裹蛋白），(B) 巨细胞病毒（IE1、IE2、pp65 包裹蛋白、gB），以及 (C) EB病毒感染的细胞（即刻早期 BZLF1 蛋白、LMP2、EBNA1）。根据它们在受感染细胞中的位置显示蛋白质，但病毒肽段通过MHC I类或II类呈现在细胞表面。另一种方法是观察免疫血清阴性者的T细胞靶标。这些个体已经接触过病毒并对病毒蛋白有T细胞反应，但他们没有被感染，因为他们没有病毒抗体，并且在血液或分泌物中没有检测到病毒。已经描述了免疫血清阴性的个体在接触HIV、HSV和EBV但未被感染的人中。目前尚不确定免疫血清阴性的个体是否真的受到感染的保护，如果是，这种保护能持续多久。一项研究中，免疫血清阴性个体中HSV特异性T细胞最常见的靶标是UL39，其次是IE ICP4和ICP0蛋白和UL29（主要的DNA结合蛋白）。已经对HSV进行了额外的分析，研究了有症状复发频率不同的人；由于在健康人中复发几乎总是无症状的，因此尚未对CMV和EBV进行类似的分析。更好地了解为什么有些人只有无症状的HSV复发，而其他人有频繁的症状复发，可能为开发HSV治疗性疫苗提供重要线索。对HSV-2蛋白的T细胞反应的分析组合包括（a）血清阳性个体中T细胞反应的总体频率，（b）无症状与有症状感染者的响应，（c）免疫血清阴性与有症状个体中更高的反应，以及（d）受保护与未受保护个体中更高的反应（基于他们在已知暴露后抵抗感染的能力、有无症状感染或没有复发疾病）。利用这些分析，ICP4、UL2（尿嘧啶DNA糖基化酶）、UL11（一种包裹蛋白）和UL40（核苷酸激酶的小亚基）是CD4+和CD8+ T细胞最常针对的HSV蛋白。针对IE和包裹蛋白的病毒蛋白的大量可能反映了它们在感染期间的早期表达或它们在感染细胞的病毒粒子中的存在，导致它们在病毒免疫逃逸分子能够阻止病毒蛋白的识别之前暴露给T细胞。治疗性疫苗的另一种方法是针对免疫逃逸分子。如上所述，许多疱疹病毒编码抑制免疫反应的蛋白质。一种编码抑制抗体和补体活性的gE和gC的HSV mRNA疫苗正在进行I期临床试验（ClinicalTrials.gov NCT05432583）。除了病毒特异性T细胞外，抗体效应功能也可能对杀死病毒感染的细胞很重要（表3）。ADCC、补体介导的细胞毒性和抗体依赖性细胞吞噬作用可能除了T细胞外，还有助于杀死疱疹病毒感染的细胞。目前，尚不确定抗体效应功能与病毒特异性T细胞在预防病毒复发方面的相对贡献是多少。表3. 治疗性疱疹病毒疫苗的目标病毒特异性T细胞在HSV中的位置重要性为了使疫苗减少生殖器或口腔HSV的复发，病毒特异性CD8+ T细胞应该存在于复发部位或其附近。HSV-2特异性细胞，包括CD8组织驻留记忆T细胞，在生殖器粘膜中存在，并在复发期间数量增加。几乎所有关于T细胞识别的病毒蛋白的研究都是使用来自外周血液的细胞进行的。在复发期间，HSV-2特异性记忆T细胞从循环系统进入组织，并补充组织记忆T细胞反应。皮肤淋巴细胞相关抗原（CLA）是一种在HSV特异性CD8+ T细胞上表达的归巢标记，它可能对他们到达皮肤的能力很重要。2003年，Koelle等人从10名HSV-2感染患者中分离出表达高水平CLA的HSV-2特异性CD8+ T细胞克隆。这些克隆识别病毒包裹蛋白（52%的克隆）、衣壳蛋白（17%）、IE蛋白（13%）、糖蛋白（3%）和其他蛋白（14%）。 T细胞靶向的病毒蛋白可能与血液中的和病毒复发部位的不同。2001年，Koelle等人研究了3名患者的生殖器病变中的病毒特异性T细胞反应，发现最常见的反应是针对包裹蛋白UL47、UL49和ICP0。对8名患者的生殖器组织进行的后续研究发现，最常见的T细胞反应是针对gD（6名患者）、gB和UL39（4名患者）以及UL23（病毒胸腺嘧啶激酶，3名患者）。在动物模型中，已经成功采用了诱导病毒特异性T细胞从外周血液流向生殖器粘膜的策略。这包括（a）用外周疫苗对动物进行初次免疫，以及（b）通过应用趋化因子或免疫刺激剂将T细胞吸引到生殖道。在小鼠中的初步研究使用了趋化因子CXCL9和CXCL10来选择性地招募CD8细胞到生殖器粘膜。在豚鼠中的一项研究使用了局部应用的伊马克莫德，招募了CD8和CD4细胞；生殖器粘膜中CD4细胞数量的增加可能会增加HIV感染的风险。另一种方法可能是使用检查点抑制剂来增强治疗性疫苗的效果。在动物模型中，将抗-PD-1抗体添加到治疗性人乳头瘤病毒疫苗中增强了疫苗的效果，在人类试验中也报告了有希望的结果。然而，抗-PD-1抗体可能引起严重的免疫介导的并发症，包括结肠炎、肺炎、肝炎和内分泌病；因此，在接种治疗性疫苗的健康人群中使用抗-PD-1抗体的风险可能大于其益处。大多数在感觉神经节中的效应CD8+ T细胞在HSV潜伏期表达高水平的PD-1，这与功能耗竭的表型和体外复发增加相关。 HSV的治疗性疫苗 HSV可以在口腔和生殖器部位复发，导致病变。2023年，NIH发布了一份名为“2023-2028单纯疱疹病毒研究战略计划”的文件，其中指出“治疗性疫苗将针对已有HSV感染的患者，以引发免疫反应，减少病毒复发和病变发作的频率，并减少病毒脱落。治疗性生殖器疱疹病毒疫苗还必须减少脱落；如果一种疫苗导致症状性复发减少，但不减少无症状脱落，它可能会导致病毒传播的增加。虽然目前许可的抗病毒药物的抑制性抗病毒治疗减少了生殖器HSV的复发，并在其他健康人群中减少了大约50%的传播，但它们必须每天服用才能有效。大多数HSV的预防性疫苗都集中在病毒糖蛋白gD、gB、gE和gC上。使用灭活HSV、从感染细胞中提取的病毒抗原、从感染细胞中提取的HSV糖蛋白、铝佐剂中的重组gD、MF-59中的重组gD和gB、删除UL39的减毒活HSV和删除gH的复制缺陷HSV的治疗性疫苗的安慰剂对照试验没有成功进入进一步的临床试验。最近，一种表达截短的泛素化gD和全长gD的DNA疫苗在增强免疫后与安慰剂接受者相比，病毒脱落减少了约50%，但与安慰剂相比没有减少平均发作次数。一项针对表达gD和UL46包裹蛋白的DNA疫苗的随机、双盲、安慰剂对照研究减少了57%的新生殖器病变，但没有减少脱落（ClinicalTrials.gov NCT02837575）。一种含有32个HSV-2肽和热休克蛋白的疫苗，用皂苷作为佐剂，诱导了50%以上的疫苗接受者的病毒特异性T细胞反应，并减少了15%的病毒脱落（Agenus；ClinicalTrials.gov NCT01687595）。最有希望的疫苗之一是由Genocea生产的，包含ICP4的一部分与gD（删除了其跨膜域）在Matrix-M中作为佐剂。该疫苗在几项临床试验中进行了测试，并诱导了中和抗体和多功能病毒特异性T细胞反应。在进行的最后一项研究中，当疫苗与两种不同剂量的Matrix-M一起给予时，与安慰剂相比，它将病变率降低了37%-51%，并将复发持续时间减少了1.2天。该疫苗与接种疫苗前的水平相比，在1年内显著减少了病毒脱落。作者得出结论，“仍然需要确定的是一种疫苗策略，它将复发性疾病和复发性病毒脱落减少了约50%，大约一年，是否是比每天必须服用的更有效的抗病毒药物的可行替代品。”该疫苗尚未进一步研究。目前，正在进行两项治疗性疫苗试验。一项是HSV mRNA的剂量范围研究（Moderna，ClinicalTrials.gov NCT06033261），另一项是成分未披露的疫苗（GSK，ClinicalTrials.gov NCT05298254）。治疗性疫苗对CMV CMV是导致出生缺陷的最常见感染原因，也是器官移植和造血干细胞移植（HSCT）接受者中最重要的病毒感染。虽然大多数预防性CMV疫苗针对gB和五聚体复合物（gH/gL/UL128-131），但大多数治疗性疫苗针对pp65、IE1或IE2蛋白，或gB。与主要针对健康或轻度免疫受损个体的HSV和VZV治疗性疫苗不同，CMV的治疗性疫苗主要针对免疫受损人群，如移植接受者。这些人通常对疫苗的反应较差，这可能使得开发成功的CMV治疗性疫苗特别困难。抑制性抗病毒疗法用于减少移植接受者中与CMV相关的复发和疾病。目前可用的CMV抗病毒药物存在问题，包括与其他药物的众多相互作用（来特莫韦）、骨髓毒性（更昔洛韦）或肾脏毒性（福斯卡尼特）。因此，有效的CMV治疗性疫苗可以避免使用具有严重副作用和药物相互作用问题的药物。最早进行临床试验的治疗性疫苗之一是减毒的CMV Towne株。对血清阳性的肾脏移植接受者的疫苗接种没有带来益处；然而，血清阴性接受者的CMV疾病较轻。更多的近期试验使用了CMV亚单位、DNA、肽和病毒载体疫苗。对CMV血清阳性和血清阴性的肾脏或肝脏移植接受者使用CMV gB在MF59佐剂中的疫苗接种，对CMV血清阳性器官移植接受者没有保护作用；然而，血清阴性接受者从血清阳性捐献者那里获得的器官有更短的病毒血症持续时间和需要较少天数的抗病毒治疗。在CMV血清阳性HSCT移植接受者中进行的表达gB和pp65的DNA疫苗的III期试验显示，对CMV最终器官疾病和全因死亡率（主要终点）、病毒血症率或抗病毒治疗的使用没有影响。一个表达gB和pp65的淋巴细胞性脉络膜炎病毒复制缺陷疫苗（ClinicalTrials.gov NCT02798692）在从CMV血清阳性捐献者那里接受肾脏的CMV血清阴性肾脏移植接受者中无效。在HSCT捐献者中测试了一种表达CMV pp65的痘病毒（canarypox）载体疫苗的II期试验（ClinicalTrials.gov NCT00353977），但结果尚未报告。一种表达CMV pp65、IE1和IE2的痘病毒（改良的安卡拉牛痘）载体在CMV血清阳性HSCT接受者的II期试验中诱导了病毒特异性T细胞，并减少了大约50%的累积事件（病毒复发、需要治疗的病毒血症或CMV器官疾病），尽管疫苗和安慰剂之间的差异不显著。这种疫苗目前正在进行几个额外的I/II期或II期试验：在CMV血清阳性儿童接受HSCT（ClinicalTrials.gov NCT03354728）、在CMV血清阳性成人进行HSCT（ClinicalTrials.gov NCT04060277）、在HSCT捐献者（ClinicalTrials.gov NCT06059391）、在CMV血清阴性肝脏移植接受者（ClinicalTrials.gov NCT06075745）和在HIV和CMV血清阳性成人（ClinicalTrials.gov NCT05099965）。一种由CMV pp65肽与破伤风毒素的一部分结合的疫苗，配以CpG寡核苷酸佐剂，在HLA-A0201阳性的CMV血清阳性HSCT接受者的Ib期试验中诱导了病毒特异性T细胞，并显著减少了CMV病毒血症，减少了预防性抗病毒治疗的持续时间，并增加了无复发生存期，与仅观察的患者相比。这种疫苗目前正在CMV血清阳性HSCT接受者中进行II期试验（ClinicalTrials.gov NCT02396134）。计划对CMV血清阳性HSCT接受者（ClinicalTrials.gov NCT05683457）和CMV血清阳性或血清阴性肝脏移植接受者（ClinicalTrials.gov NCT06133010）进行两项CMV mRNA疫苗试验；这些疫苗包含6个mRNA，编码gB和五聚体（gH/gL/UL128-131）复合物。治疗性疫苗对EBV EBV与包括鼻咽癌、胃癌、霍奇金淋巴瘤、伯基特淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤和移植后淋巴瘤在内的几种恶性肿瘤有关。预防性疫苗一直集中在gp350，最近是gH/gL/gp42上。已经测试了治疗性疫苗用于治疗EBV恶性肿瘤，特别是鼻咽癌。不同的EBV相关癌症表达不同的病毒蛋白组；大多数EBV阳性鼻咽癌表达EBV EBNA1、LMP1和LMP2。一种表达EBV EBNA1羧基部分和EBV LMP2非活性形式的痘病毒（改良的安卡拉牛痘）载体被开发用于治疗鼻咽癌患者。该疫苗在英国和香港的鼻咽癌患者中分别诱导了针对EBNA1和LMP2的CD4+和CD8+ T细胞反应。该疫苗的II期临床试验已完成，但结果尚未公布（ClinicalTrials.gov NCT01094405）。针对各种EBV恶性肿瘤（胃癌、淋巴瘤、头颈癌、淋巴增殖性疾病）的疫苗I期临床试验也已完成，但尚未报告结果（ClinicalTrials.gov NCT01147991）。另一种治疗性EBV疫苗，一种表达LMP2的腺病毒载体，在中国的鼻咽癌患者中进行了I期临床试验；其对病毒特异性T细胞的影响尚未报告结果。含有两种不同的LMP2肽之一的肽疫苗，在Montanide ISA-51佐剂中进行了I期临床试验，试验对象为HLA-A1101或HLA-A2402的鼻咽癌患者；结果尚未报告（ClinicalTrials.gov NCT00078494）。一种使用EBV mRNA的疫苗，针对难治性EBV阳性恶性肿瘤患者，已在中国启动I期临床试验（ClinicalTrials.gov NCT05714748）。未来方向在第一个治疗性疱疹病毒疫苗——减毒带状疱疹疫苗获得许可18年后，以及带状疱疹亚单位疫苗获得许可6年后，尚无其他批准的治疗性疫苗用于其他疱疹病毒。除了与健康和免疫受损患者中病毒复发相关的发病率外，一些疱疹病毒的持续感染与恶性肿瘤有关。越来越多的证据表明，疱疹病毒可能是慢性炎症的重要原因，并且与自身免疫疾病和痴呆症有关，这强调了开发疫苗的重要性。疫苗开发的众多进展，包括病毒载体疫苗、mRNA疫苗、诱导CD4+和CD8+ T细胞反应的佐剂、用于识别病毒蛋白更具免疫原性的构象的结构生物学，以及新的粘膜疫苗方法，为我们提供了额外的治疗性疱疹病毒疫苗将取得成功的乐观态度。识别微信二维码，添加生物制品圈小编，符合条件者即可加入生物制品微信群！请注明：姓名+研究方向！版权声明本公众号所有转载文章系出于传递更多信息之目的，且明确注明来源和作者，不希望被转载的媒体或个人可与我们联系(cbplib@163.com)，我们将立即进行删除处理。所有文章仅代表作者观点，不代表本站立场。