宜明细胞：iPSC+基因编辑，赋能细胞与基因治疗新时代

2023-05-30

细胞疗法基因疗法信使RNA临床研究

5月31日（周三）晚上20:00，直播间邀请艾尔普再生医学CTO张键和宜明细胞董事长兼CTO孙秀莲分享“iPSC来源的细胞药物开发与应用”，敬请关注。2006年，日本人Takahashi和Yamanaka利用逆转录病毒在小鼠纤维母细胞导入Oct4、Sox2、Klf4 和 c-Myc 四种转录因子，获得了诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cells, iPSCs) 。iPSC的发现为医学界带来了新的视角和福音，在细胞治疗等医学领域展现了广阔的应用前景。而通过iPSC技术与基因编辑技术（如CRISPR/Cas9）联用，可以实现个性化治疗，是目前iPSC研究领域的热点。宜明细胞一直专注于细胞与基因治疗（CGT) 技术的开发和应用，依托成熟的菌种库平台、质粒生产平台、细胞培养平台、mRNA生产平台以及腺相关病毒/慢病毒等病毒载体生产平台，对iPSC基因编辑技术流程进行了全面优化创新，可为CGT新药企业提供GMP菌种库构建、GMP质粒构建、spCas9/mRNA、dsDNA、gRNA和IPSC细胞建库一站式服务，助力相关应用的商业化发展。目前，宜明细胞已经与华卫恒源、霍德生物等多家新药企业就iPSC细胞治疗药物制备结成CDMO战略合作伙伴关系，共同开发源于iPSC的细胞药物。图1：iPSC细胞治疗工艺流程（数据来源：宜明细胞）宜明细胞iPSC细胞治疗整体解决方案GMP 菌种库构建专门的GMP原核细胞库构建车间和储备车间，可提供PCB、MCB）和WCB构建以及储存服务所有菌种库均按照《中国药典》要求进行鉴定验证，确保纯度和稳定性菌种可溯源GMP 质粒生产高发酵产量>1g/L，发酵规模可达200L专有的、高效的、可放大的连续流碱裂解工艺，全程参数控制创新高效的两步柱层析纯化工艺，成本降低近80%图2：200L发酵规模，每mg质粒填料成本对比(元/mg)（数据来源：宜明细胞）iPSC细胞库建库GMP厂房设有专门的真核细胞库构建和储备车间，可提供PCB、MCB和WCB的构建以及储存服务所有细胞库均按照《中国药典》要求进行鉴定验证，确保纯度和稳定性绝对A级生产环境，一次性全封闭式生产，有效避免交叉污染成熟的细胞药物生产经验图3：宜明细胞应用的细胞药物制备隔离器与蜂巢培养系统，绝对A级生产环境，一次性全封闭式生产基因编辑元件的GMP生产CRISPR/Cas9是近年来比较主流的基因编辑技术，已被广泛应用于iPSC相关的基因敲除、敲入以及点突变等。iPSC基因编辑系统主要包括以下三个基本元件：SpCas9（mRNA或蛋白），是一种双链DNA核酸酶，能在guide RNA引导下对靶位点进行切割。引导RNA（sgRNA），是真核生物中参与RNA编辑的具有与mRNA互补序列的RNA。模版（ds-DNA或ssDNA或AAV），是CRISPER技术中通过同源介导修复（HDR）进行基因敲入的理想模版之一，敲入效率高。宜明细胞自主研发的sgRNA，在添加专有的修饰片段后：具有更好的稳定性，且引导同源重组效率高生物合成，与细胞内的环境更加相似体外转录制备：操作简便、高通量、无有机试剂残留、较之化学合成，成本大幅度降低制备工艺大幅度简化，降低成本图4：sgRNA凝胶电泳检测（数据来源：宜明细胞）宜明细胞自主研发的模版GC DNA，独特的创新设计可防止核酸外切酶切割，稳定性好相比ssDNA，序列长，载量大由生物合成的，更接近细胞内环境色谱柱纯化，纯度高质粒酶可以完全消化非目的片段，只保留目的片段dsDNA制备后，可完全去除非dsDNA片段图5：DNA模板凝胶检测（数据来源：宜明细胞）宜明细胞制备的高品质cas9-mRNA/spcas9、GC-DNA、sgRNA基因编辑系统均能能高效地将目的基因进行同源重组高酶活高纯度无RNA酶残留：生产过程严格控制RNA酶污染关于宜明细胞宜明细胞（Ubrigene）成立于2015年10月，是一家致力于细胞与基因治疗（CGT) 技术的开发和应用、为CGT 产业化提供整体解决方案的研发生产型生物技术公司。宜明细胞在中国苏州、济南以及美国波士顿建立了近17000m2 GMP生产基地，可提供GMP级别质粒、AAV、慢病毒、溶瘤病毒、CAR-T/NK、源于iPSC的药物以及RNA药物等一站式CDMO服务，支持中美双报。其中波士顿基地占地近3000 m2，拥有十余条GMP生产线，目前已完成数十批次临床级产品的制备并经FDA现场审计合格。宜明细胞还在美国马里兰和加拿大温哥华建有专注于前瞻性技术开发应用的CMC研发中心。宜明细胞专注于CGT核心生产技术的创新与突破，在CGT多个细分领域具备行业内领先的核心竞争优势。成熟的生产平台工艺、完善的GMP 体系及丰富的项目经验，可全方位满足客户各个阶段的生产需求，包括早期研发、IIT、IND、临床试验及商业化生产。自2019年以来，公司已在国内外承接/交付IND、IIT产品百余批次，仅2022年，就有4项细胞基因药物IND成功获CDE默示批准，顺利进入临床。宜明细胞以“让生命更健康，让世界更美好”为己任，践行“宜众济世，明德近道”的理念，为惠及病患和社会而持续努力。