Gentamicin Sulfate

点击上方的 行舟Drug ▲ 添加关注 眼科玻璃体内注射药物的临床应用研究进展 来源  《中国临床药学杂志》 2025年第34卷第1期 作者  唐凤敏，黄滔敏 复旦大学附属眼耳鼻喉科医院药剂科 摘要  玻璃体内注射是眼科常用的给药方法之一，国内外现已有多种药物批准用于玻璃体内注射，如抗血管内皮生长因子、糖皮质激素、补体抑制剂、纤溶酶和抗病毒药物等。通过对目前已获批的玻璃体内注射药物和超说明书用于玻璃体内注射的药物进行综述，为临床玻璃体内注射药物的使用提供参考。 关键词  玻璃体内注射；血管内皮生长因子；糖皮质激素；玻璃体内植入剂；眼科 _ 正文 _ 随着全球人口老龄化的加剧，以及各类慢性疾病的发病率上升，眼科疾病的治疗需求日益增长，特别是年龄相关性黄斑变性（neovascular age-related macular degeneration，nAMD）、糖尿病性黄斑水肿（diabetic macular edema，DME）和视网膜静脉阻塞（retinal vein obstruction，RVO）等眼底疾病，已成为目前导致视力损害和致盲的主要原因[1-3]。玻璃体内注射（intravitreal injection，IVI）是一种将药物直接注入玻璃体腔的操作方式[4]，是眼科常用的治疗手段之一。IVI能够提高药物在眼部的疗效，减少全身不良反应，是视网膜和脉络膜疾病的有效治疗方法[5]。自2004年首个抗血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）药物哌加他尼在美国获批上市以来，多种抗VEGF药物、糖皮质激素、补体抑制剂等药物陆续获批用于IVI，显著改善了眼科疾病的疗效。抗VEGF药物是nAMD的一线治疗药物，能够改善患者的视功能，恢复黄斑区解剖结构[1]。抗VEGF药物和糖皮质激素IVI是治疗DME和RVO引起黄斑水肿（macular edema，ME）的2种主要方式[2-8]。糖皮质激素通过多种机制产生抗炎作用，以修复视网膜屏障并减少渗出。糖皮质激素玻璃体内植入剂可以在玻璃体腔持续释放药物>6个月，抗炎效果更长效、更稳定，同时减少了眼内频繁注药可能发生的不良反应。但由于糖皮质激素可能引起白内障和眼压升高，因此通常作为二线治疗药物用于抗VEGF药物治疗应答不良或无应答的DME患者。对于人工晶状体眼或具有全身心血管病高危因素的DME患者，可考虑将糖皮质激素玻璃体内植入剂作为一线用药[3]。2023年美国FDA批准了补体抑制剂IVI用于治疗继发于nAMD的地图样萎缩（geographic atrophy，GA）。国外已获批用于IVI的药物还有纤溶酶和更昔洛韦。临床实践中，还有众多药物以超说明书用药的方式用于IVI，如贝伐珠单抗，万古霉素、头孢他啶、莫西沙星、伏立康唑、两性霉素B和甲氨喋呤等。我们对已获批用于IVI的药物进行综述，同时介绍IVI超说明书用药情况，以期为临床IVI药物的使用提供参考。 1 已获批用于IVI的药物 1.1 抗VEGF药物 1.1.1 哌加他尼 2004年美国FDA批准了哌加他尼用于治疗nAMD[9]。哌加他尼是第1个用于nAMD的抗血管生成药物[10]，标志着抗VEGF药物IVI治疗眼科疾病的开始。目前哌加他尼在FDA网址的上市状态为“已撤市”。 1.1.2 雷珠单抗注射液 雷珠单抗主要用于nAMD的治疗，该药自2006年起在美国、欧洲、日本和中国等地区陆续被批准上市[11]。一项Meta分析[12]发现，IVI雷珠单抗治疗nAMD可以防止严重的视力损失。随着临床实践，雷珠单抗注射液的适应证逐渐增加，除了适用于成人nAMD，还适用于DME、DR、RVO-ME引起的视力损害、脉络膜新生血管（choroidal neovascularization，CNV）及早产儿视网膜病变等[13]。传统的抗VEGF药物通常需要每月或每2个月进行1次注射，而雷珠单抗（port delivery system，PDS）用于IVI可以持续释放药物，随后每6个月补充1次即可[14]。随着越来越多抗VEGF生物仿制药获得批准[15]，雷珠单抗注射液的费用可能会降低，进而可及性提高。 1.1.3 康柏西普眼用注射液 康柏西普是我国自主研发的一种抗VEGF药物，2013年获得批准用于临床，康柏西普对于nAMD、CNV和DME等眼部新生血管性疾病显示出可靠的安全性和疗效[16]。2023年国家药品监督管理局（National Medical Products Administration，NMPA）批准了康柏西普眼用注射液增加预充式注射器包装，为临床提供了多种给药方式选择。预充式注射器的操作步骤便捷，使用更精准。 1.1.4 阿柏西普眼内注射溶液 2018年阿柏西普眼内注射溶液在我国被批准用于nAMD的治疗。研究[17]表明，阿柏西普眼内注射溶液可有效治疗nAMD，每2个月1次的用药频率减少了患者每月进行IVI的风险和每月监测的负担。有研究[18]认为，阿柏西普眼内注射溶液与平均视力的提高和质量调整生命年的延长相关，对于nAMD患者是一种具有成本效益的选择。一项临床试验[19]报道，8mg组患者IVI阿柏西普眼内注射溶液的用药频率最长可达每16周1次，相比2mg组表现出非劣效的最佳矫正视力（best corrected visual acuity，BCVA）。 1.1.5 brolucizumab 2019年，美国FDA批准brolucizumab用于治疗nAMD，推荐给药剂量和频率为首3剂每月6mg，之后每8~12周6mg。但多项研究[20-21]认为给药间隔更长（每12周或16周1次），其有效性和安全性更高[22]。2项Ⅲ期临床试验比较了brolucizumab和阿柏西普眼内注射溶液治疗nAMD的效果，结果发现brolucizumab的整体安全性与阿柏西普眼内注射溶液相似，但是brolucizumab组在治疗第48周时的视力水平非劣效于阿柏西普眼内注射溶液组，并且超过了50%的自第48周起开始维持q12w频率用药的brolucizumab组患者[20]。上述试验结果表明brolucizumab的治疗间隔延长，可以减少注射次数，进而减少频繁的IVI给患者带来的负担。 1.1.6 法瑞西单抗注射液 法瑞西单抗注射液是VEGF和血管生成素-2（angiopoietin-2，Ang-2）抑制剂，是一种双特异性抗体。2022年FDA批准法瑞西单抗注射液用于治疗nAMD和DME，2023年法瑞西单抗注射液在我国获批相同的适应证。随机、双盲临床试验[23]结果表明，法瑞西单抗注射液治疗DME的用药时间最长可达16周。近期有研究[24-25]报道了法瑞西单抗的不良反应，如急性、严重的眼内炎和脉络膜上腔出血[24]。 1.2 糖皮质激素 1.2.1 地塞米松（dexamethasone，DEX） 2017年DEX玻璃体内植入剂在我国获批，用于治疗成年患者由视网膜分支静脉阻塞或中央静脉阻塞引起的ME，以及治疗成年患者的DME。DEX玻璃体内植入剂在欧洲还获批用于治疗非感染性葡萄膜炎（non-infectious uveitis，NIU）[25]。缓释的DEX弥补了糖皮质激素半衰期短（大约3h）和需要频繁给药的缺点，它可以持续给药长达6个月。大规模、随机的Ⅲ期临床试验[26]结果表明，DEX玻璃体内植入剂若以≥6个月的间隔给药，能够持续改善BCVA和ME。DEX的的不良反应主要有眼压升高和白内障，因此DEX玻璃体内植入剂在RVO-ME和DME的治疗中属于二线用药，多在抗VEGF药物治疗无应答时使用，但DEX玻璃体内植入剂对于人工晶状体眼或不愿频繁IVI的患者具有稳定的优势[27]。COSTELLO等[28]制造了与DEX玻璃体内植入剂性质相似的逆向工程植入剂，并且与原研药具有相似的三相药物释放曲线。该研究对基于50∶50聚乳酸-羟基乙酸共聚物[50∶50Poly（lactic-co-glycolic acid），PLGA]植入剂的制备过程和特征进行了深入研究，为未来仿制药的开发奠定了基础。MATADH等[29]制备了不同药物载荷（地塞米松磷酸钠）的聚合物包覆聚合物微针，并进行了体外释放研究，探索该技术用于IVI的可能性，以降低传统IVI方式的风险。 1.2.2 氟轻松（fluocinolone acetonide，FA） 2014年美国FDA批准FA玻璃体内植入剂用于治疗已经接受过糖皮质激素治疗、但是眼内压（intraocular pressure，IOP）没有显著升高的DME。2022年FA玻璃体内植入剂在我国被批准用于治疗累及眼后段的慢性非感染性葡萄膜炎。在每支FA玻璃体内植入剂的药物递送系统中含有0.18mg FA，单次IVI后，能够以每天0.25μg的初始速率释放FA，持续36个月。有研究[30-31]表明，FA玻璃体内植入剂对常规治疗有抵抗的慢性DME有效。德国一项针对抗VEGF药物治疗反应不佳而采用IVI的DME患者研究[32]表明，单次使用FA玻璃体内植入剂最具成本效益。有研究[33]发现，FA玻璃体内植入剂发生高眼压和白内障的风险高于DEX玻璃体内植入剂。因此，在使用FA玻璃体内植入剂后应定期检查患者晶状体，并监测IOP。 1.2.3 曲安奈德（triamcinolone acetonide，TA） TA注射混悬液是一种合成糖皮质激素，适用于治疗交感性眼炎、颞动脉炎和葡萄膜炎，以及对局部糖皮质激素无反应的眼部炎症等眼科疾病，还可通过IVI用于玻璃体切割术中的可视化。MARTIDIS等[34]研究发现，对于对传统激光光凝治疗无反应的DME，TA混悬液IVI可能是一种潜在治疗方法。ACEVES-FRANCO等[35]认为，TA注射混悬液中的防腐剂与视网膜毒性相关，需开发无防腐剂的TA制剂，以减少对眼部的损伤和毒性。TA混悬液局部脂质体制剂在治疗玻璃体视网膜疾病中表现出了潜力，有可能成为TA注射混悬液IVI的替代方案。 1.3 补体抑制剂 1.3.1 pegcetacoplan 补体系统是由35种广泛存在于血清、组织液和细胞膜表面具有酶活性的蛋白质共同组成的一个反应系统，在机体免疫防御系统中起重要作用，但补体异常活化也参与许多炎症性疾病的发生和发展[36-37]。Pegcetacoplan是一种补体C3抑制剂，2023年FDA将pegcetacoplan批准用于治疗继发于nAMD的GA。有研究[38]报道pegcetacoplan IVI能够显著抑制GA的发展。Pegcetacoplan是FDA批准的首个用于GA的IVI药物，并且FDA建议使用pegcetacoplan时采用无硅油注射器[39]。WITKIN等[40]报道了13例患者使用pegcetacoplan后出现视网膜血管炎，病因不明确，建议对于此类患者避免再次使用pegcetacoplan。 1.3.2 avacincaptad pegol（ACP） ACP是一种补体C5抑制剂，2023年被FDA批准用于治疗继发于nAMD的GA。推荐用法用量为2mg，IVI，每月1次，最长可使用12个月。一项为期18个月的临床研究[41]显示，ACP对GA的抑制效果更明显，并且患者耐受性良好。 1.4 纤溶酶 2012年FDA批准奥克纤溶酶用于治疗症状性玻璃体黄斑粘连。奥克纤溶酶是一种蛋白水解酶，通过诱导玻璃体液化及减弱玻璃体黄斑粘连，起到药物性玻璃体后脱离的作用，避免了手术后玻璃体后脱离创伤大、脱离不彻底的问题。由于纤溶酶的活性受多种因素（血液内纤溶酶原的浓度会影响纤溶酶的活性、纤溶酶在生成后会在较短时间内失活等）影响，纤溶酶并没有在玻璃体切除手术中得到广泛应用[42]。 1.5 抗病毒药物 1.5.1 更昔洛韦 更昔洛韦IVI一直是慢性巨细胞病毒（cytomegalovirus，CMV）性视网膜炎的主要治疗方法之一，自1987年至今已广泛应用。SANBORN等[43]早在1992年就报道了更昔洛韦IVI后，药物可以在眼内持续释放4~5个月，与静脉注射或反复IVI相比，它在患有视网膜炎的艾滋病等传染病的患者中具有更大优势。1996年FDA批准了更昔洛韦用于治疗艾滋病患者的CMV性视网膜炎。更昔洛韦玻璃体内植入剂是第1个被批准上市玻璃体内植入装置[44]，但是目前已下市。2024年KAPOOR等[45]报道了1例CMV性视网膜炎患者多次IVI更昔洛韦后出现视网膜毒性的罕见病例。 文章内容由凡默谷小编查阅文献选取，排版与编辑为原创。如转载，请尊重劳动成果，注明【来源：凡默谷公众号】。 2  IVI超说明书用药 眼科超说明书用药是一种常见的情况[46]，为了规范眼科超说明书用药行为，《中国眼科药物说明书外使用临床实践指南》[46]中给出了药品说明书适应证中无眼部疾病药物的眼科使用推荐意见，以指导眼科超说明书用药。 2.1 抗VEGF药物 多项研究证实了IVI贝伐珠单抗注射液在nAMD、DME、ROP和ROV相关ME等眼科疾病中的安全性和有效性[47-52]。一项研究[53]比较了贝伐珠单抗注射液和雷珠单抗注射液IVI治疗nAMD的效果，结果发现2种药物在有效性和安全性方面差异无统计学意义，但雷珠单抗注射液的治疗成本远高于贝伐珠单抗注射液。HELJAK等[54]建立了一个模型，用以预测贝伐珠单抗注射液IVI对不同大小PLGA微球的视网膜浓度的影响，此模型为抗VEGF药物眼部持给药续释放提供了可靠的评价依据。LEE等[55]的研究中报道了1种可以实现玻璃体腔长期释放药物的贝伐珠单抗水凝胶棒，这种剂型能够降低注射频率，改善视网膜血管疾病患者的长期视力。贝伐珠单抗水凝胶棒的生物可降解性和安全性表明其可作为治疗视网膜血管疾病的高级玻璃体内药物递送系统。 2.2 抗菌药物 万古霉素是治疗感染性眼内炎最常用的糖肽类抗菌药物，由于眼球结构特殊，万古霉素常规眼部给药的生物利用度非常低（<5%），通过IVI给药是目前解决这一难题的较好方式[56]。对于白内障摘除术后出现的感染性眼内炎，专家共识[57]推荐首选10g·L-1的万古霉素0.1mL和20g·L-1头孢他啶0.1mL联合IVI。若患者对头孢菌素类药物过敏，可选用庆大霉素、阿米卡星、丁胺卡那霉素等抗菌药物替代。还可以少量IVI糖皮质激素（地塞米松0.4mg）以减轻炎性反应。对于外源性眼内炎患者，若临床确诊或高度怀疑的感染性眼内炎，专家共识[58]推荐IVI抗菌药物作为首选治疗方法，以快速提高药物浓度。对于眼部术后或外伤后的眼内炎，相关指南[46]推荐阿米卡星联合万古霉素IVI经验性治疗。莫西沙星IVI作为万古霉素和头孢他啶治疗细菌性眼内炎的辅助药物耐受性良好。使用这种组合与双联抗菌药物相比，具有扩大革兰阴性菌覆盖范围的优势和潜在的协同作用[59]。 2.3 抗真菌药物 真菌性眼内炎是一种非常严重的感染性眼病，通常与外伤、手术或全身性真菌感染有关，可导致患者视力丧失甚至破坏眼球。近年来，由于广谱抗菌药物和糖皮质激素的广泛应用，真菌性眼内炎的发病率呈明显上升趋势[60]。伏立康唑是一种新型的三唑类抗真菌药物，具有广谱的抗真菌活性，尤其对曲霉菌属和念珠菌属等多种真菌具有强大的抗菌作用。2006年KRAMER等[61]首次报道了伏立康唑IVI在曲霉菌性眼内炎中的应用。伏立康唑是用于IVI最广谱的抗真菌药物[62]，在真菌性眼内炎中表现出良好的疗效[63]。IVI伏立康唑和两性霉素B脂质体联合玻璃体切割术可以有效地治疗真菌性眼内炎，与两性霉素B脂质体相比，伏立康唑对治疗早期和中期的真菌性眼内炎效果更好[64]。研究[65]发现，IVI两性霉素B治疗真菌性眼内炎能够提高视功能，改善眼解剖结构和临床结局。 2.4 抗肿瘤药物 甲氨喋呤IVI已被证实是治疗多种眼内疾病的有效方法。ABDI等[66]对甲氨喋呤IVI在各种眼部疾病中的应用进行了综述，发现甲氨喋呤在眼内淋巴瘤和葡萄膜炎治疗中疗效良好。FRENKEL等[67]报道显示，甲氨喋呤可以作为眼内淋巴瘤的一线治疗选择。 3 总结与展望 IVI在眼科疾病的治疗中发挥了重要作用，但是也存在眼压升高和白内障等不良反应，频繁、反复地操作会增加不良反应的发生率。研究[68-69]认为传统药物（贝伐珠单抗、雷珠单抗和阿柏西普等）IVI对nAMD的疗效较好，但是注射频率较高，而新的抗VEGF药物能够通过延长药物半衰期或新的植入方式（雷珠单抗、康柏西普、brolucizumab和KSI-301等）来降低注射频率。为了提高治疗的安全性、有效性和经济性，有待开发给药间隔更长的药物以降低IVI频率，或开发新剂型，减少操作对眼部的损伤。未来期待更多生物类似药物上市，降低眼部疾病患者的治疗成本，进一步提高疗效。 参考文献  详见《中国临床药学杂志》 2025年第34卷第1期 文章信息源于公众号凡默谷，登载该文章目的为更广泛的传递行业信息，不代表赞同其观点或对其真实性负责。文章版权归原作者及原出处所有，文章内容仅供参考。本网拥有对此声明的最终解释权，若无意侵犯版权，请联系小编删除。 学如逆水行舟，不进则退； 心似平原走马，易放难收。 行舟Drug 每日更新 欢迎订阅+ 医药大数据|行业动态|政策解读

关注并星标CPHI制药在线 外膜囊泡(Outer membrane vesicles, OMVs)是由革兰氏阴性菌分泌的双层脂质纳米囊泡。OMVs 含有细菌衍生的多种成分，如脂质、蛋白质、核酸和其他小分子，还包括抗原病原体相关分子模式(Pathogen-associated molecular patterns, PAMPs)，这是疫苗的基本成分，基于此，天然 OMVs 或生物工程 OMVs 被开发为细菌疫苗，以对其亲本细菌产生强大的体液和细胞免疫应答。OMVs含有的多种生物分子，是细菌与细菌、环境和宿主等交流的重要介质，因此它们可能成为抗肿瘤的有效的方案。 OMVs 的结构成分 OMVs含有细菌多种衍生成分，主要包括脂质、蛋白质、核酸及其他小分子。OMVs 膜主要含有磷脂(Phospholipid, PL)和脂多糖(Lipopolysaccharide, LPS)，PL主要包括磷脂酰乙醇胺、磷脂酰甘油等，不同革兰氏阴性菌的OMVs 的磷脂含量有所不同。在大肠杆菌中，OMVs主要脂质为甘油磷脂、磷脂酰甘油、磷脂酰乙醇胺(Phosphatidyl ethanolamine, PE)和心磷脂；铜绿假单胞菌膜OMVs的主要成分为磷脂酰甘油；脑膜炎奈瑟菌的OMVs主要含有磷脂酰甘油和PE。LPS 是一种重要的PAMPs，在生物膜中发挥粘附功能，也是 OMVs 的主要组成部分。 在OMVs中鉴定出的蛋白质可以分为三类：外膜的基本成分，腔内特定的货物蛋白，以及未知或污染的蛋白质。第一类属于外膜蛋白，如孔蛋白、较大运输系统的外膜蛋白部分、 锚定蛋白黏附蛋白、酶（如磷脂酶和蛋白酶），以及鞭毛或菌毛蛋白、补体调节蛋白、结合蛋白、不浊相关蛋白、转运体、离子通道蛋白等。第二类包括周质酶、细胞质酶以及一些毒力因子，如蛋白酶、肽酶、核酸酶、溶细胞素、霍乱毒素、空泡细胞毒素、细胞毒性膨胀毒素和脲酶等酶。最后一类蛋白质是常见的细胞质蛋白包括延伸因子、伴侣蛋白和热休克蛋白。 在OMVs 中也发现了许多细胞质和细胞内膜蛋白，这些蛋白被认为是来自培养物中裂解细胞的污染物。OMVs同时携带腔内和表面相关的DNA，此外RNA、质粒、噬菌体DNA和染色体 DNA在 OMVs中也有报道。研究认为核酸被OMVs 携带可能来自于环境中细胞的裂解残留物。此外，OMVs 还可以运输多种离子、群体感应信号和代谢物。 OMVs应用于肿瘤治疗 在抗肿瘤研究中，OMVs既能作为载体用于抗肿瘤药物的递送，也能作为免疫调节剂重塑肿瘤免疫微环境、激活机体自身免疫反应以协同化疗/PDT等疗法抑制肿瘤生长；在肿瘤疫苗领域，OMVs可同时作为疫苗纳米载体和佐剂以激起强效的肿瘤特异性免疫反应，而且OMVs自身也能通过诱导肿瘤细胞死亡、调节免疫等手段起到一定抑制肿瘤生长的作用。 1、OMVs的载体优势 易于修饰的特点及自身性质使OMVs被广泛作为抗肿瘤药物递送载体研究。首先，尺寸效应使OMVs本身就具有一定肿瘤靶向能力；其次，靶向修饰可进一步的增加OMVs对特定细胞的靶向性；最后，表面PAMPs分子与纳米级的粒径使得OMVs兼具佐剂性与淋巴滞留能力，这可以极大地协同抗原增强抗肿瘤免疫反应与表面修饰。 对OMVs进行药物装载可分为分泌前装载与分泌后装载两类方法。分泌前加载是对细菌进行处理以得到封装有药物的OMVs，这种方法主要用于易变性的生物分子。例如，研究人员在细菌培养过程加入庆大霉素，利用细菌会通过OMVs排出有害物质的性质，得到了封装有庆大霉素的OMVs，而利用基因工程则可使OMVs高效加载蛋白质类药物。分泌后加载是将药物封装人已分离提纯的OMVs中，脂双层结构使OMVs既可封装疏水药物又可封装亲水药物。通过与药物共孵育，疏水性小分子药物可封装在OMVs膜内，同时带正电的小分子药物可利用静电吸附作用封装在OMVs膜上；而通过电穿孔、超声处理、物理挤出或渗透处理等方法可使OMVs封装亲水性药物分子。 作为载体，OMVs可靶向肿瘤部位：OMVs表面富集的PAMPs使其易被血液循环中的中性粒细胞吞噬，而由于中性粒细胞具有炎性靶向能力，因此OMVs可利用中性粒细胞靶向炎性肿瘤组织。OMVs到达炎性肿瘤后，可通过中性粒细胞胞外陷阱（neutrophil extracellular traps，NETs）形成过程中被释放出来且不影响活性，这使得OMVs具有天然的肿瘤靶向能力。同时，20~250nm的粒径使OMVs可以自由循环至淋巴结，表面富集的PAMPs使其易于被DC摄取滞留淋巴，并诱导Th1型免疫反应。研究表明随插随显示的OMVs抗原展示平台在小鼠体内有明显的淋巴蓄积现象，激活了有效的抗肿瘤免疫反应。此外，OMVs可以通过毛囊途径和表皮渗透两种途径穿过角质层到达真皮层，这赋予了其作为透皮药物递送载体独特的优势。 2、OMVs对肿瘤的直接杀伤 在抗肿瘤研究中，OMVs自身就对肿瘤具有一定的杀伤效果。PAMPs的富集使OMVs可通过受体激活的死亡途径在细胞层面可诱导细胞发生焦亡或调亡。首先，有研究表明，OMVs通过内吞途径进人宿主细胞后可在早期内体阶段将LPS释放到胞质中，继而在GBPs的帮助下激活Caspase-11，引起细胞焦亡并释放炎性因子IL-1β，修饰后的LPS则不具有激活Caspase-11的能力。其次，细菌OMVs可诱导细胞线粒体膜电位降低，引发线粒体功能障碍，进而导致线粒体调亡、炎症小体激活，最终触发细胞凋亡。最后，致病菌OMVs可递送毒力因子诱导细胞死亡，例如：致病型大肠杆菌OMVs上携带的细胞质酶HlyF可通过阻断细胞自噬体与溶酶体的融合阻断自噬，激活非经典炎症小体途径，诱导细胞死亡。不过，细胞可通过多种途径抑制由OMVs诱导的细胞死亡。因此，OMVs诱导的细胞死亡受多种因素影响，包括OMVs的组分构成、PAMPs分子的相对浓度以及宿主细胞敏感度等。 OMVs在活体层面也有一定的肿瘤抑制效果，这主要归功于OMVs对机体免疫系统的激活。首先，OMVs可以诱导肿瘤相关巨噬细胞(tumor-associated macrophage，TAM） 向促炎M1型巨噬细胞极化；其次，OMVs可招募包括NK细胞、T细胞在内的多种免疫细胞，这既能逆转肿瘤区域免疫抑制性的微环境，也能在肿瘤区域诱导干扰素（IFN-γ）的产生以介导肿瘤凋亡。然而，IFN-γ在介导肿瘤细胞调亡的同时会上调肿瘤细胞程序性死亡配体1（programmedcelldeath1 ligand1，PD-L1）的表达，这抑制了T细胞活性并最终降低了抗肿瘤效果。针对这个问题，研究人员通过基因工程化修饰得到了程序性死亡受体1(programmed cell death protein 1，PD-1）修饰的OMVs，在保留OMVs肿瘤杀伤能力的同时通过对肿瘤细胞表面PD-L1的封闭解除了肿瘤细胞对T细胞的功能抑制，显著提高了肿瘤抑制效果。类似的，通过基因工程得到的表面表达CD47抗体的OMVs不仅能封闭肿瘤表面CD47分子以解除其对巨噬细胞的吞噬抑制，还能作为桥梁连接巨噬细胞与肿瘤细胞以增强吞噬，该工程化的OMVCD47nb在小鼠体内重塑了肿瘤微环境且激活了肿瘤特异性免疫反应，在有效抑制肿瘤生长的同时诱导了对肿瘤的长期免疫记忆。 3、OMVs激活免疫协助增强抗肿瘤效果 OMVs对机体免疫系统的调节作用使其在抗肿瘤研究中大有可为。首先，OMVs对免疫细胞的强烈刺激可对免疫抑制性的肿瘤微环境进行重编程，这可增强化疗、光动力等对肿瘤的抑制效果。其次，OMVs的佐剂性及淋巴靶向性使其在肿瘤疫苗的应用中有着广泛应用前景。因此，OMVs主要作为递送载体、免疫调节剂、佐剂等应用于临床前抗肿瘤研究。 在肿瘤治疗中，OMVs不仅可作为纳米递送载体增加抗肿瘤药物的利用率并降低药物副作用，还可以作为免疫调节剂激活机体免疫反应以协同增强化疗、PDT等抗肿瘤疗法的疗效。早在2014年，研究人员利用基因工程化的接有肿瘤靶向肽的减毒OMVs向肿瘤部位递送了小干扰RNA（small interfering RNA，siRNA），有效抑制了肿瘤生长。此后，OMVs被广泛用于抗肿瘤药物的递送。例如，载有光敏剂二氢卟吩e6（chlorine6，Ce6）和化疗药阿霉素（doxorubicin，DOX）的OMVs作为治疗平台，通过光动力、化疗与免疫疗法的有机协同实现了对小鼠三阴性乳腺肿瘤的完全抑制，并成功防止了肿瘤转移的发生。负载黑色素的OMVs有着良好的光热转换效率，其不仅可在近红外激光的照射下对肿瘤进行局部加热以杀死肿瘤，还可利用多光谱光声断层扫描技术（multispectral optoacoustic tomography，MSOT） 对肿瘤组织进行光声成像。 在肿瘤疫苗研究中，OMVs同时作为疫苗纳米载体与免疫佐剂来增强由针对肿瘤抗原的特异性免疫反应。作为载体，工程化的OMVs既可以快速捕获多种肿瘤抗原，又可以靶向淋巴结并增强DC对抗原的摄取，同时OMVs能作为佐剂进一步增强肿瘤特异性免疫反应，强效的免疫反应消除了小鼠皮下肿瘤并抑制了肿瘤的转移。类似的，利用OMVs向DC递送抗原mRNA能引起有效的抗肿瘤免疫反应，成功实现了对肿瘤的抑制并诱导了长期免疫记忆的产生。然而由佐剂诱导的DC快速成熟会导致其摄取能力降低，这种现象被称为成熟诱导的摄取阻塞(maturation-induced uptake obstruction，MUO）。对此，研究人员通过在OMVs修饰上葡萄球菌蛋白A的结构域B（domain Bof staphylococcal protein A）以结合αDEC205抗体的Fc端，而αDEC205抗体的Fab端与DC表面DEC205（CD205，一种具有抗原呈递功能的内吞受体）的结合使OMV-DEC能通过异位摄取途径突破MUO的限制。因此，DC对OMV-DEC表现出比OMVs更强的摄取能力，这增强了OMV-DEC对抗原的呈递能力，激活了更强的抗肿瘤免疫反应，成功抑制了黑色素瘤的生长与转移。 作为细菌分泌物，OMVs可由肠道细菌原位产生，因此，研究人员开发了一种阿拉伯糖诱导型基因工程化大肠杆菌作为口服型肿瘤疫苗。大肠杆菌在小鼠肠道原位产生负载肿瘤抗原的OMVs，其可穿过肠上皮细胞屏障，刺激DC成熟，并进一步激活肿瘤特异性免疫反应以杀伤肿瘤细胞。在小鼠模型中，该疫苗不仅实现了对肿瘤的抑制，原位产生的方式还使其避免了分离提纯的繁琐步骤，有效降低了生产成本。而为了实现个性化治疗，可将OMVs与肿瘤细胞膜或肿瘤外泌体融合，得到的杂化囊泡作为个性化肿瘤疫苗能诱导强烈的适应性免疫反应，提高小鼠生存率并提供对肿瘤的长期防护。进一步的，OMV-Mal可在肿瘤原位捕获PTT后释放的肿瘤抗原，并将之递送至DC以引发肿瘤特异性免疫反应。这种策略不仅通过增强抗原摄取、刺激DC成熟等手段增强了免疫反应，还实现了免疫疗法与PDT、PTT、化疗等治疗方法的协同。 OMVs在肿瘤领域中具有多重功能。它们不仅促进肿瘤生长和转移，还调节肿瘤微环境，抑制肿瘤的发展。OMVs 中携带的生物标志物还可以作为肿瘤的诊断标志，有助于肿瘤的早期监测。此外，OMVs作为药物载体，可有效传递抗肿瘤药物到肿瘤部位，提高治疗效果，因此具有广阔的应用前景。 参考资料 [1]毛露珈,史恩宇,王瀚平,等.细菌外膜囊泡在抗肿瘤治疗方面的研究进展[J].中国生物工程杂志,2022,42(05):100-105. [2]王云锋,庄婉茹,马宪彬,等.细菌外膜囊泡应用于肿瘤治疗[J].生物化学与生物物理进展,2024,51(02):309-327. 作者简介：小泥沙，食品科技工作者，食品科学硕士，现就职于国内某大型药物研发公司，从事营养食品的开发与研究。 扫码领取CPHI & PMEC China 2025展会门票 来源：CPHI制药在线 声明：本文仅代表作者观点，并不代表制药在线立场。本网站内容仅出于传递更多信息之目的。如需转载，请务必注明文章来源和作者。 投稿邮箱：Kelly.Xiao@imsinoexpo.com ▼更多制药资讯，请关注CPHI制药在线▼ 点击阅读原文，进入智药研习社~