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导读：在真核生物中，环状RNA(circRNA) 是通过反向剪接产生的，当内含子 5' 端的供体剪切位点和上游内含子 3' 的受体剪切位点进入同一个剪接小体并发生加工处理时，就会发生反向剪接。 基于排列内含子-外显子（PIE）技术，体外转录(IVT)形成的常规线性mRNA可环化形成circRNA。CircRNA无游离末端，是改善mRNA稳定性的有效方案。目前，基于IVT和PIE环化制备circRNA正逐渐开发用于疫苗、蛋白替代疗法、CAR-T等领域。 环化效率是circRNA疫苗/药物的关键质量属性。本期文章菌菌将分享circRNA PIE成环效率的影响因素分析，主要参考内容为美国国立卫生研究院（NIH）国家癌症研究所Jason W. Rausch团队2021年发表在Nucleic Acids Res的文章：Characterizing and circumventing sequence restrictions for synthesis of circular RNA in vitro。 01 PIE法生成circRNA的机制 I型内含子具有自我剪接活性，通过两次连续的转酯反应会生成一个环化的内含子副产物。1992年，Michael D.Been将具有自我剪接活性的I型内含子-外显子序列重新排列（PIE）—E1/E2外显子端对端融合在一起，将内含子序列从中间打断。在体外剪接反应中，添加的外源鸟苷酸的3’OH会进攻内含子5’末端剪切位点的磷酸二酯键，使得E1末端核苷酸暴露出游离3’OH，从而进攻内含子3’末端剪切位点处的磷酸二酯键，最终使得E1-E2两个外显子序列环化。然而，这种最初的PIE环化策略只适合较短的RNA自我环化，例如，100nt外显子序列或者适配体。对于较长的RNA序列来说，两个剪接位点就会变得很难靠近，从而使得自我环化效率极大地减弱。 2018年，Daniel G. Aderson引入同源臂和间隔序列优化了基于T4噬菌体胸苷酸合成酶和鱼腥藻(Anabaena) pre-tRNA(亮氨酸) I型内含子的PIE环化方法，成功环化表达蛋白的长RNA。在前体RNA 5’和3’端安插同源臂，使得5‘/3’剪接位点彼此靠近，提升自剪接效率。加入间隔序列将3’剪接位点与IRES分离开来，使得I型内含子可完成正确折叠。在靠近间隔序列的位置引入同源臂还可促进剪接泡的形成，从而使得剪接效率得到更进一步的提升。自我环化反应在IVT反应进行中便可完成，但是，在某些情况下还是需要额外的重新环化反应（加入2mM GTP，55℃条件下反应15min）。值得关注的是，相比T4噬菌体胸苷酸合成酶内含子，基于鱼腥藻pre-tRNA(亮氨酸) I型内含子在环化反应中产生的nicked circRNA会减少37%。 02 E1/E2疤痕的天然免疫反应 PKR 是一种 IFN 诱导的 Ser/Thr 蛋白激酶，可被长 dsRNA 直接激活 （>33 bp，其中 79 bp 达到最大激活），并在对 dsRNA 的先天免疫反应中起核心作用，而长度为 16-33 bp 的短 dsRNA 可以结合 PKR 单体并在体外阻断激活。细胞中的许多 circRNA 倾向于形成 16-26 bp 的不完美 dsRNA 区域，这些区域作为一个基团会抑制先天免疫 dsRNA 受体 PKR 的激活。2022年，陈玲玲发现基于T4噬菌体胸苷酸合成酶和鱼腥藻pre-tRNA(亮氨酸) I型内含子产生的circRNA序列中会残存由E1+E2+间隔序列组成的74nt（T4噬菌体胸苷酸合成酶外显子序列）或者186nt（鱼腥藻pre-tRNA(亮氨酸) 外显子序列）无关序列。这些无关序列倾向于形成额外的、更长的茎环区域 ，扭曲原始circRNA的折叠状态，从而触发强烈的先天免疫反应。 E1、E2 和IG 之间的碱基配对是I型内含子的一个高度保守的结构特征，有助于建立和维持自剪接催化活性中心，决定3’/5’剪接位，同时促进酯交换反应之间的过渡。另外一方面，残留在circRNA序列上的E1/E2序列会跟临近的Loop环或者间隔序列发生相互作用，形成稳定的分子内双链结构，改变原有circRNA结构，触发不想要的天然免疫反应。 03 E1/E2序列影响cicrRNA环化反应 为解决PIE环化策略引入外显子残余序列的弊端，2021年，Stuart F. J. Le Grice等人在Nucleic Acids Research发表文章：Characterizing and circumventing sequence restrictions for synthesis of circular RNA in vitro，他们使用连续诱变和体外筛选来确定胸苷酸合酶 （td） I 型含子 PIE 转录模板构建体中 E1 和 E2 序列的变化如何影响 circRNA 合成产量，为设计定制PIE转录模板给出了指导性依据。 通常用于体外 circRNA 合成的 PIE 转录模板采用来自 T4 噬菌体胸苷酸合酶基因的或者鱼腥藻pre-tRNA （亮氨酸） 的 I 组内含子序列。T4 噬菌体胸苷酸合酶（td）mRNA 具有一些局部结构—一个富含 A：U 的短茎，两侧有一个 8-nt 内环，然而，类似所有tRNA，Anabaena tRNA （Leu）结构非常稳定，经常被作为末端支架来提升RNA转录本的稳定性。Anabaena tRNA （Leu）内含子剪接活性对于两侧外显子序列的强烈依赖性使其并不适合开发为作为广泛适用的PIE构建体，因此，研究人员选择T4 噬菌体胸苷酸合酶（td）内含子作为PIE构建体来研究E1 和 E2 序列的变化对于circRNA环化效率的影响。 04 无疤痕PIE序列的开发 circPVT1 是一种 410-nt 的人 circRNA，可隔离 let-7 miRNA，促进细胞增殖，同时抑制衰老 。circPVT1 在天然环境中是通过跨 PVT1 基因外显子的反向剪接产生的。如果将未修饰的PVT1 外显子序列直接插入T4 td PIE 构建体，这种模板产生的 circRNA 将包含无关的源自T4 td 的 E1-E2 序列，因此与天然 circPVT1 的序列将不是完美匹配的。如果从T4 td PIE 构建体中去除 E1 和 E2，用源自PVT1 的外显子序列去替换，那么PVT1 外显子的末端核苷酸将无法与 T4 td I 型内含子的 IG 序列正确杂交，对于环化反应造成严重的损害。 那么，如何构建T4 td PIE 才能使得其环化生成的circPVT1不残留源自T4 td的 E1 和 E2无关序列呢？研究人员搜索PVT1 外显子中与 T4 td E1-E2 相互匹配的序列，确定nt324-331 组成的 PVT1 外显子序列片段几乎完美地匹配 E1-E2，即 nt 324-329 与 E1 相同，而 nt 330-331 匹配 E2 的两个 5' 核苷酸。通过对PVT1 外显子序列的重排，研究人员成功构建了不含有T4 td E1-E2 残留序列的circPVT1。 05 E1/E2突变体对cicrRNA环化的影响 5.1 单点突变E1/E2序列 由于许多人类 circRNA 中并不包含与天然T4 td E1-E2序列紧密匹配的序列片段，因此重新排列环化RNA序列的方法无法普通应用。因此，研究人员想突变cSAA-PIE构建体中 E1 和 E2 序列，测试其对剪接活性的影响。cSAA（链霉素）适配体较小，并且二极结构是已知的，使我们能够更可靠地推断要环化的 RNA 的结构如何影响 PIE 的结构和功能。 当从 WT 构建体产生时，cSAA 以离散带的形式迁移，并领先于所有环化反应的前体和副产物。与WT 构建体生成的cSAA相比，分别突变天然T4 td E1序列中的6个核苷酸或者E2序列中的4个核苷酸，会对环化产量、主要产物组成及同质性产生极大的影响。有些核苷酸位点（E1：1C、E1：1G、E1：2A、E1：2G）的突变会降低产量，而有些核苷酸位点（E1：3 ）的突变可提升产量。 5.2 多点突变E1/E2序列 为更深入地表征环化反应对于 E1 和 E2 序列的依赖性需要对其序列中的核苷酸进行多点突变，由于E1序列和E2序列分别存在 4096 和256 种序列排列组合，因此，显然无法挨个单独构建所有的突变体。研究人员采用Ultramer 寡核苷酸 （IDT） 组装了一个转录模板文库，其中 E1 或 E2 的序列片段是随机的。在转录反应完成后，对于所有E1-E2 连接的 circRNA产物进行测序，分析E1-E2序列核苷酸组成和占比。从含有6nt E1的circRNA 25,777 个reads中鉴定出 717 个不同的功能性 E1 序列。这些变体不仅占所有可能的 E1 序列的 18%，而且它们之间的代表性呈现出高度的偏离分布。10 个最常观察到的 E1 变体集合占比超过读取总数的 17%，而超过一半的选定变体只观察到一次或两次。具体来说，'G' 在 E1 位置 4 和 5 受到高度青睐，功能变体之间的集体加权比例分别为 79% 和 99%。这些观察结果强烈表明，这些核苷酸与 IG 中的“CC”基序配对对于维持 E1-IG 相互作用和 PIE 功能至关重要。E2 变体的选择分布也是偏斜的，但未达到 E1 观察到的程度。具体来说，在源自circRNA 的 99355 个读数中鉴定出 256 种可能的 E2 变体中的 249 种。 06 代偿性突变IG序列降低circRNA产量 E1 和 E2 筛选实验中鉴定的 10 个最具代表性的变体中，没有一个与相应的 WT 序列完全匹配。研究人员选择了3个最具代表性的E1变体，并且突变IG序列，使E1变体/IG序列配对。令人大感意外的是，提升E1 变体与IG序列之间的配对反而使得circRNA产量显著减少。 单突变和体外选择实验都表明，E1 第 4 位和第 5 位的“G”与 IG 中的“C”之间的碱基配对对于内含子功能很重要。研究人员从E1体外筛选实验中（E1为随机片段，且以“GG” IG为背景）分析E1变体序列和核苷酸组成的占比，发现E1：4 和 E1：5 的强选择是针对“C”，而不是“G”。打断E1 第 4 位和第 5 位的“G”与 IG 中的“C”之间的碱基配对或者在IG序列引入代偿性突变以恢复E1变体与IG之间的完全配对均会使得circRNA产量持续性下降。 07 circRNA结构影响环化反应产量 由于 5' 和 3' 内含子的一半位于 PIE 构建体中的相对末端，因此功能性核酶的组装可能至少在某种程度上依赖于要环化的 RNA 的折叠。研究人员发现将基于T4噬菌体胸苷酸合成酶 I型内含子及天然E1/E2序列的PEI构建体产生的cSAA结构与T4噬菌体胸苷酸合成酶基因mRNA序列的天然结构尽可能匹配，这种序列上的改变会使得cSAA变体产量与野生型cSAA产量（circRNA产量仅达到5~10%，环化效率为25-50%）相比提升超过4.5倍，环化效率接近100%。这说明待环化的RNA结构也可能是circRNA产量的重要决定性因素。 08 总结 E1/E2序列与IGS引导序列之间会形成碱基互补配对，这对于维系内含子结构和剪接活性来说至关重要。尽管采用PIE环化策略可成功生成表达蛋白的circRNA，但是，circRNA中残存的E1/E2序列会引发强烈的天然免疫反应。 为解决此问题，研究人员采用T4噬菌体胸苷酸合成酶 I型内含子PIE构建体为模型，深度研究E1/E2序列对circRNA环化反应的影响。在待环化的RNA序列中搜寻与E1/E2序列完美匹配的片段，然后重新排列待环化的RNA序列，从而生成没有残存无关序列的circRNA。遗憾的是，并非所有的待环化的RNA序列均会出现与E1/E2序列完美匹配的片段，这就要求我们知道I型内含子的剪接活性对于E1/E2序列变化的耐受程度。采用单点突变和多点突变E1/E2序列，研究人员发现外显子序列核苷酸组成对于circRNA产量、产物类型、异质性存在非常显著的影响。此外，研究人员还发现代偿性突变ISG引导序列，恢复E1/E2序列与ISG之间的碱基互补配对并不会带来circRNA产量的增加。令人非常意外的是，待环化RNA折叠结构越接近I型内含子剪接而成的天然mRNA结构，circRNA产量会出现显著增加。 总结来说，I型内含子的E1/E2序列和待环化靶标RNA序列均会对剪接活性和环化反应造成显著影响。 参考文献  1.Group I permuted intron-exon (PIE) sequences self-splice to produce circular exons. 2.Engineering circular RNA for potent and stable translation in eukaryotic cells. 3.Characterizing and circumventing sequence restrictions for synthesis of circular RNA in vitro. 识别微信二维码，添加生物制品圈小编，符合条件者即可加入 生物制品微信群！ 请注明：姓名+研究方向！ 版 权 声 明 本公众号所有转载文章系出于传递更多信息之目的，且明确注明来源和作者，不希望被转载的媒体或个人可与我们联系(cbplib@163.com)，我们将立即进行删除处理。所有文章仅代表作者观点，不代表本站立场。

– Study will assess the safety, pharmacokinetic and pharmacodynamic profiles and anti-tumor activity for CV6-168 in the treatment of multiple solid cancers, including colon, gastric, breast, ovarian, lung, and other solid tumors – CV6-168 is a dUTPase-specific, first-in-class DNA Uracilation agent, the first of the company’s innovative pipeline targeting Uracil-DNA metabolism to enter clinical trials Aug. 15, 2024 -- CV6 Therapeutics (NI) Ltd. (“CV6”), a clinical-stage pharmaceutical company dedicated to improving the lives of patients with cancer and inflammatory diseases by developing novel, first-in-class, small molecules targeting Uracil-DNA metabolism, today announced the successful dosing of the second patient in its Phase 1a study evaluating CV6-168 + infusional 5-fluorouracil (5-FU) in cancer patients. This Phase 1 part of this modular, first-in-human Phase 1a clinical trial (ISRCTN12434145) is a multicenter, open-label, dose-escalation study of CV6-168 in patients with advanced metastatic solid tumors refractory to standard treatment. The primary objectives of the study are to determine the following parameters for CV6-168: safety profile, potential optimal biologically relevant doses, maximum tolerated dose, and anti-tumor activity. “CV6-168 induces DNA Uracilation, a novel mechanism of action, and is our first drug candidate to enter the clinic. CV6-168 has the potential to treat a variety of commonly occurring cancers in combination with cornerstone therapies that are used to treat millions of patients per year globally,” said Dr Robert D. Ladner, founder, and chief executive officer at CV6. “CV6-168 accelerates the translation of Uracil-DNA biology by inducing the misincorporation of uracil into cancer cell DNA resulting in uracil-repair-mediated DNA damage, immune modulation and cell death into clinical applications. The dosing of the second patient in our first clinical trial marks an important milestone as CV6 works to deliver new and effective first-in-class small molecules with a novel mechanism of action to patients facing common, difficult-to-treat cancers.” CV6-168 is a novel, targeted, small molecule, dUTPase-specific inhibitor in development for the treatment of multiple, high-incidence cancers. In preclinical studies, it has demonstrated robust anti-tumor activity in cell line and animal models with no added toxicity. CV6-168 targets the nucleotide metabolism enzyme dUTPase, with high specificity, avoiding drug-drug interactions with its drug combination partners that include thymidylate synthase (TS) inhibitors like 5-fluorouracil (5-FU). CV6 is a clinical-stage biopharmaceutical company focused on the development and commercialization of novel therapeutic agents for patients with cancer and inflammatory diseases. CV6 develops innovative, first-in-class therapies with a novel mechanism of action by targeting dUTPase and Uracil-DNA Metabolism - an area of research that its founder helped pioneer. Its lead oncology drug candidate CV6-168 is in a Phase 1a clinical trial in advanced cancers. Investors include QUBIS, the commercialization arm of Queen’s University in Belfast, Invest Northern Ireland, CoFund NI, managed by Clarendon Fund Managers, and Techstart Ventures, as well as US, UK, European, and Australian-based private investors. CV6 is headquartered in Belfast, Northern Ireland, UK, with research facilities at Queen’s University Belfast in the Patrick G Johnston Centre for Cancer Research. The content above comes from the network. if any infringement, please contact us to modify.

来源：药渡撰文：balabala    编辑：哦呼靶向蛋白降解（Targeted protein degradation, TPD）已经被确立为一种可行的替代方法，可以在生物学和临床环境中减弱特定蛋白的功能。独特的TPD作用模式使以前不可药物的蛋白质成为可行的靶标，扩大了可药物特性和特权靶标蛋白质的范围。随着TPD的不断发展，出现了一系列不依赖于募集E3泛素连接酶的创新策略，包括自噬系固化合物（ATTEC）、溶酶体靶向嵌合体（LYTAC）、自噬靶向嵌合体（AUTOTAC）、细胞因子受体靶向嵌合体（KineTAC）、整合素促进的溶酶体降解（IFLD）和树突状DNA嵌合体（DENTAC），已经被开发出来，通过溶酶体运输受体、生长吞噬体上的LC3-II或寡聚的SQSTM1来劫持内源性溶酶体（图1）。这些工具有效地降解细胞内、细胞外和膜蛋白、蛋白质聚集体、脂滴和受损的细胞器。此外，研究表明，病理蛋白可以直接被募集到26S蛋白酶体上，并受到小分子的诱导蛋白水解，例如最近开发的化学降解诱导剂（CIDEs）和泛素化独立降解剂（uids）。在这里，我们概述了这些直接与溶酶体或蛋白酶体结合的TPD技术的最新发展[1]。图1. 不依赖泛素化过程的TPD策略01通过自噬机制靶向降解细胞内蛋白质和细胞器自噬栓系化合物（attecs）最初的一种不依赖于泛素化的TPD方法被设计为利用LC3配体，在自噬的早期阶段直接与发育中的吞噬细胞相互作用（图2A），被称为ATTEC，即一种自噬小体绑定化合物，其结构包含靶蛋白配体、连接子、和LC3 配体三个部分。ATTEC分子可以直接将目标蛋白（POI）和自噬关键蛋白LC3结合在一起，促进目标蛋白通过自噬-溶酶体途径降解[2]。复旦大学鲁伯埙教授团队开创性地提出了ATTEC的概念，报道了一系列可连接突变亨廷顿蛋白（mHTT）和LC3的分子胶化合物。实验结果表明，这些化合物可以在细胞内和动物模型体内将mHTT靶向自噬体并降解 mHTT，而不影响野生型HTT的水平，还可以缓解亨廷顿病的相关表型[3]。靶向自噬嵌合体（AUTOTAC）2022年，Yong课题组首次提出AUTOTAC技术（图2B）。AUTOTAC是一种异双功能分子，一端为p62配体，另一端为靶蛋白配体，两者通过Linker相连。具体作用机制如下：AUTOTAC与p62和靶蛋白同时结合，形成三元复合物，导致p62构象发生变化，产生自身寡聚并暴露出LC3（light-chain 3）结合域，进而与LC3结合，介导底物隔离至自噬小体并通过溶酶体途径降解。基于这一理念，研究人员开发出多种能够激活p62的小分子化合物，并且在体外实验中检验了它们降解可溶性蛋白的能力。实验结果显示，将直接激活p62的小分子化合物与靶向雄激素受体（AR）或雌激素受体β（ERβ）亚基的分子连接在一起，可以导致AR和ERβ通过自噬作用被降解，并且有效抑制它们介导的下游信号通路[4]。图2.基于自噬的降解物的作用机制02通过内溶酶体途径靶向降解分泌蛋白和膜蛋白靶向溶酶体嵌合体（lytac）斯坦福大学的Bertozzi教授团队报道了一种不同的蛋白降解技术——溶酶体靶向嵌合体（LYTACs），为靶向降解细胞外以及膜结合蛋白开辟了新的可能（图3A）。研究人员报告称，溶酶体靶向嵌合体（LYTACs）是一种双功能分子，有两个结合域，一端携带与细胞表面跨膜受体CI-M6PR结合的低聚糖肽基团，另一端携带一个与靶蛋白结合的抗体或小分子。这两个结合域通过一个化学linker连接起来。后续经研究人员证实，LYTAC技术能够有效降解胞外蛋白和单次跨膜蛋白（如EGFR、PD-L1）[5]。整合素促进的溶酶体降解（IFLD）和树突状DNA嵌合体（DENTAC）细胞外和细胞膜相关蛋白占据了所有基因编码蛋白质的40%左右，其中部分蛋白是导致癌症、衰老、代谢、免疫等多种疾病的关键因素，是一类重要的药物作用靶点。为了实现此类蛋白的靶向降解，中国科学院深圳先进技术研究院房丽晶教授研究团队发展了一种新型整合素促进的溶酶体降解（IFLD）策略（图3B）。将靶蛋白结合配体与整合素识别配体相偶联，所得到的双功能化合物能够以整合素和溶酶体依赖的方式诱导细胞外或细胞膜蛋白的内吞和降解。整合素是细胞表面表达的细胞粘附受体，在细胞-基质相互作用中发挥重要作用。由于整合素αvβ3通常在肿瘤中过表达，因此该IFLD策略在降解肿瘤相关蛋白方面极具价值。应用这一策略，该团队设计、合成了靶向免疫检查点PD-L1的双功能化合物BMS-L1-RGD，并证实该化合物在细胞和整体动物水平均能够有效的降解靶标蛋白PD-L1，且具有显著的体内抗肿瘤效果[6]。此外，南京大学李金波教授团队报告了一种树突状DNA嵌合体（DENTAC）策略（图3C），该策略利用SRs进行靶向膜蛋白降解，包括POI结合分子与树突状DNA。DENTAC一端为靶蛋白配体，另一端为结合SR受体的树枝状DNA配体。DENTAC同时与靶蛋白和SR结合后可诱导靶蛋白溶酶体降解。共价树枝状DNA结构明确，性质稳定，是SR的通用配体。研究发现DENTAC平台可以利用SR介导致癌膜蛋白发生溶酶体途径降解，达到治疗肿瘤的目的[7]。细胞因子受体靶向嵌合体（KineTACs）美国加州大学旧金山分校James A. Wells团队研究报道了一种溶酶体降解策略，称为细胞因子受体靶向嵌合体（KineTACs）（图3D），可用于定向降解细胞表面和细胞外蛋白。KineTAC是完全基因编码的双特异性抗体，由结合其同源细胞因子受体的细胞因子臂和目标蛋白质的靶标结合臂组成。研究人员发现，含有细胞因子CXCL12的KineTAC可以使用诱饵回收受体CXCR7，将多种靶蛋白靶向到溶酶体进行降解。另外的KineTACs被设计用来驾驭其他CXCR7靶向细胞因子，CXCL11和vMIPII，以及白细胞介素-2（IL-2）受体靶向细胞因子IL-2。因此，KineTAC代表了一种通用的、模块化的、选择性的和简单的遗传编码策略，用于诱导具有广泛或组织特异性分布的细胞外和细胞表面靶标的溶酶体递送[8]。图3.利用配体触发受体内吞作用的基于溶酶体的降解物03通过直接募集26S蛋白酶体的TPD降解化学诱导剂（CIDEs）PROTAC分子依然面临一系列挑战：分子量过大而难以穿膜的困境；连接子的选择有限，尚无系统标准的设计方法；脱靶毒性；E3连接酶的表达水平差异；POI可能不是所选E3连接酶的天然/理想底物等。有鉴于此，Erin C. Dueber等人提出希望拓展降解化学诱导剂（CIDEs）的选择（图4A），这就是直接将底物引向26S蛋白酶体。26S蛋白酶体在所有细胞都高表达，理论上可以扩展到任何底物；此外，这种策略使得降解端只需一种配体就足够通用。机体本身也天然存在一些不依赖泛素化而直接被蛋白酶体降解的蛋白，如鸟氨酸脱羧酶和胸苷酸合酶[9]。研究人员通过实验也证明了通过直接蛋白酶体募集进行降解是靶向蛋白质降解的可行策略。ADRM1介导的泛素非依赖性降解物（UIDs）最近，Kodadek等人提出了一种基于直接参与26S蛋白酶体而不涉及多聚泛素链的替代TPD策略。UID系统使用26S蛋白酶体上的另一种泛素化受体ADRM1，由于不存在适合ADRM1的配体，因此使用稳定过表达与HaloTag7融合的ADRM1 N端片段的细胞系作为模型系统，并将与底物靶向配体共轭的伯氯烷烃链作为同源UID化合物进行测试（图4B），合成了靶向溴和外端结构域（BET）家族蛋白的原型UID。研究发现，由ADRM1结合物和JQ1组成的异二价分子（ByeTACs）在纳摩尔浓度范围内诱导了不依赖泛素化的蛋白酶体降解BRD4，他们也指出这些发现需要进一步验证，但该研究表明目标蛋白募集到蛋白酶体可能足以有效降解[1]。图4.直接与26S蛋白酶体结合的降解物总之，这些可替代的TPD方法不仅补充了用于细胞内蛋白质降解的第一代PROTAC，而且还提供了靶向位于细胞膜和细胞外空间的病理蛋白质独特策略。参考文献（可上下滑动）：[1] Targeted protein degradation directly engaging lysosomes or proteasomes.[2] Degradation of Cyclin-Dependent Kinase 9/Cyclin T1 by Optimized Microtubule-Associated Protein 1 Light Chain 3 Beta-Recruiting Coumarin Analogs.[3] Allele-selective lowering of mutant HTT protein by HTT-LC3 linker compounds.[4] Author Correction: the AUTOTAC chemical biology platform for targeted protein degradation via the autophagy-lysosome system.[5] Lysosome-targeting chimaeras for degradation of extracellular proteins.[6] Bifunctional Compounds as Molecular Degraders for Integrin-Facilitated Targeted Protein Degradation[7] Dendronized DNA Chimeras Harness Scavenger Receptors To Degrade Cell Membrane Proteins.[8] Modular cytokine receptor-targeting chimeras for targeted degradation of cell surface and extracellular proteins.[9] Targeted degradation via direct 26S proteasome recruitment.*声明：本文仅是介绍医药疾病领域研究进展或简述研究概况或分享医药相关讯息，并非也不会进行治疗或诊断方案推荐，也不对相关投资构成任何建议。内容如有疏漏，欢迎沟通指出！CAR-T真的实现了一针治愈？来看看各家的产品疗效对比强生Q1强势开局：营收超200亿美元，Carvykti飙升118%！巴瑞替尼专利攻防，晶型专利迎来无效挑战点击蓝字 关注我们