TERF1

研究揭示了一个关键的蛋白质复合体—染色体乘客复合体（CPC）和BLM-TOP3A-RMI1/2（BTR）复合体，其在有丝分裂阻滞期间能共同作用导致端粒去保护。 在细胞的微观世界里，染色体端粒一直被视为细胞衰老和癌症的关键“守护者”，其就像一顶顶小小的帽子戴在染色体的末端，保护着染色体不受损伤。然而随着机体年龄的增长，端粒会逐渐变短，当其变得足够短时就会向细胞发出停止分裂的信号，这是细胞防止癌变的一种重要机制。 然而，近日，一篇发表在国际杂志Nature Communications上题为“A CPC-shelterin-BTR axis regulates mitotic telomere deprotection”的研究报告中，来自日本京都大学等机构的科学家们通过研究发现，端粒不仅仅是一个被动的“警报器”，其在细胞面临压力时还能主动出击开启一种全新的抗癌防御机制。 端粒的结构非常特殊，其能通过形成一种被称为“t-loop”（端粒环）的结构将染色体的末端隐藏起来，从而避免激活一种名为ATM的蛋白激酶，这种激酶一旦被激活，就会引发细胞的DNA损伤响应（DDR）；这种机制就像是细胞内部的一个“安全开关”，在正常情况下，端粒通过t-loop结构将这个开关保持在关闭状态，防止细胞因误判而进入不必要的应激反应。 然而，当细胞进入有丝分裂阶段并被阻滞时端粒就会发生线性化，从而暴露出染色体末端并激活一个局部的、依赖于ATM的DDR。这种DDR能够检测到染色体末端的异常，并触发一系列的细胞反应，包括细胞周期停滞或细胞死亡，从而防止受损细胞继续分裂。这一过程被称为MAD（有丝分裂阻滞依赖性）端粒去保护。这项研究中，研究人员通过联合研究揭示了端粒在避免癌症方面的一个“意外机制”，他们展示了端粒如何通过一种复杂的主动机制将染色体末端暴露出来以应对有丝分裂期间的压力。 TRF1的相互作用或能揭示CPC和BLM在MAD端粒去保护中的作用 研究者Cesare教授解释道，大多数人认为端粒只是随着细胞分裂而逐渐缩短的被动存在，这是一种在衰老过程中使用的被动安全机制，但我们的研究结果表明，端粒要活跃得多，其能迅速响应压力并主动打开，从而激活一种类似于衰老的细胞反应来避免癌症发生。这种反应会导致细胞周期停滞或细胞死亡，阻止那些染色体出现错误的受损细胞继续分裂，研究者指出，端粒可能还有一种之前未知的抗癌机制，这一研究发现不仅对端粒研究领域具有重要意义，还可能为癌症治疗提供新的思路—通过靶向端粒来诱导癌细胞死亡。 本文研究揭示了端粒在细胞应激反应中的“主动性”，文章中，研究人员通过包括无偏倚的蛋白质相互作用组学、生化筛选、分子生物学和超分辨率成像技术等一系列复杂实验揭示了一个关键的蛋白质复合体—染色体乘客复合体（CPC）和BLM-TOP3A-RMI1/2（BTR）复合体，其在有丝分裂阻滞期间能共同作用导致端粒去保护。具体来说，CPC的一个组分—Aurora激酶B（AURKB）会在有丝分裂阻滞期间磷酸化端粒蛋白TRF1和TRF2。TRF1的磷酸化增强了CPC与TRF1的相互作用，而TRF2的磷酸化则促进了端粒的线性化，并能激活依赖于BTR的DDR；这一过程不仅揭示了端粒在细胞分裂过程中的动态变化，还为理解端粒如何在细胞应激时发挥保护作用提供了新的视角。 这项研究发现为癌症治疗带来了新的希望，如果科学家们能开发出针对端粒去保护机制的药物，或许就能诱导癌细胞进入不可逆的衰老或死亡状态，从而为癌症患者提供一种新的治疗选择。此外，这项研究还可能帮助科学家更好地理解细胞衰老和癌症之间的复杂关系，为开发延缓衰老和预防癌症的新策略提供理论基础。总之，端粒“主动防御”机制的发现不仅让科学家们对细胞内部的复杂调控有了更深刻的认识，也为未来的医学研究和癌症治疗开辟了新的道路。正如Cesare教授所说的那样，端粒不仅仅是细胞衰老的时钟，其还是细胞对抗癌症的“秘密武器”。（生物谷Bioon.com） 参考文献： Romero-Zamora, D., Rogers, S., Low, R.R.J. et al. A CPC-shelterin-BTR axis regulates mitotic telomere deprotection. Nat Commun 16, 2277 (2025). doi：10.1038/s41467-025-57456-8

编辑丨王多鱼 排版丨水成文 利用合成致死（Synthetic Lethality）特异性杀伤肿瘤细胞，是近年来肿瘤临床治疗的一项重要尝试。特别是靶向 BRCA1/BRCA2 突变的 PARP 抑制剂（PARPi），自问世以来便展现出显著的临床疗效，为基于合成致死原理的靶向药物开发提供了积极的实践验证。 然而，PARPi 的应用有其局限性，即便在 BRCA1/2 突变的肿瘤细胞中，也并非所有病例均能对其产生敏感应答。究其原因，除了耐药机制的存在，还在于 BRCA1/2 所参与的生物学过程比以前学术界所知的更为复杂。近年来，BRCA1/2 被发现在复制叉稳定性维持中发挥关键作用，然而细胞进行复制叉稳定性维持的分子机制还未得到清晰揭示。 2025年1月14日18时，浙江大学刘婷教授团队、方东教授团队及黄俊教授团队（博士生谢海华、宋礼志为共同第一作者）合作，在 Nature 子刊 Nature Chemical Biology 上发表了题为：Synergistic protection of nascent DNA at stalled forks by MSANTD4 and BRCA1/2-RAD51 的研究论文。该研究揭示了一条与 BRCA1/2 合成致死的新通路。 在这项最新研究中，研究团队发现了一个具有与端粒结合蛋白 TRF1/TRF2 类似的 Myb/SANT-like DNA 结合结构域的新蛋白——MSANTD4（Myb/SANT-like DNA-binding domain-containing protein 4），能结合于停滞复制叉翻转臂的 3'-ssDNA 末端，特异性阻碍 RPA-WRN/BLM-DNA2 复合物对翻转臂上新生 DNA 的过度切割，从而维持停滞复制叉的稳定性。该通路完全独立于传统已知的由 BRCA1/2-RAD51 介导的停滞复制叉保护机制，因此与 BRCA1/2 合成致死。 该研究首次报道了 MSANTD4 在复制叉稳定性维持中的功能及分子机制，为深入理解复制叉稳定性维持的分子机制以及肿瘤治疗提供了全新视角。 在高等真核生物中，复制叉翻转（Fork reversal） 是细胞应对复制压力的一种进化上高度保守的机制。在此过程中，“三叉”结构的复制叉在转位酶（例如 SMARCAL1、ZRANB3、HLTF 和 PICH），以及 DNA 拓扑异构酶 TOP2A 和 SUMO E3 连接酶 ZATT 等因子的协作下，被重塑为更稳定的“四叉”结构，从而维持复制叉的动态平衡。然而，复制叉翻转臂末端由于其结构类似于单一末端的 DNA 双链断裂（One-ended DSB），极易受到核酸酶攻击，从而引发新生DNA链的降解，导致基因组不稳定性。 已有研究表明，BRCA1/2 介导的 RAD51-DNA 核纤丝（RAD51 filament） 能够保护停滞复制叉的翻转臂，起到维持复制叉稳定性的作用。然而，现有证据显示，BRCA1/2-RAD51 轴并不能完全抵御多种核酸酶的攻击，这表明可能存在独立于 BRCA1/2-RAD51 的其它保护机制，有待进一步研究和揭示。 在解旋酶 WRN/BLM 等的协助下，核酸酶 DNA2 可修剪翻转复制叉的末端，产生带有  3'-单链DNA突出末端（3'-overhanged DNA）的结构。这一结构是复制压力缓解后，复制叉通过同源重组（Homologous recombination，HR）实现重启的关键。然而，若这一切割过程失控，将导致复制叉的降解，并显著增加基因组不稳定性的风险。因此，如何精确调控这些复合物的活性，成为实现停滞复制叉精准调控和有效保护的关键科学问题。 研究团队发现，MSANTD4 蛋白在复制压力下能够被招募至停滞复制叉，并特异性结合 3'-overhanged DNA。该蛋白通过拮抗 BLM 或 WRN 对复制叉翻转臂双链 DNA 的解旋活性，有效阻止了 DNA2 对新生 DNA 的降解。与这一作用一致，MSANTD4 的缺失会导致细胞内新生 DNA 降解显著增加，同时提升细胞对复制压力的敏感性。此外，由于 MSANTD4 保护翻转复制叉末端的机制与传统的 BRCA1/2-RAD51 轴完全不同，研究者还发现，MSANTD4 的缺陷能够进一步加剧 BRCA 缺陷细胞中新生 DNA 的降解现象，并显著提高这些细胞对复制压力的敏感性，展现出“合成致死”的效应。 综上所述，该研究首次报道了 MSANTD4 在复制叉稳定性调控中的关键功能与作用机制；系统阐明了 MSANTD4 保护停滞复制叉新生 DNA 链的分子生物学过程；同时揭示了一种 MSANTD4 与 BRCA1/2-RAD51 协作的新型复制叉保护模式。该协同机制能够有效防止核酸酶对停滞复制叉翻转臂中新生 DNA 的过度降解，为 BRCA1/2 突变相关肿瘤的“合成致死”疗法开发提供了潜在的全新靶点。 论文链接： https://www-nature-com.libproxy1.nus.edu.sg/articles/s41589-024-01833-9 设置星标，不错过精彩推文 开放转载 欢迎转发到朋友圈和微信群  微信加群  为促进前沿研究的传播和交流，我们组建了多个专业交流群，长按下方二维码，即可添加小编微信进群，由于申请人数较多，添加微信时请备注：学校/专业/姓名，如果是PI/教授，还请注明。 点在看，传递你的品味

本文为转化医学网原创，转载请注明出处 作者：Sophia 导读： 早期转移是胰腺导管腺癌 （PDAC） 预后极差的主要因素，肝转移是 PDAC 中最常见的远处转移形式。 2024年1月30日，华中科技大学附属同济医学院研究人员在期刊《Cell Death & Disease》上发表题为“Exosome-derived tRNA fragments tRF-GluCTC-0005 promotes pancreatic cancer liver metastasis by activating hepatic stellate cells”的研究论文，研究证实， 外泌体衍生的 tRNA 片段 tRF-GluCTC-0005 通过激活肝星状细胞促进胰腺癌肝转移。 https://www-nature-com.libproxy1.nus.edu.sg/articles/s41419-024-06482-3 研究背景 01 胰腺导管腺癌 （PDAC） 是一种高度致死的实体瘤，生存率低，死亡率高。PDAC 的主要治疗选择包括手术切除、化疗和放疗，具体取决于肿瘤分期。尽管早期发现PDAC的目标是值得称赞的，并且可能导致总生存期的显着改善，但超过70%的PDAC患者在当前模式下诊断时已经失去了手术切除的机会。因此， 有必要为PDAC开发替代分子诊断生物标志物。 含 WD 重复序列的蛋白 1 （WDR1） 在肌动蛋白细胞骨架重塑中具有重要作用，这已在多种细胞的胞质分裂和细胞迁移中得到证实。它通过切割肌动蛋白丝和从细丝中解离肌动蛋白单体来进行肌动蛋白分解。据记载，失调的 WDR1 控制恶性肿瘤的细胞侵袭、迁移和增殖。例如，通过肌动蛋白细胞骨架介导的YAP控制，高表达的WDR1刺激非小细胞肺癌细胞的增殖和迁移。最近的一项研究表明， Hippo 信号通路的耗竭导致 TAZ 的蛋白酶体依赖性降解，并最终阻止了 PDAC 肿瘤的生长和肝转移。 转移 RNA 衍生片段 （tRFs） 是 tRNA 片段化产生的短 RNA，其作用在癌症研究中引起了高度关注。tRF表现出不同的大小和序列，与癌症发展和细胞应激反应的各个方面有关。根据其不同的位置，tRF分为五种不同的类型：tRF-1、tRF-2、tRF-3和tRF-5。大量研究表明，tRFs积极靶向结合的RNA或蛋白质以引起生物学效应，包括调节蛋白质翻译、表观遗传修饰、控制细胞周期和免疫信号。 尽管tRFs在一些实体瘤中得到了深入研究，但tRFs在PDAC中的研究仍然有限。 研究结果 02 为了研究PDAC肝转移的机制，我们发现PDAC细胞可以通过外泌体促进转移前生态位（PMNs）的形成，从而促进早期肝转移。在我们的研究中，用PDAC衍生的外泌体（PDAC-exo）处理肝星状细胞（HSCs），并检测到HSCs的活化。tRF-GluCTC-0005是一种新型转移RNA衍生片段，通过PDAC患者血清外泌体的小RNA测序获得。生物信息学分析和 RNA pull-down 分析揭示了 WDR1 和 tRF-GluCTC-0005 之间的相互作用。采用KPC转基因小鼠模型和AAV介导的sh-WDR1小鼠模型检测体内肝转移机制。最后，采用双荧光素酶报告基因法、蛋白突变截短法、Co-IP法和流式细胞术法探究HSCs活化和PMNs形成的分子机制。我们发现外泌体中的 tRF-GluCTC-0005 与 HSC 中 WDRl 的 mRNA 的 3' 非翻译区结合并增加 mRNA 稳定性。WDR1的N端直接与YAP蛋白结合，抑制YAP磷酸化，促进YAP转录因子的表达。PDAC-exo 中的 tRF-GluCTC-0005 在肝脏中显著募集髓源性抑制细胞 （MDSC），从而形成 PMNs 免疫抑制微环境并进一步推进 PDAC 的肝转移。我们的结果表明， PDAC肝转移的关键是通过外泌体中tRF-GluCTC-0005上调WDR1激活HSCs，介导MDSCs浸润形成PMN。 研究结论 03 综上所述，本研究为tRFs促进PDAC肝转移的临床诊断和分子机制提供了启示。我们的研究结果表明， 血清外泌体中的tRF-GluCTC可以作为PDAC肝转移的预测因子。该研究还强调了tRF-GluCTC在调控WDR1中的作用及其在HSC活化和肝纤维化中的意义，HSCs中的分子相互作用有望为后续靶向治疗提供线索。 参考资料： https://www-cell-com.libproxy1.nus.edu.sg/cell-reports-medicine/fulltext/S2666-3791(24)00005-3#%20 https://www.shca.org.cn/Home/news/content/id/307/pid/25847 注：本文旨在介绍医学研究进展，不能作为治疗方案参考。如需获得健康指导，请至正规医院就诊。 热门·直播/活动 🕓 上海｜3月01日-02日 ▶第三届长三角单细胞组学技术应用论坛暨空间组学前沿论坛将在上海召开，诚邀您的参与！ 点击对应文字 查看详情