今晚有约 | AAV下游工艺开发的挑战与应对策略

2023-11-22

基因疗法疫苗

腺相关病毒（Adeno-associated virus，AAV）是目前发现结构最简单的、无包膜的单链DNA病毒，病毒基因组长约有4.7Kb，属于细小病毒家族。其由一个具有反末端重复序列的单链DNA和两个两端的开放阅读框Rep和Cap组成。由于AAV具有能长期表达、低毒性、低免疫原性以及高组织特异性等优势，因此逐渐成为基因治疗领域最重要的基因载体之，且被广泛应用。图1：AAV基因组结构示意图AAV病毒载体的生产流程分为上游病毒包装和下游病毒纯化。其中，下游工艺包括细胞裂解、澄清、核酸酶处理、超滤、色谱柱纯化、超滤浓缩、除菌过滤及罐装等环节。下游处理步骤占病毒生产总成本的很大一部分，且难度很大，特别是纯化过程，因此有效地制备高纯度病毒的方法很重要。图2：病毒载体的生产工艺在AAV的纯化过程中，面临一些挑战。如存在超过100种不同的变体AAV衣壳，而不同血清型的AAV蛋白存在差异，因此各种血清型的表面特性增加AAV纯化难度；针对工艺和产品相关的杂质（包括宿主细胞物质，DNA和空衣壳），缺乏一个有效和可重复的平台方法来将完整衣壳与空衣壳分离；另外，空衣壳的清除是一个难点，其必须使用特定的技术......图3：AAV制备过程中所产生的病毒颗粒类型可见，如何更好地考察产品相关杂质以及提升过程相关杂质的去除效率是AAV纯化工艺所面临的挑战。基于此，瑞普利金联合生物制品圈将于11月22日（周三）19：30-20：30进行关于“AAV下游工艺开发的挑战与应对策略”的线上直播。本次直播邀请了瑞普利金下游应用技术专家王凯晨老师和和元生物纯化主管王莹老师，分别进行关于“创新性层析超滤技术助力下游AAV载体工艺升级”和“AAV下游工艺开发中的挑战和策略”的主题分享。为大家提供AAV下游工艺优化方案。嘉宾介绍1、王凯晨瑞普利金下游应用技术专家他一直专注于生物制药下游工艺的开发及应用。王凯晨毕业于华东理工大学生物化工专业，超过6年的物制药行业经验，精通生物下游超滤浓缩，层析技术，特别在单抗，重组蛋白纯化技术方面有着丰富的经验。在加入Repligen之前，曾在睿智化学，杜邦生命健康工作，参与并主导多个生物药下游工艺的开发及GMP生产。2、王莹和元生物纯化主管毕业于合肥工业大学，现任职于和元生物技术（上海）股份有限公司，在生物制药纯化领域有5年多的工作经验。负责和元生物AAV工艺开发、工艺放大、工艺验证、工艺转移和生产支持。加入和元生物之前曾在药明生物工作，参与并主导了多个单抗、双抗、融合蛋白、新冠疫苗项目的工艺开发和放大生产以及病毒清除验证。Repligen（纳斯达克证交所代码：RGEN），中文名瑞普利金，是一家专注于生物工艺的全球化生命科学公司。自1981年创立以来，一直致力于为客户提供专业知识和技术创新。我们通过开发和商业化极具创新性的产品和灵活的解决方案，来帮助客户解决生物药生产过程中的关键步骤，从而推动生物工艺的进步。Repligen总部位于萨诸塞州波士顿，在美国马萨诸塞州、加利福尼亚州和新泽西州以及瑞典、法国、荷兰、德国和爱沙尼亚设有主要生产基地。参考资料：[1]基础干货丨一文了解腺相关病毒（AAV）是什么？.2023-03-30.[2]技术贴：腺相关病毒载体AAV研究现状及开发工艺梳理.生物制品圈.2023-03-09.[3]AAV工业化生产面临的挑战及应对策略（下游篇）：纯化纯化还是纯化.星耀研究院.2022-08-18.[4]Analytical methods for process and product characterization of recombinant adeno-associated virus-based gene therapies.Published:February 17, 2021.识别微信二维码，添加生物制品圈小编，符合条件者即可加入生物制品微信群！请注明：姓名+研究方向！版权声明本公众号所有转载文章系出于传递更多信息之目的，且明确注明来源和作者，不希望被转载的媒体或个人可与我们联系(cbplib@163.com)，我们将立即进行删除处理。所有文章仅代表作者观点，不代表本站立场。