Fatty Liver, Alcoholic

丨本期上榜企业由药融圈推出的2024《CXO企业品牌榜》榜单推荐。榜单持续征集中... 榜单介绍：随着全球医药研发投入的不断增加以及药品上市许可持有人制度的实施，中国 CXO 行业（CRO、CMO、CDMO）得以快速发展。对于 MAH 企业来说，迫切需要一个能够链接 CXO 企业资源的平台；而对于 CXO 企业而言，也需要一个展示自身的平台，以便筛选潜在的合作机会。在此背景下，药融圈 CXO 企业品牌榜应运而生，旨在为CXO企业提供更多曝光机会，吸引更多关注，促成更多合作项目。 01 临床前药代动力学研究 拥有一支在药代动力学、药效学及毒理学等方面具有专业知识的团队，可提供符合NMPA和FDA法规要求的一系列体内、体外药代动力学试验,包括小分子化合物、多肽、抗体类药物等，提供最优化的解决方案和增值服务。 02 临床前药效学研究 华仁济瀛生物药效学研究平台团队成员具有较强的建模能力和丰富的实操经验，帮助客户快速完成新药非临床药效学研究、提高效率和减少项目转化凤险，可以承接实验猴、大小、豚鼠、免、小型猪等各种动物的申报性与非申报性的药效研究技术服务,能够开展药效项目涉及糖尿病、非酒精性脂肪性肝炎/肝病、高血症、脑卒中、阿尔兹海默症、帕金森、骨缺损及骨性关节炎、抗血栓等适应症领域。 03 Non-GLP非临床安全性评价研究 华仁济瀛生物拥有一批具备丰富项目经验的技术人员，团队拥有多年国内外实验外包服务工作经验及GLP工作背景的专业技术人员，与来自医疗/科研型高校和学术研究机构的科研人员和技术团队保持良好的合作关系。可高质量开展优质的Non-GLP非临床药物安全性评研究。 包括客户需求定制的毒性剂量探索、单次给药毒性、重复给药毒性、局部给药毒性以及各种化合物的遭传毒性、安全药理研究。涵盖试验方案设计/准备/编作;IACUC审查;活体实验;生物样品的采集和临床病理分析;统计数据评估/分析;毒代动力学分析;一般检查、血液学生理生化分析、尿常规分析、尸体解剖、脏器重量和组织学、病理组织切片的制备、特殊染色、免组化;研究报告和资料管理等。 04 生物样本分析 华仁济瀛生物建有大规模的生物样本分析平台，平台联合科研中心拥有多种先进检测实验设备，可完成多样性生物样本分析。 Nikon C2 激光共聚焦显微镜 UltimalV组合型X射线行射仪 NX10原子力显微镜 安捷伦气液质联用仪 05 平台介绍 实验动物是生命科学研究要药物研发的重要支撑条件。广西华仁济瀛生物科技有限公司作为一家综合性实验动物机构，致力于为生命科学研究、CRO药效试验及药代动力学试验、医学成果转化提供实验动物和实验平台。 我们的优势 1、拥有优质的大动物资源和相应的动物使用许可证，包括：五阴级食蟹猴、普通级食蟹猴、恒河猴、巴马小型猪、树鼩。匹配各类新药研发需求。 2、具备丰富的非人灵长类动物疾病模型建模经验和多种模型储备。擅长构建多种非人灵长类动物的自发、药物诱导、手术模型。预先储备多种疾病模型动物（手术类除外），助力临床前实验快速高效开展。 3、自有平台功能完善，仪器设备先进，保障实验数据的精准可靠性。 拥有屏障环境动物实验室、普通环境动物实验室、分子生物学实验室、病理实验室。在大动物实验方面配备了大动物专门手术室、行为学分析系统、影像学相关仪器、脑立体定位注射系统、血液分析系统等用于动物模型构建和药效学、药代动力学分析的系统性设备。 4、高水平执行团队，专职专岗执行，保证高质量执行。 中心拥有强大的动物实验执行团队，硕士以上学历人员占比62%，本科以上学历人员占比90%，配备专业的兽医、动物饲养员、QA、手术团队、专题负责人岗位，对实验各个环节进行严格执行，层层质检，实验记录完善。 5、体系完善，保障执行过程规范有序。 建立了完善的质量管理体系，涉及项目管理标准、质量管理标准、操作执行标准、产品标准、档案管理标准、实验室安全标准、实验动物伦理管理标准等，保障执行过程规范有序。 专注科研，引领健康！广西华仁济瀛生物科技有限公司，用科技赋能生命，为人类的健康事业贡献力量！ 06 实验室模型案例 案例1：缺血性脑卒中模型构建 1.脑卒中的概念 脑卒中又称中风，具有致残率高、复发率高和病死率高等特点；脑卒中可分为缺血性脑卒中和出血性脑卒中，出血性脑卒中和缺血性脑卒中，其中缺血性脑卒中约占85%，出血性脑卒中约占15%。缺血性脑卒中患者临床症状主要表现为：运动障碍、感觉功能及语言功能障碍，从而出现上下肢偏瘫、面瘫、言语不清等。 2．模型方法：大脑中动脉M1段缺血再灌注临床上缺血性脑卒中患者主要是单侧大脑中动脉闭塞导致的。大多数患者在卒中后48小时内会得到溶栓治疗，再灌注会导致脑组织进一步损伤；大脑中动脉（middle cerebral artery，MCA）根据解剖结构可分为M1、M2、M3、M4，其供血区域越往后越小，因此采用开颅法短暂夹闭大脑中动脉（middle cerebral artery occlusion，MCAO）建立缺血再灌注食蟹猴脑卒中模型拟临床缺血性脑卒中。 3.模型构建流程和方法 图1：手术团队在执行食蟹猴左侧大脑中动脉M1段缺血再灌注损伤手术4.成模标准 4.1行为学评分 术前、术后1、3、5、7天，根据《食蟹猴神经功能缺损评分表》（Hua zhu et al, 2011）进行行为学评分，见附录A。模型组动物的神经功能缺损评分应显著高于假手术组动物。 图1：MCAO术后动物的行为学评分。（1）假手术组动物的神经功能缺损评分在术后1天时略高，随后逐渐恢复正常。（2）模型组动物在MCAO术后1~3天神经功能缺损评分逐渐升高，随后逐渐降低，在术后第3天神经功能缺损评分达到峰值；各个时间点与假手术组比较，均具有统计学差异。（3）依达拉奉干预组动物在MCAO术后1天神经功能缺损评分最高，随后逐渐下降；各个时间点与模型组比较具有统计学差异。 4.2 MRI扫描 在术前、MCAO术后3和7天进行MRI扫描，扫 描 序 列 有 T1WI、T2WI、T2W FLAIR、DWI，扫描结束后观察动物的苏醒情况，以及动物的精神行为状况。用Weasis软件进行图像分析，分别用T2W FLAIR和DWI序列分析水肿体积，每层水肿体积为该层水肿面积和层厚的乘积，各层的水肿体积之和为总的水肿体积。假手术动物应无水肿体信号，模型组动物的脑水肿体积应显著高于假手术组动物。 图2：MRI扫描T2W FLAIR序列和DWI序列结果。（1）假手术组动物在术前无异常信号，术后1天有轻微水肿，3天实基本无异常信号。（2）模型组动物在术前无异常信号，术后3天和7天水肿体积与假手术组比显著升高。（3）依达拉奉组在术前无异常信号，术后3天和7天水肿体积与假手术组及模型组比较均具有显著差异。 4.3 TTC染色 在手术后的第8天，对动物实施安乐死，取下大脑，冠状方向切片，每片脑组织的厚度为4 mm，用2% TTC，固定后用扫描仪扫描组织片，ImageJ进行图片分析，测量梗死面积，每层梗死体积为该层梗死面积和层厚的乘积，各层的梗死体积之和为总的梗死体积。假手术组动物应无梗死体积，模型组动物梗死体积应显著高于假手术组动物。 图3：脑组织梗死体积统计。（1）假手术组TTC染色呈现红色，无梗死体积。（2）模型组TTC染色正常组织呈现红色，梗死组织呈现白色，梗死体积显著大于假手术组。（3）模型组TTC染色正常组织呈现红色，梗死组织呈现白色，梗死体积与假手术组和模型组比较均具有显著差异。 案例2：非酒精性脂肪肝病模型 1． 非酒精性脂肪肝病的概念 非酒精性脂肪肝病：Nonalcoholic fatty liver disease，NAFLD，是指除酒精和其他明确的肝损害因素所导致的，以肝细胞脂肪过度沉积为主要表现的一种疾病。临床表现为：（1）部分病人可有乏力、消化不良、肝区隐痛、肝脾肿大等症状；（2）体重超重和（或）内脏性肥胖、空腹血糖增高、血脂紊乱、高血压等代谢综合征相关症状。NAFLD患者病理呈现以弥漫性肝细胞大泡性脂肪变性，肝细胞气球样变为主要特征。 2．非酒精性脂肪肝病造模机制高脂诱导的非酒精性脂肪肝病机制主要是由于过度摄入高脂肪饮食，导致肝脏中脂质的大量积累，脂质从头合成的过程中会产生大量的中间产物，如单酰甘油和二酰甘油等，引起肝细胞代谢紊乱、肝细胞线粒体功能障碍等。除此之外，高脂肪饮食同样会引起胰岛素抵抗，胰岛素抵抗可使外周脂解、肝摄取游离脂肪酸（FFA）增加，引起细胞β氧化产生过多ROS，造成肝细胞损伤，促进脂肪性肝炎的发生。 3.模型构建流程 高脂饲料诱导非酒精性脂肪肝模型 自发性非酒精性脂肪肝模型 4.自发模型筛选标准 非酒精性脂肪肝患者特性主要表现为肥胖、中年年龄，通过这一特性挑选可能存在脂肪肝的动物，再进行B超检查来确认脂肪肝情况。动物筛选标准为：年龄≥8岁，体重≥8.0 kg，BMI≥40，B超提示为脂肪肝。 5.高脂饲料诱导成模标准 5.1生理指标 高脂饲料造模3个月，动物体重、腹围、皮脂厚度、BMI升高，3个月后指标维持稳定。 注：“*”代表与0 mth比较，0.01<*P<0.05；**P<0.01。 图1：高脂饲料饲养造模后动物生理指标变化。（1）动物体重、腹围、皮脂厚度、BMI在0到3个月升高。（2）动物体重、腹围、皮脂厚度、BMI在3到6个月趋于稳定。 5.2血生化指标 通过给高脂饲料造模，根据动物血生化指标分析评估非酒精性脂肪肝病模型，验证高脂饲料诱导构建NAFLD模型后，动物出现血脂、肝功能异常。 注：“*”代表与0 mth比较，0.01<*P<0.05；**P<0.01。 图2：高脂饲料诱导NAFLD模型猴的血生化指标变化。（1）高脂饲料喂养6个月后，NAFLD模型猴的总胆固醇（CHOL）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、动脉粥样硬化指数（AI）、总胆红素（TBIL）、直接胆红素（DBIL）、胆碱酯酶（CHE）显著升高。（2）高脂饲料喂养6个月后，NAFLD模型猴的空腹血糖（FPG）、谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、碱性磷酸酶（ALP）、谷氨酰基转移酶（γ-GGT）有上升趋势。 5.3 B超指标 通过给高脂饲料造模，根据动物B超分析评估非酒精性脂肪肝病模型肝脏变化，验证高脂饲料诱导构建NAFLD模型后，动物肝脏存在脂肪肝情况。 造模前 造模6个月 图3：高脂饲料诱导NAFLD模型猴的肝脏B超变化。高脂饲料喂养6个月后，NAFLD模型猴的肝叶偏大，肝实质回声增强，后方衰减，肝肾区回声反差存在，肝脏存在脂肪肝情况。 案例3：高血压模型用于小核酸药物治疗 1.高血压的概念 高血压（hypertension，HBP）是指以体循环血液在流动时对血管壁造成的压力值（收缩压和/或舒张压）持续高于正常值的现象，伴有心、脑、肾等器官的功能或器质性损害的临床综合症。 2.项目流程 客户根据档案挑选自发高血压动物-血压持续监测-供试品注射-血压持续监测及采血 3.3成模标准 3.3.1血压值 测定时，动物静坐与猴椅上，身体、手臂、手指放松，手心向上、手臂自然弯曲，用电子血压计测量，将袖带卷绑在手臂上，袖带捆绑位置与心在同一水平面上，动物平静状态下测量6次以上，取3次（差值＜10）测量计算平均值，以mmHg记录，收缩压≥120 mmHg 和舒张压≥72 mmHg 判定为高血压。 图1：模型筛选。对照组动物与自发高血压组动物收缩压比较（n=10） 图2：给药后自发高血压组动物收缩压值在8周内的变化。（n=10） 案例4：骨缺损模型制备 1.食蟹猴骨缺损模型造模 手术造模：通过手术造成骨缺损。 2.成模标准 （1）骨缺损的长度不能低于临界缺损长度(critical sizedefect)：指骨缺损后若不作任何处理无法自愈的最低骨缺损长度； （2）动物负重管状骨的临界缺损长度应为其周径的1. 5～2. 5倍； （3）缺损局部临床表现结合X线平片CT扫描即可明确诊断。 案例5：肝穿活检术 Lucy：15958675001

点击蓝字 关注我们 前言 糖尿病和肝脏病是我国常见的慢性病，二者在发病机制、临床表现、诊疗靶点等多方面存在着相互作用或互为危险因素，共同管理有利于减轻疾病负担。为助力我国糖尿病肝脏病共管事业发展，本刊携手CHESS肝脏健康联盟共同推出“糖肝共管”文献月评专栏，每月分享有关于糖尿病合并肝脏病的疾病机制研究、诊疗进展等相关文献，并邀请国内相关领域的专家进行文献点评，希望为相关领域专家、研究人员及一线医务工作者开展科学研究和临床诊治提供一定的思路和帮助。 本期CDL文献月评将分享糖尿病及脂肪性肝病相关的6篇临床研究文献。本期特邀点评专家：宁波市第二医院胡爱荣教授，福建医科大学附属第一医院李友炳教授，河北医科大学第一医院张玉果教授。 胡爱荣教授 李友炳教授  张玉果教授 点评专家 胡爱荣教授 宁波市第二医院  主任医师（三级），博士生导师，博士后合作导师。宁波市第二医院肝病中心五病区主任、宁波市肝病研究所常务副所长。浙江省首届十佳感染科医师，浙江省151人才，浙江省首届医坛新秀人才，宁波市优秀中青年卫技人才，宁波市领军和拔尖人才。浙江省临床重点专科（肝炎专业）带头人，宁波市医疗卫生品牌学科（肝病学）带头人。中国医师协会感染科医师分会委员，中国中西医结合内分泌与代谢病专业委员会委员，中国研究型医院学会肝病专业委员会委员，中国人体健康科技促进会门静脉高压专业委员会委员；浙江省医师协会感染科医师分会副会长，浙江省中西医结合学会感染病专业委员会副主任委员；宁波市老年医学学会老年肝病分会主任委员。主持或主要参与国自然，（浙江）省自然、基础公益，国家卫健委等项目29项。获浙江省科技进步奖三等奖（第3位）、浙江省医药卫生科技二等奖（第1位）、宁波市科技进步奖二等奖、三等奖（第1位）。发表论文180余篇。 01 儿童肥胖合并脂肪性肝病与青少年发病的2型糖尿病风险增加相关 Steatotic Liver Disease in Pediatric Obesity and Increased Risk for Youth-Onset Type 2 Diabetes. Putri RR, Casswall T, Danielsson P, et al.  Diabetes Care. 2024: dc241236. doi: 10.2337/dc24-1236. 为评估肥胖儿童代谢功能障碍相关脂肪性肝病（MAFLD）和青少年2型糖尿病发病之间的关系，MAFLD和中度高血糖对2型糖尿病风险的联合作用，以及针对肥胖的治疗对2型糖尿病风险的影响，一项队列研究利用与瑞典国家登记系统相关联的儿童肥胖治疗登记系统[Barnobesitas Registret i Sverige （BORIS），1999 ~ 2020年]，纳入了10 346名超重或肥胖儿童和59,336名匹配的对照组。MAFLD通过转氨酶和诊断代码定义，2型糖尿病由国家登记系统确定。结果表明，在儿童肥胖患者中，由转氨酶或诊断代码定义的MAFLD与青少年发生2型糖尿病风险增加相关。MAFLD与中度高血糖有协同作用，显著增加发病风险。即便存在MAFLD的情况下，达到最佳效果的肥胖症治疗也能够降低 2 型糖尿病的发病风险。 在肥胖队列中，诊断2型糖尿病的中位年龄为16.9（Q1，Q3：14.7，21.4）岁，中位随访时间为8.1（Q1，Q3：5.1，11.7）年。30岁时2型糖尿病的累积发病率为22.7%（肥胖合并MAFLD）、9.9%（单纯肥胖）和0.7%（对照）。独立于年龄、性别、肥胖程度、中度高血糖和父母2型糖尿病，MAFLD与2型糖尿病发病风险相关（HR：2.71，95% CI：2.14~3.43）。MAFLD和中度高血糖的联合作用增加了2型糖尿病发病风险（HR：9.04，6.38~12.79），而达到最佳效果的肥胖治疗降低了发病风险（HR：0.23，0.09~0.57）。 点评 2型糖尿病和肥胖都属于代谢综合征的组分，代谢功能障碍相关脂肪性肝病（MAFLD）的诊断标准是：经影像学或病理学诊断为脂肪肝，且存在至少一项代谢综合征组分（2型糖尿病或肥胖）。而且，MAFLD与2型糖尿病之间的双向关联已多次得到证实。不过，肥胖儿童患MAFLD是否会增加2型糖尿病的发病风险，目前仍不明确。 这项研究利用瑞典国家疾病登记系统的大样本数据，涵盖了10346名超重或肥胖儿童，以及59336名匹配的对照个体。研究发现，在肥胖儿童中，MAFLD与青少年患2型糖尿病的风险增加有关，并且MAFLD和中度高血糖症的协同作用会显著增加2型糖尿病的发病风险。当然，对于存在MAFLD的肥胖儿童，实施积极的肥胖症治疗，能降低2型糖尿病的发病风险。因此，要重视肥胖儿童，尤其是合并MAFLD肥胖儿童的管理，尽早对这类人群开展治疗干预，可降低青少年2型糖尿病的患病风险。 当然，该研究也存在一些不足。（1）该研究仅依据血清丙氨酸转氨酶（ALT）≥2×正常值上限（ULN）或ICD-10（脂肪肝）来诊断MAFLD，正如该文指出，ALT诊断MAFLD并不严谨，且该研究ALT的 ULN为男性26 U/L、女性22 U/L；MAFLD亦未纳入ICD编码。2型糖尿病的诊断与数据提取也可能存在类似问题。（2）由于缺少组织病理学和影像学数据，该研究未评估MAFLD疾病谱及其与2型糖尿病的关系。 02 GLP-1受体激动剂和SGLT-2抑制剂对2型糖尿病患者发生非酒精性脂肪性肝病的风险：一项大样本巢式病例对照研究 Non-alcoholic fatty liver disease risk with GLP-1 receptor agonists and SGLT-2 inhibitors in type 2 diabetes: a nationwide nested case-control study Chang KC, Kuo FC, Yang CY, et al. Cardiovasc Diabetol. 2024 Oct 17;23(1): 367.doi: 10.1186/s12933-024-02461-2. 非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）/非酒精性脂肪性肝炎（NASH）是2型糖尿病患者中最常见的肝脏疾病。新型降糖药物（GLAs），如胰高血糖素样肽-1受体激动剂（GLP-1RAs）和钠-葡萄糖协同转运蛋白2抑制剂（SGLT2is），已被证明可改善肝脏相关生物标志物。然而，它们对NAFLD/NASH发生发展的影响尚不明确。 一项巢式病例对照研究利用中国台湾居民健康保险研究数据库2011年–2018年的数据，纳入年龄 ≥40岁、确诊为2型糖尿病、稳定使用GLA药物且未应用胰岛素、无NAFLD/NASH病史的患者。根据年龄、性别、入组日期、2型糖尿病诊断日期和疾病风险评分，将NAFLD/NASH患者匹配至10个随机抽样的对照。采用条件logistic回归分析评估肝脏风险和治疗暴露之间的关联，并进行了剂量-反应分析。结果表明，GLP-1RA和SGLT2i治疗可能预防2型糖尿病患者发生NAFLD/NASH，且治疗剂量越大，风险越低。 研究共纳入621,438例患者，中位随访时间1.8年，NAFLD/NASH的发病率为2.7/1 000人年。匹配后，确定了5,730例新发NAFLD病例（平均年龄：57.6岁，男性：53.2%）和45,070例对照（57.7岁，52.7%）。虽然GLP-1RAs或SGLT2is与NAFLD/NASH风险降低非显著相关[OR（95%CI）分别为：0.84（0.46~1.52）和0.85（0.63~1.14）]，而SGLT2i累积剂量的增加与NAFLD/NASH风险降低显著相关[0.61（0.38~0.97）]。 点评 美国食品药品监督管理局（FDA）近期批准了瑞司美替罗（Resmetirom，甲状腺激素受体-β激动剂）用于治疗伴有中度至晚期纤维化的非酒精性脂肪性肝炎（NASH）成人患者，不过，当前针对非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）以及伴有早期纤维化的NASH，仍无许可治疗方法。NAFLD/NASH与糖脂代谢紊乱相关联，胰高血糖素样肽-1受体激动剂（GLP-1RA）和钠-葡萄糖协同转运蛋白2抑制剂（SGLT2i）这两类降糖药已被证实可改善肝脏相关生物标志物，然而，它们对NAFLD/NASH发生发展的影响尚不明确。 该研究收集了中国台湾居民健康保险研究数据库中2型糖尿病人群为期8年的纵向数据，共纳入621,438例患者并进行倾向性评分匹配。研究发现，在这些人群中，使用GLP-1RA和SGLT2i可能降低相关NAFLD/NASH事件的发生风险和疾病进展，且这种降低效果呈剂量依赖性。此外，该研究基于意向治疗方案进行分析，此方案考虑到了药物治疗2型糖尿病的复杂性，增强了研究结果在现实人群中的适用性。 不过，该项研究也存在一定局限性。比如在研究人群中，GLP-1RA和SGLT2i使用者数量较少，而且该研究为巢式病例对照研究，并非队列研究，这可能导致在推断因果关系时存在局限，尤其在评估药物效应方面。综上，需要开展使用活性对照药物的长期随访研究，以获取更可靠的因果关系认知。 点评专家 李友炳教授 福建医科大学附属第一医院 福建医科大学附属第一医院肝病中心副主任医师，硕士研究生导师。福建省预防医学会肝脏病预防控制专业委员会常务委员，中国医师协会福建省感染病分会委员，中国首届研究型医院学会肝病专业委员会肝癌学组委员，中国科学技术协会科普部主办健康中国-肝胆病防治行动全国肝胆病咨询专家，福建省医学会肝病分会青年委员会委员，福建省医学会肝病学分会肝癌学组委员，福建省医学会肝病学分会介入学组委员，福建省医学会肝病学分会肝炎学组委员。先后作为项目负责人及主要研究者承担国家、省、厅级课题研究3项，在SCI、CSCD核心期刊及国家级杂志及上发表论文十余篇。参编学术著作《肝病查房手册》及《丙型肝炎临床实践》。 03 GLP-1RA对酒精相关性肝病合并2型糖尿病患者不良肝脏结局风险的影响 Impact of GLP-1RA on the Risk of Adverse Liver Outcomes Among Patients With Alcohol-Associated Liver Disease and Type 2 Diabetes Rashid Z, Woldesenbet S, Khalil M, et al.  Liver Int. 2024 . doi: 10.1111/liv.16132. 为明确GLP-1RA对酒精相关性肝病（ALD）和2型糖尿病（T2DM）患者不良肝脏结局（ALO）的影响。一项回顾性研究利用IBM MarketScan数据库，筛选2013~2020年新诊断的ALD合并T2DM患者，并根据GLP-1RA暴露情况进行分类。以首次发生肝功能失代偿（HD）、门静脉高压（PH）、肝细胞癌（HCC）或肝移植（LT）为复合终点，采用重叠倾向评分加权（OPSW）和泊松回归模型分析调整GLP-1RA后ALO的发生风险。结果表明，GLP-1RA可能对ALD合并T2DM患者具有肝脏保护作用。 14 730例患者中男性9752例（66.2%），中位年龄57（IQR：52~61）岁，2.2%（317例）的患者有GLP-1RA暴露。总体而言，患者中32.0%（n=4717）出现肝功能失代偿，15.9%（n=2345）出现门静脉高压，3.8%（n = 563）发展为肝细胞癌，2.5%（n=374）接受了肝移植。非GLP-1RA组肝功能失代偿（32.2% vs. 22.4%）和肝细胞癌（3.9% vs. 0.3%）的发生率高于GLP-1RA组（均P<0.001）；而PH（14.5% vs. 16.0%）和LT（1.3% vs. 2.6%）的发生率差异无统计学意义（均P>0.05）。采用OPSW后，GLP-1RA组ALO总发生率低于非GLP-1RA组（GLP-1RA：12.0%，95%CI：9.0~16.0 vs. 非GLP-1RA：21.0%，95%CI：20.0~22.0），GLP-1RA组发生ALO的绝对风险降低9.0%（95%CI：3.0%~15.0%）。与非GLP-1RA个体相比，GLP-1RA显著降低了肝功能失代偿的发病率，调整后发病率降低了0.56（95%CI：0.36~0.86）。 点评 该研究利用IBM MarketScan数据库回顾性研究GLP-1RA对酒精相关性肝病（ALD）合并2型糖尿病（T2DM）患者不良肝脏结局（ALO）的影响，文章采用重叠倾向评分加权（OPSW）和泊松回归模型分析美国不同地区共14730例酒精性肝病合并2型糖尿病患者接受GLP-1RA治疗后患者首次发生肝功能失代偿、门静脉高压、肝细胞癌及肝移植发生率，结果表明GLP-1RA可降低酒精性肝病合并2型糖尿病的患者包括肝功能失代偿等终末期肝病的作用。 目前国际上关于GLP-1RA与非酒精性脂肪肝合并2型糖尿病的研究较多，而关于GLP-1RA对酒精性肝病合并2型糖尿病病情影响的研究未见报道，此项研究填补了该类研究的空白，并且可能为GLP-1RA治疗酒精性肝病合并2型糖尿病提供新的理论依据。同时该研究也存在不足之处，第一，2型糖尿病患者并发非酒精性脂肪肝病较高，大量文献提示GLP-1RA可改善非酒精性脂肪肝合并2型糖尿病患者肝功能，而该研究所有患者没有排除非酒精性脂肪肝病，从而影响该研究结果。第二，酒精性肝病患者最关键的治疗是戒酒，大部分患者戒酒后肝功能可明显好转，GLP-1RA可明显抑制患者食欲，可能存在因接受GLP-1RA治疗后患者饮酒减少或戒酒导致肝功能好转从而降低酒精性肝病合并2型糖尿病患者终末期肝病的发生率，故本研究无法确定饮酒与GLP-1RA二者谁是肝功能好转的主要因素。 04 儿童和青少年1型糖尿病患者的血糖控制指标和代谢功能障碍相关的脂肪性肝病 Glycaemic control metrics and metabolic dysfunction-associated steatotic liver disease in children and adolescents with type 1 diabetes Maffeis C, Piona C, Morandi A, et al. Diabetes Obes Metab. 2024 ;26(12):5896-5905. doi: 10.1111/dom.15961.  MAFLD是动脉粥样硬化性心血管疾病的危险因素，本研究阐明了患有T1DM的儿童和青少年血糖控制和MAFLD的关系。这项研究在意大利维罗纳大学医院的儿科糖尿病区域中心、内分泌、糖尿病和代谢科以及胃肠科进行。共连续纳入244例确诊T1DM且年龄大于10岁儿童和青少年。 所有患儿均存在一种或多种糖尿病相关自身抗体（GADA、ZnT8A、IAA 或 IA-2A），确诊为T1DM。MAFLD的诊断标准为肝脏超声检查发现肝脂肪变性并伴有5种常见心血管代谢危险因素中的至少1种。研究评估指标主要有：短期和长期血糖控制、血压、血脂、人体测量学特征以及与MAFLD易感性强相关的三个遗传变异rs738409 （PNPLA3） 、rs58542926 （TM6SF2） 和 rs1260326 （GCKR）。研究采用独立样本t检验、Mann-Whitney U检验或χ2检验比较MAFLD组和非MAFLD组的临床特征，并通过Logistic回归分析判断MAFLD的独立危险因素。 最终共有244名T1DM患者纳入分析，其中女孩115名，平均年龄为16.2±3.2岁。MAFLD在儿童和青少年T1DM患者中的患病率为27.5%。与非MAFLD组相比，MAFLD组的血压、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇（LDL）、非高密度脂蛋白胆固醇、HbA1c以及血糖超过10.1 mmol/L的时间（TAR）均显著升高。HbA1c（OR：1.703，95%CI：1.040-2.787，P=0.034）、TAR（OR：1.028，95%CI：1.009-1.047，P=0.006）和LDL（OR：1.045，95%CI：1.013-1.078，P=0.004）是MAFLD发生的独立危险因素。MAFLD在T1DM儿童和青少年中非常常见，糖尿病发病时的平均HbA1c值、TAR和LDL是MAFLD的独立危险因素。 点评 本研究采用横断面研究方法，探索来自意大利的244名儿科T1DM患者血糖与MAFLD的关系。研究结果表明，MAFLD在T1DM患儿中的患病率相对较高为27.5%，且糖尿病发病时的平均HbA1c值、血糖超过10.1 mmol/L的时间（TAR）和低密度脂蛋白胆固醇（LDL）是MAFLD的独立危险因素。这些发现对于临床医生在管理T1DM患者时具有重要的指导意义。 本研究的主要局限性有三方面：首先，本研究采用超声诊断肝脂肪变性，超声检查对轻度肝脂肪变性灵敏度低，无法区分脂肪变性和脂肪性肝炎，未采用“金标准”肝活检。其次，本研究采用FibroScan检查但只用于肝脏硬度的检测，无法检测肝脂肪含量。最后，虽然研究提供了有价值的见解，但作为横断面研究，它无法确定因果关系。未来的研究可以考虑采用前瞻性队列研究设计，以进一步探索T1DM患儿血糖控制与MAFLD之间的因果关系。 点评专家  张玉果教授 河北医科大学第一医院 主任医师，教授，医学博士，硕士生导师。担任中华医学会肝病学分会青年学组委员，中国医师协会中西医结合学会肝病专家委员会委员，中国医药教育协会肝病专业委员会委员，河北省肝病学会青年委员会主任委员，河北省急救医学会第一届门静脉高压专业委员会副主任委员，河北省医师协会肝病医师分会常委，河北省急救医学会消化专业委员会常委，河北省康复医学会外科快速康复专业委员会常委，河北省中西医结合学会肝病专家委员会委员。《临床肝胆病杂志》审稿专家，参与完成/承担国家级、省部级及市厅级科研课题10余项。获河北省科技进步一等奖、河北省医学进步奖一等奖各一项。发表SCI及中华系列杂志等核心期刊学术论文40余篇，主编或参编/参译著作7部。 05 维格列汀作为辅助治疗对1型糖尿病和非酒精性脂肪性肝炎青少年患者基质金属蛋白酶-14水平、肝脏硬度和亚临床动脉粥样硬化的影响：一项随机对照试验 The impact of vildagliptin as an add-on therapy on matrix metalloproteinase-14 levels, liver stiffness and subclinical atherosclerosis in adolescents with type 1 diabetes and non-alcoholic steatohepatitis: A randomized controlled trial ElKabbany ZA, Ismail EAR, Hamed ET,et al.  Diabetes Obes Metab. 2024;26(12):5857-5869. doi: 10.1111/dom.15958. 许多1型糖尿病（T1DM）患者符合非酒精性脂肪性肝炎（NASH）的组织学标准，NASH可引发心血管疾病甚至死亡。基质金属蛋白酶-14（Matrix metalloproteinase-14，MMP-14）参与心血管疾病和动脉粥样硬化。为评估口服二肽基肽酶-4抑制剂维格列汀辅助治疗青少年1型糖尿病（T1DM）合并非酒精性脂肪性肝炎（NASH）的疗效及其对血糖的控制、MMP-14水平和颈动脉内膜中层厚度（CIMT）的影响，一项随机对照试验纳入60例T1DM合并NASH的青少年患者进行了相关研究。结果表明，维格列汀可改善T1DM合并NASH青少年患者的血糖控制、血脂异常和MMP-14水平，降低肝脏硬度和CIMT，因此减少亚临床动脉粥样硬化的发生，并控制了疾病进展，且维格列汀安全、耐受性好。 患者被随机分为两组，分别为口服维格列汀（50 mg，1次/ d）6个月和对照组。检测糖化血红蛋白、血脂、肝脂肪变性指数、甘油三酯-葡萄糖（TyG）指数和MMP-14水平，采用受控衰减参数（CAP）和瞬时弹性成像测量CIMT。12例（20%）T1DM合并NASH患者肝脏硬度≥7 kPa（F2期及以上）。基线MMP-14与胰岛素剂量（P=0.016）、甘油三酯和TyG指数、CIMT、肝脏硬度和研究患者的CAP水平呈正相关（均P<0.001）。6个月后，维格列汀治疗的1型糖尿病患者糖化血红蛋白、血脂、肝脂肪变性指数和TyG指数以及MMP-14显著降低（P<0.001）。CIMT，肝脏硬度和CAP在治疗后较基线水平和对照组显著降低（P<0.001）。 点评 非酒精性脂肪性肝炎（NASH）是一种与代谢综合征密切相关的肝脏疾病，NASH与2型糖尿病（T2D）均为代谢相关性疾病，目前已经有许多关于T2DM患者合并NASH的治疗及相互作用的研究，但有关1型糖尿病（T1DM）合并NASH的相关研究特别是药物治疗方面则相对较少。ElKabbany ZA等人的一项随机对照研究纳入了60例T1DM合并NASH的青少年患者，将其随机分为口服维格列汀（50 mg，1次/ d）组和对照组（空白对照），所有的患者均接受甘精胰岛素及门冬胰岛素的基础降糖治疗，检测基线及6个月后两组患者糖化血红蛋白、血脂、肝脂肪变性指数、甘油三酯-葡萄糖（TyG）指数、基质金属蛋白酶-14（Matrix metalloproteinase-14，MMP-14）和颈动脉内膜中层厚度（CIMT）等指标，研究发现，维格列汀治疗组的患者糖化血红蛋白、血脂、肝脂肪变性指数和TyG指数以及MMP-14较基线水平显著降低，CIMT、肝脏硬度测值和受控衰减参数（CAP）在治疗后较基线水平和对照组均显著降低。 该研究表明对于合并NASH的T1DM青少年患者，胰岛素联合口服维格列汀治疗方案，不仅能更好地控制血糖水平，而且还能改善肝脏炎症、降低肝脏硬度值，发挥肝保护的作用，在合并NASH的T1DM青少年患者降糖药物的选择方面具有重要的临床意义，但是该研究纳入的研究对象相对较少，影响结果的外推性，仍需要更多的样本量和实验数据进行验证。 06 墨西哥裔美国人的肠道噬菌体组：代谢功能障碍相关脂肪性肝病和糖尿病的高危人群 Gut phageome in Mexican Americans: a population at high risk for metabolic dysfunction-associated steatotic liver disease and diabetes Kwan S-Y, Sabotta CM, Cruz LR, et al.mSystems. 2024，17;9(9):e0043424. doi: 10.1128/msystems.00434-24. 墨西哥裔美国人特别容易受到代谢相关脂肪性肝病（MAFLD）的影响，这种疾病通常与糖尿病同时发生。尽管有大量证据表明肠道微生物影响MAFLD的发生，但确定肠道噬菌体参与的研究却很少。一项横断面研究通过粪便宏基因组测序，对南德克萨斯州340名墨西哥裔美国人的肠道噬菌体进行了特征化分析，同时通过瞬时弹性成像对肝脏脂肪变性进行了筛查。 研究表明，个体间噬菌体的差异与性别、出生国、糖尿病和肝脏脂肪变性有关，并据此确定了糖尿病和肝脏脂肪变性的噬菌体标志物。Inoviridae噬菌体的富集与糖尿病和肝脏脂肪变性有关。糖尿病还与大多数Escherichia噬菌体的富集有关，其中一些具有致病因子。肝脂肪变性与Lactococcus噬菌体r1t和BK5-T的耗竭，以及广泛分布的包括IX群（Burzaovirus coli, Burzaovirus faecalis）和VI群（Kahnovirus oralis）的Crassvirales噬菌体富集相关。Lactococcus噬菌体与乳酸乳球菌（Lactococcus lactis）有很强的相关性并且共存。Crassvirales噬菌体、B. coli、B. faecalis和UAG-未终止的crAss噬菌体分支，均与Prevotella copri相关并共存。总之，研究识别出了与两种具有全球重大负担的代谢疾病密切相关的肠道噬菌体标志物。这些噬菌体标志物可能在高风险人群的风险建模和疾病预防方面具有实用价值，并可作噬菌体疗法的潜在细菌靶点。 噬菌体通过塑造肠道细菌群落影响人类健康。研究利用墨西哥裔美国人的高危粪便样本，了解了与代谢疾病有关的肠道噬菌体变化，如糖尿病和肝脂肪变性。Inoviridae是一种感染细菌宿主的噬菌体，它能长期感染细菌而不裂解细菌，从而能显著影响细菌的生长、毒性、运动、生物膜形成和水平基因转移，而两种疾病的共同点是Inoviridae的富集。糖尿病还与感染噬菌体的大肠杆菌数量增加有关，其中一些噬菌体含有毒性因子。肝脂肪变性还与感染噬菌体的乳酸链球菌数量减少有关，并与Crassvirales，一种在全球范围内广泛分布且跨代持续存在的高度致病性噬菌体的数量增加有关。 点评 MAFLD与糖尿病两者常共存，互为因果，相互促进疾病的进展，这两种密切相关的代谢疾病给全球带来了巨大的负担。目前大量的研究主要分析肠道菌群与MAFLD、糖尿病发生及发展的关系，而本研究立题新颖，以肠道噬菌体为出发点，通过收集德克萨斯州340名墨西哥裔美国人的粪便，采用粪便宏基因组测序对其肠道内的噬菌体进行了特征化分析，并且使用FibroScan的瞬时弹性成像技术对纳入研究对象的肝脏脂肪变性和纤维化情况进行了筛查。结果表明，糖尿病与大多数温和Inoviridae噬菌体的富集有关，但有五种（Shigella 病毒 VASD、Shigella 病毒 7502Stx、Stx2转化噬菌体1717、Escherichia 病毒 933W和Enterobacteria噬菌体 cdtl）被认为具有致病因子。肝脏脂肪变性发生与几种温和噬菌体的变化有关，如与Lactococcus噬菌体 r1t 和 BK5-T 的富集呈负相关，与广泛分布的包括IX群（Burzaovirus coli, Burzaovirus faecalis）和VI群（Kahnovirus oralis）的Crassvirales噬菌体呈现正相关。糖尿病和肝脏脂肪变性两种疾病的共同之处是Inoviridae噬菌体的富集。 总而言之，该研究研提供了糖尿病和MAFLD这两种疾病的肠道噬菌体标志物，在这两种代谢相关疾病的预防、预测及治疗方面提供了新的思路，但仍有些许不足之处，如本研究是在局部地区特定人群的横断面研究，结论对于其他地理环境及同一环境的其他人群的适用性尚不清楚；同时，以瞬时弹性成像技术判定的肝脏脂肪变性情况可能存在一定的误差，从而影响患者肠道噬菌体特征与肝脏脂肪程度相关性的判断。 *主编：李婕、祁小龙 *执行编辑：靳睿 芮法娟 付丽云 往期回顾 “糖肝共管”文献月评——2024年10月第二十一期 CDL（中国糖尿病肝脏病共管行动计划）文献月评——2024年9月第二十期 CDL（中国糖尿病肝脏病共管行动计划）文献月评——2024年8月第十九期 CDL（中国糖尿病肝脏病共管行动计划）文献月评——2024年7月第十八期 CDL（中国糖尿病肝脏病共管行动计划）文献月评——2024年6月第十七期 CDL（中国糖尿病肝脏病共管行动计划）文献月评——2024年5月第十六期 CDL（中国糖尿病肝脏病共管行动计划）文献月评——2024年4月第十五期 CDL（中国糖尿病肝脏病共管行动计划）文献月评——2024年3月第十四期 CDL（中国糖尿病肝脏病共管行动计划）文献月评——2024年2月第十三期 CDL（中国糖尿病肝脏病共管行动计划）文献月评——2024年1月第十二期 CDL（中国糖尿病肝脏病共管行动计划）文献月评——2023年12月第十一期 CDL（中国糖尿病肝脏病共管行动计划）文献月评——2023年11月第十期 CDL（中国糖尿病肝脏病共管行动计划）文献月评——2023年10月第九期 CDL（中国糖尿病肝脏病共管行动计划）文献月评——2023年9月第八期 CDL（中国糖尿病肝脏病共管行动计划）文献月评——2023年8月第七期 CDL（中国糖尿病肝脏病共管行动计划）文献月评——2023年7月第六期 CDL（中国糖尿病肝脏病共管行动计划）文献月评——2023年6月第五期 CDL（中国糖尿病肝脏病共管行动计划）文献月评——2023年5月第四期 CDL（中国糖尿病肝脏病共管行动计划）文献月评——2023年4月第三期 CDL（中国糖尿病肝脏病共管行动计划）文献月评——2023年3月第二期 CDL（中国糖尿病肝脏病共管行动计划）文献月评——2023年2月第一期  声明：本文仅供医疗卫生专业人士了解最新医药资讯参考使用，不代表本平台观点。该等信息不能以任何方式取代专业的医疗指导，也不应被视为诊疗建议，如果该信息被用于资讯以外的目的，本站及作者不承担相关责任。 最新《国际糖尿病》读者专属微信交流群建好了，快快加入吧！扫描左边《国际糖尿病》小助手二维码（微信号：guojitnb），回复“国际糖尿病读者”，ta会尽快拉您入群滴！ （来源：《国际肝病》编辑部）

展位详情 2024年11月28-29日 北京创新药早期开发及CMC策略大会展位号：A03 立即扫码免费报名参会 01 平台介绍 实验动物是生命科学研究药物研发的重要支撑条件。广西华仁济瀛生物科技有限公司作为一家综合性实验动物机构，致力于为生命科学研究、CRO药效试验及药代动力学试验、医学成果转化提供实验动物和实验平台。 我们的优势 1、拥有优质的大动物资源和相应的动物使用许可证。 包括：五阴级食蟹猴、普通级食蟹猴、恒河猴、巴马小型猪、树鼩。匹配各类新药研发需求。 2、具备丰富的非人灵长类动物疾病模型建模经验和多种模型储备。 擅长构建多种非人灵长类动物的自发、药物诱导、手术模型。预先储备多种疾病模型动物（手术类除外），助力临床前实验快速高效开展。 3、自有平台功能完善，仪器设备先进，保障实验数据的精准可靠性。 拥有屏障环境动物实验室、普通环境动物实验室、分子生物学实验室、病理实验室。在大动物实验方面配备了大动物专门手术室、行为学分析系统、影像学相关仪器、脑立体定位注射系统、血液分析系统等用于动物模型构建和药效学、药代动力学分析的系统性设备。 仪器设备图片和名称： 大动物手术室 大动物操作间 荧光定量PCR 酶标仪 蛋白质跑胶和免疫印迹 低温离心机 大动物行为笼 脑立体定位系统 血液细胞分析流水线 全自动生化分析仪 全自动尿液分析仪 X光机 4、高水平执行团队，专职专岗执行，保证高质量执行。 中心拥有强大的动物实验执行团队，硕士以上学历人员占比62%，本科以上学历人员占比90%，配备专业的兽医、动物饲养员、QA、手术团队、专题负责人岗位，对实验各个环节进行严格执行，层层质检，实验记录完善。 5、体系完善，保障执行过程规范有序。 建立了完善的质量管理体系，涉及项目管理标准、质量管理标准、操作执行标准、产品标准、档案管理标准、实验室安全标准、实验动物伦理管理标准等，保障执行过程规范有序。 专注科研，引领健康！广西华仁济瀛生物科技有限公司，用科技赋能生命，为人类的健康事业贡献力量！ 02 本实验室模型案例 案例一：缺血性脑卒中模型构建 1. 脑卒中的概念 脑卒中又称中风，具有致残率高、复发率高和病死率高等特点；脑卒中可分为缺血性脑卒中和出血性脑卒中，出血性脑卒中和缺血性脑卒中，其中缺血性脑卒中约占85%，出血性脑卒中约占15%。缺血性脑卒中患者临床症状主要表现为：运动障碍、感觉功能及语言功能障碍，从而出现上下肢偏瘫、面瘫、言语不清等。 2．模型方法：大脑中动脉M1段缺血再灌注 临床上缺血性脑卒中患者主要是单侧大脑中动脉闭塞导致的。大多数患者在卒中后48小时内会得到溶栓治疗，再灌注会导致脑组织进一步损伤；大脑中动脉（middle cerebral artery，MCA）根据解剖结构可分为M1、M2、M3、M4，其供血区域越往后越小，因此采用开颅法短暂夹闭大脑中动脉（middle cerebral artery occlusion，MCAO）建立缺血再灌注食蟹猴脑卒中模型拟临床缺血性脑卒中。 3. 模型构建流程和方法 4.成模标准 4.1行为学评分 术前、术后1、3、5、7天，根据《食蟹猴神经功能缺损评分表》（Hua zhu et al, 2011）进行行为学评分，见附录A。模型组动物的神经功能缺损评分应显著高于假手术组动物。 ▲MCAO术后动物的行为学评分 （1）假手术组动物的神经功能缺损评分在术后1天时略高，随后逐渐恢复正常。（2）模型组动物在MCAO术后1~3天神经功能缺损评分逐渐升高，随后逐渐降低，在术后第3天神经功能缺损评分达到峰值；各个时间点与假手术组比较，均具有统计学差异。（3）依达拉奉干预组动物在MCAO术后1天神经功能缺损评分最高，随后逐渐下降；各个时间点与模型组比较具有统计学差异。 4.2 MRI扫描 在术前、MCAO术后3和7天进行MRI扫描，扫 描 序 列 有 T1WI、 T2WI、 T2W FLAIR、DWI，扫描结束后观察动物的苏醒情况，以及动物的精神行为状况。用 Weasis 软件进行图像分析，分别用T2W FLAIR和DWI序列分析水肿体积，每层水肿体积为该层水肿面积和层厚的乘积，各层的水肿体积之和为总的水肿体积。假手术动物应无水肿体信号，模型组动物的脑水肿体积应显著高于假手术组动物。 ▲MRI扫描T2W FLAIR序列和DWI序列结果 （1）假手术组动物在术前无异常信号，术后1天有轻微水肿，3天时基本无异常信号。（2）模型组动物在术前无异常信号，术后3天和7天水肿体积与假手术组比显著升高。（3）依达拉奉组在术前无异常信号，术后3天和7天水肿体积与假手术组及模型组比较均具有显著差异。 4.3 TTC染色 在手术后的第8天，对动物实施安乐死，取下大脑，冠状方向切片，每片脑组织的厚度为4 mm，用2% TTC，固定后用扫描仪扫描组织片，ImageJ进行图片分析，测量梗死面积，每层梗死体积为该层梗死面积和层厚的乘积，各层的梗死体积之和为总的梗死体积。假手术组动物应无梗死体积，模型组动物梗死体积应显著高于假手术组动物。 ▲脑组织梗死体积统计 （1）假手术组TTC染色呈现红色，无梗死体积。（2）模型组TTC染色正常组织呈现红色，梗死组织呈现白色，梗死体积显著大于假手术组。（3）模型组TTC染色正常组织呈现红色，梗死组织呈现白色，梗死体积与假手术组和模型组比较均具有显著差异。 案例二：非酒精性脂肪肝病模型 1． 非酒精性脂肪肝病的概念 非酒精性脂肪肝病：Nonalcoholic fatty liver disease，NAFLD，是指除酒精和其他明确的肝损害因素所导致的，以肝细胞脂肪过度沉积为主要表现的一种疾病。临床表现为：（1）部分病人可有乏力、消化不良、肝区隐痛、肝脾肿大等症状；（2）体重超重和（或）内脏性肥胖、空腹血糖增高、血脂紊乱、高血压等代谢综合征相关症状。NAFLD患者病理呈现以弥漫性肝细胞大泡性脂肪变性，肝细胞气球样变为主要特征。 2．非酒精性脂肪肝病造模机制 高脂诱导的非酒精性脂肪肝病机制主要是由于过度摄入高脂肪饮食，导致肝脏中脂质的大量积累，脂质从头合成的过程中会产生大量的中间产物，如单酰甘油和二酰甘油等，引起肝细胞代谢紊乱、肝细胞线粒体功能障碍等。除此之外，高脂肪饮食同样会引起胰岛素抵抗，胰岛素抵抗可使外周脂解、肝摄取游离脂肪酸（FFA）增加，引起细胞β氧化产生过多ROS，造成肝细胞损伤，促进脂肪性肝炎的发生。 3. 模型构建流程 诱导非酒精性脂肪肝 自发性非酒精性脂肪 ▲图一：高脂肪料饲喂食蟹猴前称量；图二：体检评估（皮脂厚度）；图三：体检评估（采血）4.自发模型筛选标准 非酒精性脂肪肝患者特性主要表现为肥胖、中年年龄，通过这一特性挑选可能存在脂肪肝的动物，再进行B超检查来确认脂肪肝情况。动物筛选标准为：年龄≥8岁，体重≥8.0 kg，BMI≥40，B超提示为脂肪肝。 5.高脂饲料诱导成模标准 5.1生理指标 高脂饲料造模3个月，动物体重、腹围、皮脂厚度、BMI升高，3个月后指标维持稳定。 ▲高脂饲料饲养造模后动物生理指标变化注：“*”代表与0 mth比较，0.01<*P<0.05；**P<0.01。 （1）动物体重、腹围、皮脂厚度、BMI在0到3个月升高。（2）动物体重、腹围、皮脂厚度、BMI在3到6个月趋于稳定。 5.2血生化指标 通过给高脂饲料造模，根据动物血生化指标分析评估非酒精性脂肪肝病模型，验证高脂饲料诱导构建NAFLD模型后，动物出现血脂、肝功能异常。 ▲高脂饲料诱导NAFLD模型猴的血生化指标变化。注：“*”代表与0 mth比较，0.01<*P<0.05；**P<0.01。 （1）高脂饲料喂养6个月后，NAFLD模型猴的总胆固醇（CHOL）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、动脉粥样硬化指数（AI）、总胆红素（TBIL）、直接胆红素（DBIL）、胆碱酯酶（CHE）显著升高。（2）高脂饲料喂养6个月后，NAFLD模型猴的空腹血糖（FPG）、谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、碱性磷酸酶（ALP）、谷氨酰基转移酶（γ-GGT）有上升趋势。 5.3 B超指标 通过给高脂饲料造模，根据动物B超分析评估非酒精性脂肪肝病模型肝脏变化，验证高脂饲料诱导构建NAFLD模型后，动物肝脏存在脂肪肝情况。 （左图：造模前）高脂饲料诱导NAFLD模型猴的肝脏B超变化（右图：造模6个月） 高脂饲料喂养6个月后，NAFLD模型猴的肝叶偏大，肝实质回声增强，后方衰减，肝肾区回声反差存在，肝脏存在脂肪肝情况。 案例三：高血压模型用于小核酸药物治疗 1.高血压的概念 高血压（hypertension，HBP）是指以体循环血液在流动时对血管壁造成的压力值（收缩压和/或舒张压）持续高于正常值的现象，伴有心、脑、肾等器官的功能或器质性损害的临床综合症。 2.项目流程 客户根据档案挑选自发高血压动物-血压持续监测-供试品注射-血压持续监测及采血。 3.成模标准 血压值：测定时，动物静坐于猴椅上，身体、手臂、手指放松，手心向上、手臂自然弯曲，用电子血压计测量，将袖带卷绑在手臂上，袖带捆绑位置与心在同一水平面上，动物平静状态下测量6次以上，取3次（差值＜10）测量计算平均值，以 mmHg 记录，收缩压≥120 mmHg 和舒张压≥72 mmHg 判定为高血压。 ▲模型筛选。对照组动物与自发高血压组动物收缩压比较（n=10）  ▲给药后自发高血压组动物收缩压值在8周内的变化。（n=10） 案例四：骨缺损模型制备 1.食蟹猴骨缺损模型造模 手术造模：通过手术造成骨缺损。 2.成模标准 （1）骨缺损的长度不能低于临界缺损长度(critical sizedefect)：指骨缺损后若不作任何处理无法自愈的最低骨缺损长度； （2）动物负重管状骨的临界缺损长度应为其周径的 1. 5～2. 5倍； （3）缺损局部临床表现结合X 线平片CT 扫描即可明确诊断。 案例五：肝穿活检术 1.消毒 2.定位 3.穿刺 4.取材 ▲点击免费报名上下滑动查看议程↓↓