【好文推荐】甘草次酸修饰酶敏感多柔比星脂质体的处方筛选及体外靶向肝癌干细胞作用的评价

2023-12-07

临床研究

未经授权，不得转载甘草次酸修饰酶敏感多柔比星脂质体的处方筛选及体外靶向肝癌干细胞作用的评价Formulation Optimization of Glycyrrhetinic Acid Modified Enzyme Sensitive Doxorubicin Liposomes and Evaluation of Targeting Liver Cancer Stem Cells in vitro孔亮1，郭睿博1，张璐1，李学涛1*，贾连群2*(1. 辽宁中医药大学药学院，辽宁大连 116600；2. 辽宁中医药大学中医脏象理论及应用教育部重点实验室，辽宁沈阳 110847)摘要：该研究利用薄膜分散- 硫酸铵梯度法制备甘草次酸(GA) 修饰的酶敏感多柔比星(1) 脂质体(GA-1-PVGLIG-Lip)，以1 包封率为评价指标，以磷脂与胆固醇(EPC/Chol) 质量比、磷脂与1(EPC/1) 质量比及水化时间为自变量，通过Box-Behnken 设计- 响应面法优化处方和工艺。并考察了该脂质体对基质金属蛋白酶2(MMP-2) 的响应能力和对肝癌干细胞(LCSCs) 的体外靶向作用。结果显示，优化处方和工艺参数为：EPC/Chol 质量比为6.88，EPC/1 质量比为27.74，水化时间为35.12 min。所得优化脂质体的1 平均包封率为(92.58±0.92)％。GA-1-PVGLIG-Lip 具有较好的MMP-2 响应能力，且在MMP-2 存在时靶向LCSCs 的能力显著增强。该研究成功制备了MMP-2 响应性逐级靶向LCSCs 的脂质体，为肝细胞癌的治疗提供了新策略。关键词：多柔比星；肝细胞癌；脂质体；甘草次酸；基质金属蛋白酶2 ；Box-Behnken 设计；响应面法；靶向；肝癌干细胞以下为文章节选肝细胞癌(hepatocellular carcinoma，HCC) 是常见的恶性肿瘤。统计数据[1—2] 显示，2020 年其发病率在恶性肿瘤中居第6 位，死亡率居第3 位，并且在我国的发病率和死亡率远高于世界平均水平。约80％的HCC 确诊患者处于进展性阶段，常规治疗方法是全身化疗，但缺少靶向性的化疗药会损伤正常细胞，不良反应严重，且易产生耐药性[3—4]。并且，放疗、化疗等传统治疗策略无法有效杀灭肝癌干细胞( liver cancer stem cells，LCSCs)[5]。LCSCs 又称肝癌起始细胞，具有较强的自我更新和分化潜能，可驱动HCC 发生，是肿瘤异质性形成的主要原因[6]。此外，LCSCs 也被认为是促进肿瘤细胞生长、介导耐药、增加肿瘤转移及复发的“元凶”[7]。因此，开发靶向LCSCs 的药物可能是解决目前HCC 临床治疗效果不佳、患者预后较差困境的有利策略[8]。多柔比星(doxorubicin，1) 是临床一线化疗药物，可用于HCC 的治疗，但缺乏靶向性和肿瘤细胞穿透能力，疗效不理想[9]。脂质体作为一种广泛应用的纳米药物载体，可延长体内循环时间，且易通过功能化修饰获得肿瘤靶向性[10]。甘草次酸(glycyrrhetinic acid，GA) 受体在HCC 细胞中高表达[11] ；基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase 2，MMP-2) 是一种蛋白水解酶，在HCC 微环境中大量分布，参与调控HCC 的进展。因此，采用MMP-2 敏感肽构建MMP-2 响应性纳米药物载体，再与GA 表面修饰法相结合，有望增加靶向抗肿瘤活性、减少不良反应[12]。本研究拟构建一种包载1 的MMP-2 响应性逐级靶向脂质体。在该脂质体中，PEG5000 位于最外层，形成水化膜包被层以增强EPR 效应，同时隐藏主动靶向配体GA，以减少正常肝细胞对1 的摄取、减轻不良反应。当脂质体到达肝癌细胞周围时，由于微环境中过表达MMP-2，脂质体中的MMP-2敏感肽(Pro-Val-Gly-Leu-Ile-Gly，PVGLIG) 会被酶切，使PEG5000 水化层脱落，暴露出靶向分子GA，进而通过主动靶向作用增加肝癌细胞的摄取，实现化疗药物的减毒、增效作用。基于此，本研究采用Box-Behnken 设计- 响应面法优化该脂质体(GA-1-PVGLIG-Lip) 处方，对包封率、MMP-2 响应性以及细胞摄取情况进行初步评价，旨在开发一种安全、有效的抗HCC靶向制剂。↑长按二维码阅读全文基金项目：国家自然科学基金项目(82204629)、中国博士后科学基金项目(2022MD713762)、辽宁省自然科学基金博士科研启动基金项目(2022-BS-197)作者简介：孔亮(1990—)，男，博士后，讲师，从事新型纳米给药系统的研究。通信作者：李学涛(1979—)，男，教授，博士生导师，从事新型给药系统的研究。E-mail：lixuetao1979@163.com贾连群(1975—)，女，教授，博士生导师，从事中西医结合基础的研究。E-mail：jlq-8@163.com文章详情欢迎登录《中国医药工业杂志》官网查看。年度发布2023年《全球药研新动态》《中国医院市场用药格局》（2023年Q2版）2023年《数图药讯》权威发布2022年度中国医药工业百强榜单解读中国仿制药发展报告（2022版）《2023年专利到期药品概述》医药行业专项报告中国医药中间体和原料药行业调研报告中国非甾体抗炎类原料药市场调研报告中国祛痰类原料药市场调研报告中国钙拮抗剂类原料药市场调研报告中国血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂类原料药市场调研报告中国口服血糖调节类原料药市场调研报告中国中枢兴奋类原料药市场调研报告中国抗痛风类原料药市场调研报告中国脑血管病类原料药市场调研报告END如需获取更多数据洞察信息或公众号内容合作，请联系医药地理小助手微信号：pharmadl001