八次跨膜蛋白—Napi2b，抗体药物开发新靶点

2023-08-11

孤儿药临床结果抗体药物偶联物临床2期

NaPi2b简介膜蛋白至少占目前所有测序基因组的30%和已知药物靶点的60%，因此在理解和治疗疾病方面具有重要意义【1】。膜蛋白的定位特性使其成为肿瘤疾病靶向治疗的重要靶点。目前，市场上有127种治疗性单克隆抗体，其中77种针对膜蛋白【2】。钠依赖性磷酸转运蛋白2B（SLC34A2、NaPi2b、NaPi-IIb和NPT2）是一种多通道的膜蛋白，是溶质载体SLC34家族的成员，该家族由NaPi-IIa（SLC34A1）、NaPi-IIb（SLC34A2）和NaPi-IIc（SLC34A3）构成。其中NaPi-IIb蛋白通过钠离子共转运介导无机磷酸盐进入上皮细胞，负责维持全身的磷酸盐平衡【3】。NaPi-IIb包含两个保守序列的倒置重复单元，由一个大的细胞外环连接，两个末端都位于细胞膜内【4】。Napi2b结构示意图【4】NaPi2b在疾病中的作用NaPi2b与多种疾病有关，包括SLC34A2基因突变引起的肺泡微石症，NaPi2b表达减少导致的炎症性肠病，以及几种类型的癌症（卵巢癌、肺癌、乳腺癌和甲状腺乳头状癌）。临床前和早期临床证据表明，NaPi2b在高级别浆液性上皮性卵巢癌、输卵管癌和原发性腹膜癌以及甲状腺癌、乳腺癌和非鳞状非小细胞肺癌中表达，在正常组织中表达有限。NaPi2b在肿瘤中高表达的第一个证据来自20世纪80年代和90年代的研究，该研究表明单克隆抗体MX35在卵巢肿瘤中具有高反应性，尽管当时抗原的身份尚不清楚。2008年，发现MX35抗体靶向的表位为NaPi2b，在90%的卵巢上皮性癌症细胞系中表现出反应性。随后的研究结果证实，NaPi2b及其SLC34A2基因在良性输卵管上皮和分化良好的浆液性、子宫内膜样癌以及在较小程度上的粘液性卵巢癌中高表达，但在正常卵巢上皮中不存在。因此，NaPi2b成为肿瘤治疗中非常有吸引力的靶点之一【3】。NaPi2b在卵巢癌和非小细胞肺癌腺癌中广泛表达，但在正常组织中较少表达。目前，市面上靶向Napi2b的抗体药物较少，Mersana开发的靶向Napi2b的ADC药物XMT-1536（Upifitamab rilsodotin，UpRi）最为知名，也是临床进展最快的一款候选药物。UpRi由人源NaPi2b单克隆抗体和微管抑制剂羟丙胺澳瑞他汀F通过可裂解连接子偶联而成，DAR值约为10。2022年12月，欧盟委员会（EC）将Mersana Mersana的UpRi指定为治疗卵巢癌的孤儿药。但是，今年UpRi也接连遭遇滑铁卢。多次跨膜蛋白开发技术平台Napi2b属于八次跨膜蛋白，开发全长蛋白难度较大。近岸蛋白根据此靶点蛋白的结构特征以及应用场景，利用公司成熟的多次跨膜蛋白开发技术平台，成功开发了Napi2b ECL2蛋白和不同种属（Human/Mouse/ Cynomolgus）的Napi2b全长蛋白。多次跨膜蛋白种类较多，公司建立的“三大”技术平台：ECL技术平台、膜蛋白-去垢剂技术平台以及VLP技术平台，可以帮助开发高活性的不同种类的跨膜蛋白产品。1. ECL技术平台近岸蛋白采用哺乳动物细胞表达系统，能够指导蛋白质的正确折叠，提供复杂的N型糖基化和准确的O型糖基化等多种翻译后加工功能，因而表达产物在分子结构、理化特性和生物学功能方面最接近天然高等生物蛋白质分子。2. 膜蛋白-去垢剂技术平台近岸蛋白以哺乳动物细胞表达技术为基础，搭建了全长多次跨膜蛋白的表达平台和纯化平台，并且已筛选出多种效果很好的去垢剂，能够增溶和纯化跨膜蛋白，并在含有去垢剂的溶液中维持全长多次跨膜蛋白天然正确的构象。3. VLP技术平台近岸蛋白以哺乳动物细胞表达技术为基础，建立了成熟的包膜VLP组装工艺，全长多次跨膜蛋白可以稳定且高密度的表达在膜上。同时，公司建立了多种VLP验证平台，保障多次跨膜蛋白的纯度和活性。近岸蛋白现推出Napi2b系列靶点蛋白，均经过ELISA验证，适用于动物免疫、靶向药物筛选、功能评估和质量控制等不同环节。此外，近岸蛋白还提供四次跨膜蛋白Claudin18.2和CD20靶点蛋白，加速靶向膜蛋白抗体药物开发。多次跨膜蛋白产品试用/定制，欢迎咨询部分数据展示：Immobilized Human NaPi2b ECL2-Fc (Cat#C27G) at 2μg/ml (100 μl/well) can bind Human NaPi2b Antibody(7C9)(Cat#NC091, Biotinylated by NHS-biotin prior to testing). The ED50 of Human NaPi2b Antibody(7C9) (Cat#NC091) is 50.90 ng/ml.Immobilized Recombinant Human NaPi2b-6His-Flag (Cat#C27K) at 2μg/ml (100 μl/well) can bind Human NaPi2b Antibody (7C9) (Cat#NC091). The ED50 of Human NaPi2b Antibody (7C9) (Cat#NC091) is 15.35ng/ml. Immobilized Recombinant Mouse NaPi2b-Flag (Cat#C27W) at 2μg/ml (100 μl/well) can bind Human NaPi2b Antibody (7C9) (Cat#NC091). The ED50 of Human NaPi2b Antibody (7C9) (Cat#NC091) is 1.65ng/ml.Immobilized Recombinant Cynomolgus NaPi2b-Flag (Cat#C27X) at 2μg/ml (100 μl/well) can bind Human NaPi2b Antibody (7C9) (Cat#NC091). The ED50 of Human NaPi2b Antibody (7C9) (Cat#NC091) is 3.61ng/ml.相关产品：Target ProteinProduct NameCat.No.NaPi2bRecombinant Human NaPi2b ECL2 (C-Fc)C27GRecombinant Human NaPi2b (C-6His-Flag)C27KRecombinant Mouse NaPi2b (C-Flag) C27WRecombinant Cynomolgus NaPi2b (C-Flag) C27XClaudin18.2Recombinant Human CLDN18.2 (N-Twin strep-Flag)C17DCD20Recombinant Human CD20 (C-Flag) C17GRecombinant Human CD20 (C-6His-Flag) C20P参考资料【1】Bulatova, Leisan et al. “Toward a Topology-Based Therapeutic Design of Membrane Proteins: Validation of NaPi2b Topology in Live Ovarian Cancer Cells.” Frontiers in molecular biosciences vol. 9 895911. 15 Jul. 2022, doi:10.3389/fmolb.2022.895911【2】To’a Salazar, G., Huang, Z., Zhang, N., Zhang, X.-G., and An, Z. (2021). Antibody Therapies Targeting Complex Membrane Proteins. Engineering 7, 1541–1551.doi:10.1016/j.eng.2020.11.013【3】Banerjee, Susana et al. “Targeting NaPi2b in ovarian cancer.” Cancer treatment reviews vol. 112 (2023): 102489. doi:10.1016/j.ctrv.2022.102489【4】Fenollar-Ferrer, Cristina, and Lucy R Forrest. “Structural models of the NaPi-II sodium-phosphate cotransporters.” Pflugers Archiv : European journal of physiology vol. 471,1 (2019): 43-52. doi:10.1007/s00424-018-2197-x苏州近岸蛋白质科技股份有限公司（简称近岸蛋白）深耕重组蛋白行业十余年，是一家专注于蛋白质技术与应用解决方案的高新技术企业，主营业务为生物药、体外诊断、mRNA疫苗药物、生命科学基础研究等领域的原料与技术解决方案，包括靶点及因子类蛋白、重组抗体、酶及试剂的研发、生产和销售及相关技术服务。公司在上海、苏州和菏泽建有研发、生产基地。访问www.novoprotein.com.cn或致电400-600-0940。点击“阅读原文”，了解更多产品信息