Pirfenidone

美国基因与细胞治疗学会（ASGCT）2025年学术年会于2025年5月13-17日在新奥尔良圆满举行，来自全球的8000多名基因与细胞治疗领域的科研人员、临床医师及产业代表参加了该会议。会议有490场口头演讲，数千份海报展示。本文对其中的17个特色演讲和海报内容进行了整理。1. 核苷修饰的mRNA-LNP疗法来自宾夕法尼亚大学的Drew Weissman博士介绍了他对mRNA疗法的未来展望，强调了其在疫苗之外的广泛潜力。他首先回顾了mRNA研究的悠久历史，驳斥了mRNA疫苗是一种快速、新发明的说法。然后，他讨论了早期与Katalin Karikó博士合作，通过使用核苷修饰来理解和克服mRNA的炎症性质，令人惊讶的是，这种修饰也增强了翻译。他演讲的很大一部分集中在将mRNA脂质纳米颗粒(LNPs)靶向递送到体内特定组织和细胞类型。他描述了如何通过修饰LNPs，使用诸如抗体、抗体片段、受体配体、适配体和肽等靶向方式，将它们导向肺等器官，更重要的是，导向免疫细胞。Weissman详细介绍了他们创造体内CAR-T细胞的创新方法。通过使用携带编码CAR的mRNA的修饰LNPs靶向T细胞，他们实现了在动物体内直接表达CAR-T细胞，从而绕过了昂贵且复杂的体外制造过程。这种体内CAR-T细胞方法在治疗小鼠心脏纤维化方面显示出可喜的结果。在另一项体内CAR-T项目中，功能性CAR-T细胞在猕猴体内也显示出快速且短暂的B细胞耗竭，这表明其可能是一种用于治疗自身免疫性疾病的“现货型”疗法，相比传统CAR-T细胞具有更高的安全性。目前，利用这种技术治疗自身免疫性疾病的临床试验正在澳大利亚进行。此外，Weissman还介绍了他们使用LNP-Cre和CD117(c-kit)在体内靶向骨髓干细胞的工作。这一方法实现了在小鼠骨髓干细胞中高效进行基因编辑，无需进行骨髓提取或化疗。他强调了这种技术通过体内碱基编辑治疗镰状细胞贫血的潜力，并展望了这种简化的、易于获取的治疗方案，有望为那些缺乏足够医疗资源的人群提供帮助。最后，Drew Weissman充满激情地讨论了疫苗和疗法的公平性。他强调了疾病负担和研究经费方面的不平等，着重指出人们对中低收入国家常见疾病缺乏关注。他详细介绍了新冠疫情爆发后，他为在这些地区建立mRNA-LNP GMP生产基地所做的合作努力，首先从泰国开始，以及他最近与世卫组织合作在全球发展中国家建立15个此类基地的项目。他还为这些国家争取到了其实验室mRNA疗法知识产权的免许可使用权，旨在促进当地自主研发针对疟疾、肺结核和镰状细胞贫血症等疾病的平价疫苗和疗法。2. 为一名患有CPS1缺乏症的新生儿加速开发个性化碱基编辑疗法宾夕法尼亚大学的 Kiran Musunuru 博士和费城儿童医院 (CHOP) 的 Rebecca Ahrens-Nicklas 博士介绍了一个引人注目的案例，展示了为患有严重 CPS1 缺陷的新生儿 （名为KJ）快速开发和交付个性化碱基编辑疗法的过程。面对这种紧急的尿素循环障碍，Musunuru 博士的实验室利用其成熟的基于 mRNA 的 CRISPR 碱基编辑和脂质纳米颗粒 (LNP) 递送平台。在非常短的时间内——仅在患者出生后四周——他们就确定了一种有效的碱基编辑器和向导 RNA 组合，可以在实验室培养的肝细胞中纠正患者特异性的 CPS1 变体 (q335X)，随后在六周内进一步优化了这一组合。与此同时，他们快速生成了一个携带患者 CPS1 变体的鼠模型，以在体内测试该疗法。在使用 LNP 后五个月内，在肝脏中实现了显著的校正性编辑（高达 42%），并且发现任何旁观者编辑都是同义突变。在六个月内完成了全面的脱靶分析，尽可能针对 KJ 的特定基因组进行了定制，结果显示该疗法具有良好的安全性。Musunuru 博士、Ahrens-Nicklas 博士及其合作伙伴快速开发了一种临床级 LNP 药物产品，其中包含定制化的碱基编辑器和向导 RNA 。这种个性化疗法在获得 FDA 扩大使用许可后进行，在 KJ 六到七个月大时给予治疗，展现了快速碱基编辑和 LNP 递送对于像 CPS1 缺陷这样危及生命、极其罕见的遗传疾病的强大作用，并突显了向患者特异性基因编辑转变的可能趋势。3. 为所有有需要的人提供有效且易于获取的针对艾滋病和镰状细胞贫血的治愈性干预措施盖茨基金会的Mike McCune博士介绍了一项全面的战略，旨在开发一种全球可及的、单次给药的体内基因疗法，用于治疗艾滋病和镰状细胞贫血。他指出，尽管抗逆转录病毒疗法已将艾滋病从一种“死刑”转变为可控制的慢性疾病，但其仍存在诸多局限性，例如患者依从性挑战、无法完全抑制病毒，以及长期并发症等问题。这些局限性使得开发根治艾滋病的方法变得尤为必要。为此，盖茨基金会启动了“艾滋病前沿”项目，专注于开发单次给药的治疗方案。鉴于艾滋病治愈研究的复杂性，基金会战略优先地推进镰状细胞病的体内基因编辑研究，将其视为一个关键的平台技术。通过在镰状细胞病领域的进展和知识积累，基金会希望为开发艾滋病疗法奠定基础。为此，基金会投入了大量资金，并与多家生物技术公司和学术机构合作，共同探索各种体内基因编辑工具和递送载体。与此同时，基金会也在积极探索多种针对艾滋病的治疗策略，包括体内基因编辑病毒靶点，以及利用AAV递送治疗性抗体。其中，针对新生儿的干预措施是当前研究的重点方向之一。盖茨基金会的核心原则是确保未来疗法在全球范围内的可及性和可负担性。基金会积极参与塑造监管路径，以促进疗法的广泛采用，并致力于实施一种即使在资源有限的环境中也切实可行的、具有成本效益的定价模式。McCune博士描绘了一个关于慢性病治疗未来的美好愿景。他认为，体内基因疗法有望彻底改变我们应对这些疾病的方式，从而突破终身每日服药的局限性和负担。他强调，要实现这一变革潜力，持续创新、强有力的多方合作以及对全球健康公平的坚定承诺至关重要。4. CRISPR-hfCas12Max 基因编辑疗法在杜氏肌营养不良症 (DMD) 中显示出临床前疗效和早期临床益处来自辉大基因的 Alvin Luk 博士介绍了 HG302，这是一种一种基于CRISPR技术的一次性基因疗法。该疗法通过单个 AAV9 载体递送Cas12max，HG302展现了显著的疗效。与传统的双AAV方法相比，其剂量降低了六倍，但仍能有效恢复抗肌萎缩蛋白的产生，并将运动功能改善至接近野生型水平。此外，该AAV疗法在肌肉组织中分布广泛，免疫反应极小，且在小鼠和非人灵长类动物中均显示出良好的安全性，未观察到明显的肝肾毒性。广泛的脱靶分析也证实了其在体内具有高度的基因编辑特异性。基于这些令人鼓舞的临床前数据，HG302已进入首次人体临床试验阶段，针对4至8岁、具有特定外显子缺失且能够自主行走的DMD男童（肌肉试验）。来自两名接受低剂量AAV递送疗法的患者的早期数据显示，该疗法耐受性良好，不良事件均为轻微且短暂。治疗后，患者的功能表现出现了积极的趋势，包括六分钟步行距离的增加、爬楼梯能力的改善，以及一名患者的NSAA评分提高。肌肉活检进一步证实了AAV载体DNA的稳定递送和抗肌萎缩蛋白的微量表达，尽管RNA水平较低。此外，患者活检样本的脱靶分析也证实了预期的靶向编辑效果，未发现明显的脱靶活性。Alvin Luk博士总结指出，HG302作为一种针对DMD的单次AAV体内CRISPR疗法，展现了高度的精准性、安全性和转化潜力。他同时强调，未来仍需进一步优化AAV载体中遗传物质的表达动力学以及组织取样策略，以提升疗法的整体效果和应用前景。5. 造血干细胞慢病毒基因疗法治疗Angelman综合征来自加州大学洛杉矶分校的Christopher Luthers博士介绍了一种针对Angelman综合征的新型交叉校正基因疗法策略。Angelman综合征是一种神经发育障碍，由大脑中母系遗传的UBE3A基因缺失引起。由于UBE3A基因的父系拷贝在神经元中是沉默的，因此母系拷贝的缺失对疾病的发生至关重要。Luthers博士提出的方法是利用造血干细胞（HSC）衍生的巨噬细胞，这些巨噬细胞经过慢病毒载体（LVV）的基因改造，使其能够表达UBE3A蛋白。研究假设是，这种分泌的UBE3A蛋白可以被大脑中缺乏UBE3A的神经元吸收，从而恢复其功能。该策略基于之前有前景的慢病毒基因疗法研究，但由于之前使用的强大MND启动子可能引发插入性肿瘤发生的安全性问题，因此需要进一步改进。为了解决这些安全问题，Luthers团队开发了使用替代启动子（人PGK和EFS）的LVV。这两种启动子在慢病毒介导的基因递送中都具有已建立的临床安全性。与使用MND启动子的LVV相比，这些新的LVV在体外实验中表现出相当或更高的UBE3A表达水平。在Angelman综合征小鼠模型的体内研究中，研究人员将经过基因改造的造血干细胞移植到小鼠体内。结果显示，经过慢病毒修饰的细胞成功植入多个组织，包括在大脑中约5%的植入率（考虑到免疫细胞在大脑中的代表性，这是一个显著的比例）。重要的是，在接受慢病毒基因治疗的小鼠神经元中检测到了UBE3A蛋白的表达。行为评估（包括旋转杆、平衡木、开放视野和新物体识别测试）表明，使用PGK和EFS启动子驱动的慢病毒载体治疗的小鼠，其运动功能和认知能力显著改善，在某些测试中甚至达到了与野生型小鼠相当的水平。此外，脑电图（EEG）分析是Angelman综合征的关键生物标志物，结果显示接受慢病毒治疗的小鼠的δ功率显著降低，与神经正常个体中观察到的模式相似。尽管这些使用LVV的临床前研究结果令人鼓舞，但Luthers博士强调，仍需进一步验证，包括确认慢病毒介导的基因转移后UBE3A在大脑中的生物活性，并量化其表达水平。未来的步骤包括验证小鼠和人类LVV的临床可行性和安全性，以推进到FDA的IND研究，并最终开展Angelman综合征的1期临床试验。Luthers博士提出的工作为这种具有挑战性的神经系统疾病提供了一种潜在的更安全、更有效的基于慢病毒的基因治疗方法，为未来的治疗研究开辟了新的方向。6. AAV介导的基因疗法治疗CTNNB1综合征的临床前进展儿童医学研究所的Andrea Perez Iturralde博士介绍了针对CTNNB1综合征的AAV介导基因治疗的研究工作。CTNNB1综合征是一种罕见的神经发育障碍，由CTNNB1基因（编码β-catenin蛋白）的功能丧失性突变引起。在研究中，Perez Iturralde博士团队设计并筛选了多个治疗性表达盒，并利用AAV7m8载体在患者来源的脑类器官中进行测试，最终筛选出最具潜力的表达盒，以实现高效的基因转导。随后，该领先表达盒被包装到AAV9载体中，并在CTNNB1基因敲除小鼠模型中进行了测试。结果显示，该基因治疗能够剂量依赖性地改善小鼠的焦虑样行为和步态异常。目前，团队正在小鼠和非人灵长类动物中进行全面的毒理学研究，该研究已进入最后阶段，至今未发现任何明显的安全问题。该项目由CTNNB1基金会资助，正朝着临床试验准备阶段迈进，临床试验资料包正在积极准备中，计划在欧洲提交申请。该治疗策略采用广谱启动子，旨在靶向大脑和肌肉中的β-catenin表达，这对于缓解CTNNB1综合征的广泛影响至关重要。7. 通过关节腔注射AAV6递送的sIL17RA治疗胶原诱导性关节炎小鼠模型中的类风湿性关节炎北卡罗来纳大学教堂山分校的Susi Feng及其同事提出了一种针对类风湿性关节炎（RA）的新型局部基因治疗策略，并在小鼠模型中进行了研究。该研究探讨了通过AAV6载体将可溶性白介素-17受体A（sIL17RA）直接递送到受累关节，是否能够减轻胶原诱导性关节炎（CIA，一种类风湿性关节炎模型）小鼠的炎症。研究人员成功构建了一种遗传构建体，该构建体在引入细胞后能够产生功能性sIL17RA蛋白。这种蛋白能够阻断RA中关键炎症分子IL17A的活性，且已在体外实验中得到验证。在CIA小鼠模型中，研究人员将携带sIL17RA基因的AAV6注射到一个膝关节中。与同一小鼠的未治疗关节以及接受对照病毒的对照小鼠相比，治疗关节的关节炎严重程度呈现出显著降低的趋势。此外，治疗效果似乎仅限于局部，因为产生的sIL17RA在血液中未被检测到，且治疗组与对照组之间的整体免疫反应（抗胶原抗体水平）没有显著差异。总的来说，这项研究表明，通过AAV6将sIL17RA直接递送到关节可能是RA的一种潜在局部治疗策略。研究人员强调，未来的研究需要进一步优化基因递送方式，探索预防性治疗策略，并增加研究动物的数量，以验证这些初步的积极结果。8. AAV基因疗法在肿瘤免疫治疗中的首个临床试验设计 (SENTRY-ALL)Vironexis Biotherapeutics公司的Allen Reha博士介绍了SENTRY-ALL试验。这是一项1/2期临床研究，旨在研究VNX-101，一种创新的AAV基因疗法，用于治疗复发或难治性CD19阳性B细胞急性淋巴细胞白血病（ALL）患者。VNX-101能够递送GP101的编码序列，而GP101是一种分泌型的抗CD19/抗CD3双特异性抗体片段（scFv）。其作用机制是通过CD19靶向癌变B细胞，同时通过CD3靶向T细胞，从而激活T细胞来消灭癌细胞。在小鼠模型的临床前研究中，VNX-101已显示出能够减少白血病/淋巴瘤细胞并延长生存期的效果。随后在大型动物中进行的安全性和药代动力学研究也为其进入人体试验提供了支持，并获得了FDA的IND批准。SENTRY-ALL试验分为两个阶段。第一阶段将专注于确定VNX-101在成人患者中的最佳剂量，通过评估体内药物水平并识别任何剂量限制性毒性。第二阶段将在更大规模的患者群体（包括青少年）中，进一步评估选定剂量的安全性以及药物在体内的分布和代谢情况（药代动力学）。此外，该研究还将长期跟踪治疗对B细胞计数、疾病进展和生存期的影响，持续数年。研究人员指出，VNX-101有望成为一种比现有CD19靶向疗法（如CAR-T细胞疗法）更易于获取且可能更安全的替代方案。该试验计划于2025年第一季度开始招募患者。9. 肿瘤特异性AAV递送白细胞介素-12增强卵巢癌的抗肿瘤免疫和安全性来自Cure Genetics的Lei Zhao展示了一项关于使用新型方法递送白细胞介素-12 (IL-12) 用于卵巢癌治疗（小鼠模型）的研究。IL-12是一种具有强大抗癌效果的细胞因子，但由于其毒性较大且在体内作用时间较短，临床应用受到限制。为了解决这些问题，研究人员开发了一种肿瘤靶向的tAAV9载体，能够特异性地将IL-12递送到肿瘤微环境（TME）中。这一靶向递送系统是通过高效的Spy连接技术实现的，该技术将能够识别卵巢癌细胞上常见的FOLR1蛋白的抗体片段连接到AAV9病毒载体上。在患有卵巢癌的小鼠模型中，研究人员通过静脉注射携带IL-12基因的tAAV9（tAAV9-IL-12），实现了IL-12的特异性肿瘤递送。与使用常规非靶向的AAV9载体递送IL-12（rAAV9）相比，这种靶向递送方式显著抑制了肿瘤生长，并且展现出更好的安全性。尤为重要的是，采用靶向递送方法后，小鼠血液中的IL-12水平显著降低，这表明该方法可能通过一种负反馈机制来增强安全性，从而为临床应用提供了更有利的条件。总之，本研究显示，利用肿瘤靶向性AAV将IL-12精准递送至肿瘤微环境，在卵巢癌的临床前模型中不仅实现了有效的肿瘤抑制，还显著提升了安全性，展现出良好的应用前景。10. 一种用于治疗扩张型心肌病的新型AAV基因疗法的开发斯坦福大学的Simone Chiola博士介绍了针对扩张型心肌病（DCM）的潜在基因治疗研究。扩张型心肌病是一种严重的心脏疾病，而这项研究的核心是通过AAV载体提高心肌细胞中激活转录因子4（ATF4）的蛋白水平。此前的研究已经发现，提升ATF4水平能够改善携带DCM相关遗传缺陷的心肌细胞的功能。在本研究中，研究人员设计了多种AAV载体，用于将人ATF4基因（hATF4）特异性地递送至心脏组织。他们对基因序列进行了优化，并测试了不同的心脏特异性启动子，以确保ATF4能够高效且精准地表达。随后，研究人员在患有DCM的转基因小鼠（TM54模型）中测试了最有潜力的AAV载体。这些小鼠以及健康的对照小鼠在6周龄时（此时小鼠开始出现DCM症状）接受了单次AAV载体注射。在接下来的几周内，研究人员通过超声心动图监测了小鼠的心脏功能。结果显示，经过工程改造的AAV载体成功地将hATF4基因递送到了心脏组织，而在肝脏、骨骼肌等其他器官中几乎未检测到表达。重要的是，治疗过程中未观察到肝脏或肾脏的明显毒性迹象。这项研究表明，通过基因疗法提高ATF4水平可能是治疗DCM的一种有前景的策略。研究人员指出，在考虑将其推进至人体临床试验之前，仍需在更大的动物模型中开展进一步研究，以充分评估该方法的安全性和有效性。11. 针对LMNA相关层粘连蛋白病的AAV基因疗法来自马萨诸塞大学Chan医学中心的Monique Otero正在开发一种用于L-CMD的基因疗法，L-CMD是一种由LMNA基因显性突变引起的严重肌营养不良症。他们的策略被称为“沉默并替代”，旨在既减少有害的突变层粘连蛋白A的生成，又恢复健康的层粘连蛋白A和C的水平。 为此，他们设计了一种具有双重功能的AAV载体。该载体包含一种人工微小RNA（miRNA），专门针对并降解小鼠自身突变的Lmna基因产生的信使RNA (mRNA)，有效地沉默其表达。与此同时，载体还携带一个经修改的LMNA基因（转基因），该基因能抵抗该miRNA介导的沉默。该转基因经过工程设计，能够正常进行可变剪接，确保生产层粘连蛋白A和层粘连蛋白C，模拟自然过程。 研究人员筛选了多种miRNA，以确定一种能在实验室细胞培养中高效沉默人类及小鼠LMNA的miRNA。随后，他们将这一最佳miRNA整合入不同的AAV载体骨架，测试miRNA的位置及周边遗传元件如何影响其沉默效率及层粘连蛋白A/C转基因的表达。他们确认了四种有前景的AAV载体设计，这些设计在人体细胞中表现出良好的内源LMNA沉默效果，并产生平衡的层粘连蛋白A和C水平。 这四个主要载体候选将被封装入肌肉特异性的AAV递送系统，并在高度模拟严重型L-CMD的小鼠模型中进行测试。基因疗法的成功将通过延长这些小鼠的寿命和改善其肌肉功能来评估。最终目标是确定能最有效沉默致病基因，同时恢复肌肉组织中层粘连蛋白A和层粘连蛋白C正确比例的载体设计，这有望为L-CMD带来重大治疗进展。12. 基于AAV9的PDHA1缺陷基因治疗来自德克萨斯大学西南医学中心的Siyuan Hao团队，正在开展一项针对丙酮酸脱氢酶复合体缺陷症（PDCD）的AAV基因治疗研究。PDCD是一种严重的遗传性疾病，通常会导致患者早亡，其主要病因是PDHA1基因发生突变。目前，针对该病的有效治疗手段极为有限。为了攻克这一难题，研究人员尝试利用AAV基因治疗技术，将健康的PDHA1基因拷贝精准递送至病变细胞。初步的患者细胞研究表明，携带PDHA1基因的AAV载体能够显著增加PDHA1蛋白的表达量，并使其正确地定位于细胞线粒体内，从而恢复酶的活性，改善线粒体功能。为了进一步在活体中验证该治疗方案的可行性，研究团队采用了一种特殊的遗传技术，构建了PDCD小鼠模型。通过该技术，他们能够在小鼠出生后关闭PDHA1基因，从而模拟出患有PDCD的雄鼠（症状严重）和雌鼠（症状较轻）。当研究人员将携带PDHA1基因的AAV载体注射到新生小鼠的脊髓液中后，观察到雄鼠的存活时间虽然仅小幅延长，但这一变化具有显著性，且其主要器官的酶活性也有所改善。对于雌鼠的长期研究仍在持续进行中，初步结果显示，其体重略有增加，酶活性也实现了部分恢复。此外，研究团队还在健康小鼠中开展了长期安全性研究。在长达12个月的观察期内，未发现明显的副作用或死亡事件，这表明AAV基因治疗方法具有良好的安全性。综上所述，本研究证实，基于AAV的基因治疗能够显著改善PDCD小鼠模型的细胞功能，并延长其存活期，且未观察到明显毒性。这些发现为AAV9/PDHA1基因治疗方案的进一步开发提供了有力支持，有望成为PDHA1缺乏症的潜在有效治疗手段。13. OTC-HOPE首例体内肝脏定向AAV介导基因插入治疗新生儿OTC缺陷的初步临床结果伦敦大学学院大奥蒙德街儿童健康研究所的Julien Baruteau教授介绍了OTC-HOPE试验的初步临床成果。OTC-HOPE试验是全球首个针对人类开展的AAV介导基因编辑治疗研究，旨在使用ECUR-506治疗严重新生儿期发病的鸟氨酸转氨酶缺乏症（OTCD）男婴。OTCD是一种影响尿素循环的遗传性疾病，会导致有毒氨在体内积聚。目前，该病的治疗手段较为有限，部分患者甚至需要进行肝移植。ECUR-506是一种处于研究阶段的基因编辑产品，采用两种AAVrh79载体。其中一种载体携带M2PCSK9巨核酸酶，靶向肝脏中的PCSK9基因；另一种载体则携带健康的OTC基因。该疗法的目标是将OTC基因整合到肝细胞基因组中，从而实现持续产生功能性OTC酶。OTC-HOPE试验是一项为期24周的1/2期临床研究，旨在评估ECUR-506在严重新生儿期发病OTCD男婴中的安全性和有效性。本次报告重点关注的是首位接受治疗的患者。该患儿在6.5个月大时接受了单次静脉输注ECUR-506，治疗前曾经历过两次高氨血症发作，目前已完成6个月的随访观察。在接受ECUR-506输注后，患儿出现了无症状性肝脏炎症，但经过免疫抑制治疗后症状得到了缓解。令人欣喜的是，患儿的氨水平恢复正常，谷氨酰胺水平也有所下降。患儿在第12周停止使用氮清除剂药物，并在第15周开始逐步增加蛋白质摄入。在整个6个月的随访期间，患儿的氨水平始终保持正常，未再出现高氨血症发作。此外，患儿的血尿素氮（BUN）和尿氮水平升高，提示尿素循环功能显著增强，且患儿的生长发育情况良好。研究者总结认为，这位首例接受治疗的患儿的初步结果表明，ECUR-506可能至少部分恢复了肝脏的功能性OTC酶活性，表现为氮代谢的改善以及对标准治疗药物的停用。该患儿已达到研究方案中定义的完全临床反应，这为继续在临床试验中评估低剂量ECUR-506的安全性和有效性提供了有力支持。14. 利用AAV-RNAi技术治疗神经退行性疾病Sanofi公司的Jessica Hogestyn介绍了利用AAV介导的RNA干扰（RNAi）技术，开发用于治疗多种神经退行性疾病的治疗平台的研究。这些疾病以有毒蛋白积累为特征，包括亨廷顿病、帕金森病和阿尔茨海默病。该研究重点展示了通过单次治疗降低靶蛋白所有异构体的潜力，从而克服蛋白聚集物的复杂性。亨廷顿病（HD）是由亨廷顿蛋白（HTT）基因突变引起的。在针对HD的研究中，研究人员设计了人工微小RNA（amiRNA），以降低HTT mRNA水平。通过优化筛选过程，他们发现高效的amiRNA在体外实验和HD大鼠模型中均能显著降低HTT蛋白水平，这表明AAV-RNAi是一种极具前景的治疗策略。对于帕金森病等突触核蛋白病，这类疾病涉及α-突触核蛋白的异常积累。研究人员使用能够穿透血脑屏障的AAV载体，在小鼠模型中实现了野生型α-突触核蛋白水平降低50%。这一成果不仅阻止了α-突触核蛋白病理的形成，还保护了多巴胺能神经元，防止了有毒蛋白聚集的扩散。此外，他们还展示了通过将多个amiRNA串联（连接），可以进一步提升基因治疗候选药物的效力。在针对阿尔茨海默病等tau蛋白病的研究中，这类疾病以tau蛋白的异常积累为特征。研究人员采用AAV-RNAi技术靶向微管相关蛋白tau（MAPT），在小鼠模型中显著减少了tau蛋白聚集物和神经退行性疾病的标志物。他们强调通过严格筛选，最大限度地减少脱靶效应，并确定了一种安全高效的主导amiRNA。这种amiRNA在显著降低靶点蛋白水平的同时，不影响其他基因的正常功能。在非人灵长类动物的研究中，进一步证实了该方法降低脑内tau水平的可行性。综上所述，以上研究充分展示了AAV-RNAi技术在治疗神经退行性蛋白病中的广泛适用性和巨大潜力。研究人员通过持续改进递送载体，并在临床前模型中验证疗效，为该技术的临床转化以及为这些毁灭性疾病带来潜在的新疗法开辟了充满希望的道路。15. 体内碱基编辑延长人源化小鼠朊病毒病模型的寿命哈佛大学的Meirui An展示了一项针对朊病毒病的潜在基因编辑疗法研究。朊病毒病是一种由错误折叠的朊蛋白（PrP）引起的致命性神经退行性疾病。该研究的核心是利用腺相关病毒（AAV）载体递送碱基编辑工具，永久性地修饰小鼠大脑中的PRNP基因（该基因编码PrP），以降低PrP水平并阻止疾病进展。研究人员开发了胞嘧啶和腺嘌呤碱基编辑策略。通过系统性注射编码特定碱基编辑酶（BE3.9max）和向导RNA（sgRNA）的双AAV系统（PHP.eB），其中sgRNA被设计用于在PRNP基因中引入一个提前终止密码子（R37X）。结果显示，在小鼠大脑的靶点处平均实现了37%的编辑效率，PrP水平降低了50%。在携带人类PRNP基因并感染代表常见病型的人类朊病毒株的小鼠中，其寿命显著延长了52%。为了进一步提升疗效，研究人员对碱基编辑系统进行了优化，以增强其在大脑中的活性，同时降低其在其他组织中的表达，从而可能提高治疗的安全性。优化后的系统在小鼠大脑中仅使用6.7倍更低的病毒剂量，就实现了更显著的PrP水平降低，达到63%。重要的是，在人体细胞和小鼠组织中，研究人员未发现与临床安全相关的显著脱靶编辑现象。本研究结果表明，通过AAV递送的体内碱基编辑技术有望成为一种潜在的一次性治疗方案，用于有效降低大脑中致病性PrP蛋白的产生，从而为治疗朊病毒病提供新的思路。同时，该技术的脱靶效应极低，显示出良好的应用前景。16. ICM-203腺相关病毒（AAV）基因治疗治疗骨关节炎的1/2a期临床研究中期分析华盛顿大学医学中心的Alison Heald报告了ICM-203 1/2a期临床试验低剂量组的中期结果。该试验旨在评估ICM-203——一种用于治疗膝关节骨关节炎（OA）的重组腺相关病毒（AAV）载体的安全性、免疫反应及潜在生物学活性。ICM-203被设计用于表达人类Nkx3.2蛋白的截短形式，这种蛋白对软骨和关节滑膜细胞的功能至关重要。研究共纳入8名中度至重度膝关节OA患者，他们被随机分配接受单次ICM-203注射或安慰剂。安全性通过不良事件监测进行评估，免疫反应通过检测针对AAV载体的抗体和T细胞反应来评估。膝关节疼痛和功能通过标准骨关节炎问卷（包括KOOS和WOMAC评分）进行评估，膝关节结构变化则通过MRI（MOAKS评分）和X光（关节间隙宽度）进行评估。结果显示，ICM-203具有良好的安全性和耐受性，最常见的不良反应为轻度至中度的关节疼痛。所有接受ICM-203治疗的参与者均产生了针对AAV载体的免疫反应。值得注意的是，基线时未检测到AAV载体预存抗体的参与者，在疼痛、功能、整体OA症状、MRI骨髓病变以及关节间隙宽度方面均显示出显著改善，优于接受安慰剂的患者。而存在预存抗体的参与者则未表现出上述改善。无论初始抗体状态如何，2名接受ICM-203治疗的受试者的滑膜炎（关节滑膜炎症）均有所改善。此外，所有参与者的软骨损伤或骨赘形成情况均未见显著变化。研究者总结认为，ICM-203的关节内注射是安全的，并且在没有预存AAV抗体的个体中，ICM-203可能对治疗骨关节炎具有积极作用。研究结果表明，ICM-203有望通过减轻症状、延缓结构破坏和减轻关节炎症来实现疾病修饰。目前，研究团队正在开展更高剂量ICM-203的进一步研究，以探索其更广泛的治疗潜力。17. 基因治疗临床试验十五年：2010年至2025年的演变德黑兰医科大学的Maryam Bemanalizadeh对2010年至2025年1月期间开展的基因治疗临床试验进行了回顾性分析，更新了之前的研究，以反映该领域的显著增长和不断扩展的范围。研究人员分析了Clinicaltrials.gov数据库中的数据，重点关注了载体类型、治疗方式（体外或体内）、临床试验阶段、疾病类别以及具体治疗的疾病等关键参数。对2987项临床试验的分析显示，慢病毒载体的使用最为常见，占比达到29%；其次是腺病毒载体（15%）、逆转录病毒载体（10%）和腺相关病毒（AAV）载体（9%）。在非病毒方法中，基于RNA的技术处于领先地位，占比为14%。值得注意的是，基因编辑技术（如CRISPR）近年来已进入临床试验阶段。自2019年以来，慢病毒载体的使用显著增加，这一趋势与CAR-T细胞疗法的兴起密切相关，而CAR-T疗法也越来越多地被用于自身免疫性疾病的探索。在过去十年中，基因治疗领域中，体内基因治疗最初更为普遍，但体外基因治疗的方法稳步增长，目前已逐渐超过体内基因治疗试验的数量。在体外基因治疗中，以T细胞为基础的疗法占据了主导地位，占比高达85%。而在体内基因治疗中，肿瘤相关研究最为常见，通常采用溶瘤病毒作为治疗手段；其次是针对免疫系统（如疫苗试验）、眼睛和中枢神经系统的研究。尽管与癌症相关的基因治疗试验在早期阶段（第1和第2阶段）的数量最多，但它们进入后期阶段（第3阶段）的比例相对较低。相比之下，遗传疾病和传染病相关的基因治疗试验在第2和第3阶段显示出更显著的进展，进入后期阶段的频率更高。作者总结认为，分析成功临床试验的趋势对于指导未来研究方向、优化研究设计以及为政策制定提供科学依据具有重要意义。这将有助于推动基因治疗技术更有效地从实验室转化为临床实践，造福患者。参考资料1. https://annualmeeting.asgct.org/abstracts2. https://www.seattlechildrens.org/research/featured-research/asgct-2025/3. https://www.packgene.com/learning-center/051625-asgct-2025/关于派真生物

CAMBRIDGE, Mass., May 22, 2025 (GLOBE NEWSWIRE) -- Avalyn Pharma Inc., a clinical-stage biopharmaceutical company developing inhaled therapies for the treatment of life-threatening pulmonary diseases, today announced that management will participate in the Jefferies Global Healthcare Conference on June 3, 2025. Format:1x1 Meetings Date:Tuesday, June 3, 2025 Location:New York Marriott Marquis, New York, NY Participants:Douglas Carlson, CFO & CBO; Craig Conoscenti, SVP, Clinical Development About Avalyn PharmaAvalyn is reimagining the future of pulmonary fibrosis treatment with a pipeline of new inhaled formulations of approved medicines. Pulmonary fibrosis is characterized by scarring of lung tissue, decline in lung function, reduced exercise capacity, and quality of life, and is associated with increased mortality. Currently approved therapeutic options slow pulmonary fibrosis progression but are associated with significant toxicities that restrict their use and dosing. Avalyn’s inhaled approach tackles the underlying pathophysiology of pulmonary fibrosis at its source by safely delivering treatments directly into the lungs, thereby improving tolerability by decreasing systemic exposure and improving efficacy by increasing lung exposure. Avalyn’s AP01 is an optimized inhaled formulation of pirfenidone, currently being studied in the ongoing MIST Phase 2b study in progressive pulmonary fibrosis (PPF). AP01 has been assessed in over 150 individuals with different forms of pulmonary fibrosis and demonstrated clinical proof-of-concept with improved efficacy and safety compared to historical data with existing therapies. The company completed two Phase 1 studies for AP02, inhaled nintedanib, for the treatment of idiopathic pulmonary fibrosis (IPF). For more information, please visit avalynpharma.com and follow us on LinkedIn. Investor Contact:Alex StrausTHRUST Strategic Communicationsalex@thrustsc.comir@avalynpharma.com Media Contact:media@avalynpharma.com