Quadrivalent Influenza Vaccine, MF-59 Adjuvanted(CSL)

巨细胞病毒（Cytomegalovirus），简称 CMV，属于乙型疱疹病毒亚科。与其他疱疹病毒一样，该病毒为具有包膜的双股 DNA 病毒，位于病毒包膜上的许多糖蛋白与宿主细胞表面受体结合引发感染。尽管 CMV 感染的健康成年人大多没有症状，但全世界每 200 名新生儿中就有 1 人在母亲怀孕期间感染 CMV—世界上最常见的先天性感染。该病毒很少对健康成年人造成严重疾病，然而，可能会导致子宫内感染的新生儿出生缺陷和脑损伤，以及给免疫功能低下的成年人带来致命损伤。我们急需开发一种有效的 CMV 疫苗，通过限制水平传播，有效防止育龄妇女原发性 HCMV 感染。包膜糖蛋白 B (gB) 对于 CMV 入侵成纤维细胞至关重要。gB 在免疫个体中触发大量中和抗体，通过阻断 gB 介导的病毒粒子和细胞膜之间的融合，来阻止 CMV 感染成纤维细胞。而且，与初始 CMV 血清阴性的女性相比，在原发感染期间体内产生高亲和力 gB 中和性抗体的孕妇生出先天性感染 CMV 的婴儿可能性较小。这些观察结果构成选择 gB 作为疫苗抗原的基本依据。赛诺菲和诺华资助的研究团队开发了一款 gB/MF59 重组蛋白 CMV 候选疫苗，在一项 II 期临床试验中该疫苗保护了“约一半的疫苗接种者”免受 CMV 感染。然而，2013 年临床试验结束后并没有继续进行第三阶段。gB/MF59 疫苗既能保护健康妇女免于 CMV 感染，又能保护血清阴性器官移植者免于来自血清阳性器官供体的 CMV 感染。虽然之前的工作强调了 gB 特异性免疫反应在限制 CMV 原发感染中的重要性，但是，后来，研究者又发现阻断 CMV 感染各种非成纤维细胞类型（包括内皮细胞、上皮细胞及单核细胞）的中和抗体反应与阻断成纤维细胞感染的存在本质不同。目前的模型提出两种 CMV 入侵宿主细胞的机制：第一种，HCMV 进入成纤维细胞是通过质膜融合发生的，并且依赖于由 gB、gH/gL 和/或 gH/gL/gO 组成的包膜糖蛋白复合物 。第二种，HCMV 进入上皮细胞是通过内吞作用介导的，并且需要由 UL128、UL130、UL131A 和 gH/gL 组成的额外糖蛋白复合物，称为 gH/gL 五聚体复合物(gH/gL-PC) 。图源：Neutralization of Human Cytomegalovirus Entry into Fibroblasts and Epithelial Cells.PC 特异性中和抗体在上皮细胞、内皮细胞和单核细胞中的中和作用比 gH/gL 和 gB 抗体强 100 至 1000 倍。此外，怀孕早期母体 PC 抗体的存在与传播给胎儿的风险降低有关。因此，非常需要将 PC 掺入 CMV 疫苗中。然而，开发基于 PC 的疫苗的一个主要障碍是，PC 的形成需要在同一细胞中共表达和组装所有五种单独的蛋白质，以形成多聚蛋白质复合物，并且暴露所有中和表位。2018 年，Moderna 研究团队在Vaccine发表文章：Multi-antigenic human cytomegalovirus mRNA vaccines that elicit potent humoral and cell-mediated immunity。将 5 个编码 PC 复合物单体的 mRNA 单独转染 HEK293 细胞，胶图证实均可正常表达相应蛋白。单克隆抗体 8I21 可识别由 PC 中五个亚基中的四个形成的构象表位，将所有五个亚基 mRNA 以等摩尔比或等质量比共转染 HEK293 细胞，流式细胞术分析显示高水平的 PC 表达，表明多蛋白复合物正确组装并易位至细胞表面。而且，缺少任何其中一个 PC 亚基均会完全破坏复合物的形成。此外，针对 gH（3G16）、UL128（15D8var1）和 UL128/UL130/UL131A（7I13）的构象依赖性中和单克隆抗体均与细胞表面表达的 PC 结合。这些结果证实 mRNA-1647 可表达正确折叠的 PC。细胞系中 PC 亚基 mRNA 的表达和表面 PC 的形成。PC 和 gB 都是中和抗体的靶标，而 pp65 和 IE1 则诱导细胞免疫反应。用 PC+gB+pp65+ IE1 mRNA 疫苗两次免疫食蟹猴，可触发剂量依赖性的中和抗体滴度（N50）。采用 VR1814 毒株感染人视网膜色素上皮细胞 ARPE-19，纯化的 PC 竞争性抑制血清中和抗体滴度。采用 AD169 感染人胎儿肺成纤维细胞 HEL299，纯化的 gB 竞争性抑制血清中和抗体滴度。也就是说，来自免疫 NHP 的血清可阻止上皮细胞和成纤维细胞感染 CMV。Moderna 开发了一款针对 CMV 的 mRNA-1647 疫苗，由 6 个 mRNA 序列组成，编码 2 个 CMV 抗原（糖蛋白 B 和五聚体糖蛋白复合物）。有意思的是，mRNA1647 疫苗在临床 1 期中为液体形式，在临床 2 期或者临床 3 期中为冻干形式。2023 年 10 月 14 号，Moderna 公布了一项临床 2 期、随机、观察者盲法、安慰剂对照、剂量探索试验的结果，旨在测试 mRNA-1647 在健康成人中的安全性和免疫原性。在 CMV 血清阴性接种者中，保护上皮细胞和成纤维细胞感染的中和抗体滴度在每次接种结束后出现爬升，而且，预防表皮细胞感染的中和抗体滴度在临床试验终点（第 18 个月）仍然高于 CMV 血清阳性者的基线水平。在 CMV 血清阳性接种中，mRNA-1647 首次接种结束后，保护上皮细胞和成纤维细胞感染的中和抗体滴度出现明显爬升，然而，在第二次和第三次接种完成后，中和抗体滴度基本维持不变。此外，在不同剂量水平下（50ug/100ug/150ug），无论血清状态如何，mRNA-1647 在接种者中均表现出良好的安全性和耐受性。2024 年 2 月 7 号，威尔康奈尔医学院与 Moderna 的研究人员共同在 The Journal of Infectious Diseases 发表文章：Human Cytomegalovirus mRNA-1647 Vaccine Candidate Elicits Potent and Broad Neutralization and Higher Antibody-Dependent Cellular Cytotoxicity Responses Than the gB/MF59 Vaccine，他们使用系统血清学方法评估首次接种疫苗到第三次接种疫苗后一年的 HCMV 血清阴性接种者和血清阳性接种者中 mRNA-1647 诱导的抗体反应。在这项研究中，他们证实 mRNA-1647 HCMV 疫苗在血清阴性接种者中触发有效且持久的 HCMV 特异性 IgG 反应，并且还会增强血清阳性疫苗接种者中先前存在的 HCMV 特异性 IgG 反应。而且， mRNA-1647 可引发广泛而有效的中和抗体反应以及 Fc 介导的效应功能，包括强大的 ADCC 反应。有意思的是，mRNA1647 触发的 gB 特异性 IgG 反应要远低于 PC 特异性的 IgG 反应以及 gB/MF59 触发的 gB 特异性 IgG 反应，这说明在 mRNA-1647 疫苗中 gB 抗原的免疫原性还存在优化空间。mRNA-1647 触发的较低比值的 gB 特异性 IgG 反应/PC 特异性 IgG 反应可能是由于在疫苗制剂中所包含的 gB-mRNA 太低（gB-mRNA：PC-mRNA 为 30ug:150ug），因此，可调整 mRNA-1647 疫苗制剂中编码两种抗原的 mRNA 比例，使得其触发更加均衡的免疫反应。与接种 gB/MF59 疫苗相比，mRNA-1647 疫苗虽然触发较低水平的 gB 抗体，但是，其可触发广泛、持久的中和抗体反应和强大的 ADCC 反应，这两者均有助于阻止 CMV 传播。相比之下，接种 gB/MF59 疫苗的人产生了更高水平的 gB 抗体，其中和活性较低，这或许是其未获得上市批准的部分原因。Moderna 在 2021 年就着手开始 mRNA-1647 的 III 期临床研究（NCT05085366），被公司称为“CMVictory”，首次在全球范围内进行。CMVictory 旨在评估 100 μg 剂量的 mRNA-1647 针对 16-40 岁女性原发性 CMV 感染的安全性和有效性。小结Moderna 开发的 CMV mRNA-1647 疫苗最为显著的特点是编码 6 个独立的抗原蛋白，并且，其中 5 个蛋白还会形成聚合体。在同一细胞中共表达和组装所有五种单独的蛋白质，形成正确折叠的五聚体复合物，触发相应的抗体免疫反应，绝非易事。初步的临床试验结果表明，mRNA1647 可成功触发 gB/PC 特异性的抗体反应。mRNA-1647 三期临床试验早在 2021 年就已经启动，预计完成时间为 2026 年。相信在不远的将来，mRNA1647 一定会成为首个获批上市的 CMV 疫苗。识别微信二维码，添加生物制品圈小编，符合条件者即可加入生物制品微信群！请注明：姓名+研究方向！版权声明本公众号所有转载文章系出于传递更多信息之目的，且明确注明来源和作者，不希望被转载的媒体或个人可与我们联系(cbplib@163.com)，我们将立即进行删除处理。所有文章仅代表作者观点，不代表本站立场。

IVC2024第四届核酸疫苗与创新型疫苗论坛议程曝光点击图片查看，报名即将截止：（扫码立即领取限量免费参会入场券）前言疫苗接种无疑是人类历史上最引人注目的健康成就之一。在短短两个多世纪的时间里，疫苗使我们实现了非凡的目标，如彻底根除天花、消灭了世界大部分地区的脊髓灰质炎，并使许多传染病的死亡率和发病率大幅下降。疫苗接种政策是公共卫生的基石，人们非常重视确保接种安全有效的疫苗。疫苗的效力不仅取决于抗原成分，还取决于经常使用的佐剂，以更有效的方式刺激免疫系统。佐剂是添加到疫苗中以改善对抗原免疫反应的成分。此外，佐剂还有几个好处，如可使每剂疫苗的抗原量和疫苗接种次数减少；在某些情况下，它们还增加了抗原成分的稳定性，延长了其半衰期，并间接提高了其免疫原性。抗原与佐剂相关，它们能够通过激活先天免疫系统诱导局部促炎反应，导致免疫细胞募集到注射部位。抗原-佐剂复合物通过病原体相关分子模式（PAMP）来激活模式识别受体（PRR）途径。这导致先天免疫细胞的激活，产生细胞因子和趋化因子。目前，欧洲药品管理局和美国食品药品监督管理局（FDA）批准的绝大多数人类使用的疫苗都使用铝盐作为佐剂，这是疫苗配方中使用最古老的佐剂。为了提高疫苗的安全性和有效性，增加新佐剂的种类和数量是非常必要的。纳米技术和分子生物学等现代技术的进步有力地促进了对佐剂成分的开发过程，从而提高了疫苗的效力。一种好的佐剂必须是安全的、有效的、易于生产的；具有良好的药用特性（pH值、渗透压、内毒素水平等）和耐用性；最后，在经济上也可承受。微粒、乳液以及免疫刺激剂在疫苗生产中显现出巨大的潜力。递送系统佐剂佐剂可以根据不同的标准进行分类，例如它们的物理化学性质、来源和作用机制。最受关注的分类系统之一是基于其作用机制，将其分为两大类:递送系统佐剂和免疫增强佐剂。铝盐铝盐的佐剂特性是在20世纪20年代发现的，自1926年以来，这些化合物一直被用作疫苗佐剂。作为使用时间最长、疫苗中使用频率最高的佐剂，目前获得许可的疫苗中约有三分之一含有铝佐剂。在疫苗中，铝以结晶氢氧化铝（AlH）或无定形羟基磷酸铝（AlP）的复合聚合物的形式存在，形成聚集的纳米颗粒。AlH具有针状纳米颗粒的外观，而在透射电子显微镜下观察时，AlP呈现为网状。这两种铝佐剂形式通常都溶解在柠檬酸盐中，但AlP比AlH更可溶。抗原通过静电相互作用和配体交换吸附在佐剂颗粒表面。铝盐/抗原结合增强抗原呈递细胞（APC）的抗原摄取和呈递。此外，铝盐刺激NLRP3炎症小体的激活，导致IL-1β和IL-18的产生，从而引起局部炎症和APC的募集。许多疫苗使用铝佐剂，例如针对白喉和破伤风、百日咳、乙型肝炎以及肺炎球菌和脑膜炎球菌的疫苗。在欧洲，《欧洲药典》将疫苗中的铝含量设定为每剂最多1.25 mg。在美国，《美国联邦法规》将生物产品（包括疫苗）中的铝含量设定为0.85mg/剂。与食品中主要以可溶性柠檬酸盐或氯化物盐形式存在的铝不同，用作佐剂的无机铝化合物的可溶性较差；这是它们辅助作用模式的一部分。因此，由于这种在生理pH下较差的溶解性，肌肉内或皮下注射后疫苗中所含铝的吸收率将非常缓慢。一些研究评估了肌肉注射后铝的动力学。一项实验研究了基于肌内注射用26Al标记的AlH和AlP，铝的总剂量为0.85 mg。结果显示，在实验的28天内，AlH和AlP的吸收率分别为17%和51%。26Al的最大血清浓度（Cmax）为2μg/L。此外，铝的神经毒性已经在体外、离体和动物模型和人类体内进行了研究。对细菌进行的一些体外研究显示没有致突变性。而一些体内研究结果往往不一致和互相矛盾，可能存在方法上的缺陷。因此，迄今为止，尽管铝盐或多或少地产生强烈的氧化应激，但仍无法确定用作佐剂的铝盐（按推荐剂量）是否会产生毒性作用。弗氏佐剂弗氏佐剂包括完全和不完全的弗氏佐剂。这两种佐剂都是油包水乳液，能够携带抗原并刺激先天免疫系统。完全弗氏佐剂（CFA）在其结构中包括热杀死的分枝杆菌，其增强免疫反应的刺激。然而，CFA能够诱导强烈、持久的局部炎症，这可能会带来显著的疼痛，并可能在注射部位出现溃疡。不完全弗氏佐剂（IFA）不含分枝杆菌，在20世纪50年代被用作人类流感疫苗的佐剂；与没有佐剂的相同疫苗相比，它可以诱导更强、持久的抗体反应。IFA的佐剂活性是基于其作为油性抗原沉积物的特征，抗原在注射部位从中连续释放。这同时导致抗原半衰期的增加，以及通过吞噬作用、白细胞募集和浸润以及细胞因子产生强烈的局部先天免疫刺激。然而，IFA在人类疫苗配方中的常规使用引发强烈的副作用。世界卫生组织2005年进行的一项调查显示，约100万IFA受试者的免疫接种有40000名接种者出现严重副作用（如无菌脓肿）。MF59MF59是一种油包水乳液，由角鲨烯、Span 85和Tween 80在pH 6.5的10mM柠檬酸钠缓冲液中组成，平均粒径约为165nm。这是1997年意大利批准用于人类疫苗的第一种水包油乳液。目前，它被用于三价和四价（TIV和QIV）流感疫苗Fluad（Seqirus）中。研究表明，MF59的存在提高了流感疫苗在2岁以下儿童中的有效性。MF59也被用做HBV疫苗的佐剂，能够引发强烈的免疫反应，比铝诱导的免疫反应更好。关于作用机制，MF59具有与铝盐类似的效果。注射部位的贮库活性可以忽略不计，研究表明其半衰期为42小时。相反，MF59具有诱导细胞和体液免疫反应的强大能力，包括产生高滴度的功能性抗体。MF59的存在刺激局部先天免疫细胞分泌趋化因子，如CCL4、CCL2、CCL5和CXCL8，进而通过触发适应性免疫反应来驱动白细胞募集、抗原摄取并迁移到淋巴结。MF59安全且耐受性良好的，在超过35个国家已接种数百万剂。AS03AS03是一种水包油佐剂乳液，由表面活性剂聚山梨醇酯80和两种可生物降解的油组成，即在磷酸盐缓冲液中的角鲨烯和DL-α-生育酚。这种佐剂已用于流感疫苗，引发类似于MF59的免疫反应，也用于疟疾疫苗。欧盟于2009年批准销售AS03佐剂疫苗Pandemrix，而AS03佐剂甲型流感（H5N1）单价疫苗于2013年获得FDA的批准。与MF59相比，α-生育酚的抗氧化和免疫刺激特性似乎更强。此外，研究表明，AS03能够通过激活NF-κB来刺激免疫系统，从而诱导肌肉和淋巴结中的细胞因子和趋化因子分泌，并促进先天免疫细胞的迁移。AS03还可以刺激CD4+T细胞特异性免疫反应，这可以导致持久的中和抗体产生和更高水平的记忆B细胞。AS02在AS03的基础上进一步补充了两种强大的免疫刺激剂，QS-21（一种从黄芪中提取的皂苷）和3-O-去酰基-4′-单磷酸脂质a（MPL），以增强其免疫原性。病毒样颗粒病毒样颗粒（VLP）是由自组装衣壳蛋白的外壳组成的二十面体或杆状纳米颗粒（Å20–200 nm）；其已被长期研究用于疫苗开发。它们是非传染性颗粒，不包括任何遗传物质。VLP是是由具有重复表位的外部病毒外壳形成的，这些表位会立即被免疫系统识别为非自身，从而产生强大的免疫反应。除了这些重复的结构基序外，VLP的大小与病毒相似（通常在20–800 nm之间），并经过快速有效的处理，即使在没有佐剂的情况下，也能产生快速持久的免疫反应。目前，有两种重要的疫苗使用病毒样颗粒佐剂诱导免疫：乙型肝炎和乳头瘤病毒（HPV）疫苗。目前使用的乙型肝炎疫苗是一种含有乙型肝炎表面抗原（HBsAg）的重组DNA疫苗，其形式为VLP，用于预防乙型肝炎感染，该疫苗接种于15岁以下的婴儿、儿童和青少年，或感染乙型肝炎的高危人群，在乙型肝炎携带者母亲出生的新生儿中也显示出良好的免疫原性（95-99%的有效性）。HPV疫苗也是基于VLP平台的疫苗。目前的九价HPV疫苗可预防九种不同的病毒基因型，这九种病毒基因型可导致90%的宫颈癌和80-95%的肛门生殖器癌。九价HPV疫苗含有九种不同基因型HPV（6、11、16、18、31、45、53、58）的L1蛋白，形成VLP，并通过重组DNA技术合成。病毒体病毒体是一种与天然病毒结构非常相似的疫苗平台。从结构上讲，它们是由缺乏病毒遗传物质的血凝素（HA）、神经氨酸酶（NA）和磷脂（磷脂酰乙醇胺和磷脂酰胆碱）组成的重组流感病毒包膜形成的VLP。病毒体首次用于制造流感疫苗是在1975年，流感病毒是一种适用于所有年龄组的佐剂流感疫苗，对健康和免疫功能低下的儿童、成人和老年人都有良好的疗效。它能够诱导B细胞反应并产生特异性抗体。病毒体保留了病毒HA的受体结合能力和膜融合活性，但由于缺乏病毒RNA，它们在结合后无法在细胞中诱导感染。病毒体是一个完美的递送系统，能够将抗原转移到抗原呈递细胞的胞质中，并诱导细胞毒性T淋巴细胞（CTL）反应。然而，由于其弱佐剂特性，病毒体在激活APC和促进交叉呈递方面不是很有效。这种内在的限制可以通过添加更强的佐剂来消除。如最近开发了一种基于病毒体的新型流感疫苗，该病毒体补充有Toll样受体4（TLR4）配体单磷酰脂质a（MPLA）和吸附到膜中的金属离子螯合脂质DOGS NTA-Ni。用了这些MPLA佐剂的病毒体对小鼠进行体内免疫可以诱导特异性CTL。病毒体递送系统佐剂的显著优点是它们能够通过疏水性脂质相互作用将抗原吸附到其表面和管腔上。将抗原吸附到病毒体的流体磷脂双层表面会刺激与宿主细胞受体的相互作用。FDA已批准病毒体作为人类使用的纳米载体，它们具有非常高的耐受性和安全性。与亚单位疫苗对病毒入侵反应不佳相反，病毒体能够以与自然感染和其他强效佐剂非常相似的方式诱导强大的体液和细胞免疫。迄今为止，除了上述两种针对流感和甲型肝炎的基于病毒体的疫苗外，还有几种基于病毒体疫苗正在研究中，包括针对艾滋病病毒、人乳头瘤病毒、呼吸道合胞病毒和疟疾的疫苗。免疫增强剂佐剂TLR1/2激动剂在TLR1/2激动剂中，L-pampo是一种强效佐剂系统，由Pam3Csk4（Pam3）和聚肌苷酸：聚胞苷酸（polyI:C）组成。在一项研究中，L-pampo诱导了比铝佐剂更强的抗HBV抗体的产生，还涉及细胞介导的免疫反应，如增加的多功能CD4+T细胞。此外，细菌脂蛋白是TLR2识别的最有效的配体。研究表明，源自细菌脂蛋白的合成脂肽是B细胞和巨噬细胞的强激活剂，可用作疫苗佐剂。来自发酵支原体的巨噬细胞活化脂蛋白-2（MALP-2）显示通过TLR2-和MyD88依赖性信号通路激活免疫细胞。除了MALP-2外，Pam2CSK4和Pam3CSK4也是公认的TLR2激动剂，它们已被评估为对抗传染性疾病如利什曼原虫、疟疾和流感的治疗药物。TLR3激动剂TLR3是一种检测病毒dsRNA的内涵体受体，它识别poly（I:C），因为它在结构上模拟病毒RNA，从而诱导I型IFN和III型IFN的产生，并引发Th1细胞因子反应。TLR3-poly（I:C）相互作用后产生的I型IFN对于传统树突状细胞（cDC）有效激活CD8+T细胞反应特别重要。此外，poly（I:C）产生的I型IFN刺激T细胞的克隆扩增，增加效应T细胞比率和抗原特异性B细胞的数量。poly（I:C）作为一种潜在的佐剂已被广泛研究。然而，poly（I:C）对人体有毒性作用。因此，科学家的注意力集中在poly（I:C）的衍生物上，如poly（ICLC）和poly（IC12U），以及其他合成的TLR3激动剂，如ARNAX、IPH3102和RGC100。迄今为止，一些研究已经使用poly（ICLC）作为传染病的候选疫苗，如恶性疟原虫和HIV，以及癌症。研究表明，与LPS和CpG等其他TLR激动剂相比，poly（ICLC）能够引发更强的Th1免疫反应。一种新的具有佐剂潜力的TLR3激动剂是ARNAX，这是一种TLR3特异性配体，其毒性比poly（I:C）低。ARNAX研究的最重要的两个领域是癌症免疫疗法和流感疫苗。TLR4激动剂作为疫苗佐剂研究的TLR4激动剂包括AS01、AS02和AS04，它们都含有内体TLR4的配体MPLA。AS01已被用于开发针对疟疾、艾滋病毒和结核病的疫苗。AS01是一种联合佐剂系统，由两种不同的免疫刺激分子MPLA和QS-21组成，包裹在脂质体结构中。这两种化合物使用脂质体作为载体，通过胆固醇依赖性内吞作用到达细胞内。在细胞内，QS-21引起溶酶体不稳定，并促进蛋白激酶SYK的激活。MPLA作用于内涵体TLR4，诱导TRIF依赖性信号通路。AS01激活胱天蛋白酶-1，从而促进NLRP3炎症小体的激活以及IL-1β和IL-18从APC的释放。IL-18的释放导致IFN-γ的快速产生，尤其是淋巴结中的自然杀伤细胞，从而促进DC的成熟和Th1型免疫反应的诱导。TLR5激动剂TLR5是一种识别细菌鞭毛蛋白的受体，由几种免疫细胞表达。与配体的连接导致炎症途径的激活和许多炎症介质的释放，如TNF-α、IL-1β、IL-6和一氧化氮。此外，鞭毛蛋白能够引起Th1和Th2反应，而不像其他TLR配体，它们只能诱导Th1反应。鞭毛蛋白通过激活NLRC4炎症小体诱导IL-1β的产生和释放。迄今为止，至少有三种使用鞭毛蛋白作为佐剂的疫苗处于临床试验阶段：两种针对流感病毒，一种针对鼠疫耶尔森菌。TLR7/8激动剂一些研究表明，TLR7/8的激动剂能够强烈诱导Th1免疫反应。配体与TLR7/8结合能够产生高水平的I型IFN、IL-12、TNF-α和IL-1β。此外，TLR7/8和TLR9激动剂是唯一能够激活和促进cDC和浆细胞样树突状细胞（pDC）克隆扩增的激动剂分子，还能够动员CD14+CD16+炎性单核细胞和CD14dimCD16+巡逻单核细胞。最具代表性的TLR7/8激动剂是一些合成的小分子，如咪喹莫特（R837）和雷基莫特（R848），属于咪唑喹啉类。咪喹莫特目前已被批准用于治疗生殖器疣、浅表基底细胞癌和光化性角化病，而雷喹莫特已被研究用于抗病毒和抗癌治疗。然而，这些小分子具有一些内在的局限性。特别是，它们可以远离给药部位扩散，从而远离抗原，导致疗效降低并诱导全身副作用。已经表明，这些分子与铝佐剂的直接结合能够提高疫苗的效力。此外，与合成聚合物支架、脂质聚合物两亲物、聚乙二醇（PEG）、纳米凝胶、明矾和各种其他合成聚合物的结合显著增加了咪唑喹啉的递送，并改善了DC和抗原特异性T细胞的成熟。此外，先前使用咪唑喹啉与一种或多种其他TLR激动剂（如MPLA和MPLA+CpG ODN）的研究表明，这种组合增加了先天免疫反应，显著产生了抗原特异性中和抗体，并改善了Th1反应。所有这些创新都突出了TLR7/8激动剂作为候选佐剂的卓越潜力。TLR9激动剂TLR9自然识别由非甲基化胞嘧啶磷酸鸟嘌呤（CpG）二核苷酸代表的细菌DNA基序，通过MyD88依赖性途径驱动先天免疫系统的激活。CpG-ODNs在NK细胞、B细胞和pDC中引起强大的趋化因子、细胞因子和抗体产生，从而驱动强烈的Th1型免疫反应。到目前为止，已经开发出三类（A-C）不同类别的CpG-ODN，但只有B类的分子在临床试验中用作佐剂。B型CpG-ODN可以诱导pDCs的成熟，并直接与B细胞相互作用，以增强抗体的产生。最近获得许可的CpG 1018是一种具有高化学稳定性，并能够引发Th1型免疫反应佐剂能力的寡核苷酸，被用作乙型肝炎疫苗Heplisav-B的佐剂。Heplisav-B中的CpG 1018提高了疫苗的效力，与需要三剂才能获得最佳保护的传统乙型肝炎疫苗相比，只需要两剂疫苗。另一种CpG-ODN，CpG 7909，也在临床评估中，并在HBV和疟疾疫苗接种中显示出令人鼓舞的结果。此外，其他下一代TLR9激动剂也在开发中。MGN1703，是一种小的DNA分子，包括CG基序，但在结构上与CPG-ODN不同。MGN1703由一段反向互补DNA组成，该DNA在中间是双链的，两头的单链环包括三个非甲基化CG基序，形成哑铃形结构。MGN1703已被测试用作癌症疫苗的佐剂，发现它能够激活先天和适应性免疫反应，仅产生轻微或暂时的副作用。小结疫苗接种一直是且将继续是人类抗击传染病的最有力武器之一。由于这些有效和安全的预防工具，人类得以从世界许多地区铲除人类历史上最可怕的敌人。最近的新冠肺炎大流行充分强调了疫苗接种的重要性，疫苗研究必须取得进一步进展，为未来可能得传染病大流行做好准备。疫苗的效力取决于佐剂的基本特性和作用。关于疫苗接种的未来，必须更多地关注这些分子，以生产出越来越安全有效的疫苗，造福人类。参考文献：1. An Overview of Vaccine Adjuvants: Current Evidence and Future Perspectives. Vaccines (Basel).2022 May 22;10(5):819ENDIVC2024第四届核酸疫苗与创新型疫苗论坛招商热线：李欣欣 158 0045 2389戳这里，阅读原文立即领取免费参会入场券