PDL1-t-haNK (ImmunityBio)

Affimed宣布FDA已批准其靶向CD16/CD30免疫细胞衔接蛋白（ICE）AFM13与通用型NK细胞疗法AB-101联用的2期临床试验AFM13-203 IND申请。Affimed打算在2023年第三季度启动这项研究，并预计将在2024年上半年报告安全磨合阶段的数据。 这一临床试验的批准将推动克服NK细胞疗法长期疗v效不足的短板，改善NK细胞对实体瘤的靶向特异性，迸发出更多极具潜力的通用型NK细胞疗法。 借此机会，我们为读者梳理了NK疗法的前沿进展，包括研究短板、分类、临床情况、投融资与市场交易情况等。 NK细胞是人体固有免疫的重要组成部分，约占外周血淋巴细胞的10%~15%，由造血干细胞分化而来，具有独立于T细胞和B细胞之外的发育途径。NK细胞广泛分布于骨髓、外周血、肝、脾、肺和淋巴结等。其中，以外周血和脾、淋巴结中NK细胞活性最高。 NK细胞无需抗原预先致敏即可快速反应并非特异性产生杀伤效果，不被MHC限制，具有强大的杀伤功能，同时具有很强的免疫调节功能，与机体其他多种免疫细胞相互作用。NK细胞可以迅速杀死多个相邻显示与致癌转化相关表面标志物的细胞，这种特性在免疫细胞中是独一无二的存在，NK细胞增强抗体和T细胞反应的能力使其具备作为抗癌剂的能力， NK细胞有望成为癌症多管齐下治疗策略的关键组成部分。 01 以输注为主的NK疗法 正在评估的NK细胞介导的癌症免疫疗法以NK输注为主，主要分为两种方法：第一，自体或异体NK细胞疗法，第二， CAR-NK疗法。 目前输注用NK细胞可从外周血、脐带血（间充质干细胞）中或产后胎盘中获得。这些来源的NK细胞之间的功能差异尚不清楚，但脐带血库为选择某些HLA类型和具有特定NK受体谱的供体提供了优势。 一些研究人员使用NK-92细胞系，该细胞系来源于CD56CD3+− 非霍奇金淋巴瘤（NHL）患者的肿瘤细胞，具有与NK细胞相似的细胞毒性特性。尽管可以无限提供，但主要缺点是需要在输注前对细胞进行照射，以防止细胞进一步增殖，从而防止肿瘤转移到患者身上，这极大地限制了输注后的细胞持久性。 激活NK细胞的方式主要使用细胞因子和超因子，最常用IL-2和IL-15。健康个体外周血中的NK细胞通常处于静息状态，在输注淋巴因子激活的杀伤细胞（LAK细胞，NK细胞输注的前身，含有不同比例的NK细胞和T细胞）的早期研究中，这些细胞因暴露于IL-2而具有增强的细胞毒性。另外一种预活化方法是IL-15暴露法，IL-15预活化是否比IL-2预活化产生更强大的NK细胞尚不清楚。分离成熟NK细胞的替代方法是从造血祖细胞中提取，目前已有多种方式被报道可用于诱导造血祖细胞分化为NK细胞，最常见的是使用诸多细胞因子进行分期诱导。 此外也可以使用刺激先天免疫的药物进行NK细胞的内源性诱导，例如TLR激动剂可诱导强烈的先天性和适应性免疫反应，其作为免疫治疗剂越来越受到关注和信任。 CAR-NK疗法采用与CAR-T细胞类似的方式修饰NK细胞，但NK细胞活化可能比持续性T细胞活化毒性更小，同时CAR-NK细胞相对于CAR-T细胞具有一些显著优点，比如可以避免与CAR-T细胞治疗相关的免疫反应过度激活引起的细胞因子释放综合征（CRS）等等。这使得CAR-NK疗法更具潜力更安全更便宜更快速。此外由于NK细胞具有增强抗体和T细胞反应的能力，NK细胞和T细胞领域具有极大的协同作用，这种组合可能有助于患有严重疾病的患者。 02 NK疗法临床项目开展如火如荼 目前NK疗法的临床试验阶段几乎集中在早期一期、一期和二期。从全球角度来看，截至目前，NK疗法相关临床有138家公司（Fate Therap，ImmunityBio等）涉及1381项试验正在开展。 其中Fate公司目前已完成FT500和FT516两款NK疗法产品分别与纳武利尤单抗和帕博利珠单抗联用治疗晚期实体瘤以及与伊布托珠单抗联用治疗卵巢癌的相关临床试验。 Nkarta去年首次公布NKX101（靶向NKG2D）和NKX019（靶向CD19）治疗血液瘤的初步临床数据，显示出两个产品不错的安全性和初步治疗效果。 CAR-NK细胞或成为CAR-T疗法的强有力替代品。截止2023年5月8日，已有75项CAR-NK临床研究在Clinicaltrials.gov上注册。其中有4项临床试验已完成，42项正在招募中。适应症多集中在血液系统肿瘤和实体瘤。有23项实验针对急性髓系白血病，22项针对B细胞淋巴瘤，主要靶点为CD19、CD22、BCMA、CD33或CD7。此外还有针对肾细胞癌、卵巢癌、胰腺癌等的相关试验开展，靶向表达HER2、PSMA、mesothelin、ROBO1或MUC1等肿瘤相关抗原。 Senti Bio 公司使用一种被称为“逻辑门控基因电路”的技术来设计CAR-NK细胞，以靶向表达FLT3或CD33的AML细胞，提高了对AML的杀伤能力，而识别内皮粘蛋白（EMCN）的CAR结构可使其远离健康细胞。 Fate Therap 开发即用型CAR-NK疗法的策略是通过对iPSC进行基因工程改造，筛选并保存能够扩增并且可以分化为NK细胞的iPSC细胞系。这些iPSC细胞系在需要时被扩增，分化成为“即用型”NK细胞疗法。目前该疗法正在进行I期临床试验。 Affimed 的CD16A抗体是其构建激活NK细胞双特异抗体的基础，抗原结合的IgG与CD16A相互作用，诱导其细胞内基于免疫受体酪氨酸的磷酸化，引起依赖激酶的信号级联传导和相关效应细胞发挥功能。该疗法在原理上类似CAR-NK，但是不需要对NK细胞进行工程化处理，因此更加方便，快捷。 另外，国外还有Caribou Biosciences、Cytovia Therapeutics等多家CAR-NK技术公司登陆纳斯达克。国内优凯瑞、呈诺医学、重庆精准生物、阿思科力、科伦博泰、英百瑞、博生吉、星奕昂等都布局了CAR-NK细胞疗法。 03 NK疗法投融资概况 目前国内NK细胞疗法赛道热度上升，超越国外，但项目进展度方面仍是国外保持领先。 目前尚未有NK细胞疗法上市，进展最快的为SMT bio公司治疗胆道癌的NK细胞疗法产品SMT-NK，处于II/III期临床阶段。CAR-NK细胞疗法进展最快的为NantKwest( ImmunityBio )治疗胰腺癌、三阴性乳腺癌等实体瘤的PDL1.t-haNK，处于II期临床阶段。 2023年4月，ImmuneBridge完成1200万美元超额认购种子轮融资，将用于建立经过筛选和优化的NK细胞系，验证制造工艺的可拓展性，并为主要NK细胞产品生成临床前数据。此轮融资由全球投资机构Insight Partners 和战略性企业M Ventures 共同牵头。 以设计生产通用型CAR-NK为目标的Nkarta Therapeutics 公司于2022年4月公布两款CAR-NK在研产品NKX101和NKX019的初步临床数据，使该公司股价上涨140%。去年Nkarta完成增发的2.3亿美元融资，并拟将这笔收益用于资助 NKX101和 NKX019的临床开发、研究阶段项目的临床前研究以及内部制造能力的持续建设。 2021年NK细胞疗法相关投融资事件中，国内公司占比为23%（5/22），2022年之后，国内NK细胞疗法的投融资热度显著上升，投融资事件全球占比已经达到67%（10/15）。国内NK细胞疗法赛道现阶段的主要代表为恩凯赛药（A轮）、景达生物（分别于2022年1月、6月完成天使轮和Pre-A轮）、河络新图（天使轮）、昕传生物和济因生物（天使轮）等。 04 NK疗法市场交易现状 随着大型企业展开合作，业界对NK细胞的兴趣不断增强，2022年9月27日，Scribe Therapeutics宣布与赛诺菲进行战略合作，使用Scribe的CRISPR基因组编辑技术实现对新型NK细胞的基因修饰以治疗癌症，宣布其正努力提供“现货型”NK细胞疗法和新的组合方法，以改进第一代细胞疗法，交易总额超10亿美元。2022年12月，赛诺菲加深了对基于抗体的NK细胞接合器的研发，扩大了与Innate Pharma的持续合作关系，价值超14 亿美元。 据GIR (Global Info Research)调研，按收入计，2022年全球NK细胞疗法收入大约357.9百万美元，预计2029年达到981.5百万美元，2023至2029期间，年复合增长率CAGR为 15.5%。北美是最大的NK细胞疗法市场，约占51%的市场份额，其次是欧洲，约占33%的市场份额。主要的生产厂商有Nektar Therapeutics, Innate Pharma SA, Affimed, Chipscreen Biosciences, Fate Therapeutics, Glycostem Therapeutics, Dragonfly Therapeutics, Kiadis Pharma, NantWorks, Nkarta Therapeutics, Fortress Biotech等。排名前三的厂商，约占82%的市场份额。 05 未来的NK疗法 由于NK细胞消除肿瘤细胞的先天能力，基于NK细胞的癌症免疫疗法已经研究了几十年。早期临床试验已经证明了NK细胞输注的总体安全性，即使在同种异体环境中也是如此。利用同种异体NK细胞的可行性、已建立的安全性以及NK细胞的快速作用性质在很大程度上推动了开发基于NK细胞的癌症免疫疗法。 然而，仍然有许多挑战需要克服，例如难以满足临床级离体扩增，体内持久性有限，对实体瘤的浸润有限，以及肿瘤编辑以逃避NK细胞杀伤活性。目前的研发正在采用各种策略来克服这些挑战，以提高基于NK细胞的治疗疗效，例如使用细胞因子和/或小分子药物进行离体预处理，设计“现成的”或iPSC分化的CAR-NK等等。 参考文献[1]Liu S, Galat V, Galat Y, Lee YKA, Wainwright D, Wu J. NK cell-based cancer immunotherapy: from basic biology to clinical development. J Hematol Oncol. 2021 Jan 6;14(1):7. doi: 10.1186/s13045-020-01014-w. PMID: 33407739; PMCID: PMC7788999.[2]Liu Q, Li J, Zheng H, Yang S, Hua Y, Huang N, Kleeff J, Liao Q, Wu W. Adoptive cellular immunotherapy for solid neoplasms beyond CAR-T. Mol Cancer. 2023 Feb 7;22(1):28. doi: 10.1186/s12943-023-01735-9. PMID: 36750830; PMCID: PMC9903509.[3]Berrien-Elliott MM, Jacobs MT, Fehniger TA. Allogeneic natural killer cell therapy. Blood. 2023 Feb 23;141(8):856-868. doi: 10.1182/blood.2022016200. PMID: 36416736; PMCID: PMC10023727.[4]Shimasaki N, Jain A, Campana D. NK cells for cancer immunotherapy. Nat Rev Drug Discov. 2020 Mar;19(3):200-218. doi: 10.1038/s41573-019-0052-1. Epub 2020 Jan 6. PMID: 31907401.[5]Maalej KM, Merhi M, Inchakalody VP, Mestiri S, Alam M, Maccalli C, Cherif H, Uddin S, Steinhoff M, Marincola FM, Dermime S. CAR-cell therapy in the era of solid tumor treatment: current challenges and emerging therapeutic advances. Mol Cancer. 2023 Jan 30;22(1):20. doi: 10.1186/s12943-023-01723-z. PMID: 36717905; PMCID: PMC9885707. 内容来源于网络，如有侵权，请联系删除。

2020年2月5日，MD Anderson在世界顶级医学杂志NEJM上发表了一篇CAR-NK I/II 期临床试验结果论文：研究者用异体抗CD19 CAR-NK细胞治疗了11位NHL（6例）或CLL（5例）的患者，8人（73%）获得了客观缓解，其中7人为完全缓解，无细胞因子风暴（CRS）、无移植物抗宿主病（GvHD）、无神经毒性发生。同时解决了安全性和应用异体CAR细胞从而降低费用两大问题，引起关注。2022年，Nkarta Therapeutics公布了其两款CAR-NK产品非常积极的临床数据，为这一领域又注入了很多信心。相较于CAR-T治疗，CAR-NK具备低毒性、低成本等优势，因此目前针对CAR-NK领域出现了很多优秀的科技企业，大致梳理了国内外40家涉及NK细胞治疗的公司，逐一介绍如下。大部分资料来源于对应公司官网及披露的会议资料等，时间和精力有限，有的公司，尤其国内公司披露的信息较少，感兴趣的朋友可以针对具体公司或产品再细作调研。1、Nkarta TherapeuticNkarta Therapeutic成立于2015年，2020年登陆纳斯达克上市，是一家专注于开发同种异体现货型NK细胞疗法的美国公司。早期细胞治疗主要以T细胞为主，但目前仅适用于血液瘤，实体瘤尚未见突破。相较于T细胞治疗，Nkarta认为其CAR-NK疗法具有以下优势：          Nkarta的CAR-NK产品主要通过以下流程制备，包括NK细胞收集、激活、工程化改造使其表达膜结合IL-15和CAR，持续扩增、冻存及给药。目前Nkarta主要有两款产品处于临床研究阶段，分别是NKX101和NKX019，并在早期临床研究中获得了不错的数据，产品结构设计如下：NKX101为靶向NKG2D配体的异体CAR-NK细胞产品，约80%-100%的AML样本表达NKG2D配体。2022年4月，一项NKX101治疗复发/难治AML临床研究中，高剂量组1B*3和1.5B*3共5例患者，3例CR。未见DLT，未见CRS、神经毒性或GvHD。NKX019为靶向CD19的CAR-NK细胞产品。2022年一项NHL临床试验中，6名复发/难治性B细胞恶性肿瘤患者，高剂量组6名患者中5名获得了部分缓解，ORR 83%，其中CR 50%。2022年12月，该公司又公布NKX019作为单药治疗 r/r NHL 患者的I期 积极研究结果，较高剂量水平治疗组CR达70%。2022年4月28日，Nkarta宣布完成增发的2.3亿美元融资，并拟将这笔收益用于资助 NKX101和 NKX019的临床开发、研究阶段项目的临床前研究以及内部制造能力的持续建设。2、Fate TherapeuticsFate Therapeutics成立于2007年，2013年在纳斯达克上市，核心技术是将iPSC分化成NK和T细胞，并对其进行基因改造。2020年4月份，公司与杨森达成协议，合计31亿美元。但2023年1月5日，该协议被终止。另外公司与小野、武田也有合作。Fate在2023年对产品管线进行了调整，终止了FT596（靶向CD19/CD20的CAR-NK）。公司官网显示目前临床核心产品分别是FT576（CAR-NK）和FT589（CAR-T，不属于本文主题范围，不作细表）。FT576来源于iPSC细胞系的现货型NK细胞疗法，转入靶向BCMA的CAR，此外还改造CD16受体，增强了亲和力，以增强联用CD38抗体的ADCC作用。另外，为增强NK细胞活性，使其表达IL-15受体融合蛋白。第四项改造是敲除了CD38表达，以减少NK细胞间的互伤。具体结构如下：2022年ASH会议上公布了FT576的最新研究结果，临床前研究结果显示，采用荧光标记的MM.1S细胞接种到NSG小鼠中，FT576联用CD38抗体Daratumumab显示出优于单药治疗的，明显的协同抗肿瘤作用。临床Ⅰ期主要研究FT576单药或与Daratumumab联用治疗复发/难治性多发性骨髓瘤。9例患者参与评估。安全性方面，未见DLT，未出现任何等级CRS，未见免疫相关神经毒性(ICANS)，也未见移植物抗宿主反应(GvHD)。有效性方面，9例患者，3例出现肿瘤负荷降低，2例确认缓解。值得一提的是，其中1例患者前期已经经历过5线治疗，FT576单药第2次给药后，达到VGPR(very good partial response)，同时伴随可溶性BCMA显著降低。3、Kiadis Pharma/SanofiKiadis Pharma成立于1997年，总部位于荷兰阿姆斯特丹，2015年在欧交所上市。2019年4月收购CytoSen Therapeutics公司，获得了“智能”NK细胞平台。2020年11月2日，赛诺菲宣布以3.58亿美元收购Kiadis，此次收购使赛诺菲获得了Kiadis的“现货型”NK细胞平台，开发用于治疗造血干细胞移植和实体瘤以及传染病的基于NK细胞的药物。Sanofi于2023年2月3号最新公布的产品线中，处于临床阶段的NK细胞疗法只有SAR445419(Formerly as KDS1001，Phase 1，AML/CML)，尚未有数据披露。4、Cytovia TherapeuticsCytovia成立于2019年，总部位于美国佛罗里达州，聚焦于NK细胞治疗的iPSC平台、基因编辑的CAR以增强对NK细胞的靶向性、以及NK engager多功能抗体。目前进展比较快的是两款多功能抗体类产品，CYT-303和CYT-338。NK细胞产品尚无数据披露。2021年7月，Cytovia和中国泰福资本共同成立了专注于中国的合资企业再凌生物。再凌生物和Cytovia之间的合作协议将通过大中华地区的产品开发推进多种NK疗法的研发。此外，再凌生物获得了Cytovia的技术许可，允许其在中国开发NK疗法以实现全球商业化。          5、Century TherapeuticsCentury成立于2018年，总部位于美国费城。专注于即用型同种异体细胞疗法领域，开发同种异体、iPSC衍生的CAR-iNK和CAR-iT细胞疗法产品。2019年7月获得来自拜耳等公司的2.5亿美元融资，2021年3月，完成1.6亿美元C轮融资。同年6月，在纳斯达克上市。2022年1月，与BMS达成一项总额超30亿美元的研究合作和许可协议，以联合开发和商业化iPSC衍生的同种异体细胞疗法。根据公司披露信息，目前处于临床1期阶段的是一款靶向CD19的NK细胞疗法，治疗B细胞恶性肿瘤，产品名称为CNTY-101，产品结构如下图所示：在淋巴瘤异源移植模型中，CNTY-101显示出不错的抑瘤效果，并呈剂量依赖性。Century公司其它产品管线如下图所示，多处于早期研究阶段。6、Caribou BiosciencesCaribou成立于2011年，总部位于美国加利福尼亚，公司专注于新一代CRISPR基因编辑技术同种异体CAR-T细胞治疗以及iPSC来源的NK细胞治疗等领域，而该公司联合创始人正是因CRISPR基因编辑获得2020年诺贝尔化学奖的Jennifer Doudna。Caribou目前有多款CAR-T细胞产品在研，分别是CB-010(CD19)、CB-011(BCMA)、CB-012(CD371)。唯一一款CAR-NK产品名称为CB-020，来源于iPSC，该产品的CAR为靶向ROR1，该靶点在卵巢癌、胰腺癌、三阴乳腺癌等瘤种中表达，并驱动肿瘤生长。目前处于临床前研究阶段。7、Immunitybio/NantKwest2020年12月，Immunitybio与NantKwest达成合并协议，旨在创建一家专注于癌症和传染病领域的领先免疫和细胞疗法公司，合并后前者具有公司72%股份，新的公司采用Immunitybio的名字。该公司的NK细胞治疗主要基于NantKwest专有的NK-92（aNK）主细胞库，经过工程改造后使其表达高亲和力CD16受体，从而使其可以直接结合先前与癌细胞结合的单克隆抗体，通过抗体介导的ADCC作用来增强对肿瘤细胞的杀伤作用。其产品PD-L1.t-haNK，是在此基础上增加了靶向PD-L1的CAR。Immunitybio还有一款IL-15细胞因子产品N-803。IL-15可以增强NK细胞的活性，并延长其作用时间。因此与CAR-NK疗法是很好的搭档。2023年最新数据显示，N-803、PD-L1.t-haNK及Aldoxorubicin联用三线治疗晚期胰腺癌，平均OS为5.8个月，优于历史数据的2-3个月。已经提交FDA type B会议，寻求上市。除靶向PD-L1外，公司尚有针对HER、EGFR等靶点的CAR-NK产品在研。顺便提一句，Immunitybio的创始人为号称美国华裔首富的黄馨祥，也号称世界最有钱的医生。8、ScribeScribe Therapeutics成立于2018年，由加州大学伯克利分校CRISPR先驱，2020年诺贝尔化学奖得主Jennifer Doudna创立，致力于开发和设计基于CRISPR的新疗法。2020年，Scribe完成2000万美元A轮融资；2021年，Scribe完成1亿美元B轮融资。2022年9月，与赛诺菲达成协议，赛诺菲将使用Scribe开发的CRISPR基因组编辑技术改造创新NK细胞疗法以对抗肿瘤。根据协议内容，赛诺菲将向Scribe支付2500万美元预付款，以及根据开发与商业化进展高达10亿美元的里程碑款项。目前尚无产品进入临床阶段。9、CelularityCelularity成立于2016年，总部位于美国新泽西州，Celularity通过开发现成的胎盘来源的同种异体细胞疗法（包括基因修饰的NK细胞，经CAR工程改造的T细胞）。基于NK细胞的两款产品分别是CYNK-001和CYNK-101，前者是非基因修饰的NK细胞治疗产品，目标适应症为AML和GBM。后者经过基因修饰以表达高亲和力和抗切割的 CD16 抗体来增加NK细胞杀伤活性，目前主要与HER2抗体联用。2022年1月，CYNK-101与曲妥珠、Keytruda联用一线治疗局部晚期不可切除或转移性晚期 HER2阳性胃癌或胃食管结合部腺癌患者获得了 FDA 的快速通道指定。CYNK-101作用机理如下：          10、Artiva biotherapeuticsArtiva成立于2019年，位于美国圣地亚哥，致力于开发用于血液瘤或实体瘤治疗的同种异体NK细胞疗法。公司产品主要分为两大类，一类是未经修饰改造的NK细胞产品，一类是靶向性的CAR-NK产品，均是脐带血来源。进展最快的两个产品分别是AB-101和AB-201。AB-101临床主要与CD20抗体联用，通过增强CD20抗体的ADCC作用实现协同抗肿瘤作用，目前处于临床1/2期。AB-201则是一款HER2 CAR-NK产品，目前正在开展HER2阳性乳腺癌、胃癌/胃食管交界癌的临床研究。公司产品管线如下：11、ONK TherapeuticsONK therapeutics成立于2015年，由爱尔兰国立大学戈尔韦分校（NUI Galway）的Michael O’Dwyer医学博士创建，ONK于2022年1月完成2150万美元A轮融资。ONK是一家脐带血来源的现货型NK细胞疗法生物技术公司，致力于优化血液恶性肿瘤和实体瘤的下一代双靶点NK细胞疗法。如下图所示，ONK公司产品从4个维度对NK细胞进行基因编辑改造，通过表达IL-15受体，促进NK细胞增殖；通过表达趋化因子受体，促进归巢至肿瘤部位；通过敲除抑制性受体如PD-1、TIGIT、LAG-3等，减少NK细胞的耗竭；通过利用自己独特的死亡受体（DR5）TRAIL变体联合CD19或CD38，TRAIL激活死亡受体途径，除了CAR介导的颗粒酶杀伤外，还能再次增加对癌细胞的杀伤作用。ONK公司目前有3个CAR-NK产品在研，均处于临床前研究阶段，分别是靶向CD38的ONKT102、靶向CLL-1的ONKT104、靶向MUC-1的ONKT-103。12、Catamaran BioCatamaran Bio成立于2020年，总部位于美国的马萨诸塞州剑桥，其科学创始人为NK细胞工程和生物学领域的先驱者：明尼苏达大学Branden Moriarity博士和乔治华盛顿大学癌症中心的医学博士Catherine Bollard。2020年11月23日，Catamaran Bio宣布完成4200万美元的A轮融资，资金由SV Health Investors和Lightstone Ventures共同领投。Catamaran的CAR-NK细胞疗法与众不同的TAILWIND™平台3个专有和独特部分为：NK细胞特有的CAR结构、提高效力的生物开关、先进的非病毒NK细胞工程技术（参见：https://catamaranbio.com/tailwind-platform/platform/）。目前公司主要有两款产品在研，分别是CAT-248和CAT-179，分别靶向CD70和HER2，产品设计层面除了转入对应CAR以外，也是增加了IL-15功能，并通过TME-switch中合了TGF-β抑制性信号。CAT-248还敲除了自有的CD70基因。CAT-248的目标适应症是肾癌，CAT-149则是乳腺癌和胃癌。13、MD Anderson/ TakedaMD Anderson的CAR-NK平台采用来自脐带血分离的NK细胞，通过设计，表达相应的CAR及IL-15。2019年11月5日，Takeda与其达成协议，获得MD Anderson四个产品排他性开发及商业化权利，包括CD19 CAR-NK和BCMA-CAR-NK产品。2022年9月29日，MD Anderson再次发文称其发现trogocytosis通过引发肿瘤抗原丢失，促进肿瘤逃逸，并降低CAR-NK治疗效果。Trogocytosis是指靶细胞表面的目的蛋白转移到免疫细胞表面如NK或T细胞。MD Anderson Rezvani实验室的Li主持了这项研究，并证明CAR的激活会导致肿瘤抗原出现转移，从而使CAR-NK表达肿瘤抗原。出现的后果就是，肿瘤表面抗原丰度降低，NK细胞表面抗原丰富增加，并导致NK细胞之间的互相攻击，NK耗竭、代谢紊乱、抗肿瘤效果减弱。MD Anderson研究人员通过双靶点CAR设计解决了这一问题，即在传统CAR-NK基础上，增加一个只识别NK细胞的抑制性CAR，使NK细胞之间不会互伤，号称下一代CAR-NK细胞产品，目前尚处于临床前研究阶段。14、NKGen biotechNKGen biotech之前名称为Nkmax（2021年更名），成立于2017年，位于美国加州尔湾，是ATGen Global的全资子公司，致力于利用专有细胞扩增和细胞激活技术开发自体和同种异体NK细胞疗法。公司核心产品是SNK01，是一款自体NK细胞疗法，从患者血液中提取的高纯度NK细胞，扩增并激活后回输患者体内，目前在美国、韩国、墨西哥等地开展临床研究。2022年世界肺癌大会上公布了SNK01联用Keytruda治疗一线失败的NSCLC患者，SNK01联合治疗组患者的中位无进展生存期(PFS)为6.2个月，明显优于帕博利珠单抗组的1.7个月。2年的长期随访结果显示，联合治疗组生存率为58.3%，PD-1单药组为16.7%，联合治疗组的生存率增长了41.6%。但样本量只有20例，偏少。另外一款产品SNK02是异体NK细胞疗法，预计2023年启动1期临床。15、Glycostem therapeuticsGlycostem therapeutics成立于2007年，总部位于荷兰，致力于开发干细胞衍生的 NK 细胞并将其作为抗癌药物。Glycostem有两代NK产品在研，第一代是oNKord属于未修饰NK细胞，分别在2014年和2016年获得EMA、FDA治疗AML的孤儿药认定。在10例老年不能接受干细胞移植的AML患者中，1年生存率高达80%，对照组仅为35%。viveNK是第二代产品，属于CAR-NK，GTA103是进展比较快的，但也只是处于早前研究阶段，目标适应症是神经胶质瘤，CAR未公布，推测是GD-2之类的。 16、Fortress biotechFortress成立于2006年，总部位于美国纽约。这个公司的产品既有化药如曲马多，又有生物药如PD-1抗体，涉及肿瘤、罕见疾病和基因治疗等多个大市场领域，已上市的 5 款产品均为皮肤类药物。唯一一款NK细胞治疗产品是CNDO-109。有研究表明，将白血病细胞系CTV-1或其裂解物与NK细胞一起孵育过夜，而不加细胞因子，足以使NK细胞在体外对原本不敏感的肿瘤细胞产生强烈的细胞毒性，但不会对正常造血细胞产生影响。CNDO-109-NK细胞就是从HLA半相合供体中获得的CTV-1裂解物预处理的人类NK细胞。临床1期研究结果发现耐受良好，未出现剂量依赖性毒性。12名患者中有3名出现持久完全缓解。但是，该产品2012年获得专利，当年6月19日被FDA授予AML孤儿药地位，2017年clinicaltrial最后一次数据更新，后续再无进展，官网pipeline也不见其踪影。客观讲，相较于现如今的CAR-NK技术，CNDO-109就没有任何优势可言了。17、Gamida cellGamida cell成立于1999年，总部位于以色列，2018年10月26日登陆纳斯达克上市。Gamida利用其专有烟酰胺（或NAM）的细胞扩增技术开发了一系列产品，旨在解决细胞疗法的局限性。进展最快的一个产品是Omidubicel，NAM扩增的脐带血细胞疗法，用于需要造血干细胞移植的患者，临床3期已经达到主要终点，并已在FDA递交BLA，预计2023年5月1日审评结束。GDA-201是一款NK细胞治疗产品，也是基于其NAM技术获得的先天免疫细胞治疗产品，未进行CAR改造，通过增强ADCC与一些抗体标准治疗联用。在一项难治性NHL患者1期临床研究中，19例患者接受GDA-201治疗，13例CR，1例PR，2年随访生存率为78%，中位缓解持续时间16个月（Bachanova, et al. ASH 2021. Abstract #3854）。GDA-201生产过程大致如下：18、SentibioSentibio创立于2016年，总部位于美国加利福尼亚，由麻省理工80后华裔科学家卢冠达博士与Philip Lee博士联合创立。Philip Lee博士在细胞生物技术方面拥有深厚的专业知识，他曾在默克公司（Merck KGaA）担任业务总监和细胞培养部技术总监。二人协力创建Senti Bio之后，利用合成生物学设计“基因电路”，旨在以细胞和基因治疗药物治疗肿瘤及免疫性疾病。2021年12月20日，Senti Biosciences, Inc.与Dynamics Special Purpose Corp.(Nasdaq:DYNS)宣布，他们已达成最终的业务合并协议，以创建一家专注于基因电路工程细胞和基因疗法的上市公司，合并后的估值约为6亿美元。核心候选CAR-NK产品包括SENTI-202（靶向CD33/FLT3，治疗AML或MDS）、SENTI-301（靶向GPC3，治疗肝癌）、SENTI-401（靶向CEACAM5，治疗结直肠癌），均处于临床前研究阶段。以下三家公司Dragonfly、GT biopharma、Affimed的产品严格讲不是NK细胞治疗产品，是利用NK细胞衔接器募集或激活NK细胞，靶向肿瘤抗原的蛋白产品，但发挥作用还是依赖于NK细胞参与，因此也放进来供讨论。19、Dragonfly therapeuticsDragonfly是一家受到昆虫启发而成立于2015年的公司，总部位于马萨诸塞州剑桥市。Dragonfly是一家基于NK细胞衔接器TriNKET平台和细胞因子CYTOKNE平台，利用免疫系统的力量来治疗疾病的公司。联合创始人Tyler Jacks是麻省理工学院科赫综合癌症研究所的创始主任。联合创始人David Raulet是加州大学伯克利分校基础癌症生物学Esther and Wendy Schekman主席，是世界领先的NK细胞研究人员之一。2018年10月，与默沙东达成了一项高达6.95亿美元的合作协议，联合对通过Dragonfly公司独有的技术平台TriNKET(Tri-specific NK cell Engagement Therapies)研发的实体瘤癌症免疫疗法进行开发和市场推广。2018年12月13日，Celgene公司（2019年被BMS收购）以总计2400万美元的预付款、未来的里程碑和特许权使用费，获得Dragonfly的2种TriNKET免疫治疗候选药物的授权许可。2020年8月，BMS宣布获得Dragonfly Therapeutics的IL-12研究性免疫疗法项目的独家授权，包括它的半衰期延长细胞因子DF6002。Dragonfly将获得BMS 4.75亿美元的近期预付款，并有资格获得基于绩效的开发、监管和商业里程碑付款。此外，Dragonfly Therapeutics有资格获得全球净销售额最高24％的特许权使用费。不过，2023年2月7日，BMS在花费6.5亿美元后，未看到DF6002的预期临床效果，将该产品权益退回给了Dragonfly。2022年5月2日，吉利德与Dragonfly达成合作，吉利德引进后者的TriNKET平台产品DF7001（5T4/CD16/NKG2D），支付3亿美预付款，以及根据选择权行使支付的里程碑金额和最高20%的销售分成。基于TriNKET平台开发的HER2靶向蛋白DF1001、EGFR靶向蛋白DF9001分别处于临床2期和1期阶段。                    20、GT biopharmaGT biopharma是一家临床阶段的免疫治疗公司，核心平台为NK细胞参与的TriKE技术。简单讲就是通过三特异抗体实现治疗目的，一个是结合CD16受体的抗体，增强ADCC；一个针对肿瘤抗原的抗体，实现靶向目的；一个是人IL-15，增强NK细胞的扩增。目前公司产品管线均是基于这一平台打造，如下所示：21、AFFIMEDAFFIMED成立于2000年，其核心技术来源于位于海德堡的德国癌症研究中心 (DKFZ)的Melvyn Little教授开发的平台，致力于开发多特异性抗体，并利用自身免疫系统来杀伤肿瘤细胞。这个公司放进来并非完全合适，主要因为该公司核心产品并不是CAR-NK，更多的是通过多特异性抗体，一端连接肿瘤相关抗原，一端作为NK细胞连接器。目前核心的两款产品分别是AFM13、AFM24，前者为靶向CD30的两个结合位点及靶向CD16A的两个结合位点多特异性抗体，后者为EGFR/CD16A的多特异性抗体。          看完国外这些NK细胞治疗的代表性公司，我们也大致浏览下国内有哪些企业专注此领域。22、阿思科力阿思科力成立于2013年，由李华顺博士创立，是一家专注于开发创新型肿瘤免疫治疗药物的生物技术公司。该公司聚焦在其原创型靶点为基础的多管线细胞药物的研发上（11个CAR-NK细胞药物），致力于开发研、产、销为一体的、国内领先型的CAR-NK细胞治疗药物。进展比较快的是ROBO1 CAR-NK产品，计划2023年递交IND申请。ROBO1是李华顺博士发现的原创靶点，公布的17例临床研究数据显示，阿思科力的ROBO1 CAR-NK细胞疗法在乳腺癌、肺癌、胰腺癌等实体瘤中疗效显著，疾病控制率达到76.5%，患者总生存期大于20个月，且无一例重大不良事件发生。23、国健呈诺生物科技国健呈诺成立于2017年，是由国亦生科和呈诺医学合资的高端生物科技公司，国健呈诺的细胞研发中心，开发了低免疫原性、可以异体间使用的Car-NK细胞免疫治疗技术，并已经取得CAR结构的基底层技术发明专利。公司以CD244骨架为基础，继续开发筛选出了含有NKG2D、CD226、4-1BB、CD28等不同排列组合的多种共刺激结构CAR骨架。第一个申报的靶向间皮素嵌合抗原受体NK细胞注射液治疗卵巢癌实体瘤的CAR-NK产品，已经于2021年11月11日获得NMPA临床研究许可。此外，公司尚有针对PSMA、CD19、CD22的CAR-NK产品在研。24、先博生物先博生物2019年成立于美国波士顿，2021年从先声药业剥离，单独运营。2022年10月，首个CAR-NK产品启动IIT临床研究，靶向CD19，治疗B细胞肿瘤。此外，公司还有多款CAR-NK产品处于临床前研究阶段。25、贝斯生物2021年4月成立，7月完成近亿元天使轮融资，2023年1月完成数千万美元A轮融资。公司由徐天宏博士发起创立，专注于研发新型基因编辑NK细胞治疗产品及基因治疗产品。科学创始人朱诗国教授在MD Anderson癌症中心博士后工作期间即开始研究NK细胞，专注于NK细胞肿瘤免疫治疗领域超过16年，在国际上率先攻克了NK细胞体外扩增的障碍，是国内最领先的NK领域专家之一。贝斯的首款Super-NK产品2022年已经进入IIT临床试验阶段，是世界上最早进入临床研究的碱基编辑产品之一。NK510在治疗晚期肉瘤动物模型的试验中，超过60%的肉瘤荷瘤小鼠获得完全缓解，其余荷瘤小鼠均获得部分缓解；NK520在治疗晚期非小细胞肺癌(NSCLC)动物模型的试验中，约60%的肺癌荷瘤小鼠获得完全缓解，其余小鼠均获得部分缓解。公司产品管线如下：26、英百瑞英百瑞成立于2014年，从事肿瘤和免疫类疾病的治疗，2016年专注于创新型通用现货CAR-NK细胞疗法的开发。创始人兼CEO苗振伟博士，拥有多年的工业界药物研发经验，在多家纳斯达克上市公司担任要职，曾担任 Enanta公司首席科学家，Ambrx公司的资深化学总监，Sorrento公司首席技术官，成功推动多款重磅产品进入临床和获批上市。2022年3月1日，公司完成2.3亿人民币A轮融资，推动其First-in-Class现货型同源异体CAR-NK和NK细胞治疗药物进入到临床阶段。2022年11月10日，其CAR-NK产品IBR854获得NMPA IND受理。2023年1月31日，获得临床默示许可。IBR854是一款通用现货型CAR-NK产品，能够与表达5T4靶抗原的肿瘤细胞特异性结合，从而达到靶向识别和杀伤肿瘤细胞的目的。英百瑞已开展的IIT研究已经看到了极佳的安全性和对非小细胞肺癌、卵巢癌在内的多种实体肿瘤的潜在疗效。27、启函生物启函生物由基因编辑领域的先驱于2017年共同创立，位于杭州。2020年，启函生物开始深度发力在细胞治疗产品方面的研发。2021年3月，完成6700万美元的A++轮融资。本轮融资由战略投资方礼来亚洲基金、经纬中国等参与，红杉资本、招银国际等老股东持续加持。其靶向CD19的CAR-NK产品QN-19a已于2022年启动临床研究。28、星奕昂生物星奕昂2021年6月成立于上海外高桥，是一家专注基于iPSC衍生的CAR-NK技术开发通用型量产化可治疗实体瘤的新一代免疫细胞产品的创新型生物医药公司。公司创始人兼CEO王立群博士在美国和中国的生物制药领域拥有丰富的专业技术和研发管理经验。在成立星奕昂之前，曾任复星医药副总、首席技术官和美国凯特合资公司复星凯特的总裁。2021年8月，星奕昂宣布完成4千万美元天使轮融资，由礼来亚洲基金领投，跟投方包括IDG资本和夏尔巴投资。2022年9月至12月，星奕昂宣布完成A-1轮5千5百万美元融资，由辰德资本领投，雅惠投资和宽愉资本等跟投，现有股东礼来亚洲基金，夏尔巴资本和IDG资本继续追加投资。29、昕传生物昕传生物2021年10月创立，位于北京，联合创始人兼首席医学官张文君博士在免疫疗法、多能干细胞的研究和临床应用以及CAR的开发等方面拥有丰富的经验和前沿的研究成果。昕传生物是一家通用型免疫细胞疗法研发商，基于其iPSC-CAR-NK免疫细胞疗法与类器官高通量筛选技术，公司围绕肺癌、肝癌、肠癌、B淋巴细胞瘤等高发癌症已布局多款CAR-NK产品管线。2022年3月，昕传生物宣布已完成近亿元人民币种子轮融资，由融昱资本、云睿资本联合领投，求臻医学参与战略投资。30、艾凯利元/普米斯生物艾凯利元成立于2021年3月，位于苏州。公司自成立以来，已获得西湖创新投资、联新资本、五源资本、凯风创投、知一投资、德联资本、字节跳动、康哲药业等多家知名投资机构的超过3.5亿人民币投资。公司以诱导多能干细胞（iPSC）为起点，致力于应用iPSC、基因编辑、干细胞分化等前沿技术赋能细胞，革新肿瘤免疫与再生医学治疗方案，为患者提供通用、有效、可负担的细胞产品。2021年6月10日，普米斯生物与艾凯生物科技有限公司共同宣布，双方正式达成全球战略合作，利用艾凯的iPSC NK 细胞治疗技术和普米斯的临床前研发和临床能力共同开发两款针对实体瘤的iPSC-CAB-NK细胞治疗产品。31、景达生物景达生物成立于2015年，是一家专注于开发异体现货型NK/CAR-NK细胞药物的全球创新药研发企业。创始人多为军科院背景。2021年10月，景达生物与天广实达成合作，开展景达生物通用型NK细胞分别与天广实生物新一代CD20抗体和ADCC增强型Claudin18.2抗体联合疗法治疗肿瘤的临床前研究和临床研究。2022年6月，公司完成数千万元人民币Pre-A轮融资。本轮融资由金科君创领投，德源药业、知恒创投等机构共同参与投资。本次融资资金将主要用于推动公司首个CAR-NK细胞药物JDC06注射液进入临床研究，并丰富实体瘤产品管线的临床前研究。32、传奇生物传奇生物成立于2014年，位于南京，其在CAR-T领域里面已经非常成功，首个BCMA CAR-T产品西达基奥仑赛已经于2022年2月被FDA批准上市，同年5月和9月也分别在欧洲、日本获批上市。除CAR-T外，传奇生物也布局了CAR-NK产品，处于临床前研究阶段。33、恒润达生上海恒润达生生物科技股份有限公司于2015年7月成立于上海，是一家专注于突破性免疫细胞治疗药物研发与生产的创新生物医药公司，主要聚焦恶性血液病和实体肿瘤等治疗领域。恒润达生以自主研发CAR-T细胞治疗产品为先导，同步布局CAR-NK等国际前沿技术的产品开发管线。2021年4月26日，上海恒润达生生物科技有限公司宣布完成数亿元C轮融资，盈科资本为领投方。资金主要用于3个CAR-T产品临床研究。CAR-NK产品进展未见披露。34、百济神州/ShorelineCAR-NK那么火爆，百济神州又岂会错过这一治疗潜力巨大的赛道。2021年，6月11日，百济神州斥资 4500 万美元现金，以里程碑付款和特许权使用费的方式和美国一家生物技术公司 Shoreline Biosciences达成了独家全球战略合作，双方将利用 Shoreline 的 iPSC NK 细胞技术与百济神州的临床前研发和临床开发能力，开发并商业化一系列基于 NK 细胞疗法的产品组合，用于治疗各类恶性肿瘤。两家公司表示，这项为期多年的合作最初将针对 4 种潜在疗法，可以在未来扩大合作规模。其中，百济神州将领导全球临床开发，Shoreline 负责临床生产。作为投资回报，百济神州拥有任何获批疗法的全球商业化权力，Shoreline将保留其中两种疗法在美国和加拿大的商业化权力。35、优凯瑞优凯瑞成立于2019年，位于杭州。是由瑞典、新加坡等海外科学家为核心团队创立的高科技医药公司。优凯瑞致力于靶向性抗肿瘤的细胞药物的研发、转化及应用，以原创性和持续性的研发创新为核心驱动力，专注于建立新一代非病毒方法的免疫治疗平台，高效地产业化尖端抗肿瘤细胞药。2021年11月19日，优凯瑞宣布，在河北燕达陆道培医院开展的CAR-NK临床研究项目取得重要突破，首例复发难治性急性髓系白血病（r/r AML）患者在输注CAR-NK细胞30天后骨髓形态报告显示完全缓解（CR）且残留为0%。患者未出现细胞因子释放综合征、CAR相关脑病、移植物抗宿主病等不良反应，仅出现轻微皮疹。公司产品管线如下：36、河络新图河络新图成立于2021年，位于南京，是聚焦于iPSC定向分化、基因编辑、规模化细胞产品制备及细胞治疗技术开发的创新型生物企业。其通用型细胞治疗平台结合iPSC定向分化的NK细胞和基因编辑开发iNK细胞治疗技术（IPSC-CAR-iNK），研发管线将覆盖血液和淋巴系统肿瘤、实体肿瘤和神经系统相关疾病。公司创始人王文元博士为麻省理工学院博士后，任中科院有机化学研究所、中科院生物与化学交叉研究中心研究员，复旦大学附属华山医院双聘教授，深耕干细胞领域数十年，具有iPSC全线分化经验。CEO陈俊峰博士毕业于剑桥大学，师从诺贝尔医学奖获得者Sir John Gurdon，具有15年GMP/AABB标准细胞制备经验。2022年7月获凯泰资本及亚盛天使基金的天使轮投资。2022年底完成由复容投资领投的数千万元天使+轮投资。37、天科雅天科雅公司成立于2016年，科学创始人李启靖教授是杜克大学医学院免疫学教授，曾师从TCR先驱MarkDavis，在肿瘤免疫细胞治疗经验丰富。另外一位科学创始人王品教授，是国际著名的病毒与免疫工程专家，在免疫调控和靶向基因及药物传递的工程改造方向的研究居于世界领先水平。天科雅的通用型产品来自于优化的脐带血NK细胞的分离，培养，转基因，增殖和分化技术，保证NK细胞药物的高效转染和扩增。独特的药物设计，充分发挥NK细胞作为通用药物和现货药物的优势。但是，目前公司核心产品为TCR-T和CAR-T类。2022年2月，天科雅宣布完成超过3亿元的新一轮融资，由阿斯利康中金医疗产业基金和建信（北京）投资基金领投。公司产品管线如下：38、杭州荣谷生物杭州荣谷生物科技有限公司成立于2018年，位于杭州，由聚焦通用型CAR-NK创新药研发领域顶尖实验室及精英人才发起成立的高技术生物技术公司，聚焦创新型实体瘤和血液瘤的CAR-NK细胞治疗等的创新药研发、临床试验和新药申报，致力于将CAR-NK细胞治疗关键新技术应用于临床，造福中国患者。2022年9月更新的公司产品管线如下：39、卡提医学南京卡提是由CAR-T免疫治疗的先行者Carl June团队核心人员王恩秀博士回国创办的创新型细胞药物公司。公司于2017年成立，位于南京。看公司名字也清楚，核心产品以CAR-T为主导，但CAR-NK、CAR-巨噬等多个研发项目也有布局。40、博生吉博生吉成立于2010年，公司位于苏州，由杨林博士创建。根据杨林博士采访披露，博生吉2014年开始涉及CAR-NK研究，与前文介绍的Nantkwest类似，主要采用NK92细胞作为效应细胞，但临床POC发现NK92细胞诸多限制如需要辐照处理、体内存活时间短、体内没有扩增能力等，从疗效及治疗成本等角度考虑，公司2017年暂停了NK92体系的CAR-NK产品开发（参考：https://www.ankebio.com/News/1452.html）。