Malaria, Falciparum

Luminex的合作伙伴们采用xMAP®技术开发的产品目前销售收入已逾40亿美元 Luminex的xMAP®技术可以进行各类基于蛋白质和核酸分子为检测目标的多重检测，单次实验，每个反应孔内可同时检测多达500种不同的待测分析物，目前已开发了多场景应用解决方案，包括肿瘤研究、代谢研究、免疫研究、生物标志物的筛选、基因组学和蛋白质组学研究、临床诊断及药物开发等领域，具有成本低、通量高、检测组合灵活的特点。 据统计，自2001年至今，Luminex的合作伙伴已在其多重检测平台上创造了逾40亿美元的销售收入；超过80000篇科学出版物引用了Luminex的技术或其合作伙伴开发的相应产品；超过67款产品获得美国FDA上市许可；在全球范围内的各种类型实验室里销售并安装了超过20000台xMAP®检测仪器。 Luminex xMAP®技术具有成本低、通量高、检测组合灵活等特点 Luminex 的核心技术— xMAP®多重检测技术采用了微球染色编码以及流式的进样原理配合其对应仪器实现了完美的多重检测效果。其主要特点是采用微球编码技术，即针对微球进行染色，染色后的不同颜色微球即可在软件内对其编码，实现检测仪器能够稳定识别的效果，其每种颜色的微球即可与抗体或寡核苷酸进行共价偶联，偶联后的每种微球都可以被设定用来检测一种指定的蛋白或核酸片段。 在蛋白检测方面，该技术利用荧光编码的微球共价交联抗体，与被测定的目标抗原分子结合后，加入荧光素标记的检测抗体，再通过激光扫描荧光编码来识别单个微球和测量“检测荧光”强度来确定被测指标在样本中的含量。 Luminex应用的荧光编码微球带有针对不同目标分子的特异性抗体，多种不同的编码微球在一定程度上可以自由组合，这样在一次实验中可以同时完成多个目标分子的分析。多目标分子的同时测定可以大大减少生物样品的消耗量，节省成本并缩短整个反应操作流程的时间，使多种目标分子之间相关性的分析更加准确。Luminex蛋白类靶标的多重检测用于基础和临床医学研究以及临床检测，目前已经可以检测超过2000种各类蛋白质分子，包括细胞因子、激素、自身抗体、肿瘤标志物等。 Luminex xMAP®技术可在多种场景中进行应用，我们后续将制作《多重检测技术应用案例报告》，如果您在多重检测应用领域使用xMAP®技术有最新的研究进展或应用服务场景，在此诚挚邀请您和我们共同编写。 您可在以下领域进行多重检测探索： 遗传疾病 囊性纤维化基因检测 (Cystic Fibrosis)  细胞色素 p450 (Cytochrome p450)  免疫诊断 过敏测试 (Allergy Testing)  自身免疫病检测 (Autoimmune Disease)  HLA 基因检测 (HLA Testing)  感染性疾病检测 (Infectious Disease)  疫苗测试 (Vaccine Testing)  新生儿筛查 (Newborn Screening) 癌症标志物检测 (Cancer Markers)  心脏标志物检测 (Cardiac Markers)  细胞信号传导分析 (Cellular Signaling)  细胞因子、趋化因子及生长因子检测 (Cytokines, Chemokines, and Growth Factors) 内分泌激素检测 (Endocrine)  分型 (Isotyping)  基质金属蛋白酶检测 (Matrix Metalloproteinases)  代谢标志物检测 (Metabolic Markers)  神经生物学研究 (Neurobiology)  转录因子 / 核受体检测（Transcription Factors/Nuclear Receptors) microRNA 检测 基因表达谱 基因分型   等等 会议：xMAP® CONNECT 2024技术大会 主题：Multiplexing From Data to Discovery(多重检测-从海量数据到新发现) 时间：2024年10月16日 地点：上海 人数：150人 领域：医院、疾控、生物医药、疫苗、高校、科研院所 xMAP® CONNECT 2024技术大会是多重检测技术的技术创新及应用场景拓展的年度巡礼，在这场交流会中，我们将邀请资深专家和应用产品开发者共同探讨多重检测技术的最新进展及最新应用领域，因为基于xMAP®多重检测技术方法，他们已经开发、验证并优化了该技术在各种领域的应用。 通过这场技术交流盛会，您将看到xMAP®技术的市场应用的巨大潜力。据统计，自2001年至今，Luminex的合作伙伴已创造了逾40亿美元的销售收入；超过80,000篇科学出版物引用了Luminex的技术或其合作伙伴开发的相应的产品；超过67款产品获得美国FDA上市许可；目前在全球范围内的各种类型实验室里已有20,000台以上的xMAP®检测仪器被销售并安装。 Luminex全球合作伙伴Bio-Techne、Bio-Rad、Merck、Thermo Fisher将联袂出席本次活动 会议主要内容 Luminex重磅新品— INTELLIFLEX的解读与演示 当前其它方法学检测如何转化至高效的xMAP®技术检测平台的经验分享 xMAP®技术在神经退行性疾病检测中的卓越表现 基于xMAP®技术开发的各类细胞因子检测试剂的特点与应用场景 xMAP®技术在疫苗开发及生物制药领域的应用等… 具体会议议程敬请期待…… 欢迎您扫码报名，了解更多会议信息 转发本文到朋友圈报名时上传截图，前50位会议当天赠送自助午餐一份 长按识别二维码报名会议 上届会议精彩回顾 往届会议内容 09:15-09:45 开场致辞 09:45-10:20 多病原检测技术在传染病症候群和健康人群病原谱监测中的应用 10:20-10:35 MILLIPLEX多重蛋白检测技术优势及应用场 10:35-10:50 茶歇 10:50-11:25 Luminex技术在细菌性联合疫苗的质量控制和临床研究中的应用 11:25-12:00 Bio-Techne在Luminex蛋白多因子检测的产品解决方案 12:00-13:30 午餐 13:30-13:45 xMAP®技术在神经标志物检测方面的应用 13:45-14:20 多病原检测技术在传染病症候群和健康人群病原谱监测中的应用 14:20-14:35 高效至精的多重检测技术-从RNA到蛋白“一网打尽” 14:35-14:50 茶歇 14:50-15:25 利用 LUMINEX技术平台开发动物病原检测试剂盒 15:25-16:30 Precision Coupling to Developed Multiplex Assays for Different Applications xMAP®新品INTELLIFLEX现场演示与讲解 技术应用案例 如下是典型的用户基于多重检测技术的应用案例 点击下方文字即可跳转到相应链接 多重检测技术加速疫苗开发：9价HPV疫苗Merck's Gardasil®（加卫苗）、13价肺炎疫苗Pfizer Prevenar 13(沛儿13)、新冠mRNA疫苗BioNTech（复必泰） 表观遗传修饰的应用：DNA 甲基化及组蛋白修饰进行多靶标检测 耐药基因检测：革兰氏阳性菌耐氨基糖苷药物基因检测、革兰氏阴性菌耐磺胺药物基因检测、HIV 病毒耐药基因检测、结核菌耐药基因检测、恶性疟原虫耐药基因检测 过敏原检测：大幅提升对于食物中过敏原的诊断能力及范围 多重检测平台在动物健康的应用：动物疫病检测 生物药物免疫原性评价：一次检测完成多种免疫原性评价测试 多重检测法之食安应用：沙门氏菌血清分型 更多应用案例期待您的探索…… 欢迎您扫码报名，了解更多会议信息 转发本文到朋友圈报名时上传截图，前50位会议当天赠送自助午餐一份 长按识别二维码报名会议 关于Luminex Luminex公司总部位于美国德克萨斯州的奥斯汀，是全球知名的医疗科技公司之一。其核心技术— xMAP®多重检测技术已被全球各国和医疗以及生命科学各专业领域大量使用，极大地提升了实验室检测的效率，节省了宝贵的时间。在2021年被意大利索灵集团收购后成为其旗下的全资子公司。 想要了解更多Luminex产品信息 欢迎联系我们 路明克斯贸易（上海）有限公司 Luminex Trading (Shanghai) Company Limited 地址：上海市宝山区园丰路69号4幢402A室  邮编：200444 电话：+86.21.8036.9888 传真：+86.21.8036.9899 E-mail: infocn@luminexcorp.com www.diasorin.com 技术支持热线：400 996 2655 ©2024 Luminex Corporation. A DiaSorin Company. All rights reserved.

摘要：疫苗是人类历史上最重要的发明之一，已经彻底改变了全球健康。通常，疫苗通过触发先天免疫反应和刺激抗原呈递细胞，引发针对特定病原体抗原的防御性适应性免疫反应。作为关键要素，佐剂是经常作为添加剂使用的化学物质，用于提高疫苗的效力和免疫原性。90多年来，佐剂一直是许多人类疫苗的重要组成部分，通过增强、调节和延长免疫反应来提高其效力。在这里，我们提供了一份及时且全面的佐剂历史发展和当前状态的综述，包括它们的分类、作用机制以及在不同疫苗中的作用。此外，我们对当前的许可程序进行了系统分析，并重点介绍了涉及疫苗佐剂的临床试验中的显著例子。展望未来，我们预计该领域的未来趋势，包括新佐剂配方的开发、创新佐剂的创造以及它们在系统疫苗学和疫苗输送的更广泛范围内的整合。文章认为，对生物化学、材料科学和疫苗免疫学的更深入理解对于推进疫苗技术至关重要。预计这些进步将带来更有效的疫苗的未来开发，能够对抗新兴传染病和增强公共卫生。 1.引言：疫苗佐剂的历史 疫苗佐剂研究领域自20世纪初诞生以来已显著进步（图1）。随着传染病的日益流行，免疫接种已成为限制其传播和减少相关伤害的最有效方法。然而，早期的疫苗往往证明是无效的，因为纯化的抗原本身无法引发足够强大的免疫反应。为了克服这一挑战，引入了佐剂的概念。佐剂是添加到疫苗中以增强其免疫原性，从而提高其效力的物质。 图1.疫苗佐剂发展的重大事件时间线。这一时间线展示了疫苗佐剂的逐步发展，从RNA和DNA等天然成分演变到合成工程佐剂。 现代佐剂的发展一直是一个缓慢而具有挑战性的过程。研究人员旨在创造既能够引发强烈免疫反应又保持安全有效的疫苗。这涉及到选择性地结合明确定义的分子和配方，并探索天然和合成化合物。正如图1所总结的，佐剂的组成随时间演变。它从早期的天然成分发展到当代的合成化合物。 尽管佐剂开发面临挑战，但目前有超过30种不同制造商的许可疫苗含有佐剂。铝盐是最早发现的佐剂，已被发现能够增强针对乙型肝炎、破伤风、白喉、百日咳和人类乳头瘤病毒等疾病的疫苗的免疫反应。铝盐的有效性归因于它们在注射部位形成储库、诱导炎症以及激活树突细胞和T细胞的能力。尽管铝盐在疫苗中使用已有七十多年，但其确切的免疫机制仍未完全理解。 20世纪90年代后期的佐剂发展包括油包水乳液。这些乳液有助于在较长时间内缓慢释放抗原，激活先天免疫系统，并诱导体液和细胞免疫反应。这种乳液的首次使用之一是在Fluad，这是一种针对65岁以上成年人的许可季节性流感疫苗。其他FDA许可的佐剂包括MF59（一种含角鲨烷、生物可降解油和表面活性剂的油包水乳液佐剂，用于流感疫苗）和AS03（由α-生育酚、角鲨烷和表面活性剂组成，用于H1N1流感疫苗和一些大流行流感疫苗）。AS01（一种脂质体和单磷脂A的混合物）已在RTS,S/AS01疟疾疫苗和带状疱疹疫苗中使用。 尽管许多其他佐剂在临床前模型中显示出高效力，但由于安全或耐受性问题，大多数尚未获得人类使用的许可。此外，包括铝盐、MF59和佐剂系统AS0佐剂在内的现有佐剂在人类中的作用分子机制仍不完全清楚。 2.佐剂的益处和效果 总体而言，疫苗佐剂在提高疫苗的有效性和可及性，以及减少全球传染病负担方面发挥着关键作用。它们的用途和其他实际应用如下（见图2）： 图2. 佐剂的潜在益处 1.缓解有限的疫苗供应：佐剂增强免疫反应，允许较少的疫苗剂量实现完全保护。这减轻了卫生系统的负担，并增加了那些无法接受多次剂量的人的可及性。佐剂还可以降低疫苗中必要的抗原剂量，从而可能减少副作用并增加可用性。例如，重组疫苗提供了显著的制造优势，但通常自身免疫原性较弱。将佐剂与重组大流行流感蛋白结合，可以大幅减少实现目标抗体水平所需的抗原量，从而显著增加生产能力。例如，AS03是一种油包水乳液佐剂，已在H1N1流感疫苗等疫苗中使用。它已被证明可以改善免疫反应，并允许抗原节约，这意味着可以使用较小量的疫苗抗原，同时仍然产生强烈的免疫反应，这有助于延长可用的疫苗供应。 2.快速启动免疫反应：佐剂刺激对疫苗抗原更强、更持久的反应，提供更好的保护。例如，将AS04佐剂加入GlaxoSmithKline（GSK）的乙肝抗原Fendrix中，实现了三剂方案减为两剂。Advax是一种基于δ-菊糖的佐剂，已被证明可以加速免疫反应。它激活先天免疫系统，并促进细胞因子和趋化因子的产生，这有助于增强适应性免疫反应。 3.扩大抗体反应：佐剂扩大对具有显著抗原漂移或株变异的病原体的抗体反应，对于流感、人类乳头瘤病毒（HPV）和疟疾寄生虫等疾病至关重要。例如，MF59是一种油包水乳液佐剂，已被证明可以增强细胞和体液免疫反应，并显著增加抗体滴度，改善抗体反应的质量。 4.加强抗体反应的幅度和功能性：佐剂不仅增加了抗体反应的幅度，还增加了它们的功能性、亲和力或免疫系统产生的功能性抗体数量。例如，AS04是一种将铝盐与单磷脂酸脂A（MPLA）结合的佐剂，MPLA是一种Toll样受体4激动剂。AS04已被证明可以增强抗体反应的幅度和功能性。它促进了高质量抗体的产生，包括增加抗体滴度和改善抗体亲和力和亲和力。 5.加强T细胞反应：正在开发新的疫苗候选物以改善T细胞反应，现有的人类使用批准的佐剂不能有效诱导这些反应。目标是诱导更有效的T辅助细胞参与，以优化抗体反应的质量和持久性，或诱导可以针对和消除细胞内病原体的效果CD4+或CD8+ T细胞。因此，新疫苗可能包括Toll样受体（TLRs）和其他先天免疫受体的激动剂，以促进T辅助细胞反应的产生。这种方法旨在克服传统佐剂的局限性，创造更有效的疫苗，可以提供长期保护，对抗更广泛的病原体。通过改善T细胞反应，这些疫苗也可能为免疫系统较弱的个体或对传统疫苗反应不佳的人提供益处。例如，CpG ODNs是含有特定免疫刺激性序列的合成DNA分子，作为Toll样受体9（TLR9）激动剂，已被证明通过促进抗原特异性CD4+和CD8+ T细胞的激活和分化来增强T细胞反应。它们诱导Th1型免疫反应，导致T细胞增殖、细胞因子产生和细胞毒性T细胞活性增加。 6.开发新疫苗：佐剂在开发传统疫苗无效的疾病疫苗中至关重要，增强免疫反应并针对多种病原体株。它们可以增强对疫苗的免疫反应，并帮助针对病原体的多种株。例如，在流感疫苗的情况下，已使用佐剂创建可以针对不同流感病毒株提供更好保护的疫苗。此外，佐剂可用于开发针对尚未有效疫苗可用的病原体引起的疾病的疫苗，如HIV或疟疾。开发能够刺激针对这些病原体的强大和针对性免疫反应的佐剂是一个重要的研究领域。例如，在病毒样颗粒（VLP）佐剂中，VLP是自组装结构，模仿病毒的整体结构但缺乏病毒遗传物质，使它们无传染性。VLP可以作为抗原和佐剂。它们已被用于新疫苗的开发，以增强免疫反应，提高疫苗效力，并扩大对不同病毒株或亚型的免疫反应。 7.提高安全性：通过增强免疫反应，佐剂可以降低疫苗相关不良事件的风险。这是因为免疫系统能够更好地针对和消除抗原，降低可能导致副作用的过度免疫反应的风险。因此，在疫苗中使用佐剂已成为提高疫苗效力、安全性和可及性的重要策略。例如，病毒体是将病毒蛋白（如流感血凝素）纳入其结构的类脂质体颗粒。它们已被用作疫苗中的佐剂以提高安全性。病毒体提供了病毒的抗原性质，但没有传染性遗传物质，降低了疫苗相关不良事件的风险。病毒体佐剂已在流感和甲型肝炎等疾病的疫苗中使用。 3.佐剂的类别及其作用机制  在这一部分，我们讨论了典型的疫苗佐剂，包括它们的组成部分、功能机制、在疫苗中的应用以及它们的优点和缺点，以及与它们相关的挑战。 图3. 疫苗佐剂的类型 3.1.铝盐类佐剂 通常被称为明矾的铝盐类佐剂是第一种在许可的人类疫苗中使用的佐剂，并且仍然是使用最广泛的佐剂。它们由氢氧化铝、磷酸铝或两者的组合组成，已知能在注射部位形成储库，随时间缓慢释放疫苗抗原，从而产生更强和更持久的免疫反应。它们已被证明能增强对包括乙型肝炎、人类乳头瘤病毒（HPV）和肺炎球菌病疫苗在内的广泛抗原的免疫反应。由于它们经过验证的安全性记录、增强免疫反应的广谱能力以及易于制造，它们仍然是疫苗开发中一个有吸引力的选择。然而，人们对铝盐可能引起的不良反应，如注射部位的局部反应和罕见的过敏反应，也存在一些担忧。使用铝盐作为疫苗佐剂的好处通常大于风险。 铝盐类佐剂的确切作用机制尚未完全理解，但有几种提出的理论（图4a）。明矾作为佐剂之所以受欢迎的一个关键原因是它们能在注射部位形成储库。这个储库随时间缓慢释放疫苗抗原，使免疫系统长时间暴露于抗原。这种长时间暴露有助于增强免疫反应，导致更强和更持久的免疫力。 图4. 疫苗佐剂的作用机制。a) 基于铝盐的佐剂。b) 乳液佐剂。c) 基于TLR激动剂的佐剂。 此外，明矾还被认为是通过在注射部位诱导炎症来激活先天免疫系统。这种炎症被认为是由炎症体的激活触发的，炎症体是一种在先天免疫反应中起关键作用的蛋白质复合物。激活的炎症体释放促炎细胞因子，这有助于吸引免疫细胞到炎症部位并激活它们。 铝盐类佐剂还被认为是通过诱导促炎细胞因子的释放来激活树突状细胞，这些是专门呈递抗原给T细胞的免疫细胞，负责识别和攻击外来入侵者。铝盐类佐剂通过诱导释放促炎细胞因子，如IL-1β和TNF-α，吸引树突状细胞到注射部位并激活它们。反过来，树突状细胞促进效应T细胞的分化，这些细胞在诱导免疫中起着关键作用。 明矾还被认为是通过刺激CD4+ T细胞的分化和诱导B细胞产生抗体来发挥作用，这对于诱导免疫至关重要。这一过程是通过树突状细胞产生的IL-1β和IL-18来介导的，它们促进效应T细胞的分化。储库中抗原的缓慢释放也有助于延长B细胞对抗原的暴露，这可以增强抗体的产生。 总之，铝盐类佐剂通过在注射部位形成储库、激活炎症体、诱导促炎细胞因子的释放、吸引树突状细胞到注射部位以及增强B细胞产生抗体的作用来发挥作用。这些机制共同作用，增强了疫苗中抗原的免疫反应，提高了对目标疾病的保护。 3.2.无机纳米颗粒基佐剂 无机纳米颗粒基疫苗佐剂，如纳米铝、层状双氢氧化物（LDH）和纳米/介孔硅、纳米金刚石、量子点，已被研究其增强疫苗免疫反应的潜力。无机纳米颗粒提供了一个多功能的平台，用于表面修饰，允许精确控制大小和形状参数。这种多功能性有助于设计旨在引发特定免疫反应的定制结构。此外，这些纳米颗粒通常表现出强大的化学和物理化学稳定性，确保在储存和运输过程中不需要冷藏即可长时间保存。这些属性对于实际的疫苗部署和分发场景至关重要，特别是在资源有限的环境中，使它们成为储备疫苗以应对未来紧急需求的理想候选者。 无机纳米颗粒基疫苗佐剂的作用机制涉及它们与免疫系统的相互作用，以增强和调节对疫苗中抗原的免疫反应。无机纳米颗粒作为抗原的载体，确保它们有效地传递给抗原呈递细胞（APCs）。纳米颗粒被设计为被APCs，如树突状细胞和巨噬细胞，有效摄取。这种摄取是通过纳米颗粒的大小、表面电荷和表面修饰来促进的。一些无机纳米颗粒佐剂，如基于铝的佐剂，会在注射部位引起局部炎症。这吸引免疫细胞到该部位，并促进APCs的招募。无机纳米颗粒佐剂有助于发展持久的免疫记忆。这确保了免疫系统“记住”遇到的抗原，在随后暴露于病原体时提供保护。 其中，具有纳米纤维形态的γ相氧化铝水合物纳米颗粒（γ-AlOOH）被制备并用作人结核杆菌水热提取物的传递系统。由于其独特的介孔纤维结构，合成的γ-AlOOH显著增强了巨噬细胞样细胞的细胞摄取，与商业明矾相比增加了约两倍。 介孔硅具有有序的多孔结构，孔径在介孔范围内（2至50纳米）。这种结构提供了大的表面积和可调节的属性，使其适合于各种应用，包括药物传递和疫苗佐剂。介孔硅的表面可以被修饰以定制其属性，用于特定的疫苗配方和应用。介孔硅也可以被用来封装免疫调节剂，进一步增强佐剂效果。例如，无定形硅可以用作疫苗佐剂以增强免疫反应。纳米级和微米级硅都促进了髓系细胞中NLRP3炎症体的激活，而只有纳米级硅在角质形成细胞中激活了炎症体。 层状双氢氧化物（LDHs）是一种具有正电荷的类水镁石层和层间阴离子的材料，为包括药物传递和免疫调节在内的各种应用提供了独特的结构。由于其层状结构，LDHs对抗原具有高负载能力。LDHs可以设计成以控制的方式释放抗原，促进持久和延长的免疫反应。LDHs还可以表面修饰以整合额外的功能，如靶向配体或免疫调节剂，以进一步定制其性能。 总之，无机纳米颗粒作为疫苗佐剂是一个活跃的研究领域，它们在疫苗开发中的应用有望增强免疫反应，提高疫苗的整体有效性。 3.3.乳液佐剂 当两种液体混合在一起时，如果它们不能形成均匀混合物，就会形成乳液。抗原包含在这些水滴中，油则作为储库，缓慢释放抗原，并通过减少清除时间和延长抗原暴露来增强免疫反应。乳液是另一种已开发用于增强疫苗免疫反应的疫苗佐剂。乳液由两种不相溶的液体组成，通常是一个油相和一个水相，由表面活性剂稳定。乳液通过在油相中形成小的抗原滴液，然后将它们分散在整个水相中。 最早获得人类疫苗批准的水包油佐剂之一是MF59，它包含角鲨烷、聚山梨醇酯80、三油酸山道醇酯和脱水柠檬酸钠。MF59诱导ATP释放，并上调细胞因子和趋化因子以增强疫苗接种部位的抗原特异性免疫反应。它已被证明是安全且耐受性良好的。另一种基于水包油乳液的佐剂是AS03，它包含表面活性剂聚山梨醇酯80和两种可生物降解的油，角鲨烷和DL-α-生育酚。欧洲委员会在2009年为AS03佐剂的Pandemrix授权上市，2013年FDA批准了AS03佐剂的流感A（H5N1）单价疫苗。AS03已越来越多地用于流感和疟疾疫苗。 乳液已被用于各种疫苗中，包括流感、乙型肝炎和人类乳头瘤病毒（HPV）疫苗。它们提高了疫苗的效力，特别是在可能对传统疫苗反应不佳的人群中，如老年人或免疫功能低下的个体。乳液佐剂通过几种机制增强对疫苗的免疫反应。图4b提出了几种理解基于乳液的佐剂如何工作的机制： 一个主要机制是抗原的缓慢释放延长了时间。乳液滴液的小尺寸允许延长的表面积体积比，这增强了抗原的呈现和抗原呈递细胞的摄取。这种抗原的缓慢释放可以在更长的时间内激活免疫系统，从而产生更强大和更持久的免疫反应。 乳液佐剂还激活了先天免疫系统。乳液滴液被免疫系统识别为异物，导致激活如树突状细胞、巨噬细胞和单核细胞等抗原呈递细胞。然后这些细胞产生促炎细胞因子和趋化因子的复合物，如TNF-α和IL-1β，这进一步激活免疫系统并吸引免疫细胞到注射部位，并形成一个免疫能力环境，以增强抗原向引流淋巴结的运输。 乳液佐剂的另一个重要机制是它们能够诱导体液和细胞免疫反应。乳液滴液可以被抗原呈递细胞摄取，然后将抗原呈递给T细胞和B细胞。T细胞负责直接攻击感染的细胞，而B细胞产生可以中和病原体的抗体。乳液佐剂已被证明可以激活T细胞和B细胞，导致更全面的免疫反应。 总之，乳液佐剂已成为疫苗开发中的重要工具。它们通过几种机制增强对疫苗的免疫反应，包括缓慢释放抗原、激活先天免疫系统以及诱导体液和细胞免疫反应。 3.4.Toll样受体（TLR）激动剂 Toll样受体（TLRs）是一种模式识别受体，对入侵病原体的先天免疫反应至关重要。TLRs是跨膜受体，主要由先天免疫系统的细胞表达。这些受体分为两组：细胞表面TLRs（TLR1、TLR2、TLR4、TLR5和TLR6）和细胞内TLRs（TLR3、TLR7、TLR8和TLR9），它们表达在内体膜上。每个TLR都包含一个跨膜域、一个富含亮氨酸的重复（LRR）段，该段识别病原体相关分子模式（PAMPs）和损伤相关分子模式（DAMPs），以及一个Toll/白介素-1受体（TIR）域，该域启动下游信号转导并诱导炎症反应。因此，TLRs是佐剂刺激有效免疫反应的有吸引力的靶点，提供对病原体的长期保护。Toll样受体（TLR）激动剂作为疫苗中的佐剂对生命威胁和复杂疾病（如癌症、艾滋病和疟疾）非常有前景。 CpG寡脱氧核苷酸（ODNs）是含有磷酸硫酯骨架的合成DNA分子，其中包含未甲基化的CpG基序。图4c描述了基于TRL的佐剂如何起作用：CpG ODN是一种有效的佐剂，诱导1型辅助T（Th1）反应，并促进细胞毒性T淋巴细胞（CTLs）的产生和干扰素-γ（IFN-γ）的分泌。CpG ODN通过TLR9激活增强了对抗原的特异性体液和细胞免疫反应。由于其独特的特性，CpG ODN可以作为通过肌肉注射、皮下、口服和鼻内途径的疫苗佐剂。作为有效的疫苗佐剂，CpG ODN可以促进抗原的免疫刺激效应，激活抗原呈递细胞（APCs），并加速免疫反应。CpG ODNs促进浆细胞样树突状细胞（pDCs）上主要组织相容性复合体（MHC）、CD40和CD86的表达，并增强抗原处理，导致强大和持久的免疫反应。 3.5.脂质体 脂质体是一种疫苗佐剂，由磷脂和胆固醇组成，是能够包裹抗原和其他免疫刺激性分子的小球形结构。它们是可生物降解的、生物相容的，并且允许进行多样化的结构修改，以实现可调节的特性和毒性。脂质体可用于将抗原传递给抗原呈递细胞，如树突状细胞，这些细胞可以激活免疫系统。此外，脂质体能够增强体液和细胞免疫反应，诱导对清除细胞内病原体和增强抗体反应至关重要的Th1偏向反应，使它们成为疫苗开发中具有吸引力的佐剂。脂质体的一个独特特性是它们能够被修改以针对特定的细胞类型。它们可以被修饰以带有针对树突状细胞上特定受体的抗体或肽，增加脂质体包裹的抗原的摄取。脂质体还可用于共同传递多种抗原或免疫刺激性分子，从而引发更强大的免疫反应，特别是对于可能需要多种抗原才能诱导保护性免疫反应的复杂病原体。 AS01是一种基于脂质体的佐剂系统，包含两种免疫刺激性剂，3-O-去酰基-4'-单磷脂A（MPL）和QS-212。使用AS01佐剂的疫苗包括新开发的疟疾疫苗RTS, S（Mosquirix），以及针对带状疱疹（HZ/su）、HIV和结核病的疫苗候选物。AS01可以促进产生抗原特异性抗体和抗原特异性CD4+ T细胞，这与其他佐剂不同。 3.6.其他佐剂 细胞因子——细胞因子是一类在免疫反应中起重要作用的信号分子。它们由免疫系统的各种细胞分泌，并作用于特定受体以介导一系列生物学功能，如炎症、细胞增殖和分化。根据它们的结构和功能，细胞因子可以分为不同的类别，包括白细胞介素、干扰素、肿瘤坏死因子和趋化因子。 聚合物——另一方面，聚合物是由共价键连接的重复单元组成的化合物。它们可以是天然的或合成的，在材料科学、医学和生物技术中有广泛的应用。在疫苗方面，聚合物可以用作载体，创建缓慢释放的储库，在其大的交联结构中包含抗原和其他免疫调节剂。这导致持续的抗原呈现和免疫系统的激活，可以导致更强和更持久的免疫反应。 皂苷——皂苷是具有两亲性质的天然化合物，即它们既有亲水区也有疏水区。它们在传统医学中已被使用数百年，并且有许多潜在的药物应用，包括作为疫苗中的佐剂。皂苷可以通过刺激树突状细胞等抗原呈递细胞以及促进细胞因子和趋化因子的产生来增强免疫反应。皂苷基佐剂的一个例子是QS-21，它与MPL（单磷脂A）一起在AS01佐剂系统中使用。AS01是一种有效的佐剂，已用于开发针对疟疾、结核病和带状疱疹等疾病的疫苗。 病毒体——病毒体由磷脂和病毒包膜蛋白组成，通常来源于不引起人类疾病的病毒。病毒包膜蛋白提供了一个免疫原性表面，可以激活免疫系统，而磷脂有助于稳定病毒体结构并增加其被抗原呈递细胞的摄取。 4.各种疫苗及其佐剂的作用 在本节中，我们讨论了佐剂在各种疫苗中的作用。图5总结了目前主要的已确认疫苗和正在开发的方法。这些包括全病毒疫苗（如减毒活病毒、灭活病毒和病毒载体疫苗）、亚单位疫苗和核酸疫苗（包括pDNA和mRNA）。 图5. 各种疫苗及其佐剂的总结 4.1.灭活疫苗 灭活疫苗通常由病毒感染的细胞生产而成，并经过灭活处理，确保病毒不再具有传染性，但保留了其抗原特性，使其能够用于产生免疫反应。可以向灭活疫苗中添加佐剂以增强免疫反应。铝盐，如氢氧化铝和磷酸铝，是灭活疫苗中最常用的佐剂。它们通过将抗原吸附到其表面来增强免疫反应，这允许抗原缓慢释放，并在更长时间内刺激免疫系统。灭活疫苗中使用的其他佐剂包括MF59、AS03和AS04。MF59是一种油包水乳液，通过在注射部位创建抗原库以及刺激先天免疫系统来增强免疫反应。这些佐剂已在H1N1流感疫苗和人类乳头瘤病毒（HPV）疫苗等疫苗中使用。在一项研究中，含铝佐剂的CoronaVac灭活疫苗对SARS-CoV-2显示出高效的中和效果。 4.2.减毒活病毒疫苗 减毒活病毒疫苗由于其在注射后能够在宿主系统中迅速扩增，从而实现有效的免疫接种，已成为一种成功的免疫策略。减毒活病毒疫苗是病毒的减弱形式，能够在体内复制但不会引起疾病。因此，它们能够引发强烈且持久的免疫反应。通常不与减毒活病毒疫苗一起使用佐剂，因为疫苗本身就是一种强烈的免疫刺激剂。然而，一些研究已经探索了在减毒活病毒疫苗中使用佐剂以可能增强其有效性。一个例子是使用油包水乳液MF59作为减毒流感疫苗的佐剂，已被证明可以改善老年人的免疫反应。然而，需要更多的研究来确定佐剂与减毒活病毒疫苗的安全性和有效性。 4.3.病毒载体疫苗 复制能力和非复制能力的腺病毒载体通常被用来表达其他病毒蛋白的抗原以进行免疫接种。可以与病毒载体疫苗一起使用佐剂来增强疫苗产生的免疫反应。例如，牛津-阿斯利康COVID-19疫苗是一种病毒载体疫苗，它使用一种弱化的黑猩猩腺病毒来传递SARS-CoV-2刺突蛋白的遗传物质。这种疫苗含有一种名为AS03的佐剂，这是一种由角鲨烷（一种天然油）、聚山梨醇酯80（一种洗涤剂）和维生素E组成的混合物。 4.4.病毒样颗粒疫苗 在这种策略中，结构病毒蛋白被共同表达以形成非感染性颗粒作为疫苗免疫原。它们类似于真正的病毒颗粒，但缺乏病毒基因组。在细胞中生产VLPs，然后进一步重建为稳定和免疫原性形式，是一个多阶段过程。可以在病毒样颗粒疫苗中使用佐剂来增强免疫反应并提高疫苗效果。病毒样颗粒疫苗中常用的佐剂包括铝盐、MF59（油包水乳液）和CpG寡核苷酸（TLR-9激动剂）。这些佐剂刺激免疫系统对VLP疫苗产生更强大和更持久的反应。在某些情况下，VLP本身可以作为佐剂，因为它已被证明可以通过多种途径刺激免疫系统。总的来说，在VLP疫苗中使用佐剂可以帮助增加其效力，减少所需剂量，并提高疫苗覆盖率。 4.5.DNA疫苗 DNA疫苗使用DNA质粒作为载体，将编码抗原的基因转移到宿主细胞中，特别是抗原呈递细胞。这些疫苗的基本原理依赖于将遗传物质传递到细胞核中，激活载体中的哺乳动物启动子，并通过宿主细胞机制启动目标基因的转录。然而，与其他疫苗类型相比，DNA疫苗通常具有有限的免疫原性，这可能限制了它们的有效性。佐剂可以帮助克服这一限制，通过增强对编码抗原的免疫反应。在DNA疫苗中已测试了各种佐剂，包括铝、CpG寡脱氧核苷酸（CpG ODNs）和脂质体。铝已被证明可以增强小鼠对DNA疫苗的免疫反应，但在人类试验中的成功有限。CpG ODNs是模拟细菌DNA的合成分子，可以通过与免疫细胞上的Toll样受体（TLRs）相互作用来激活免疫系统。脂质体是小的脂质囊泡，可以包裹DNA和佐剂，并将它们直接传递给抗原呈递细胞。基于脂质体的佐剂在DNA疫苗的临床前研究中显示出前景。 4.6.mRNA疫苗 mRNA疫苗涉及将mRNA分子直接注射到宿主细胞中，然后在细胞质中翻译成目标蛋白。这些疫苗通常包含一个带有3'聚腺苷酸尾部的开放阅读框（ORF），可以刺激细胞和体液免疫反应。与传统疫苗相比，mRNA疫苗提供了许多优势，如安全性、灵活性、可扩展性和成本效益。mRNA疫苗通常不需要佐剂，因为mRNA分子本身会刺激免疫系统。例如，针对COVID-19的mRNA疫苗使用脂质纳米颗粒传递系统来保护mRNA并促进其进入细胞，但这种传递系统在传统意义上不被视为佐剂。然而，一些研究正在进行中，以探索在mRNA疫苗中使用佐剂以增强其有效性，特别是对于可能对疫苗有较弱免疫反应的某些人群，如老年人。 4.7.基于蛋白质亚单位的疫苗 基于蛋白质亚单位的疫苗只包含来自病原体的特定蛋白质或蛋白质，而不是整个病原体。佐剂通常与基于蛋白质亚单位的疫苗一起使用，以通过增加对蛋白质抗原的免疫反应来增强其有效性。铝盐（如氢氧化铝）是用于基于蛋白质亚单位疫苗的最常用佐剂，因为它们已被证明可以增强对抗原的抗体反应。其他佐剂，如MF59（油包水乳液）、AS03（角鲨烷油包水乳液）和AS04（氢氧化铝和MPL），也已在基于蛋白质亚单位疫苗中使用，以提高其免疫原性。此外，正在研究使用Toll样受体激动剂等新型佐剂与基于蛋白质亚单位疫苗一起使用，以进一步增强其免疫反应。 5.疫苗佐剂的临床试验和许可 开发一种含有佐剂的疫苗是一项艰巨的任务，可能需要数年时间，因为必须确保疫苗的每个组成部分单独和组合时都是兼容的。美国食品和药物管理局下属的生物制品评估和研究中心（CBER）发布了一份指南，以促进新疫苗配方的开发，以应对开发针对传染病疫苗的迫切需求（见图6）。该指南建议从使用适当的动物模型进行临床前测试开始，以评估配方的安全性和免疫原性，包括佐剂对免疫反应的作用。必须包括仅含佐剂和抗原的对照组，以提供佐剂效应的证据。免疫原性评估可能包括体液和细胞反应，如果疾病有动物模型，则可以获得初步的保护效果信息。在临床前测试和疫苗配方的良好生产规范（GMP）生产之后，开始进行人体临床试验。 图6. 疫苗发展的演变阶段 第一阶段研究评估健康个体的安全性和剂量，并获得初步的免疫原性信息。第二阶段a试验涉及数百名志愿者，以评估免疫原性、耐受性和安全性。当测试进入第二阶段b/第三阶段时，重点是确定疫苗目标人群中的免疫原性和效力，随着涉及的志愿者人数增加，研究持续时间也会增加。 在确认疫苗的安全性和效力后，可以对其进行许可和市场推广。然而，配方在第四阶段进行上市后安全性监测，以评估其他罕见的不良反应。这些活动旨在确保根据安全监测结果采取适当的行动。监管机构严格应用药物警戒流程，以评估许可后出现的潜在安全信号。然而，尽管许可后有大量安全信息，但试图建立与疫苗接种的因果关系的评估研究可能是复杂的且结论不一。 曾有疫苗在许可后因证明疫苗与不良事件之间存在因果关系或效力不足而撤回，这改变了风险-效益比。尽管也有例子表明疫苗接种与不良事件之间的所谓因果关系被证明是没有根据的。疫苗制造商和监管机构在安全信号监测或报告新的重要不良事件时采取迅速行动。他们迅速将证据传达给医疗专业人员和公众，以便就当前的风险-效益概况做出明智的决策。 6.疫苗佐剂的临床试验示例 6.1.乳液 MF59是开发疫苗以引发针对HIV的特异性体液和细胞免疫反应的一个例子，这对于预防HIV感染是可取的。在第一阶段临床试验中，研究了使用DNA进行初步免疫，然后用MF59佐剂的重组包膜糖蛋白进行增强的组合疫苗方案，以研究该组合HIV疫苗方案在未感染HIV的成年人中的安全性和免疫反应。此外，灭活流感A/H9N2疫苗有无MF59佐剂在门诊成人中的第二阶段临床试验正在进行，以评估4种不同剂量的纯化单价表面抗原（SA）流感A/H9N2病毒疫苗有无MF59佐剂的安全性，并肌肉注射给门诊成人。Montanide ISA 51和Montanide ISA 720是两种已在临床研究中调查的水包油乳液佐剂。它们具有不同的油对水比例。Montanide ISA 51已在疟疾疫苗的第一阶段和流感疫苗的第二阶段研究中进行了评估，并已在古巴的肺疗疫苗中获得许可。Montanide ISA 720已在疟疾疫苗的第二阶段临床试验中进行了测试。这两种佐剂都已被证明可以促进有效的免疫反应，特别是增强特定的细胞毒性T淋巴细胞（CTL）反应。然而，观察到短暂的副作用，如发烧、头痛或类似流感的症状，尽管两者似乎都能很好地耐受。AS03佐剂在赛诺菲H1N1流感疫苗中的使用，在健康成人和老年人群的不同剂量水平下进行，以查看身体对不同强度的H1N1流感疫苗的反应，当它在有无“佐剂”的情况下给予时。这项研究还将比较年龄如何影响身体对H1N1流感疫苗的反应。 6.2.基于铝的佐剂 在第一阶段临床试验中，评估了默克0657nI金黄色葡萄球菌疫苗单剂量的安全性、耐受性和免疫原性，有无默克铝佐剂。此外，还评估了MN重组可溶性gp120/HIV-1（MN rsgp120/HIV-1）与QS21有无铝的安全性和免疫原性的扩展评估，在第一阶段试验中进行了评估。 6.3.基于脂质的佐剂 基于脂质的材料已被用作疫苗佐剂，因为其独特的囊泡结构被发现非常适合包裹各种生物活性物质，如DNA和脂肪酸。在早期，科学家们专注于脂质A，LPS的疏水锚，它被认为是一种有效的佐剂，可以显著增加体液和细胞免疫反应。然而，基于脂质A的佐剂由于其高毒性，被认为不适合人类疫苗。相反，GLA-SE和GLA-AF，都是脂质A类似物，已被发现在增强对H5N1的保护方面特别有效，毒性低，副作用有限。GLA-AF也已作为乳液在许多疫苗中作为替代品进行了测试，最值得注意的是在大流行流感中。 6.4.基于Toll样受体（TLR）激动剂的佐剂 TLR3激动剂Poly-ICLC已在黑色素瘤患者的疫苗佐剂安全性研究中进行了研究。这是一项TLR3激动剂Poly-ICLC作为NY-ESO-1蛋白疫苗佐剂治疗高风险黑色素瘤患者的第一阶段开放标签剂量递增研究。疫苗佐剂治疗的目标是训练内源性免疫系统识别和针对最小残留疾病。 6.5.皂苷 基于皂苷的OPT-821已在三价神经节苷脂中用于临床第三阶段试验中的三阴性肉瘤患者。如果三价疫苗能刺激患者的免疫系统产生抗体，识别并针对GM2、GD2和GM3糖，则患者的抗体可能会攻击并杀死任何剩余的肉瘤细胞，可能防止肉瘤复发。MatrixMTM也在大流行流感和RSV疫苗的第一阶段和第二阶段临床试验中进行了测试，并显示出安全和良好耐受性，增强了体液和细胞免疫反应。其他基于皂苷的佐剂，如QS-21，已在癌症疫苗和传染病疫苗的临床试验中进行了评估，并显示出诱导强烈的免疫反应和提高疫苗效力。然而，它们的复杂结构和可变组成可能会影响它们的一致性和可重复性，它们潜在的毒性和溶血活性需要在dLNs的临床前和临床研究中仔细评估。由MPL和QS-21组成的AS02正在进行疟疾疫苗的第二阶段试验。 6.6.核苷酸 CpG ODN、dsRNA和IL-12 DNA等佐剂成分是激活模式识别受体（PRRs）以刺激免疫反应的核苷酸基佐剂的例子。例如，dsRNA可以分泌IFN-a和IFN-c等细胞因子，通过TLR3、MDA-5和NLRP3炎症体信号传导，目前正在流感和狂犬病疫苗的临床试验中进行。用IL-12 DNA佐剂的DNA疫苗被引入以提供针对广泛HIV变体的高效保护，最近的试验表明它们耐受性良好，可以增强免疫反应。Pika佐剂是另一种核苷酸基佐剂，是dsRNA的合成类似物，用卡那霉素和钙稳定，促进干扰素、IL-2和IL-12的产生。这种佐剂可以将主要产生体液免疫的预防性疫苗转变为具有强大细胞免疫的治疗性疫苗。 6.7.细胞因子 在最近的研究中，分子佐剂已被证明能有效刺激免疫反应，特别是在亚单位疫苗中。例如，IL-2和GM-CSF细胞因子已在针对口蹄疫的疫苗中进行了研究，GM-CSF目前正在乙型肝炎和HIV疫苗中进行评估。其佐剂效应归因于其促进巨噬细胞分化和增殖的能力，以及激活抗原呈递细胞。同样，IL-12和IL-15已被作为HIV疫苗的佐剂在第一阶段临床试验中使用。这些细胞因子已证明能够刺激NK细胞和T细胞增殖。 6.8.病毒体 病毒体是包膜的病毒样颗粒，已在欧洲获得许可，用于针对甲型肝炎和流感的疫苗，并已在恶性疟和慢性丙型肝炎疫苗的临床试验中使用。 6.9.肽 肽，MUC1-poly-ICLC疫苗正在第二阶段试验中进行测试，旨在评估MUC1疫苗在增加患结直肠癌风险的受试者中的抗体和T细胞反应，这些受试者有晚期腺瘤的病史。MUC1-poly-ICLC疫苗正在开发中，以防止息肉发展成结肠癌，并防止息肉复发，这有助于体内免疫系统识别MUC1的变化，这些变化伴随着癌症的进展，并消除产生异常的细胞1。 6.10.其他 其他形式的佐剂也在临床试验中进行调查。一项针对研究性PIKA（基于聚肌苷酸-聚胞苷酸的佐剂）狂犬病疫苗的第一阶段临床研究，包括灭活和纯化的狂犬病病毒和PIKA佐剂，是为了评估疫苗组合在健康成年志愿者中的临床安全性，并根据加速疫苗方案评估疫苗的效力。Mayo Clinic与Agri-King Corporation合作开发了一种名为AKSB（Agri-King Synbiotic）的新型合生元。AKSB在65岁以上正常人类志愿者中进行的第一阶段安慰剂对照试验，旨在研究当患者同时接受流感疫苗时这种益生菌的安全性。磷酸钙，以羟基磷灰石的形式，已在法国获得许可，用于白喉、破伤风、百日咳和脊髓灰质炎疫苗。磷酸钙被认为是人体内的天然化合物，并且耐受性良好，使其成为可能替代铝佐剂的潜在替代品，后者可能有不良副作用。作为TLR5配体的细菌鞭毛蛋白也显示出佐剂效应，导致混合的Th1和Th2反应。在临床试验中，一种双价P. aeruginosa鞭毛蛋白佐剂疫苗帮助囊性纤维化患者降低了感染P. aeruginosa的风险。多糖是另一种可能的佐剂，可以增强疫苗的免疫反应，并促进细胞免疫、体液免疫和粘膜免疫。还有一些新型佐剂结合了上述几种佐剂，有效成分协同作用以产生最佳免疫反应。 7.针对COVID-19的疫苗佐剂 COVID-19大流行凸显了需要一种安全有效的疫苗来控制SARS-CoV-2病毒的传播。开发理想的疫苗需要广泛的研究和资源，以确保它满足当前情况的需求。疫苗旨在诱导保护性免疫反应，可以预防或减轻病毒感染的严重程度。 7.1.COVID-19疫苗中佐剂的好处 在COVID-19疫苗中使用佐剂有几个原因/动机：1)一个有效的COVID-19疫苗的主要要求之一是其能够刺激强大的免疫反应，能够产生高水平的中和抗体。为了实现这一点，疫苗可能需要多剂或佐剂。佐剂可以帮助减少疫苗中所需的抗原量，从而降低其成本。2)在SARS-CoV-2疫苗中加入合适的佐剂可以通过减少产生保护性免疫反应所需的抗原量来满足这些要求。疫苗的生产和分配应该是成本效益和可扩展的，以满足压倒性的需求。由于大流行影响了世界上大多数国家，因此迫切需要一种可以快速高效生产和分发的疫苗。3)此外，佐剂还可以通过提供持久的免疫反应和扩大其对不同病毒株的保护范围来增强疫苗的效力。因此，针对COVID-19的佐剂疫苗的研究和开发对于开发一种安全、有效和具有成本效益的疫苗以控制大流行至关重要。 7.2.针对Covid-19的许可佐剂和候选物。 NVX-CoV2373是由Novavax开发的有希望的疫苗候选物，用于预防COVID-19。它是一种基于蛋白质的疫苗，是使用导致COVID-19的SARS-CoV-2病毒的第一株的基因序列创建的。S蛋白是COVID-19疫苗的关键靶点，因为它是病毒附着和感染人类细胞的主要手段。为了增强免疫反应并刺激高水平的中和抗体，NVX-CoV2373与Novavax的专利皂苷基Matrix-M™佐剂配方。这种佐剂经过广泛测试，并已证明通过刺激抗原呈递细胞进入注射部位并在局部淋巴结中增强抗原呈递，从而增强免疫反应，具有强大且耐受良好的效果。这种基于蛋白质的疫苗候选物旨在教会免疫系统如何识别和对抗SARS-CoV-2病毒，提供针对COVID-19的保护。临床试验表明，NVX-CoV2373在预防COVID-19方面非常有效，总体有效率高达90%以上。获批后，NVX-CoV2373在抗击COVID-19中可能发挥关键作用，特别是在其他疫苗可能不太容易获得或有效的地区。世界上已经授权了几种COVID-19疫苗用于紧急使用，其中一些使用了佐剂。例如，AstraZeneca COVID-19疫苗使用MF59佐剂，这是一种角鲨烷油的水包油乳液，以增强疫苗的免疫反应。Sinovac COVID-19疫苗使用铝佐剂，这是一种帮助增强免疫反应的铝盐。 8.新型疫苗佐剂的发展 8.1.新型佐剂的设计原则 为了开发有效的佐剂疫苗，了解佐剂的工作原理并遵循一些设计原则非常重要。问题导向原则涉及考虑四个主要问题：(1)预防特定病原体引起的疾病所需的免疫反应类型，(2)能够诱导所需免疫反应的相关固有免疫细胞，(3)这些固有细胞亚群在体内的定位，以及(4)这些细胞上模式识别受体（PRRs）的表达。基于这些问题，在设计疫苗佐剂时需要考虑四个步骤。首先，应该确定疫苗效力在宿主中所需的免疫效应元素类型。这应该考虑到抗原类型、目标细胞亚群和表型、免疫途径，以指导选择传递系统和免疫刺激剂。由于PRRs是产生有效疫苗生成的关键靶点，因此在设计疫苗佐剂时，评估相关固有免疫细胞在体内的定位和目标细胞上的PRR表达非常重要。不同的PRR信号通路可能被用来开发针对不同侵略的定制响应。其次，合适的疫苗抗原的确定应该基于对免疫识别和保护的分子机制的理解。合适的抗原还应该能够在目标人群中实现疫苗诱导的响应。此外，疫苗必须向适当的细胞群体呈现足够数量的正确构象的抗原，以诱导免疫反应保护，同时考虑诱导的炎症反应的耐受性和安全性。第三，佐剂需要一个传递系统，无论是合成的还是天然的。这需要设计感兴趣的抗原的适当传递方式，结合相关的免疫刺激剂。第四，疫苗和佐剂的制备过程应该简单。例如，如果不需要特殊的乳化剂，生产过程就更加简单。如果佐剂与抗原的比例较低，可能会增加疫苗改进的范围。 8.2.新型疫苗的佐剂配方 已经为已获许可产品中包含的佐剂建立了几种配方方法。这些包括用作吸附剂的不溶性铝盐、易于注射的低油含量、油包水乳液和脂质体传递系统。虽然成分不同，但这些系统有一些显著的相似之处，因为它们都是作为纳米颗粒制造的。此外，这些系统可以作为抗原和免疫增强剂（包括TLR激动剂）的有效“传递系统”。适当选择佐剂的免疫刺激剂和配方组分对于诱导适当的免疫反应以控制目标病原体至关重要。同一免疫调节分子的不同配方可能会诱导大不相同的免疫反应，正如在疟疾疫苗计划中所证明的。例如，用AS02配方的RTS,S疫苗候选物保护了七个疫苗接种者中的六个免受感染，而相同的抗原与AS03或AS04分别只保护了七个中的两个或八个中的一个。为了构建改进的佐剂，确保每个组分都是必要的，并增加明确的价值，同时不引入重大的不合理责任至关重要。AS01目前在获许可产品中包含的最成功的佐剂，对带状疱疹的有效性>97%。AS01佐剂的开发基于两个关键组分，MPL和QS-21，当一起使用时会产生固有激活的协同作用。这种协同作用不能单独使用任一分子实现，并且开发了一种脂质体传递系统，将两种免疫增强剂共同传递给相同的免疫细胞群体。此外，脂质体配方在减少QS-21诱导显著局部和全身反应原性的潜力方面也是有效的。然而，新型系统疫苗学方法可以用来识别新的佐剂途径和配方，这些可以用来设计下一代佐剂。 8.3.推进系统疫苗学 Bali等人提出了一种基于系统疫苗学的跨学科方法，以加速临床中佐剂的发现和开发，该方法涉及早期使用人类研究来生成“组学”数据，这些数据可以用来制定关于候选佐剂如何刺激强大和持久的抗原特异性T和B细胞反应的新假设。然后可以在动物模型中重新测试这些假设，随之而来的机制见解可以用来设计新的佐剂概念。所提出的佐剂开发框架更加强调在它们的发展管道早期进行许多潜在佐剂概念的小型临床试验（0/I期），这可以快速测试新的佐剂并使用系统疫苗学方法获得机制见解。此外，系统疫苗学方法可以用来定义佐剂的作用机制，以及配方的作用基础机制，疫苗接种后不久发生的不良反应的潜在机制，以及疫苗传递的最佳配方的合理设计。总的来说，这种基于系统疫苗学的跨学科方法有潜力转变佐剂科学，并为疫苗中使用的新佐剂的开发注入活力。 8.4.非侵入性疫苗传递 非侵入性疫苗传递研究是一个关键焦点，可能对全球大规模疫苗接种活动产生重大影响。开发安全、有效、低成本的疫苗配方和佐剂，以产生期望的免疫反应和长期免疫，是一个优先事项。广泛的研究已经导致了几种新的佐剂的开发，这些佐剂目前正在临床试验中或已获许可。一个研究领域集中在开发安全并提高非侵入性传递疫苗效力的含脂佐剂。然而，需要更多关于佐剂分子刺激后细胞表面受体之间相互作用的信息，以及这些佐剂与现有或新型配方的兼容性。随着我们对免疫保护所涉及的分子机制的理解提高和合成化学中的新方法的发展，预计疫苗开发将取得突破。新的技术，如新的糖苷共轭方法、反向疫苗学和下一代测序技术，应该能够为带状疱疹病毒、百日咳毒素、莱姆螺旋体病和HPV等疾病带来新的疫苗策略，无论是否使用佐剂。研究界旨在通过引入新的免疫刺激剂和结合效力、持久记忆免疫反应和安全性的新型传递系统，确保高水平的广泛保护。这种新方法将不再仅仅依赖于结构疫苗学，因为目标表位的变异性和新病原体和肿瘤抗原的不断出现。 9.结论和展望 佐剂在疫苗开发中发挥了近一个世纪的关键作用，增强了免疫原性。最初，佐剂的选择主要是经验性的，但最近的进展导致了更有针对性和合理的方法。对免疫系统的更深入理解使更有效的疫苗配方的开发成为可能。本综述概述了疫苗中使用的佐剂，从传统到COVID-19疫苗，重点关注它们的类型、对免疫反应的作用机制，以及它们在疫苗配方中的作用。这些见解为选择适合传统和冠状病毒疫苗的佐剂奠定了基础。 了解各种佐剂对免疫反应的影响、它们与不同类型的抗原和疫苗平台的协同作用，以及对这些佐剂的全面分析，将有助于选择提供必要免疫保护的佐剂。像基于铝的盐、TLR激动剂、乳液和其他新型选择的佐剂具有独特的理化性质，显著影响免疫反应的强度、持续时间和类型。这些新型佐剂已经增强了流感疫苗和乙型肝炎和HPV疫苗。 随着COVID-19等新兴疾病的持续挑战以及寻找更明确的治疗方法，开发安全有效的疫苗至关重要。更有信息的佐剂和抗原选择不仅可以增强对传统疫苗反应不佳的人群的保护，还可以开辟预防应用之外的新途径。这种方法在应对当前和未来的全球健康挑战中可能至关重要。 为了推动人用及兽用疫苗行业交流，共同探讨该领域的最新研发进展、产业化现状及未来发展趋势，生物制品圈联合四叶草会展将于2024年8月16日-17日在苏州共同举办“第三届新型疫苗研发峰会”。诚邀全国相关领域专家、学者和企业家共享学术盛会。现将有关事宜通知如下。 名称：2024第三届新型疫苗研发峰会 时间：2024年8月16-17日（周五-周六） 地点：苏州（酒店定向通知） 主办单位：四叶草会展、生物制品圈 媒体支持：药时空、抗体圈、细胞基因研究圈 会议费用：点击二维码即可查询。 报名方式：扫描下方二维码→ 填写表格 → 报名成功（报名志愿者，免交报名费，承担一定工作任务）！ 转发分享福利：疫苗研发企业、科研院校和监管机构人员，前30位报名人员转发分享会议信息可免费参会（不含餐饮）报名后，扫描下方二维码加工作人员微信后，发送截图即可。 组委会获得报名信息后，根据报名信息进行初筛，并进一步与报名者沟通确认，实现精准邀请，最终有机会进入大会微信群（严格审核通过）。 大会日程 已经确定的报告人 识别微信二维码，添加生物制品圈小编，符合条件者即可加入 生物制品微信群！ 请注明：姓名+研究方向！ 版 权 声 明 本公众号所有转载文章系出于传递更多信息之目的，且明确注明来源和作者，不希望被转载的媒体或个人可与我们联系(cbplib@163.com)，我们将立即进行删除处理。所有文章仅代表作者观点，不代表本站立场。

摘要：Matrix-M™ 辅助剂是几种新型疫苗候选物的关键组成部分。Matrix-M 辅助剂由从莫拉树皮（Quillaja saponaria Molina）树中提取的两种不同的皂苷组分组成，与胆固醇和磷脂结合形成40纳米开放式笼状纳米粒子，具有强大的辅助活性和良好的安全性。Matrix-M 在注射部位和引流淋巴结诱导先天免疫细胞的早期激活。这转化为对抗原的抗体反应的增强幅度和质量、扩展的表位识别，以及诱导以Th1为主导的免疫反应。Matrix-M 辅助疫苗具有有利的安全性概况，并且在临床试验中耐受性良好。在这篇综述中，我们讨论了Matrix-M 辅助剂及其他基于皂苷的辅助剂的作用机制、功效和安全性的最新发现，特别关注了为预防2019冠状病毒病（COVID-19）而开发的严重急性呼吸综合征冠状病毒2（SARS-CoV-2）亚单位疫苗候选物NVX-CoV2373。 1.引言 由严重急性呼吸综合征冠状病毒2（SARS-CoV-2）引起的2019冠状病毒病（COVID-19）全球大流行，导致了前所未有的疫苗开发紧迫性和随后的大规模疫苗接种活动。Novavax开发了一种含有辅助剂的重组亚单位疫苗，针对SARS-CoV-2的刺突蛋白，即NVX-CoV2373（Nuvaxovid™）。这种疫苗在2/3期临床试验中耐受性良好且具有高效力。疫苗的免疫原性严重依赖于辅助剂Matrix-M™，它具有节省抗原剂量的特性，并促进强烈的体液和细胞免疫反应的诱导。在这篇综述中，我们将描述为什么这种辅助剂是NVX-CoV2373和其他新型疫苗的关键组成部分。 疫苗辅助剂是增强和调节抗原免疫原性的物质。由于它们能够激活先天免疫系统的组成部分，辅助剂增加了疫苗诱导的免疫反应的幅度，扩大了特异性，改变了体液和细胞特征，并改善了记忆反应。这些特性使得为传统疫苗失败或效力有限的目标人群（例如，婴儿、老年人和免疫受损人群）和传染病（例如，疟疾、带状疱疹和禽流感）开发疫苗成为可能。此外，辅助剂还可能有助于减少免疫个体所需的剂量数量或减少每剂所需的抗原量（剂量节省效应）。 对新型辅助剂的需求主要是由包含来自重组技术的高度纯化抗原的疫苗开发推动的，这些抗原特征更明确、更安全，但可能比减毒或灭活全细胞疫苗的免疫原性低。事实上，大多数旧的减毒活疫苗、灭活疫苗或类毒素疫苗是“自辅助”的，因为它们含有被先天免疫系统的细胞（如单核细胞、巨噬细胞和树突细胞）通过一系列所谓的模式识别受体识别的内在分子，称为病原体相关分子模式。相比之下，纯化的重组蛋白疫苗通常缺乏这些必要的微生物模式来触发先天免疫反应。向疫苗抗原中添加辅助剂可以通过吸引和激活抗原呈递细胞（APCs），在注射部位和/或引流淋巴结（dLNs）触发快速的先天免疫反应。APCs随后可以处理并呈递抗原给CD4+和CD8+ T细胞。这两种T细胞都能够提供细胞效应功能，CD4+ T细胞有助于发展成熟的适应性免疫反应。这种急性反应为创造可以持续数年的免疫记忆奠定了基础，并在随后的感染中更快地反应。通过修改提供给先天免疫系统的初始信号，辅助剂还影响诱导的针对疫苗抗原的适应性免疫反应的类型。 尽管辅助剂已经使用了超过一个世纪，但最广泛用于人类的辅助剂——铝盐、油包水乳液、基于皂苷的辅助剂（SBAs）和Toll样受体（TLR）激动剂——的作用机制仍然不完全清楚，动物模型可能无法完全反映在人类数据中发现的更微妙的情况。这篇综述提供了基于迄今为止为Matrix-M本身和其他SBAs生成的作用机制数据的皂苷基Matrix-M辅助剂效应的概述。 2.皂苷基辅助剂的简史 皂苷是一大类具有三萜结构和各种糖苷侧链的糖苷化合物。大多数用于疫苗辅助剂和食品的皂苷是通过从南美皂树皮树Quillaja saponaria Molina的树皮中可持续的过程提取的。这些树皮提取物含有数十种结构上不同的皂苷的混合物，具有不同的糖基化或酰化模式，也影响它们的生物活性。在可以纯化的数量众多的成分中，Q. saponaria Molina QS-21在结构和功能上都是最好的表征，并且与强大的辅助活性相关。然而，QS-21在碱性条件下化学不稳定，在体外显示溶血活性，并且与注射部位的立即疼痛相关。这些游离QS-21的限制可以通过将其纳入胆固醇颗粒中来减轻，就像在基于脂质体的辅助剂系统01（AS01）和军用脂质体配方Q（ALFQ）中所做的那样，或者与胆固醇和磷脂的组合，如免疫刺激复合物（ISCOMs）或Matrix-M纳米颗粒中。除了“抑制”皂苷溶血活性外，将配方制成纳米颗粒还允许将辅助剂靶向传递到吞噬细胞，从而集中刺激到适当的细胞。皂苷辅助剂也可以与其他类别的辅助剂协同作用，如TLR激动剂。这种特性在基于脂质体的辅助剂AS01中使用，它结合了QS-21和TLR4激动剂MPL（3-O-去酰基-4'-单磷酸脂A），这是来自Salmonella minnesota脂多糖的非毒性衍生物。QS-21和MPL组分增强了抗原特异性抗体反应，并促进了T细胞反应。AS01目前用于由GSK（比利时里克森）开发的疟疾和带状疱疹疫苗。皂苷和MPL的协同辅助效应也在使用皂苷和MPL纳入ISCOM纳米颗粒时看到。 ISCOMs最初由Morein及其同事开发，目的是通过与树皮提取物中的Quillaja皂苷共同配方，这些皂苷在这些提取物中具有辅助活性，以提高膜衍生病毒糖蛋白的免疫原性。ISCOMs的特征结构依赖于皂苷和胆固醇之间的强烈亲和力。ISCOMs是由Q. saponaria皂苷、胆固醇和磷脂形成的稳定颗粒，其中多个抗原副本被物理纳入皂苷和脂质的基质中。ISCOMs是直径40纳米的颗粒，具有典型的刚性笼状结构。ISCOMs诱导强烈且持久的抗原特异性体液和细胞免疫反应，包括CD4+辅助T细胞和CD8+细胞毒性T细胞。然而，ISCOM系统的一个限制是只有疏水性膜蛋白容易纳入ISCOMs而无需修改。在将更广泛的抗原纳入ISCOM颗粒时出现的制造挑战导致了即使没有抗原纳入也产生类似特征结构的发现。这些后来称为Matrix的复合物构成了一个强大的辅助剂，可以简单地与广泛的抗原混合。Matrix技术在ISCOMATRIX™（CSL有限公司，澳大利亚维多利亚帕克维尔）的商标下进一步发展。尽管抗原没有物理连接到颗粒上，但这些配方保留了ISCOMs诱导强烈体液和细胞免疫反应的能力，并且由于它们不仅限于疏水性膜蛋白，因此可能具有更广泛的应用。 ISCOM/ISCOMATRIX品牌技术由Isconova/Novavax AB（瑞典乌普萨拉）进一步发展，导致了Matrix-M配方的开发。Matrix-M辅助剂由两种不同人群的物理稳定纳米颗粒以一定比例混合而成（85% Matrix-A + 15% Matrix-C）。Matrix-A™和Matrix-C™含有具有互补特性的不同Q. saponaria皂苷分数。Matrix-C颗粒含有Fraction-C皂苷（主要由QS-21组成），具有强大的辅助活性，但在小鼠中具有反应原性，通过倦怠和致死性来衡量。Matrix-A颗粒含有Fraction-A皂苷，这些皂苷在相同剂量下具有比Fraction-C更弱的辅助活性，但在小鼠中更易耐受。这两种颗粒的组合经过测试，减少了在动物模型中观察到的反应原性，同时保留了辅助活性。此外，Matrix-M在2-8°C的水中稳定几年。Matrix-M是NVX2373 SARS-CoV-2重组刺突蛋白疫苗（Novavax）以及目前正在或已经进行评估的几种疫苗中使用的辅助剂（总结在表1中）。 3.皂苷基辅助剂如何工作？ 许多关于SBAs作用机制的见解是从使用AS01和ISCOMATRIX的小鼠模型中获得的。使用Matrix-M评估时，得到了类似的结果，表明有共享的机制。所提出的Matrix-M作用机制在图1中总结。 图 1. 提出的Matrix-M™佐剂的作用机制。A 面板。将含Matrix-M™的疫苗注射到肌肉中（事件1）导致在注射部位短暂招募和激活先天免疫细胞，包括抗原呈递细胞。Matrix-M的存在有助于抗原的摄取和运输到引流淋巴结（事件2），在那里招募和激活的免疫细胞所诱导的Matrix-M免疫环境导致增强的抗原呈递给CD4+和CD8+ T细胞（事件3）。激活的CD4+ T细胞随后分化为CD4+ T辅助（Th）1、Th2或T滤泡辅助细胞（Tfh）（事件4），后者支持生发中心的形成（事件5）。在这些生发中心中，激活的B细胞与Tfh和滤泡树突细胞（FDC）相互作用，并经历亲和力成熟和进一步分化（事件6）。这导致形成高亲和力和持久的抗体和记忆反应（事件7）。同样，也产生了CD4+ Th1和Th2以及CD8+ 记忆T细胞（事件8）。B 面板。在被抗原呈递细胞摄取后（事件1），Matrix-M佐剂和抗原定位到溶酶体（事件2），其中一部分抗原被蛋白酶降解。溶酶体内的酸性环境还允许释放“自由”的皂苷（事件3），这反过来有助于诱导溶酶体膜的通透性增加，并将完整和降解的抗原随后转移到细胞质中（事件4）。Matrix-M诱导共刺激分子和MHC分子的上调（事件5），从而促进两条途径的抗原肽呈递。来自溶酶体的抗原肽与MHC II类结合，呈递给CD4+ T细胞，而细胞质中完整抗原的降解允许与MHC I类结合，用于CD8+ T细胞的交叉呈递（事件6）。此外，Matrix-M诱导NLRP3炎症体的激活，导致IL-1β和IL-18的释放（事件7），以及其他细胞因子的产生和分泌（事件8）。Ag，抗原；DAMPs，损伤相关分子模式；FDC，滤泡树突细胞；GC，生发中心；IL，白细胞介素；MHCI/MHCII，主要组织相容性复合体I/II；TCR，T细胞受体；Tfh，T滤泡辅助细胞；Th，T辅助；TNF，肿瘤坏死因子；ROS，活性氧。 3.1.注射部位的早期事件 在肌肉注射AS01后，首先可以在肌肉间质中检测到皂苷，但它们不会在那里停留。在注射后24小时，皂苷和抗原在注射部位都检测不到，因此不太可能将仓库效应和抗原的缓慢释放作为一个重要的作用机制。使用SBAs免疫后的早期事件涉及在注射部位和引流淋巴结（dLN）产生化学因子和细胞因子。细胞因子的诱导是短暂的，细胞因子水平在48小时急剧下降，并在第7天返回基线。检测到的细胞因子包括免疫激活和免疫细胞分化的关键介质（干扰素-γ [IFN-γ]、白细胞介素[IL]-1β、IL-6和肿瘤坏死因子[TNF]-α）。值得注意的是，IFN-γ促进Th1细胞分化和抗体类别转换，并上调树突细胞上的MHC I类和II类表达，从而促进细胞介导的免疫诱导。此外，还产生了吸引先天免疫细胞如单核细胞和粒细胞（CXCL1和CCL2）或T细胞（CXCL9和CXCL10）的化学因子。这种细胞募集在注射部位的肌肉以及dLNs迅速且短暂地发生（下面进一步讨论）。在特定病原体自由的猪中进行的基因富集分析，这些猪接受了临床级Matrix-M辅助剂的研究等效物（AbISCOⓇ-100，Novavax AB），发现在注射部位和/或dLN中，参与炎症、先天免疫和抗原处理的基因，特别是干扰素和干扰素相关基因的上调，进一步支持了在小鼠中观察到的早期事件。 3.2.增强抗原递送和引流淋巴结的细胞性 除了将免疫细胞募集到注射部位外，在用SBAs辅助的疫苗肌肉注射后，dLN的细胞性也迅速增加。免疫细胞（主要是单核细胞、树突细胞和中性粒细胞）在注射Matrix-M辅助剂后不久被招募到dLNs，无论是否带有抗原。在AS01中，MPL和QS-21的组合与单独的抗原相比，诱导了强烈的单核细胞、中性粒细胞和不同亚型的传统DC人群的招募。最近描述的SBA，SMNP（皂苷/MPLA纳米颗粒），以组胺依赖的方式增加了淋巴流量。增加的淋巴流量允许抗原、辅助剂和激活的免疫细胞从注射部位快速排出到dLN。实际上，使用荧光标记的QS-21（与MPL一起配制成AS01）的研究表明，辅助剂和抗原可以在免疫后的早期时间点（0.5和3小时）在注射部位和dLN轻易检测到，但在24小时后仅在dLN。通过局部招募炎症细胞和/或增强淋巴流量，将抗原和辅助剂快速输送到dLN，与观察到的SBAs的辅助剂效应的空间时间共定位是一致的。当抗原在AS01后24-72小时给药，或者当抗原和辅助剂在对侧肢体注射时，辅助剂效应被抑制，抗原特异性反应与未辅助的抗原获得的反应没有显著差异。这种SBAs效应的定位，也已在Matrix-M中显示，表明SBAs的作用取决于将抗原和激活的免疫细胞集中在同一个部位，而不是诱导全身反应。与非SBAs的直接比较，包括氢氧化铝、完全弗氏佐剂（由于其毒性，仅限于非人类使用，是矿物油与杀死的结核菌混合）、和AS03（含有角鲨烷和α-生育酚的油包水乳液），Matrix-M辅助剂处理的小鼠dLNs更大，总细胞计数更高，因此表明这些动物中的强免疫激活集中在dLNs。这些发现表明，Matrix-M辅助剂节省抗原剂量的能力可能依赖于将抗原输送到dLNs，在那里辅助剂已经为最佳激活和诱导强抗原特异性适应性免疫反应“奠定了舞台”。Matrix-M辅助剂诱导的dLNs白细胞募集在注射后48小时达到峰值。AS01观察到类似的动力学。在猪中也观察到dLN活性增加，其中Matrix-M辅助剂诱导dLNs增大，从而表明细胞募集和/或增殖。 3.3.炎症体激活 细胞对SBAs（如QS-21）和抗原的摄取是发生在注射部位（随后细胞运输）还是在dLN（通过淋巴自由流动）中，或两者的结合，目前尚不完全清楚。然而，关于摄取辅助剂颗粒的细胞发生了什么，我们有更多的了解。通过胆固醇依赖机制介导的细胞摄取SBAs，随后运输到溶酶体。虽然Quillaja皂苷与Matrix-M辅助剂中的胆固醇在中性缓冲液中非常稳定，但在溶酶体中较低的pH下这种结合似乎迅速分解。从Matrix-M颗粒中释放的游离皂苷可能随后引起溶酶体膜不稳定，导致溶酶体酶和内吞抗原渗漏到APCs的细胞质中。这似乎触发了炎症体激活，以及Syk-和cathepsin B依赖的细胞激活和细胞因子产生。此外，皂苷诱导的溶酶体膜不稳定产生活性氧，这反过来可以促进炎症体激活。炎症体是细胞质中的多蛋白复合物，在先天免疫中发挥重要作用。在对感染和细胞损伤做出反应时，炎症体通过caspase-1激活介导促炎细胞因子IL-1β和IL-18的成熟和分泌。这两种细胞因子可以增强NK细胞激活（从而产生IFN-γ）和Th1反应。因此，它们对消除病毒等细胞内病原体至关重要，因此是疫苗的重要靶点。事实上，ISCOMATRIX和AS01都可以在APCs中强烈激活NLRP3炎症体，从而产生IL-1β和IL-18。在与MPL联合给药的研究等效物Matrix-M，AbISCO-100中也观察到了类似的NLRP3依赖的IL-1β释放。然而，NLRP3在不同的小鼠模型中似乎可有可无，这表明体内可能涉及其他途径。 3.4.抗原呈递细胞的激活和交叉呈递 除了白细胞募集外，在dLNs中早期时间点还发生了免疫细胞的增强激活。注射Matrix-M辅助剂的小鼠dLNs表现出表达T细胞共刺激分子CD86和早期激活标志物CD69的DCs频率增加，以及表达CD69的中性粒细胞和巨噬细胞频率增加。这些效应在测试的非SBAs中没有观察到，并且不依赖于抗原的存在。此外，在用Matrix-M辅助的流感血凝素（HA）疫苗免疫的小鼠的dLNs中，发现表达CD86和CD69的B细胞、DCs和单核细胞数量增加。因此，激活的抗原呈递细胞已准备好向T细胞呈递抗原并激活它们。灭活或亚单位疫苗中的抗原通常被APCs摄取并像其他细胞外材料一样处理，结果在MHC-II上呈递并激活CD4+ T细胞。 CD8+ T细胞可以攻击和破坏感染的宿主细胞，有助于抵御病毒和其他细胞内病原体。然而，CD8+ T细胞的激活需要在MHC-I分子的背景下呈递抗原，病原体蛋白的处理和装载发生在宿主细胞的细胞质中。实现这一点通常对灭活或亚单位疫苗来说很困难，因为它们倾向于在溶酶体室中被降解，因此仅在MHC-II分子的背景下呈递。然而，上述由SBAs释放的游离皂苷引起的溶酶体膜不稳定可能有助于抗原从吞噬溶酶体转移到细胞质，从而使得抗原交叉呈递在MHC-I上并激活CD8+ T细胞。事实上，小鼠模型的实验已经证明SBAs确实通过诱导抗原从内吞体转移到细胞质来促进DCs中外源抗原的交叉呈递，更具体地说是通过PKR样内质网激酶（PERK）途径。在测试的不同辅助剂中（包括SBAs和非SBAs），Matrix-C，Matrix-M辅助剂的一个组成部分，对交叉呈递的影响最大。SBAs特别在体外和体内诱导CD11b+ DC亚群中细胞内脂质体（围绕中性脂质核心的磷脂单分子层）的增加。这些脂质体对交叉呈递和随后有效的交叉启动CD8+ T细胞至关重要。Matrix-M辅助剂预计将共享通过皂苷介导的吞噬溶酶体渗透来促进交叉呈递的相同能力。事实上，在使用Matrix-M辅助的NVX-CoV2373疫苗接种后，已经在小鼠和人类中证明了特定的CD8+ T细胞反应。值得注意的是，人类CD8+ T细胞反应在第一次或第二次疫苗接种后在较小比例的受试者中被检测到。然而，这些反应与抗原特异性CD4+ T细胞反应相关。此外，最近比较了NVX-CoV2373、两种mRNA疫苗和一种腺病毒载体疫苗（均针对SARS-CoV-2）之间的CD8+ T细胞反应，发现NVX-CoV2373的反应者频率与其他疫苗平台相比略低。然而，抗原特异性记忆CD8+ T细胞的频率在6个月时与SARS-CoV-2康复个体中相当。这表明Matrix-M可以跨越界限诱导CD8+ T细胞反应，然后可以通过丰富的CD4+ T细胞反应来放大。值得注意的是，人类CD8+ T细胞反应也在使用ISCOMATRIX辅助疫苗中观察到。 3.5.增强体液免疫和记忆反应 SBAs诱导高滴度的抗原特异性抗体，这是疫苗接种所期望和重要的结果。这些抗体是生发中心相互作用的产物，包括B细胞以及T滤泡辅助（Tfh）细胞。我们的研究表明，Matrix-M辅助的疫苗是生发中心B细胞和Tfh细胞的强大诱导剂，并且形成了长寿命的浆细胞。强烈的生发中心反应也在使用其他SBAs如AS01、SMNP和ISCOMATRIX时观察到。 使用ISCOMATRIX的研究进一步了解了Matrix-M对体液免疫反应的影响。分析在有或没有ISCOMATRIX的情况下，使用昆虫杆状病毒/Sf9衍生的流感A/H7N9病毒样颗粒（VLP）疫苗接种的先前未接触过的人类中发展出的抗体谱系显示，ISCOMATRIX促进了表位扩散和抗体亲和力成熟。这与增强的血凝抑制（HAI）和中和抗体滴度相关，表明ISCOMATRIX降低了免疫细胞的表位识别阈值，并扩大了独特表位的数量。类似地，使用Matrix-M辅助的新型季节性流感重组HA亚单位疫苗在雪貂中诱导了对多种历史流感病毒株的交叉中和和保护性抗体反应。这表明诱导了对保守的广泛中和流感HA表位的强大抗体反应，以及对未来漂移株交叉保护反应的潜力。虽然尚未正式证明，但Matrix-M很可能在人类中具有相同的能力，以促进表位扩散和抗体亲和力成熟，从而引发对抗原的持久、高亲和力和广泛免疫反应。 3.6.增强细胞介导免疫和记忆反应 CD4+ Th细胞首先通过与MHC-II结合的抗原呈递以及共刺激信号被激活，但依赖于局部细胞因子景观来极化反应。Th1和Th2 CD4+ T细胞都支持B细胞的克隆扩增并推动抗体类别转换，尽管是不同的亚型。通过分泌促炎细胞因子IL-2、IFN-γ和TNF-α的不同组合，Th1细胞还可以促进对细胞内病原体重要的细胞介导免疫。另一方面，Th2细胞的特征是分泌IL-4、IL-5、IL-10或IL-13，这促进了对抗细胞外病原体的最佳抗体介导的免疫反应。因此，诱导平衡或Th1偏向的CD4+ T细胞反应在疫苗开发中可能很重要，特别是当目标是病毒或其他细胞内病原体时。此外，强烈的Th2偏向反应实际上可能是有害的。这样的反应被假设为是疫苗诱导的RSV疾病在未接触的婴儿中增强的原因（如Carroll和同事所综述）。 ISCOMs和Matrix-M辅助剂在动物模型中诱导强烈的Th1偏向CD4+反应以及明显的细胞毒性（CD8+）T细胞反应。事实上，Matrix-M一贯表现出强大的能力，在不同的疫苗中，包括针对SARS-CoV-2、流感、西尼罗河和埃博拉病毒的亚单位疫苗，诱导高水平的抗原特异性IL-2和IFN-γ产生。此外，在使用Matrix-M辅助剂免疫的小鼠中，诱导了分泌IFN-γ、IL-2和/或TNF-α的多功能记忆CD4+和记忆CD8+ T细胞。接种流感抗原的小鼠脾细胞在体外重新刺激时产生Th1和Th2细胞因子，也证明了平衡的Th1/Th2记忆的产生。 在接种AS01辅助疫苗后几小时，淋巴结驻留细胞，主要是NK细胞，在dLN中释放IFN-γ。这种产生与抗原无关，由巨噬细胞通过炎症体激活后IL-18的分泌控制，并由IL-12支持。MPL和QS-21都有助于dLN中的转录反应以及在疫苗接种的最早阶段IFN-γ的产生。这种IFN-γ的产生对于促进对AS01辅助抗原的多功能Th1偏向抗原特异性CD4+ T细胞反应至关重要。 4.Matrix-M辅助剂从临床前到临床开发 基于皂苷的辅助剂，特别是Matrix-M，具有独特的能力，可以增强抗体反应的幅度和质量，并同时诱导由Th1主导的CD4+反应组成的细胞免疫，如在使用不同疫苗候选物在动物模型和人类中所证明的那样。此外，越来越多的证据表明，也诱导了CD8+ T细胞反应。总的来说，这些反应转化为高疫苗效力。Matrix-M辅助剂这种独特能力的一些例子如下。 4.1.SARS-CoV-2 由SARS-CoV-2引起的持续COVID-19大流行是一个持续的重大公共卫生问题。尽管基于mRNA和复制无能力的腺病毒载体的疫苗已经在全球获得授权，但COVID-19疫苗的制造和分发需要以前所未有的规模实现。截至2022年10月，全球人口的约68% - 超过40亿人 - 迄今至少接受了一剂COVID-19疫苗，但只有22%的低收入国家人员。 Novavax开发了一种基于SARS-CoV-2刺突纳米颗粒的疫苗候选物，该候选物基于以前在小鼠中使用Matrix-M辅助的重组纳米颗粒疫苗针对2003年出现的严重急性呼吸综合征冠状病毒（SARS-CoV）和2012年出现的中东呼吸综合征冠状病毒（MERS-CoV）的经验。接种这些疫苗的BALB/c小鼠针对SARS-CoV和MERS-CoV的相应刺突蛋白产生了高滴度的中和抗体。此外，MERS-CoV纳米颗粒疫苗在小鼠体内完全阻断了MERS-CoV在肺部的复制并保护了小鼠免受感染。 NVX-CoV2373是一种由重组SARS-CoV-2（rSARS-CoV-2）刺突糖蛋白（GP）组成的纳米颗粒疫苗候选物，该蛋白从武汉菌株（GenBank基因序列MN908947，核苷酸21563-25384）的全长野生型序列中构建，针对杆状病毒/Sf9昆虫细胞表达系统进行了优化，稳定在前融合构象，并用Matrix-M辅助。在小鼠和非人灵长类动物模型中，NVX-CoV2373诱导了高抗刺突抗体滴度，这些抗体阻止了与宿主细胞上的人类血管紧张素转换酶2（hACE2）受体的结合。在小鼠脾脏中，NVX-CoV2373还诱导了多功能CD4+和CD8+ T细胞、CD4+ Tfh细胞和抗原特异性生发中心B细胞。在接种rSARS-CoV-2刺突与Matrix-M的动物中，分泌IFN-γ、TNF-α和IL-2（即经典Th1细胞因子）的抗原特异性CD4+和CD8+ T细胞的频率增加显著大于分泌IL-4和IL-5的细胞（即Th2细胞因子）。这与接种rSARS-CoV-2刺突单独的动物所见的模式形成对比，并证实Matrix-M诱导了Th1优势反应。 在小鼠、仓鼠和非人灵长类动物中，NVX-CoV2373诱导的抗体中和了野生型病毒，并保护了对SARS-CoV-2挑战，没有证据表明疫苗相关的增强性呼吸道疾病。在检查的地方，CD4+ T细胞反应在每个物种中都表现出平衡或Th1优势表型。接种NVX-CoV2373的猕猴在其呼吸道中几乎没有或没有可检测到的复制SARS-CoV-2，并在鼻内和气管内挑战后免受上呼吸道感染和肺部疾病的保护。此外，对野生型病毒的中和超过了在人类恢复期血清中测量的反应幅度。 基于这些有希望的结果，NVX-CoV2373已在临床试验中进行了评估。进行了一项随机对照的1-2期试验，以评估安慰剂或NVX-CoV2373两次肌肉注射在健康成年人中的安全性和免疫原性。两种不同的rSARS-CoV-2刺突蛋白剂量（5或25微克）被评估，都带有（两种剂量）或不带有（仅25微克）Matrix-M辅助剂。两种Matrix-M辅助的rSARS-CoV-2刺突蛋白剂量都诱导了高水平的免疫反应，其中中和抗体水平与抗刺突IgG密切相关。在接种疫苗后35天，NVX-CoV2373激发的中和抗体反应超过了在COVID-19住院患者中观察到的COVID-19恢复期血清中的那些。Matrix-M辅助剂对体液和T细胞反应的幅度以及功能性抗体的诱导有明显影响。Matrix-M诱导了偏向Th1表型的CD4+ T细胞反应。此外，5微克和25微克辅助疫苗方案的免疫反应相似，表明Matrix-M具有节省抗原剂量的能力。 NVX-CoV2373临床效力的首批结果来自在南非进行的2b期和在英国进行的3期试验。与首次评估mRNA疫苗和复制无能力腺病毒载体效力的试验不同，这些试验的时机允许在事后分析中确定疫苗对原始SARS-CoV-2武汉株以及两种令人关注的新兴变体的效力。这些试验证明了NVX-CoV2373对由原始SARS-CoV-2引起的PCR确认的症状性COVID-19的非常高的效力（96.4%；95% CI，73.8%-99.5%）。这种高效力在维持对更具传染性的B.1.1.7变异株（阿尔法）的效力时（86.3%；95% CI，71.3%-93.5%），以及在较小程度上对高度逃逸的B.1.351变异株（贝塔）的效力时（51.0%的所有参与者；95% CI，-0.6%至76.2%和60.1%在18-84岁的HIV阴性参与者中）。在美国和墨西哥进行的大型3期、随机、安慰剂对照试验中发现了类似的结果，该试验在2021年上半年评估了近30000名未有严重SARS-CoV-2感染史的成年人中的NVX-CoV2373的效力和安全性。在3个月的时间里，疫苗效力为90.4%（95% CI，82.9%-94.6%；p < .001）。对中度至重度疾病的疫苗效力为100%（95% CI，87.0%-100%），对任何由关注或感兴趣的变体引起的疾病为92.6%（95% CI，83.6%-96.7%），阿尔法变体是研究期间识别的主要病毒基因组。因此，NVX-CoV2373代表了用于控制不同SARS-CoV-2菌株引起的COVID-19大流行的另一个非常有效的疫苗。 4.2.疟疾 领先的疟疾疫苗候选物RTS,S（Mosquirix™, GSK）由AS01辅助的VLPs组成，包含一个由重复序列和恶性疟原虫环孢子蛋白（CSP）的T细胞表位域与乙型肝炎表面抗原（HbsAg）连接的重组融合蛋白，以及HbsAg。在5-17个月大的儿童中进行的大型3期试验中，效力在第一年为56%，而在48个月的中位随访期间仅为36%（95% CI，32-41）。 为了提高对疟疾的保护性免疫，开发了第二代RTS,S样疫苗候选物，称为R21。与RTS,S VLPs相比，R21颗粒包含一个单一的CSP-HBsAg融合蛋白，导致VLP表面上的CSP抗原密度高于RTS,S。在BALB/c小鼠中使用不同的辅助剂评估了R21的免疫原性。R21在低剂量0.5微克时具有免疫原性，并诱导了非常高水平的CSP特异性抗体，但与RTS,S相比，它只诱导了最小的HBsAg抗体。R21诱导的CSP特异性抗体滴度在使用AbISCO-100、Matrix-M和基于角鲨烯的水包油乳液时比使用多阴离子羧甲基聚合物（Carbopol™）和氢氧化铝基辅助剂（Alhydrogel™）更高，但在使用AbISCO-100或Matrix-M后R21的T细胞诱导显著更高。R21在使用AbISCO-100或Matrix-M时对转基因孢子虫挑战引起了无菌保护，但在评估的其他任何辅助剂时则没有。 在这些临床前结果之后，R21与Matrix-M结合用于临床开发。在英国进行的2a期试验中，使用健康成年人的控制人类疟疾感染，3剂R21/Matrix-M在4周间隔给予，展示了高无菌效力（81.8%；n = 11）预防P. falciparum寄生虫病。在布基纳法索进行的另一项2期试验中，该地区是高传播的疟疾流行区，评估了5-17个月大儿童中的R21（5微克）与两种不同剂量的Matrix-M（25或50微克）的组合。R21/Matrix-M疫苗在第三次接种后28天产生了高滴度的疟疾特异性抗体，使用最高剂量的Matrix-M几乎翻了一番。这种反应转化为25微克Matrix-M的74%（95% CI，63%-82%）效力和50微克Matrix-M的77%（95% CI，67%-84%）效力。这种高效力在使用最高剂量Matrix-M的儿童中维持了12个月，效力为77%（95% CI，67%-84%）。尽管抗CSP抗体滴度随时间下降，但在第三次剂量后12个月给予的加强剂量使抗体水平恢复到接近峰值。该试验的后续研究表明，在初次接种系列后的2年内和加强剂量后的1年内，高疫苗效力对临床疟疾发作保持了。目前正在五个非洲国家进行3期临床试验，这些国家的疟疾传播和季节性各不相同。 4.3.季节性流感 与最近才部署的SARS-CoV-2和疟疾疫苗相比，流感疫苗自20世纪50年代以来就已经在使用。然而，为了解决限制现有流感疫苗有效性的差距，包括通过传统的基于鸡蛋的生产工艺在疫苗病毒血凝素中诱导的鸡蛋适应性抗原变化、高度株特异性反应以及老年人亚优的T细胞反应，正在研究各种策略来开发具有更广泛保护和更高有效性的新型疫苗，包括添加佐剂的重组蛋白和病毒载体疫苗。Novavax开发了一种在Spodoptera frugiperda Sf9昆虫细胞/杆状病毒系统中生产的重组基质M-佐剂HA纳米颗粒流感疫苗候选物（NIV）。在雪貂中，与基质M一起施用的三价NIV（tNIV）引发的血凝抑制（HAI）和微中和（MN）抗体反应明显高于由鸡蛋生产的许可三价高剂量灭活流感疫苗（IIV3-HD；Fluzone™ High-Dose）对同源A(H3N2)、A(H1N1)和B株病毒所诱导的反应。带有基质M的三价NIV还诱导了针对近20年流感季节（2000-2017）的一系列流感A(H3N2)亚型的HAI和MN抗体，而IIV和IIV3-HD诱导的反应则主要针对同源菌株。竞争抗体研究表明，用基质M佐剂的重组血凝素纳米颗粒诱导对几个高度保守的HA头和干广谱中和HA表位的反应，因此对同源和抗原漂移菌株具有高度交叉中和作用。在2期临床试验中，基质M佐剂的四价NIV（qNIV）对同源和几种漂移的A(H3N2)株引发的HAI抗体反应高于未佐剂的qNIV或IIV3-HD。与IIV3-HD和许可的四价重组疫苗（RIV4；FluBlok™）相比，观察到对疫苗同源和漂移的A(H3N2)病毒的多功能CD4+ T细胞反应显著增加。在65岁及以上健康成年人中进行的3期免疫原性试验表明，qNIV在针对四种同源菌株的HAI抗体反应方面与许可的IIV4具有免疫学非劣性。然而，当使用野生型血凝素进行HAI抗体反应评估时，一种更具生物学和临床意义的检测格式，qNIV对4种同源A(H3N2)株（24%-66%的提高）和6种抗原性不同的A(H3N2)株（34%-46%的提高）的HAI抗体反应高于IIV4。此外，qNIV在接种后7天内诱导了明显更高的总和效应（记忆）CD4+ T细胞特异性针对A(H3N2)和B/Victoria株HA表位，与IIV4相比增加了126%-189%。这些CD4+效应T细胞中的大多数产生了多种Th1表型细胞因子。值得注意的是，即使在基线CD4+ T细胞反应较低的参与者中，接种qNIV后也诱导了显著的多功能CD4+ T细胞反应，与IIV4组形成鲜明对比。总的来说，这些结果表明，在当前血凝素快速进化的背景下，基质M佐剂的qNIV可能比目前许可的流感疫苗更有效，特别是在老年人这一高风险人群中，因为它诱导了广泛交叉反应的抗体和多功能CD4+ T细胞反应，针对潜在的未来漂移菌株。 4.4.大流行流感 在临床前的小鼠研究中，作为VLPs（病毒体疫苗）配制的基质M佐剂A(H5N1)疫苗比单独的疫苗诱导了更高水平的多功能CD4+ T细胞和对致病性A(H5N1)挑战的保护。在成年人中进行的1期临床试验表明，基质M显著增强了CD4+ Th1反应（通过细胞内染色测量IL-2、IFN-γ和TNF-α）和血清保护率，与单独的A(H5N1) VLPs相比，表明了剂量节约效应。此外，基质M增强了长期Th1反应。尽管尚未针对基质M进行证明，但评估流感A(H7N9) VLPs的临床试验也表明，ISCOMATRIX具有剂量节约能力，用于诱导功能性HAI和神经氨酸酶抑制抗体。 4.5.埃博拉病毒 在2013年至2016年间几个西非国家发生大规模埃博拉疫情之后，Novavax开发了一种与基质M配制的重组埃博拉病毒（EBOV）GP纳米颗粒疫苗。在BALB/c小鼠中，与基质M共同施用的EBOV GP在抗原特异性IgG、病毒中和滴度和细胞反应方面，比与磷酸铝或未加佐剂的GP共同施用的GP更具免疫原性。值得注意的是，与其他系统中观察到的结果一致，EBOV GP/基质M配方将未加佐剂或磷酸铝加佐剂GP抗原的Th2优势反应（由其最小的IgG2a抗体产生所指示）转变为平衡的Th1/Th2 CD4+ T细胞反应（由类似的IgG1和IgG2a GP特异性抗体水平所指示）。用EBOV GP/基质M免疫的小鼠对致命病毒挑战的保护率为100%，而只有10%的小鼠用EBOV GP抗原单独保护，用磷酸铝则没有保护。有趣的是，在猕猴中评估EBOV GP与基质M的两项研究表明，抗GP IgG抗体与疫苗接种后的存活结果之间存在相关性。在首次人体试验中，230名健康成年人接受了安慰剂或四种不同剂量的EBOV GP抗原，作为1剂或2剂方案，有或没有基质M。用两剂EBOV GP/基质M免疫引发了GP特异性IgG反应的快速而有力的增加，这种反应持续了1年，以及在野生型病毒和假病毒基础上的中和抗体。这些反应在6.5至50μg的抗原剂量上无法区分，表明基质M具有强大的抗原剂量节约能力。 5.含Matrix-M佐剂的疫苗具有良好的耐受性和可接受的安全性概况 截至2022年2月，含Matrix-M佐剂的疫苗已在美国、墨西哥、欧洲、非洲和澳大利亚的29项临床试验中对超过37,000名个体进行了接种（数据存档）。在这些试验中，短期反应原性（包括局部和全身反应）的受试者比例，在Matrix-M配方的接受者中高于未加佐剂配方或安慰剂的接受者。然而，反应大多是轻度至中度强度和短暂的（≤2天），并且代表了在接种后前7天主动寻求的典型疫苗反应原性症状。在接种这些疫苗后6个月至1年的临床试验受试者中，没有发现任何器官系统中自发报告的不良事件的显著不成比例。在评估NVX-CoV2373的两项3期试验中，分别有15,187名和29,949名参与者，确认了1-2期试验中观察到的有利安全性概况。注射部位触痛和疼痛、疲劳、头痛和肌肉疼痛是最常报告的寻求反应。注射后7天内的发热很少报告（<5%），39°C以上的发热很少见（<1%）。反应在第二次剂量后比第一次更常见，在18-64岁的参与者中比65岁及以上的参与者更常见。5 未寻求的不良事件的频率在接受疫苗的人群中高于接受安慰剂的人群中（25.3%对20.5%），但这种差异的大部分是由与反应原性反应一致的事件构成的。严重不良事件的频率很低，两组之间相似（每组0.5%）。没有死亡归因于NVX-CoV2373。此外，在在美国和墨西哥进行的大约3个月的3期试验安全随访期间，没有报告其他COVID-19疫苗的观察到的安全信号。实际上，在临床计划中没有观察到过敏反应或格林-巴利综合征的事件，也没有观察到心肌炎、心包炎和疫苗诱导的免疫性血栓性血小板减少症的不平衡。此外，没有发现疫苗相关的增强型COVID-19的证据。与所有新型佐剂一样，监管机构继续监测触发免疫介导疾病发作或恶化的可能性。尽管在临床试验中指示研究人员报告广泛的潜在免疫介导疾病，但迄今为止，在临床试验中接受含Matrix-M佐剂疫苗的受试者中没有观察到此类疾病的过量发生。 在NVX-CoV2373获得紧急和有条件的市场授权后，收到了过敏反应、心肌炎和心包炎的报告。这些事件被认为是NVX-CoV2373疫苗的风险，但由于这些事件是自愿报告的，目前它们的频率未知。心肌炎和心包炎在不含Matrix-M的其他SARS-CoV-2疫苗（即mRNA和腺病毒载体）后发生，因此可能是与刺突蛋白目标抗原相关的类别效应；而过敏反应在许多疫苗后以低频率发生，无论是否加佐剂。这些事件在这里呈现是为了完整性，但它们与Matrix-M的关系是不确定的。 总之，尽管迄今为止在含Matrix-M佐剂的疫苗的临床试验中没有发现特定的安全问题，但NVX-CoV2373的安全性概况仍在通过市场后监测继续进行监测。 6.结论 在过去20年中，Matrix-M已被证明是一种稳定且有效的佐剂，能够增强对各种亚单位抗原的免疫反应，无论是在临床前模型还是临床试验中。Matrix-M特别能够在dLNs中为抗原呈递创造一个有利的免疫学环境，这反映在APCs和白细胞的快速招募和激活上。通过炎症体途径的激活，至少部分介导的先天免疫细胞的激活，导致不同细胞因子和趋化因子的产生，包括早期产生的IFN-γ，这对于促进Th1 CD4+ T细胞反应至关重要。因此，Matrix-M能够改善对抗原的抗体反应的幅度和质量，包括通过阻断病原体宿主结合相互作用和在许多系统中的中和来评估功能性抗体（即季节性和大流行性流感病毒、埃博拉病毒、SARS-CoV、MERS-CoV和SARS-CoV-2）。Matrix-M还能够诱导强烈的Th1优势免疫反应，产生IFN-γ、IL-2或TNF-α的多功能Th1偏向性CD4+ T细胞，如流感、埃博拉和SARS-CoV-2疫苗所示。Matrix-M还具有通过抗原交叉呈递诱导CD8+ T细胞反应的潜力，正如最近在人类中的一项研究所支持的。含Matrix-M的疫苗促进了对更广泛保守表位的认识，因此有可能诱导广泛的交叉反应性免疫反应，正如观察到的流感或SARS-CoV-2疫苗。这种含Matrix-M佐剂疫苗的强大免疫原性转化为高疫苗效力，正如在公认的流感和SARS-CoV-2小鼠模型、埃博拉病毒的非人类灵长类动物挑战模型中的表现，以及最近在两项大规模3期试验中为NVX-CoV2373疫苗候选物提供的大约90%的COVID-19症状预防效力的相互支持的估计。此外，Matrix-M具有抗原剂量节约能力，如SARS-CoV-2、疟疾和埃博拉所显示的，这有助于减少每剂所需的抗原量或实现足够保护所需的疫苗接种次数，从而在大流行情况下显著增强全球疫苗供应。最后，含Matrix-M的疫苗具有良好的安全性概况，并且易于耐受。总的来说，这些数据表明Matrix-M符合新型佐剂的所有标准，因此在未来，特别是在持续的COVID-2019大流行背景下，有潜力在公共卫生中发挥重要作用。 为了推动人用及兽用疫苗行业交流，共同探讨该领域的最新研发进展、产业化现状及未来发展趋势，生物制品圈联合四叶草会展将于2024年8月16日-17日在苏州共同举办“第三届新型疫苗研发峰会”。诚邀全国相关领域专家、学者和企业家共享学术盛会。现将有关事宜通知如下。 名称：2024第三届新型疫苗研发峰会 时间：2024年8月16-17日（周五-周六） 地点：苏州（酒店定向通知） 主办单位：四叶草会展、生物制品圈 媒体支持：药时空、抗体圈、细胞基因研究圈 会议费用：点击二维码即可查询。 报名方式：扫描下方二维码→ 填写表格 → 报名成功（报名志愿者，免交报名费，承担一定工作任务）！ 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