CD32A

体外制造T细胞策略在制备过程和成本上面临极大挑战，限制了其可及性。为了解决这些问题，近年来研究人员积极探索和开发体内制造CAR-T细胞疗法，已有疗法进入临床阶段。 2024年8月，“柳叶刀发现科学（Lancet Discovery Science）”系列杂志之《eBioMedicine》杂志发布了一篇题为“Advancements and challenges in developing in vivo CAR T cell therapies for cancer treatment”的文章。该文章总结了癌症治疗中体内制造CAR-T细胞疗法的最新进展与挑战。 1 体外CAR-T疗法和 体内CAR-T疗法简介 除了要克服治疗中的主要困难（如CRS和免疫逃逸）外，体外CAR-T疗法在产业化发展和制备工艺方面存在重大挑战。首先，体外制造CAR-T疗法涉及T细胞分离、改造和体外扩增，然后再重新注入人体（图2），其过程耗时且复杂，持续数周。这一较长的周期不利于因癌症快速进展而需要紧急治疗的患者。 此外，这种制造过程还带来了物流和安全挑战，需要将患者的细胞运送至专业的制造设施。它在技术上要求高且成本昂贵。 图2 | 体外CAR-T疗法过程示意图 体内制造CAR-T疗法利用包含基因编辑工具的递送载体，直接在患者体内将T细胞改造成CAR-T细胞（图3）。与体外CAR-T疗法相比，体内CAR-T疗法有望降低生产成本，缩短周转时间，并为患者提供更大的便利。 图3 | 体内CAR-T疗法过程示意图 多种基因编辑系统被用来转导原代T细胞，使之稳定表达CAR。这些包括转座子、锌指核酸酶（ZFNs）、转录激活因子效应核酸酶（TALENs）和CRISPR系统。在这四种编辑工具中，转座子、ZFN和CRISPR系统同时适用于体内和体外制造CAR-T细胞。 2 体内制造CAR-T细胞的递送系统及 靶向T细胞递送CAR构建物的进展 体内递送CAR需要满足一定的标准，包括精确的T细胞靶向、高效的基因编辑和低毒性。目前，病毒载体和纳米载体被广泛探索用于体内递送CAR构建物（图4）。 图4 | 体内制造CAR-T细胞的递送载体 用于CAR-T细胞疗法的病毒载体，通常通过瞬时转染源质粒到HEK-293T或生产病毒的细胞系中，将CAR基因克隆到病毒载体来制备。对于体内制造CAR-T细胞，这些病毒载体可以进一步工程化，通过结合T细胞靶向配体来特异性靶向T细胞。 这些配体可以通过基因融合到病毒包膜蛋白上，或通过化学偶联附着在病毒载体上。精确靶向T细胞是影响体内CAR-T疗法效果和安全性的关键因素。使用病毒载体和纳米载体开发靶向T细胞递送CAR策略和体内CAR-T疗法的实验结果列在表1中。 表1 | 体内CAR-T治疗癌症的临床前研究 3 病毒载体 用于体内制造CAR-T细胞的主要病毒类型包括慢病毒、逆转录病毒和腺相关病毒（AAV）。 Pfeiffer等人首次通过注射靶向CD8+ T细胞的慢病毒载体（LV）来递送CD19-CAR，直接在体内制造CAR-T细胞。Michels等人（VivoVec）开发了抗CD3的scFv修饰的LV，用于在体内CD3+ T细胞中构建抗CD19 CAR。 Agarwalla等人开发了一种可植入的多功能支架，该支架能够同时装载患者来源的T细胞和编码CD19的逆转录病毒颗粒，用于体内制造CAR-T细胞，将整个过程缩短至一天。这种支架通过皮下植入后，αCD3和αCD28介导细胞激活，白介素介导增殖，这促进了T细胞的体内激活和扩增。它能够在5天内持续释放功能完全的CAR-T细胞，并在控制肿瘤生长方面达到与体外CAR-T疗法相当的效果，同时在肿瘤清除后细胞扩增更好和更持久。 有研究显示，用T细胞受体-CD3复合物（CD3-LVs）修饰的LV可以特异性识别并转染循环T细胞以产生CAR基因，这成功地将CD19特异性CAR基因递送到人源化NSG小鼠的T细胞中，进而消除CD19+细胞。 另一项研究中，通过用抗CD3抗体改造偶氮（azide）基团修饰的LV，研究人员建立了一个工程化双特异性LV平台。这些LV在体外和体内都实现了靶向T细胞递送CD19-CAR基因。 AAV也被应用于体内制造CAR-T细胞。在人T细胞白血病的小鼠模型中，研究人员利用AAV-DJ，即2型、8型和9型AAV的嵌合体，将编码CD4 CAR基因的质粒递送到T细胞。然而，关键技术挑战是AAV缺乏用于定向递送到目标部位的膜包裹（membrane envelope）。因此，AAV载体的体内基因递送需要精确选择AAV血清型，进行组织特异性递送或用靶向T细胞的构建物修饰AAV衣壳蛋白。 例如，经设计的锚蛋白重复蛋白（designed ankyrin repeat proteins，DARPins）可以插入到AAV2衣壳蛋白中，以特异性靶向小鼠CD8 T细胞，使小鼠脾细胞中CAR基因递送增加了20倍。该团队进一步工程化双特异性DARPins-AAV2以双重靶向CD4和CD32a，促进了T细胞靶向和体内CAR基因产生。 尽管在临床前阶段取得进展，病毒载体因其可能触发免疫反应和引起组织炎症，其安全问题不容忽视。 4 纳米载体 纳米载体也显示出在体内向T细胞递送遗传物质（如mRNA、质粒和蛋白质）以引入CAR构建物的潜力。与病毒载体相比，纳米载体的脱靶毒性和免疫原性极小，并且可以大规模生产。此外，纳米载体可以通过与不同的靶向生物材料结合来定制设计，以提高靶向能力。此外，它们可以通过化学偶联和冻干处理以延长稳定性。 目前，聚合物（polymers）、脂质（lipids）和外泌体（exosomes）是最常用的体内制造CAR T细胞的纳米载体。 阳离子聚合物纳米粒子可以通过静电凝聚（electrostatic condensation）与负电荷核酸形成复合物。复合物表面带正电荷，可通过静电结合到带负电的细胞膜上，以增强细胞摄取。由于这些复合物能够避免酶降解，并通过它们的质子海绵（proton sponge）效应逃避内体（endosomes），因此他们更稳定。 Smith等人开发了用于体内CAR T疗法的聚合物纳米载体，使用靶向CD3的生物可降解、聚（β-氨基酯）基纳米粒子将特异性CAR基因递送到白血病小鼠模型中的T细胞，可使白血病消退且副作用很小。在尾静脉注射后4小时，这些靶向T细胞的聚合物纳米粒子成功将CAR基因转染到循环T细胞中。 这种治疗策略在免疫功能正常的白血病小鼠以及携带实体瘤的免疫缺陷小鼠中都有效。该系统后来也适用于CAR-mRNA和T细胞受体-mRNA递送，在白血病、前列腺癌和乙型肝炎病毒诱导的肝细胞癌的小鼠模型中可有效重新编程T细胞。 然而，这些研究都缺乏对CAR转基因递送的量化评估。此外，阳离子聚合物在宿主中的生物降解性和不稳定性可能会降低CAR生产能力，并可能抵消体内CAR-T疗法的治疗效果。同时，阳离子聚合物的高毒性需要进一步工程化，包括脂质共复合，以减轻毒性并增强功能。 脂质纳米粒子和外泌体也在促进体内T细胞重编程方面显示出潜力。 Zhou等人开发了载有白细胞介素6短发夹RNA（IL-6 shRNA）和CD19-CAR组合基因（AntiCD3-LNP/CAR19 + shIL6）质粒的靶向CD3脂质纳米载体。这些纳米载体选择性地靶向循环T细胞，使白血病小鼠中CAR表达增加和CAR T细胞的抗肿瘤效果延长，持续至给药后41天，与体外T细胞疗法相当。此外，IL6-shRNA的联合降低了CRS的风险。 Fan等人通过用抗CD3和抗表皮生长因子受体(EGFR)抗体修饰的、肿瘤抗原刺激的、树突状细胞衍生的外泌体（tDC-Exo），开发了一个CAR-T平台，允许同时靶向内源性T细胞和癌细胞。然而，外泌体尺寸小，难以有效地包装大型基因编辑工具，如CRISPR/Cas9 RNP。为了解决这一挑战，科学家们探索了各种策略，包括外泌体工程和混合递送系统。 5 体内CAR-T疗法产业化发展 基于病毒载体的体内CAR-T疗法已有产业转化。例如，与前述Umoja Biopharma推出的VivoVec™同期，EXUMA Biotech已开发了一种编码CD19 CAR的LV，用于在人源化NSG-SGM3小鼠模型中靶向和激活CD3+ T细胞。他们的临床前数据显示，体内编辑CD3+ T细胞可产生功能性CAR T细胞，并清除B细胞。此外，该公司开发了针对HER2阳性复发或难治性IV期转移性实体瘤的新治疗策略，目前正在进行I期临床研究。 基于纳米粒子的体内CAR-T疗法的产业转化也有进展。例如，Ensoma开发了一种病毒样颗粒Engenious™平台，可以递送高达35千碱基对的包装DNA基因材料，是AAV载体上限的七倍以上。Capstan Therapeutics利用mRNA-脂质纳米粒子平台，在心脏病小鼠模型中成功制造了体内CD5特异性CAR T细胞。该公司使用靶向CD5离子化脂质纳米粒子（CD5/LNP）包裹针对成纤维细胞激活蛋白的CAR mRNA分子。在LNP注射后48小时，一个新的CAR-T细胞亚群出现了，占总T细胞群的20%。 6 体内CAR-T疗法开发中的挑战 如前所述，体内CAR-T疗法的一个主要问题是如何有效地将CAR转基因递送到体内的目标T细胞中。病毒载体可以促进细胞摄取和核穿透，然而，直接向患者注入携带CAR构建物的病毒载体，其靶向能力有限。此外，这种方法还带来了脱靶效应的风险，其他细胞类型可能被转染。工程化病毒载体有望增强其靶向递送至T细胞的能力。 纳米载体平台相比病毒载体，相关的风险和生产成本较低，似乎更适合于体内靶向T细胞，但还需要额外的研究来提高这些纳米粒子在生物环境中的稳定性和生物相容性，以防止它们在到达并靶向T细胞之前，在体内被降解和产生潜在的不良反应。与纳米载体相关的另一个主要问题是它们有限的转染效率。 在临床环境中使用的脂质纳米粒子从内/溶酶体（endo/lysosomal）室逃逸进入细胞质之前，可能导致遗传物质（如mRNA）在溶酶体中被酶降解。质粒DNA的一个额外障碍是必须将其运输到细胞核中进行转录，然后在细胞质中翻译成蛋白质。为了解决这个问题，研究人员已开发了多种策略，包括使用pH反应性纳米载体和结合触发逃逸机制的成分，如孔形成蛋白或肽。 与体外CAR-T疗法类似，体内CAR-T疗法对于实体瘤的治疗比血液恶性肿瘤更具挑战性。 在临床前研究中使用的动物模型的临床相关性对于成功的治疗开发也至关重要。非人灵长类动物模型将对评估体内CAR T细胞产品的安全性和药代动力学特性至关重要。 7 体内CAR-T疗法的监管考量 与体外CAR-T疗法一样，体内CAR-T疗法若要在临床上复制临床前的成功，在临床环境中的安全性和有效性非常重要。监管机构如美国食品药品监督管理局（FDA）和欧洲药品管理局（EMA）要求病毒和纳米载体在批准之前遵守严格的质量、安全和有效性标准。譬如，由于脂质纳米载体在健康组织中的积累可能导致细胞毒性和/或遗传毒性，毒理学评估对于确保脂质纳米载体符合法规至关重要。在临床用于递送CAR基因的病毒载体也需要仔细测试其纯度、安全性、稳定性和功能性。某些用于递送CAR的病毒载体有致癌插入性突变风险，或在修饰的T细胞中触发不必要的炎症反应，极少情况下会偶发癌变。 另一个关于体内CAR-T疗法的监管问题是基因编辑工具的安全性，如CRISPR/Cas9系统。譬如，它可能导致在目标T细胞内非目标位点引入可变长度插入/缺失（indel），从而可能导致功能基因中断和表观遗传修饰，使疗效降低，甚至在宿主中导致过度的细胞因子释放或不良免疫反应等危险后果。为了最小化CRISPR/Cas9编辑工具在体内外修饰T细胞期间的脱靶效应，可以考虑使用高保真Cas9变体。 — 结论 — 作为一种可行的现货型替代，体内CAR-T疗法有潜力提高安全性和有效性，减少治疗等待时间，免除清淋化疗，为患者提供更大的便利。 参考文献： Bui TA, Mei H, Sang R, et al. Advancements and challenges in developing in vivo CAR T cell therapies for cancer treatment. EBioMedicine. 2024 Aug;106:105266. doi: 10.1016/j.ebiom.2024.105266. Epub 2024 Aug 1. PMID: 39094262. 同写意媒体矩阵，欢迎关注↓↓↓

来源：药融云新药笔记，更多新药内容点击上方名片☝︎关注药融云新药笔记。 1.万泰生物九价HPV疫苗拟纳入优先审评，有望早日获批上市 8月13日，万泰生物发布公告，其全资子公司厦门万泰沧海与厦门大学合作研发的“重组人乳头瘤病毒6/11/16/18/31/33/45/52/58型九价疫苗（大肠埃希菌）”被国家药品监督管理局药品审评中心拟纳入优先审评品种公示名单。2024年4月，万泰生物发布公告称，该公司九价HPV疫苗3期临床研究已完成揭盲，并取得主要数据初步分析结果。该3期临床试验采用了多中心、随机、双盲、二价HPV疫苗对照的设计。本研究共设置12次访视（V1-V12访视），截至V8访视（至首针疫苗接种后约30月）标本检测结束，主要分析数据集中已累积到方案预定的12月持续性感染终点事件数，主要数据初步分析结果符合预期。一直以来，万泰生物的九价HPV疫苗何时能上市备受关注。特别是今年以来，江苏、广东、海南、山东等多地陆续发布了二价HPV疫苗的采购价格，二价HPV疫苗单价一降再降，从跌破百元到如今30元不到。两大国产二价HPV疫苗厂商万泰生物和沃森生物之间的价格战异常激烈。对于万泰生物而言，在疫苗业务方面，2020年公司的二价HPV疫苗“馨可宁”上市销售，疫苗业务逐渐成为其最主要的收入来源，2022年公司疫苗收入占比超过75%。但到2023年，公司二价HPV疫苗销量大幅下降，疫苗板块收入不容乐观。目前国产二价HPV疫苗产能过剩，所以价格一路下行，企业的利润空间也被不断压缩。目前国内九价HPV疫苗研发企业中，包括万泰生物、康乐卫士、瑞科生物、上海泽润、博唯生物在内的这五家，其相关疫苗产品均已进入III期临床。其中，万泰生物进度领先，本次该九价HPV疫苗拟纳入优先审评，意味着该产品有希望加速来到患者身边。 2.奥赛康药业第三代EGFR-TKIASK120067新适应症申报上市，一线治疗肺癌！ 8月13日，中国国家药监局药品审评中心（CDE）官网公示，奥赛康药业申报的1类新药利厄替尼片（ASK120067片）上市申请获得受理。ASK120067是具有自主知识产权的全新分子实体，能选择性抑制EGFR T790M突变，对野生型EGFR抑制活性较弱，口服给药具有显著的体内、外抗肿瘤作用。本次为该产品的第二项上市申请，拟定适应症为具有EGFR外显子19缺失（19DEL）或外显子21置换突变（L858R）的局部晚期或转移性非小细胞肺癌（NSCLC）成人患者的一线治疗。2021年11月16日，由中国科学院上海药物研究所、中国科学院广州生物医药与健康研究院、江苏奥赛康药业有限公司联合开发的EGFR三代抑制剂ASK120067片的新药上市申请获国家药品监督管理局受理（受理号：CXHS2101052国）。该项目于2018年启动临床试验，用于含EGFR T790M突变非小细胞肺癌（NSCLC）患者的二线治疗。基于突出的I/II期临床研究结果，ASK120067片于2019年获得CDE许可，完成II期临床研究后可有条件批准。本次适应症的上市申请主要基于2021年完成的关键临床试验，结果显示ASK120067临床疗效突出，经第三方独立影像评估（IRC）的疾病控制率（DCR）达到92%，客观缓解率（ORR）达到68.8%，患者获益明显。本品对脑转移患者也具有突出的疗效，基线有脑转移的受试者IRC评估的ORR为64.6%。 3.百济神州MUC1\CD16A双抗BGB-B3227申报临床，针对实体瘤 8月13日），中国国家药监局药品审评中心（CDE）官网公示，百济神州1类新药注射用BGB-B3227的临床试验申请获受理。根据百济神州管线资料，BGB-B3227是一款MUC1/CD16双抗，临床前用于探索肺癌、胃癌和胆管癌的治疗潜力。2023年研发日上，百济神州介绍过BGB-B3227的相关信息，MUC1/CD16a双抗测差异化在于更高的CD16a亲和力，CD16a与MUC1臂空间距离近。通过CD16a的抗体依赖性细胞介导的细胞毒性（ADCC）作用是NK细胞发挥效应器功能的主要机制之一。ADCC是一种有效的细胞毒性机制，主要通过自然杀伤（NK）细胞介导。当特异性抗体结合到靶向细胞膜上以后，免疫细胞通过该反应诱导细胞死亡。这是抗体限制和控制感染的几种主要机制之一。抗体和免疫细胞的相互作用通过一个受体家族发生：Fc受体（FcR）。在人类中，IgG的FcR家族（FcγR）由6个受体组成：FcγRI/CD64、FcγRIIa/CD32a、FcγRIIb/CD32b、FcγRIIc/CD32c、FcγRIIIa/CD16a和FcγRIIIb/CD16b，其中CD16a主要负责触发NK细胞介导的ADCC。近期，关于CD16A的NK相关双抗也在实体瘤取得了显著进展。2024年6月3日，基于NK疗法的EGFR/CD16a双抗AFM24，在本次ASCO会议期间更新的非小细胞肺癌的初步二期数据，德国生物技术Affimed股票大涨68.51%。 4.辉瑞新型TFPI抑制剂「马塔西单抗」在华申报上市，针对血友病 8月13日，中国国家药监局药品审评中心（CDE）官网公示，由辉瑞（Pfizer）申报的1类治疗用生物制品马塔西单抗注射在中国申报上市并获得受理。马塔西单抗（marstacimab ，PF-06741086）是由辉瑞研发的一种靶向组织因子途径抑制剂（TFPI）的抗体，通过每周一次的皮下注射给药，用于治疗血友病A和血友病B患者，无论患者体内是否存在对外来凝血因子产生的中和抗体。这种新型的治疗方式为血友病患者带来了极大的便利。血友病是一种遗传性出血性疾病，患者缺乏凝血因子，容易发生关节出血和内部出血。传统的治疗方式需要定期注射凝血因子，而且容易产生中和抗体，使得治疗效果大打折扣。Marstacimab的出现，有望改变这一现状。在2024年的WFH年会上，辉瑞公司带来了一项令人振奋的消息：其研发的血友病疗法Marstacimab（PF-06741086）在关键的3期临床试验BASIS中取得了成功。这一突破性成果为血友病患者带来了新的希望。BASIS试验结果表明，对于体内不含有抑制剂的重度血友病A和中重度血友病B患者，Marstacimab的预防性治疗可以在统计学上显著且临床上相关地降低年化出血率（ABR）。这一成果无疑为血友病患者的治疗带来了新的希望。具体来说，与导入期内接受按需治疗因子替代静脉治疗的患者队列相比，Marstacimab展现出优越性，出血率降低了92%；与接受预防性治疗队列相比，年化出血率降低了35%。这表明Marstacimab具有显著的疗效。如果Marstacimab获批，它将为血友病患者提供一种新的治疗选择，特别是对于那些需要长期管理病情的患者。这将极大地改善他们的生活质量。 5.LENZ Therapeutics向美国FDA提交LNZ100的NDA新药申请，用于治疗老花眼 8月13日，LENZ Therapeutics宣布，该公司已向美国FDA提交其醋克立定（aceclidine）眼药水配方LNZ100用于治疗老花眼的新药申请（NDA）。醋克利定是一种小分子拟副交感神经缩瞳剂，通过独特的瞳孔缩小机制增加景深，改善因老视导致的近视力下降。醋克利定是目前首个且唯一一个能够选择性激活瞳孔括约肌上的毒蕈碱型乙酰胆碱能受体（mAchR）的在研缩瞳药物成分，其独特的高选择性瞳孔作用机制和安全性使LNZ100具有同类最佳潜力，并适用于广泛的老视患者群体。2022年4月，LENZ Therapeutics与箕星药业就在大中华区开发和商业化针对老视治疗的LNZ100和LNZ101达成独家许可协议。根据协议条款，LENZ Therapeutics将收到高达1.1亿美元的预付款和里程碑付款，以及基于未来净销售额的特许权使用费。另外，投资创立箕星药业的RTW Investments还将向LENZ Therapeutics投资1000万美元。此次NDA的递交是基于LNZ100针对老视治疗的CLARITY 关键3期临床研究的积极结果。 在3期CLARITY临床研究中， LNZ100 达到了所有主要终点和次要终点，最佳远矫正下的近视力 (BCDVA) 在统计学上呈现三行字母或更佳的显著改善，且远视力下降未超过一行。在CLARITY研究监测的超过30,000个治疗日中，没有观察到与治疗相关的严重不良事件，这证明了LNZ100耐受性良好。FDA有60天的资料审核期，以确定NDA提交是否完整并可接受评审。 6.诺和诺德GLP-1R+胰岛素组合IcoSema糖尿病3期达主要终点，多地上市申请递交在即 近期，诺和诺德（Novo Nordisk）在今年上半年投资者会议上宣布其糖尿病在研疗法IcoSema在关键3期试验COMBINE 1当中取得积极结果，该公司预定在今年下半年向中国、美国、欧盟的监管单位递交该疗法用于治疗2型糖尿病（T2D）患者的上市申请。IcoSema是每周一次的基础胰岛素icodec和每周一次的司美格鲁肽（700U/2mg/ml）以固定比例组合的药物，滴定方式与胰岛素相同，每周注射一次。最新的研究成果表明，每周一次的IcoSema治疗方案在降低2型糖尿病患者的HbA1c水平方面，不仅不逊于每日基础胰岛素方案，而且还呈现出一系列积极的效果。这次所公布的COMBINE 1试验是一项国际性的3期试验，旨在比较每周一次的IcoSema与每周一次的依柯胰岛素（Icodec）在2型糖尿病患者中的血糖控制效果。该试验共招募1291位患者，随机分配接受IcoSema或依柯胰岛素治疗共52周，并接续为期5周的随访。分析显示，该试验达成主要终点，与基线相较，IcoSema组患者的糖化血红蛋白（HbA1c）水平在第52周时下降了1.6个百分点，依柯胰岛素组则下降了0.9个百分点，差异具统计学意义。而在次要终点上，IcoSema组患者的体重在52周时下降了3.7公斤，依柯胰岛素组患者则增加了1.9公斤，两组差异具统计学显著性。 END 近期热门资源获取 后台回复关键词“报告”，获取数十篇药融云出品独家报告 后台回复关键词“CSCO”，获取2023CSCO指南 后台回复关键词“ASCO”，获取2023ASCO分癌种摘要 后台回复关键词“2023首仿”，获取2023年首仿药物获批名单 后台回复关键词“医保”，获取2022年医保目录    联系我们，体验药融云更多专业服务 会议 合作 园区 服务 数据库 咨询 定制 服务 媒体 合作 点击阅读原文，申请药融云企业版免费试用！

上期回顾：《单克隆抗体的发展史以及结构解析》（点击查看），由于结构决定功能，因此本文将介绍抗体的作用机制，另外，与传统的小分子化学药物相比，浅析以单抗分子为代表的现代抗体药物的优缺点。01抗体的作用机制图1 单克隆抗体的结构和功能（来源：Structure and function of monoclonal antibodies - Bing images）抗体由抗原结合域（Fab）和结晶区域（Fc）组成，Fab的作用机制是识别抗原，Fc的作用机制是发挥效应功能。 1.1抗体Fab区用来识别抗原1识别游离的靶点游离于血液循环中的细胞因子、促血管生成因子、生物毒素等都可以作为单抗作用的靶点。这些游离的靶点蛋白因子需要通过与受体结合，传导信号进入细胞，才能起到调控细胞的功能。如果抗体把这些蛋白因子当成抗原，与之结合，这些蛋白因子就无法与受体结合传导信号进入细胞，也就因此丧失了生物学功能。常见的针对游离靶点的抗体有血管内皮生长因子（VEGF）抗体，肿瘤坏死因子（TNF）抗体，炭疽毒素中和抗体等。2识别细胞表面受体 一些靶点抗原表达在细胞表面，具有细胞激活、生长或迁移等特定的功能。对于表达在细胞表面的靶点，根据Fab活性，可以分为结合、拮抗和激活三种结合方式：结合型抗体只结合靶蛋白进行标记而不影响其功能，让Fc产生效应功能或通过搭载毒素来杀灭靶细胞；拮抗性抗体会封阻受体上与配体相互作用的表位，阻止其与配体结合，使其丧失功能；激活型抗体能则能够模拟配体的功能，识别结合靶受体并传导信号至细胞内部。 1.2抗体Fc区发挥ADCC、ADCP、CDC等效应功能1ADCCADCC，抗体依赖的细胞介导的细胞毒性作用（Antibody-Dependent Cell-mediated Cytotoxicity ），是指抗体的Fab区结合病毒感染的细胞或肿瘤细胞的抗原表位，Fc段与杀伤细胞（NK细胞、巨噬细胞、中性粒细胞等）表面的FcR结合，介导杀伤细胞直接杀伤靶细胞。 图2  ADCC示意图(来源：药研网)2ADCPADCP，抗体依赖的细胞介导的吞噬作用（Antibody-Dependent Cellular Phagocytosis），是指抗体的Fab区结合病毒感染的细胞或肿瘤细胞的抗原表位，Fc段与单核细胞、巨噬细胞、嗜中性粒细胞和树突细胞表达的FcγRIIa（CD32a）、FcγRI（CD64）和FcγRIIIa（CD16a）结合，介导吞噬细胞来吞噬疾病细胞。 图3  ADCP示意图(来源：药研网)3CDCCDC，补体依赖的细胞毒性作用（Complement Dependent Cytotoxicity），是指抗体的Fab区结合病毒感染的细胞或肿瘤细胞的抗原表位，Fc段与血清补体分子（存在于血清与组织液中一组不耐热的，经活化后具有酶活性的蛋白质）C1q结合，激活补体经典途径，形成膜攻击复合物（MAC）造成细胞膜溶解，对靶细胞发挥裂解效应。 由于激活补体不仅需要靶细胞表面表达较高密度的抗原，也需要抗体分子的高特异靶向性，才能结合多个C1q并且有效激活补体。且位于细胞表面或者一些游离的补体抑制剂能够有效阻断补体级联反应，因此许多IgG1的抗体只具有非常弱的作用。图4  Fc区三种效应功能的作用方式(来源：肽研社)ADCC/ADCP/CDC是现在许多畅销的抗体药发挥肿瘤杀伤的重要机制，被用来检测和评定抗体的功效。人们根据抗体的这些作用机制，研制出了识别不同分子靶点的单克隆抗体，用来治疗疾病。02抗体药物的优缺点抗体药物是一种重要的生物制剂，用于治疗多种疾病，如肿瘤、自身免疫性疾病等。现代抗体药物的基础是具有疾病治疗或预防作用的单克隆抗体或其衍生物。以单抗为基本结构骨架，又可衍生出双／多特异性抗体、抗体偶联物和Fc 融合蛋白等大分子药物。近年来从羊驼、骆驼和鲨鱼中发现的单域抗体（纳米抗体），也成为抗体药物研发的热点。2.1抗体药物的优点以单抗分子为代表的现代抗体药物与传统的小分子化学药物相比，具有明显的优越性。①好的抗体药物的专一性和安全性极高，很少产生脱靶毒性，所以它们在临床上的成功率明显高于化学药物。在美国，约有 25%~30％的大分子药物在进入临床试验阶段以后，最终被批准上市；而化学药物的相应成功率只有7%~10%。②抗体药物的半衰期较长，从几天到几十天不等。相较于多数只能在体内存在数小时的小分子药物，抗体药物可大大减少患者的用药频次。③抗体药物受药物专利过期的影响要明显小于小分子药物。这是因为抗体药物无法精确仿制，只能做生物类似药，由于生物类似药的研发难度和研发成本显著高于化学仿制药，这严重地限制了生物类似药的商业回报。④在抗体药物的研发过程中，科学家可以直接对可能致病的靶分子进行定向研发，而不需要对庞大的化合物文库进行海量筛选，分子改造的工作量也远远小于化学药物开发过程中的经典的结构和活性关系研究。2.2抗体药物的缺点与小分子化学药物相比，抗体药物也存在不足之处。①抗体药物尚无法有效地进入细胞内部，因此，目前只能针对分泌型和细胞膜表面抗原，而无法有效地调节细胞内激酶和转录因子的活性。②普通抗体药物难以穿越血脑屏障，在中枢神经系统的分布往往只有血浆浓度的 1/300 甚至更低。③抗体药物本身属于蛋白质抗原，易引起人体抗药物免疫反应，导致药效消失。④这类药在体内的半衰期长，一旦发生毒副作用的话，难以进行补救。⑤抗体药在室温下不如化学药稳定，大多需要冷藏。⑥抗体药多需要皮下或静脉注射给药，不如口服药方便。⑦抗体药物生产设备投资大，单位生产成本明显高于化学药物。本期小结抗体由抗原结合域（Fab）和结晶区域（Fc）组成。抗体的Fab区用来识别抗原，包括游离的靶点和细胞表面受体，而Fc区通过结合各种FcγRs，发挥ADCC、ADCP、CDC等效应功能发挥效应功能。以单抗分子为代表的现代抗体药物与传统的小分子化学药物相比，具有改造分子工作量较小、抗体药物的半衰期较长等优点，同时，抗体药物也存在不足之处，例如易引起人体抗药物免疫反应、抗体药多需要皮下或静脉注射给药，不如口服药方便等。下期预告单克隆抗体的命名规则参考来源1、Focus | 关于单抗，这些或许是你想知道的https://mp.weixin.qq.com/s/M9uqvvYapJxJDtQUMx6IFA2、形形色色的PD-1单抗，你了解多少？https://mp.weixin.qq.com/s/Okq1QgGjn_DpD5wdsFPJCQ3、抗体三大作用机制：ADCC/ADCP/CDChttps://mp.weixin.qq.com/s/drqTnEYmI-rANHPaI4r_kA4、2023-2028年抗体药物行业市场现状及发展规划咨询综合研究报告https://mp.weixin.qq.com/s/Z5XNFvTKqIo4tACaINDpMAEND整理及编辑：芝麻核桃声明：本文仅代表作者个人观点，不代表任何组织及本公众号立场，如有不当之处，敬请指正。如需转载，请注明作者及来源：蒲公英Biopharma。关于「蒲公英 Ouryao」蒲公英（ouryao.com），创立于2012年02月，是中国医药制造领域领先的互联网生态社区，是中国医药行业极具影响力的媒体，是医药行业领先的知识平台。作为中国医药制造领域极具影响力的互联网生态社区，蒲公英每天为100万+用户会员提供专业服务，构建了以制药专业信息和知识为核心的移动生态，以蒲公英论坛、微信公众号、APP为主要支柱，孵化了药视、药文、药聘、药林、药鸽、药查、药问、药答等系列网络产品，日活跃用户、信息流稳居行业前列。作为制药行业广受关注的专业新媒体，蒲公英及旗下微信公众号关注用户突破108万+，专业媒体矩阵日均阅读量超6万，每年组织线下各类培训会议等超100场，参与人次10000+，知识传播影响力行业遥遥领先。作为制药行业领先的专业服务平台，蒲公英及其孵化的公司为200+制药企业会员单位提供知识和产品服务，涵盖创投、教育、媒体、产品、园区、咨询、人才、论坛、商城、联盟十大板块，做专做精，专业技术实力领跑制药行业。蒲公英，以传播知识、传播爱心、传播力量为理念，致力于“成为更懂制药人，并能帮助制药人成长的综合服务平台。自2021年起，蒲公英先后在天津、苏州、上海（张江 +临港）、广州、深圳、成都等地设立蒲公英医药共创平台，集共享办公、创新孵化、宣传展示、商务洽谈、沙龙培训、产品营销及区域办事处合作等功能为一体，打造制药人自己的区域交流平台，各区域平台立足本地辐射全国，形成具有蒲公英特色的线上线下为一体的共创家园，为中国制药人及制药行业的发展深耕助力。