CPI RSV F Vaccine (Blue Lake Biotechnology)

摘要：呼吸道合胞病毒（RSV）是婴儿和儿童支气管炎和肺炎的重要致病因子。RSV表面融合糖蛋白的鉴定和结构分析是RSV预防发展的关键进展。本综述全面总结了ClinicalTrials.gov上注册的RSV单克隆抗体（mAb）和疫苗临床试验，重点介绍了新生儿、婴儿和儿童RSV疫苗的分类、名称、靶标、阶段、临床结果和安全性数据。我们还讨论了用于母体免疫的RSV疫苗类型的特点，并总结了目前孕妇RSV疫苗的临床研究进展及其在婴儿中的保护效果。本综述将为未来儿童RSV预防的发展提供新的思路。 1.引言 呼吸道合胞病毒（RSV）是婴儿支气管炎和肺炎的主要病原体，也是6个月以下婴儿严重下呼吸道感染（LRTIs）的最常见原因，几乎所有儿童在2岁之前都感染过RSV，并且再次感染是常见的。根据2005年的一份报告，RSV感染或相关并发症导致的死亡人数估计在5岁以下儿童中为66,000至160,000人。尽管RSV发病率高，但目前尚无明确的治疗方法。 RSV基因组跨度为15.2 kb（如图1所示），包含10个基因，编码11种蛋白质。值得注意的是，M2基因包含两个重叠的ORF，产生M2-1和M2-2两种蛋白质。M2-1对病毒转录至关重要，而M2-2控制从转录到基因组复制的转变。RSV基因组的初始转录产生非结构蛋白NS1和NS2，它们共同作用以抑制凋亡和干扰素反应。此外，RSV病毒颗粒的特征是单链、负义RNA基因组，被脂质双层包裹，展示融合（F）、附着（G）和小疏水（SH）蛋白（图1）。病毒表面主要由G和F糖蛋白组成，它们在进入过程中发挥关键作用。F蛋白的前融合构象是人类血清中RSV中和活性的主要靶标，许多强效抗体对此构象具有特异性。因此，在开发含F蛋白的疫苗候选物时，优先考虑基于结构的工程策略，以稳定F蛋白在其前融合构象。 图1展示了RSV基因组的组织和蛋白质结构。(A) RSV基因组组织；(B) RSV蛋白质结构。 近年来，在理解RSV糖蛋白的构型和运作以及它们与宿主细胞因子的相互作用方面取得了显著进展，这些相互作用促进了宿主细胞的进入，从而为阻止RSV提供了新的途径。迄今为止，RSV预防干预策略包括mAbs和六种类型的疫苗，包括基于颗粒的疫苗、基于载体的疫苗、减毒或嵌合疫苗、亚单位疫苗、mRNA疫苗。 本文全面概述了目前针对新生儿、婴儿和儿童的RSV疫苗和mAbs的临床研究进展。考虑到母婴免疫的重要性，我们还包括了针对孕妇的RSV疫苗的临床研究。讨论包括各种疫苗的作用机制、应用范围、有效性和可能的不良反应，引用了Clinical Trials.gov和PubMed的数据。本综述旨在为政府政策制定者、学术机构和制药企业提供值得注意的见解和创新视角。 2.材料和方法使用关键词“respiratory syncytial virus” AND “Early Phase 1, Phase 1, Phase 2, Phase 3, and Phase 4”在ClinicalTrials.gov网站的“Additional Criteria”字段中进行搜索，研究开始时间限制在2025年5月20日之前。试验排除标准如下：（1）状态为暂停、终止、撤回或未知，（2）研究条件不是RSV，以及（3）主要目的是治疗、基础科学或其他。共筛选了254项临床试验，根据其状态排除了28项试验，根据其研究条件排除了19项试验，根据其主要目的排除了86项试验。最终，121项临床试验被纳入分析。 数据检索过程如图2所示。 图2展示了数据检索的过程。 收集以下信息进行分析：NCT编号、干预措施、药物、分类、给药方式、状态、赞助者/合作者、性别、年龄、阶段、资金、首次发布日期和地点。描述性分析使用数值和百分比表示分类变量，数据处理和分析使用Microsoft Office Excel 365进行。由于研究仅使用公开数据且不包含个人信息，因此免于伦理委员会审查。 3.结果 3.1.基本特征 共纳入121项试验，其基本特征如表1所述。大多数RSV疫苗试验已完成，占67.77%，14.05%的试验正在招募中，17.36%的试验正在进行但未招募。这些试验的详细信息如表2所示。 考察的RSV疫苗类型包括47种亚单位疫苗（38.84%）、26种减毒疫苗（21.49%）、23种基于载体的疫苗（19.01%）、19种mAbs疫苗（15.70%）、5种mRNA疫苗（4.13%）和1种基于颗粒的疫苗（0.83%）。大多数试验（85.12%）在两性中进行，13.22%的试验仅在女性中进行。有42项试验仅在儿童中进行（34.71%），74项试验在成人中进行（61.16%），5项试验在儿童和成人中进行（4.13%）。RSV临床研究的概览如图3所示。 图3提供了RSV疫苗试验的概览。(A) 从2005年到2023年每年各阶段试验的数量；(B) 各种疫苗类型中各阶段试验的数量。 从受试者人群的角度来看，47项试验关注儿童，13项关注孕妇。发现孕妇使用的RSV疫苗是亚单位疫苗和基于颗粒的疫苗，而儿童使用的包括亚单位疫苗、减毒疫苗、基于载体的疫苗、mRNA疫苗和mAbs。图4A、B显示了每种疫苗和mAbs的药物详细信息。 3.2.儿童RSV单克隆抗体 3.2.1.mAbs 单克隆抗体（mAbs）因其对病原体的显著特异性和提供被动免疫反应的能力，成为解决病毒感染的有力替代方案。主要目标是针对RSV前F蛋白上的一个高度中和、敏感的表位。此外，最新一代的RSV抗体经过Fc突变修饰，可以延长其半衰期。有5种针对RSV活性的mAbs，包括帕利珠单抗、莫他珠单抗、尼西瑞单抗、克雷索瑞单抗和TM001。 （1）帕利珠单抗。帕利珠单抗（Synagis）是FDA批准的首个用于预防高风险婴儿因细支气管炎住院的人源化mAb。帕利珠单抗在首个RSV季节的五个月里，每月以15 mg/kg的剂量通过肌肉注射给药，以预防儿童严重的RSV LRTI。帕利珠单抗结合RSV融合（F）蛋白上的抗原位点A，这是一个高度保守的区域，能够通过结合病毒表面的RSV融合蛋白阻止膜融合过程，也可以防止感染RSV的细胞之间的融合过程。这种干预仅限于儿科人群中的一小部分，即胎龄低于35周的婴儿和RSV季节开始时年龄在6个月以下的婴儿。这使得每年有数百万婴儿面临严重或潜在致命疾病的风险，没有RSV的保护。目前正在进行两项临床试验，研究帕利珠单抗对两岁以下儿童预防RSV的有效性（NCT01006629/2/3期；NCT01466062/3期）。鉴于新型长效mAbs的出现，有必要进一步实验以验证其对6个月以上儿童的保护效果。 3.2.2.莫他珠单抗 莫他珠单抗，也称为MEDI-524或Numax，是通过亲和力成熟技术从帕利珠单抗开发出的第二代mAb。研究发现，它能有效减轻高风险婴儿的RSV疾病负担。这种mAb已经进行了五项临床试验。一项随机、双盲、安慰剂对照试验（NCT00121108/3期）表明，与安慰剂组相比，莫他珠单抗使因RSV住院的婴儿比例相对减少了87%。此外，接受莫他珠单抗治疗的受试者不良事件（AEs）的发生率低于接受安慰剂的受试者，并且没有报告与莫他珠单抗相关的死亡。两组之间严重不良事件（SAEs）或超敏反应事件的发生没有统计学上显著差异。比较单独使用莫他珠单抗与莫他珠单抗和帕利珠单抗联合方案的给药，观察到高风险儿童连续联合方案给药相关的不良事件和抗药物抗体（ADAs）的发生率在两组之间相似。 3.2.3.尼西瑞单抗 尼西瑞单抗是一种针对F蛋白的Ø位点设计的人源mAb，其Fc部分具有YTE突变，以延长其血清半衰期，作为单一剂量给药，在整个RSV季节提供全面保护。2022年11月，EMA和欧盟批准了Beyfortus（尼西瑞单抗）在新生儿和婴儿中的使用，以帮助预防他们最初的RSV大流行季节期间的RSV LRTIs。 MEDI8897的平均半衰期在不同剂量队列中为85至117天，随后在给予300毫克肌肉注射剂量后，生物利用度为77%（NCT02114268/1期）。干预组中ADA和AEs的发生率与安慰剂组观察到的相似。随后的2期（NCT02878330）和3期试验（NCT03979313）表明，尼西瑞单抗在治疗药物处理患者中的LRTIs方面的有效性分别为70.1%（95% CI，52.3至81.2）和74.5%（95% CI，49.6至87.1）。此外，尼西瑞单抗在预防早产儿因RSV住院方面的有效性分别发现为78.4%（95% CI，51.9至90.3）和62.1%（95% CI，-8.6至86.8）。两组之间的SAEs相似。此外，尼西瑞单抗在被诊断为先天性心脏病（CHD）或慢性肺病（CLD）的婴儿中的安全性与接受帕利珠单抗治疗的早产儿观察到的相似（NCT03959488/2/3期）。 3.2.4.Clesrovimab (MK-1654) Clesrovimab是一种半衰期延长的单克隆抗体，具有与尼西瑞单抗相同的YTE突变，旨在靶向RSV F蛋白的位点IV，尽管它部分靶向位点V，并且优先结合前F。在日本成人中进行了两项1期临床试验，以测试MK-1654。单次肌肉注射MK-1654使RSV血清中和抗体（SNA）滴度呈剂量依赖性增加。该抗体的半衰期在73至88天之间，估计在300毫克肌肉注射剂量下的生物利用度为69%。MK1654组和安慰剂组之间的安全性事件没有显著差异。Orito等人证明，健康成人中MK-1654的生物利用度分别为100毫克肌肉注射和300毫克肌肉注射的86%和77%。在clinicaltrials.gov中未找到注册号。目前，这种单克隆抗体正在7项婴儿试验中进行测试。 3.3.儿童RSV疫苗 3.3.1.减毒活疫苗（LAVs） 由于其鼻内给药、能够诱导局部粘膜和系统反应以及在存在母体抗体时的免疫原性，LAVs是幼儿的有希望的选择，从而使高风险重症婴儿能够免疫。对RSV基因组和反向遗传学的增强理解，促进了通过消除或改变对RNA生物合成控制或阻碍宿主免疫反应有显著影响的蛋白质（如NS2、M2-2、SH、L和G蛋白）的LAV候选物的合理发展，从而限制了病毒复制。LAVs为可能无法从母体疫苗或单克隆抗体获得充分保护的较大婴儿提供了宝贵的无针主动鼻内免疫选择。 3.3.2.RSV DNS2/D1313/I1314L 通过删除NS2基因和L聚合酶蛋白的氨基酸S1313，开发了RSV DNS2/D1313/I1314L。因此，获得了在生理条件下显示温度敏感性的表型稳定变体。在RSV血清阴性的儿童中，给予106个斑块形成单位（PFU）剂量的RSV/DNS2/D1313/I1314L被发现耐受性良好，并且能够诱导免疫反应。在RSV季节之后，观察到接种疫苗的个体与安慰剂接受者相比，RSV滴度显著增加（1:955对比1:69），表明疫苗的有效性（NCT01893554）。RSV/DNS2/D1313/I1314L和RSV/276疫苗接种者（NCT03227029）在接种疫苗后都经历了上呼吸道感染和/或发热，症状通常较轻。值得注意的是，接受RSV/276的受试者咳嗽的发生率显著高于接受RSV/DNS2/D1313/I1314L的受试者（48%对比12%）。未观察到下呼吸道感染和SAEs。两组均在血清RSV中和滴度和抗RSV F IgG滴度方面分别有60%和92%的提升。 3.3.3.MV-012-968 MV-012-968是一种无佐剂的减毒活疫苗。该疫苗对其NS1和NS2蛋白以及G蛋白进行了修改，删除了SH并去除了分泌型G蛋白。目前正在对MV-012-968的安全性和免疫原性进行1期和2期临床试验，但结果尚未公布。 3.3.4.RSV LID DM2-2 RSV LID DM2-2是一种涉及删除RSV M2-2的候选疫苗。LIDDM2-2的减毒导致病毒基因转录和抗原表达增加，RNA复制减少。发现95%接受LIDDM2-2（105 PFU）疫苗的个体脱落疫苗病毒（中位峰值滴度，3.8 log10 PFU/mL；6.3 log10拷贝/mL）（NCT02237209）。此外，90%的疫苗接种者血清中和抗体（SNA）增加了至少四倍。值得注意的是，疫苗和安慰剂组都经历了高比例的呼吸道症状和发热。值得注意的是，一名疫苗接种者在疫苗脱落、鼻病毒和肠病毒的同时，出现了2级喘息。 3.3.5.LID/DM2-2/1030s 通过消除RSV M2-2蛋白并在RSV聚合酶蛋白中引入遗传稳定的温度敏感突变（称为1030s），生产了LID/DM2-2/1030s疫苗。LID/DM2-2/1030s疫苗（105 PFU）显示85%的疫苗脱落和血清中和抗体至少四倍增加。疫苗接种者（60%）和安慰剂接种者（27%）通常报告呼吸道症状和发热。值得注意的是，一名疫苗接种者因鼻病毒而出现2级喘息，但并未同时脱落LID DM2-2/1030s。 3.3.6.D46/NS2/N/DM2-2-HindIII D46/NS2/N/DM2-2-HindIII是一种具有M2-2缺失的重组减毒活疫苗，源自早期候选疫苗LID/DM2-2。所有21名接受D46/NS2/N/DM2-2-HindIII（105 PFUs）（NCT03102034, NCT03099291）的个体均被发现感染了疫苗，其中20人（95%）显示出疫苗脱落。值得注意的是，95%和100%的疫苗接种者分别经历了血清RSV中和抗体和抗RSV融合免疫球蛋白G的至少四倍增加。此外，疫苗接种者（76%）和安慰剂接种者（18%）报告了轻度上呼吸道感染和/或发热。 3.3.7.rA2cp248/404/1030 D SH突变和rA2cp248/104/1030 Delta SH突变 这两种疫苗是针对幼儿RSV免疫的初始减毒候选疫苗。两种疫苗在成人和RSV血清阳性儿童中均显示出高度减毒，同时在RSV血清阴性儿童中也表现出良好的耐受性和免疫原性。值得注意的是，rA2cp248/404/1030 Delta SH在RSV血清阴性儿童中的复制受到限制，平均峰值滴度为10（2.5）PFUs/mL，而rA2cp248/404 Delta SH为10（4.3）PFUs/mL。尽管rA2cp248/404/1030 Delta SH在婴儿中耐受性良好，但只有44%接受两个10（5.3）PFU剂量疫苗的接种者显示出明显的抗体反应。 3.3.8.MEDI-559和RSV冷通道/稳定2 MEDI-559是从RSV rA2cp248/404/1030 D SH突变而来，目前正在进行1/2期临床试验（NCT00767416）。RSVcps2是一种新开发的疫苗，通过引入五个核苷酸变化和一个氨基酸变化从MEDI-559修改而来。这种修改导致两个重要衰变突变的稳定，从而防止它们的降解。通过鼻内给药RSVcps2，显著比例的疫苗接种者（85%）获得了RSVcps2感染，其中77%脱落疫苗病毒，59%的RSV SNA滴度增加了至少四倍（NCT01852266, NCT01968083）。疫苗组和安慰剂组之间呼吸道和/或发热疾病的发生率相似。 图4展示了儿童和孕妇中试验的RSV疫苗类型和药物。(A) 儿童；(B) 孕妇。 3.4.基于载体的疫苗 在重组载体疫苗中，使用基因改造的复制缺陷病毒来传递编码RSV抗原的基因，以引发体液和细胞免疫。目前，有3种疫苗候选物正在进行儿科人群的临床试验，分别是源自黑猩猩腺病毒载体的ChAd155-RSV（GSK3389245A）、Ad26.RSV.preF，以及PIV5载体RSV疫苗（BLB-201）。 3.4.1.ChAd155-RSV 目前正在研究的ChAd155-RSV疫苗是一种基于黑猩猩腺病毒的疫苗，表达三种不同的蛋白，即融合蛋白、核蛋白和M2-1蛋白（55）。在给予GSK3389245A（NCT02927873；1/2期试验）的第一剂后，所有组（0.5 × 1010、1.5 × 1010和5 × 1010病毒颗粒）均显示出RSV-A Nab滴度的剂量依赖性增加，第二剂后未观察到明显的增强效应。一年后，RSV-A Nab滴度仍高于接种前水平。不良事件（AEs）的发生率在所有组中相似，高剂量组发热更为普遍。大多数发热症状轻微。未报告与疫苗相关的SAEs和住院治疗。 3.4.2.Ad26.RSV.preF 编码预融合F（preF）蛋白的腺病毒血清型26 RSV载体（Ad26.RSV.preF），结合RSV preF蛋白。先前的研究已经证明Ad26.RSV.preF在减轻老年人群RSV引起的下呼吸道感染方面的有效性。接受Ad26.RSV.preF的12-24个月龄儿童（NCT03606512；1/2期试验）的RSV A2中和几何平均滴度从121（第0天）显著增加至1608（第29天），并进一步增加至2235（第57天），在7个月以上的时间内保持在较高水平。与接受安慰剂的儿童（5, 41.7%）相比，接受Ad26.RSV.preF的儿童（1, 4.2%）RSV感染的发生率较低。未报告与疫苗接种相关的SAEs。 3.4.3.PIV5载体RSV疫苗（BLB-201） 副流感病毒5（PIV5）是一种被用作基于载体的疫苗开发平台的副黏液病毒。已经开发了两种不同的重组PIV5病毒，一种表达融合（F）蛋白，另一种表达附着糖蛋白（G）。目前正在进行1期临床试验，以评估BLB-201疫苗在儿童中的安全性、耐受性和免疫原性（NCT05655182）。 4.其他 目前，mRNA疫苗（mRNA-1345, NCT04528719）和亚单位疫苗（NCT02296463）的安全性正在1期临床试验中进行评估。 4.1.孕妇RSV疫苗 孕妇免疫被认为是通过转移母体免疫力来保护婴儿免受生命最初阶段多种危险感染的可行方法。这些疫苗类型包括亚单位和基于颗粒的疫苗。RSV preF3、RSV preF和RSV F疫苗是值得注意的例子，它们已经进入3期临床试验，并且根据已发布的数据，显示出良好的安全性、免疫原性和母婴传输率。下面部分将详细介绍这些发现。 4.1.1.RSVPreF3 RSVPreF3是一种无佐剂疫苗。有关RSVPreF3的七项临床研究。在一组健康的非孕妇女中，RSVPreF3（GSK3888550A）（30/60/120 µg）组比安慰剂组（0% ~ 15.9%）显示出更高诱导局部不良事件（AEs）的发生率（4%~53.2%）。然而，大多数上述事件被归类为轻度至中度。此外，RSVPreF3和安慰剂之间的非预期AE报告频率相似，并且没有记录与药物相关的SAEs（NCT03674177, 1期）。Bebia等人建议，RSVPreF3（RSV MAT 009）（60/120 µg）耐受性良好，因为在孕妇及其后代中均未观察到与疫苗相关的AEs。此外，即使在分娩后43天，母亲对RSV的nAbs水平也增加了10倍以上，范围为8.9-10.0倍。新生儿的nAbs水平在出生时达到峰值，逐渐下降，直到产后第181天（NCT04126213/2期）。 4.1.2.RSV稳定预融合F亚单位疫苗 在一组孕妇中，随机分配接受双价RSVpreF疫苗（120/240 mg），无论是否含有氢氧化铝，或安慰剂（NCT04032093/2b期）。研究表明，与安慰剂组相比，接种组的50% nAb滴度显著增加。此外，通过胎盘转移的中和抗体比例在1.41和2.10之间。此外，疫苗组中观察到的妇女和婴儿的AEs发生率与安慰剂组相似。RSVpreF在单独或与吸附无细胞百日咳疫苗（Tdap）联合给药时均表现出良好的耐受性和安全性（NCT04071158/2b期）。在妊娠24至36周的孕妇中给予单次肌肉注射RSVpreF疫苗或安慰剂（NCT04424316/3期）。在出生后的前90天内，疫苗在预防由药物治疗引起的严重下呼吸道感染方面的有效率为81.8%（99.5% CI, 40.6至96.3），在预防与呼吸道合胞病毒相关的下呼吸道感染方面的有效率为57.1%（99.5% CI, 14.7至79.8）。此外，在出生后的前180天内，预防严重下呼吸道感染的预防治疗有效率为69.4%（97.58% CI, 44.3至84.1）。在母亲参与者或婴儿和幼儿中未检测到明显的安全信号，直到24个月大。注射或出生1个月内报告的AEs频率在两组之间相似。 通过单次肌肉注射在健康非孕妇女中评估GSK3003891A（30/60/120 mg）的免疫原性和安全性（NCT02956837/2期）。结果显示，几何平均滴度（GMT）和PCA浓度以剂量依赖性方式增加。另一项比较分析旨在评估RSV F-020/GSK3003895A（NCT02360475/2期）和RSV F-024/GSK3003891A疫苗（NCT02753413/2期）的安全性和免疫原性。在RSV F-020临床试验中，参与者随机接受单剂量RSV PreF疫苗（30/60 mg无佐剂或60 mg含铝佐剂）或Tdap。在RSV F-024试验（NCT02753413/2期）中，参与者随机分配接受单剂量RSV PreF（60 mg无佐剂）或Tdap。两项研究显示RSV-PreF和Tdap疫苗之间的反应原性概况相似。没有与疫苗注射相关的SAEs。 4.1.3.RSV F疫苗（RSV融合（F）蛋白纳米颗粒） 接受RSV F疫苗的孕妇显示出RSV特异性抗体水平的显著提高，表现出与针对多种RSV中和表位的mAbs相当的反应性。（NCT02247726/2期）。通过胎盘传递给免疫女性所生新生儿的抗体转移率在不同检测中发现在90%到120%之间。接受疫苗接种的母亲所生的后代表现出大约40天半衰期的RSV特异性抗体，并且这些新生儿中未检测到严重的RSV疾病。 孕妇通过肌肉注射接受了RSV F疫苗，以评估其效果及其为活产婴儿提供保护的潜力。（NCT02624947/3期）。在生命的最初90天内，疫苗对与RSV相关的临床显著下呼吸道感染的有效性为39.4%，对伴有严重低氧血症的与RSV相关的下呼吸道感染的疫苗效力为48.3%。此外，疫苗在预防因与RSV相关的下呼吸道感染而住院方面的有效性被确定为44.4%。观察到疫苗接种的女性中局部注射部位反应的发生频率更高（40.7%对比9.9%）。在这些mAbs和疫苗中，可以在PubMed检索到的效力和安全性数据列在表3中。基于与临床试验阶段相关的属性，合理地优先传播来自大样本量的临床研究结果。例如，Nirsevimab已成功完成3期临床试验，因此只提供了3期效力和安全性数据。 5.展望 本文全面回顾了儿童和孕妇RSV疫苗研究的当前进展。本综述的发现为RSV疫苗的未来发展提供了宝贵的见解和新思路。尽管RSV疫苗最近取得了进展，但四个值得注意的问题仍然存在：首先，RSV疫苗的保护效果持续时间，已有报道称像MK1654这样的疫苗可持续长达一年，但需要进一步研究以确定它们的长期效力；其次，尽管已观察到老年人、孕产妇免疫和婴儿单克隆抗体治疗的RSV疫苗取得了成功的结果，但6个月至5岁的儿童仍需要保护；第三，RSV和多种流感病毒流行季节的同时出现导致婴儿经常经历多种病毒感染。同时给予RSV和流感疫苗的效力和安全性需要通过更多数据进一步证实。第四，尽管母婴免疫是保护新生儿的有效方法，但产前疫苗接种对胎儿发育的潜在影响需要进一步审查。