COVID-19 mRNA vaccine targeting S-RBD (RNACure Biopharma)

自2019年底以来，SARS-CoV-2感染引发的新冠肺炎疫情给缺乏有效治疗手段的世界带来了巨大负担。SARS-CoV-2感染诱导严重的内皮病变，其特征是肺血管系统中大量内皮细胞损伤和微血栓聚集。此外，在患有严重新冠肺炎的人群中，广泛的微血栓和高凝状态更为常见，这表明肺内皮病是常见的新冠肺炎并发症。严重的新冠肺炎患者更容易出现肺血管内皮细胞损伤，如细胞凋亡和紧密连接丢失，以及精心策划的血管内凝血病，这增加了早期诊断这些综合征可能对这些患者大有裨益的可能性。然而，在死后肺中观察到的内皮病变是否是通过直接的病毒结合介导的仍然存在争议。2023年7月14日，广州医科大学王健及钟南山共同通讯在Signal Transduction and Targeted Therapy 在线发表了题为“SARS-CoV-2 spike protein receptor-binding domain perturbates intracellular calcium homeostasis and impairs pulmonary vascular endothelial cells”的研究论文，该研究揭示SARS-CoV-2刺突蛋白受体结合域干扰细胞内钙稳态并损害肺血管内皮细胞。暴露于SARS-CoV-2的刺突蛋白或受体结合域（S-RBD）显著影响内皮细胞并诱导肺血管内皮病变。在本研究中，使用血管紧张素转换酶2人源化近交系（hACE2 Tg）小鼠和培养的肺血管内皮细胞来研究刺突蛋白/S-RBD如何影响肺血管内皮。结果表明，S-RBD通过TRPV4的急性激活导致细胞内游离钙浓度（[Ca2+]i）的急性到延长诱导，并导致培养的人肺动脉内皮细胞（PAEC）中机械敏感通道Piezo1和储存操作钙通道（SOCC）关键组分Orai1的延长上调。在机制上，S-RBD与ACE2相互作用，诱导涉及Orai1、Piezo1和TRPC1的簇的形成，促进Piezo 1和SOCC的通道激活，并导致细胞凋亡升高。这些作用被抑制S-RBD和ACE2之间结合的Kobophenol A或细胞内钙螯合剂BAPTA-AM阻断。GsMTx4阻断Piezo1和SOCC通过使升高的[Ca2+]i正常化，有效保护S-RBD诱导的hACE2-Tg小鼠肺微血管内皮损伤。与原型菌株相比，S-RBD的奥密克戎变异株（BA.5.2和XBB）诱导的细胞凋亡明显减轻。转录组学分析表明，原型S-RBD比德尔塔或Lambda S-RBD产生更严重的急性影响。总之，该研究提供了令人信服的证据，证明S-RBD可以通过与ACE2结合并通过上调Piezo1和Orai1触发[Ca2+]i来诱导持续的肺血管内皮损伤。靶向抑制ACE2-Piezo1/SOCC-[Ca2+]i轴是治疗S-RBD诱导的肺血管疾病的有效策略。据报道，在培养细胞模型和实验动物模型中，暴露于促进与宿主细胞质膜上受体结合的刺突蛋白或受体结合结构域（S-RBD），如血管紧张素转化酶2（ACE2），可以直接影响肺血管系统的内皮。在分子水平上，进行性血管内皮病是通过下调ACE2和线粒体损伤以及激活免疫反应（涉及血管内皮细胞和先天免疫细胞之间的串扰）等机制发展起来的。这些证据强烈表明，在没有完全病毒感染和随后诱导的微环境变化的情况下，特异性棘突蛋白/S-RBD-宿主相互作用可能足以损害肺血管内皮，并导致新冠肺炎的内皮病变和内皮功能障碍。然而，相关的潜在机制仍不清楚，需要进一步研究。研究报告了SARS-CoV-2或新冠肺炎感染人群中肺动脉高压（PH）的发生和发展。在感染SARS-CoV-2后，非重症监护室（ICU）和ICU人群中预测的PH患病率应分别为12%和39%。这些临床发现表明SARS-CoV-2、发育性肺血管损伤和肺动脉高压之间存在关联。与新冠肺炎相关的肺血管病与肺动脉高压具有许多病理生理学和病理生物学特征，包括平滑肌肥大和重塑、内皮功能障碍和微血管微血栓。在急性感染期间，肺血管中微血栓的增加可能会导致慢性血栓栓塞性PH的进展。在长期感染期间，持续的肺血管损伤和微血栓的积聚可能共同驱动长期的肺血管炎症和重塑，这表明PH是一种长期的新冠肺炎并发症，值得进一步评估和关注。先前的研究表明，内皮损伤在启动肺血管重塑和PH中起着至关重要的作用。内皮细胞死亡导致细胞凋亡和增殖之间的失衡，从而出现并促进管腔闭塞病变的建立。此外，内皮细胞损伤通过旁分泌机制刺激平滑肌细胞增殖和内/外膜肥大。这些机制共同促进了PH相关肺血管重塑的发病机制，这也是S-RBD诱导的血管损伤的潜在机制。SARS-CoV-2刺突蛋白受体结合域(S-RBD)诱导人肺动脉内皮细胞内钙稳态的急性到长期扰动（图源：Signal Transduction and Targeted Therapy ）在已有知识的基础上，通过使用体内ACE2人源化近交系小鼠（hACE2 Tg）、体外培养的人和小鼠肺血管内皮细胞，本研究旨在系统地确定刺突蛋白/S-RBD对肺血管内皮和内皮细胞的作用，还探讨了刺突蛋白/S-RBD如何影响细胞内钙稳态并诱导血管内皮细胞损伤的潜在机制。这项研究首次证明，刺突蛋白/S-RBD可以通过依赖于S-RBD-ACE2相互作用、细胞内钙的存在和ACE2钙通道簇的形成的机制，影响Piezo1和SOCC等钙通道的激活和表达。这些机制被针对S-RBD-ACE2相互作用的特异性抑制剂、细胞内钙螯合剂或针对Piezo1和SOCC的抑制剂抑制。这些数据强调了钙通道在刺突蛋白/S-RBD诱导的肺血管功能障碍和内皮细胞损伤中的潜在作用和贡献。此外，通过使用特异性钙通道抑制剂，该研究结果有力地表明，靶向抑制细胞内钙调节可能是治疗S-RBD诱导的肺血管损伤的有力策略，为新冠肺炎相关肺血管疾病的治疗和长期新冠肺炎并发症的管理提供了新的见解。文章来源“iNature”责编|文竞择校对|文竞择End 往期精选 围观历史性突破！不需卵子和精子就可以合成人类胚胎 热文 富豪用儿子血浆“回春”科学吗？Science：血液牛磺酸缺乏驱动衰老 热文 世界首例！35岁的她，通过机器人操刀移植的子宫，成功诞下宝宝 热文‍为了避免心脏骤停，53岁的他成为“第一个”植入开创性除颤器的心脏病患者 热文 首次披露！175家生物制药公司的薪资数据：薪资中位数达20万美元 点击“阅读原文”，了解更多~