Microbial degradation is an important solution for antibiotic pollution in livestock and poultry farming wastes. This study reports the isolation and identification of the novel bacterial strain Serratia entomophila TC-1, which can degrade 87.8 % of 200 mg/L tetracycline (TC) at 35 °C, pH 6.0, and an inoculation amount of 1 % (v/v). Based on the intermediate products, a possible biological transformation pathway was proposed, including dehydration, oxidation ring opening, decarbonylation, and deamination. Using Escherichia coli and Bacillus subtilis as biological indicators, TC degraded metabolites have shown low toxicity. Whole-genome sequencing showed that the TC-1 strain contained tet (d) and tet (34), which resist TC through multiple mechanisms. In addition, upon TC exposure, TC-1 participated in catalytic and energy supply activities by regulating gene expression, thereby playing a role in TC detoxification. We found that TC-1 showed less interference with changes in the bacterial community in swine wastewater. Thus, TC-1 provided new insights into the mechanisms responsible for TC biodegradation and can be used for TC pollution treatment.

2024-09-01·LEUKEMIA

Older MRD vs. younger MUD in patients older than 50 years with AML in remission using post-transplant cyclophosphamide

Article

作者: Nagler, Arnon ; Pascual Cascon, Maria Jesús ; Kulagin, Alexander ; Meijer, Ellen ; Sanz, Jaime ; Peccatori, Jacopo ; Labopin, Myriam ; Brissot, Eolia ; Ciceri, Fabio ; Piemontese, Simona ; Van Gorkom, Gwendolyn ; Spyridonidis, Alexandros ; Rovira, Montserrat ; Savani, Bipin ; Choi, Goda ; Bazarbachi, Ali ; Broers, Annoek E C ; Vydra, Jan ; Mohty, Mohamad ; Sica, Simona

An increasing number of older patients with acute myeloid leukemia (AML) are offered an allogeneic hematopoietic stem cell transplantation (allo-HSCT). Normally, older patients have older matched related donors (MRD). Matched unrelated donors (MUD) are an important alternative, but it remains unclear whether a younger MUD is associated with better outcomes, especially in the context of post-transplant cyclophosphamide (PTCy). We compared outcomes of patients older than 50 years with AML in first complete remission (CR1) and receiving a first HSCT from a 10/10 MUD aged younger than 40 years to those receiving a graft from a MRD aged older than 50 years, using PTCy and with well-known transplant conditioning intensity (TCI) score. A total of 345 consecutive patients were included and classified according to TCI score as low, intermediate, or high. On multivariable analysis in the TCI-intermediate/high group, MUD was associated with better graft-versus-host disease-free, relapse-free survival, lower non-relapse mortality and lower relapse incidence. For patients receiving a TCI-low regimen, outcomes are independent on the type of donor. In patients with AML in CR1, older than 50 years and receiving a TCI-intermediate/high conditioning regimen using PTCy, a MUD younger than 40 years is preferable over a MRD older than 50 years.

2024-08-01·LANCET

Nemolizumab with concomitant topical therapy in adolescents and adults with moderate-to-severe atopic dermatitis (ARCADIA 1 and ARCADIA 2): results from two replicate, double-blind, randomised controlled phase 3 trials

Article

作者: Nami, Navid ; Krasowska, Dorota ; Pauser, Sylvia ; Papp, Kim A ; Pink, Andrew E ; Sauder, Maxwell B ; Thaçi, Diamant ; Reich, Adam ; Rewerska, Barbara ; Kalowska, Monika ; Stein Gold, Linda ; Wollenberg, Andreas ; Legat, Franz J ; Bouaziz, Jean-David ; Silverberg, Jonathan I ; Magnolo, Nina ; Padlewska, Kamila ; Carrascosa, José Manuel ; Ulianov, Liliana ; Szepietowski, Jacek C ; Jain, Vipul ; Piketty, Christophe ; Fleuranceau Morel, Patricia ; Havlíčková, Blanka ; Cheong, Soo Yeon

BACKGROUND:

Nemolizumab, an interleukin (IL)-31 receptor subunit α antagonist, inhibits the IL-31 pathway of itch and skin inflammation in atopic dermatitis. Two international phase 3 studies were done to assess the efficacy and safety of nemolizumab in atopic dermatitis. In this Article we report results for the 16-week initial treatment period of both trials.

METHODS:

ARCADIA 1 and ARCADIA 2 were identical 48-week randomised, double-blind, placebo-controlled phase 3 trials in adult and adolescent participants (aged ≥12 years) with moderate-to-severe atopic dermatitis, associated pruritus, and inadequate response to topical steroids. Participants were enrolled from 281 clinics, hospitals, and academic centres in 22 countries across both trials, and were randomly assigned (2:1) to receive nemolizumab 30 mg subcutaneously (baseline loading dose 60 mg) or matching placebo once every 4 weeks with background topical corticosteroids (TCS) with or without topical calcineurin inhibitors (TCI; ie, TCS-TCI background treatment). Randomisation was done via interactive response technology and stratified by baseline disease and pruritus severity. Study staff and participants were masked throughout the study, with outcome assessors masked until database lock. Coprimary endpoints at week 16 post-baseline were Investigator's Global Assessment (IGA) success (score of 0 [clear skin] or 1 [almost clear skin] with a ≥2-point improvement from baseline) and at least 75% improvement in Eczema Area and Severity Index score from baseline (EASI-75 response). Outcome rates were compared between groups with the Cochran-Mantel-Haenszel test adjusting for randomisation strata. The key secondary endpoints were the proportion of participants with Peak Pruritus Numerical Rating Scale (PP-NRS) score improvement of at least 4 points at weeks 1, 2, 4, and 16; PP-NRS score below 2 at weeks 4 and 16; Sleep Disturbance Numerical Rating Scale score improvement of at least 4 points at week 16; EASI-75 response plus PP-NRS score improvement of at least 4 points at week 16; and IGA success plus PP-NRS score improvement of at least 4 points at week 16. Efficacy analyses were done on an intention-to-treat basis; safety analyses included all participants who received one dose of nemolizumab or placebo. Both studies are completed (ClinicalTrials.gov: ARCADIA 1, NCT03985943 and ARCADIA 2, NCT03989349).

FINDINGS:

Between Aug 9, 2019, and Nov 2, 2022, 1728 participants were enrolled across both trials: 1142 were allocated to nemolizumab plus TCS-TCI (620 in ARCADIA 1 and 522 in ARCADIA 2) and 586 to placebo plus TCS-TCI (321 in ARCADIA 1 and 265 in ARCADIA 2). ARCADIA 1 included 500 (53%) male participants and 441 (47%) female participants, and ARCADIA 2 included 381 (48%) male participants and 406 (52%) female participants. Mean age ranged from 33·3 (SD 15·6) years to 35·2 (17·0) years across the treatment groups. Both trials met the coprimary endpoints; at week 16, a greater proportion of participants receiving nemolizumab plus TCS-TCI versus placebo plus TCS-TCI had IGA success (ARCADIA 1: 221 [36%] of 620 vs 79 [25%] of 321, adjusted percentage difference 11·5% [97·5% CI 4·7-18·3], p=0·0003; ARCADIA 2: 197 [38%] of 522 vs 69 [26%] of 265, adjusted difference 12·2% [4·6-19·8], p=0·0006) and an EASI-75 response (ARCADIA 1: 270 [44%] vs 93 [29%], adjusted difference 14·9% [7·8-22·0], p<0·0001; ARCADIA 2: 220 [42%] vs 80 [30%], adjusted difference 12·5% [4·6-20·3], p=0·0006). Significant benefits were observed with nemolizumab for all key secondary endpoints including improvement in itch, as early as week 1, and sleep improvement by week 16. The safety profile was similar between nemolizumab plus TCS-TCI and placebo plus TCS-TCI. In the safety sets, 306 (50%) of 616 participants (ARCADIA 1) and 215 (41%) of 519 participants (ARCADIA 2) who received nemolizumab plus TCS-TCI had at least one treatment-emergent adverse event (serious treatment-emergent adverse events in six [1%] and 13 [3%], respectively); and 146 (45%) of 321 (ARCADIA 1) and 117 (44%) of 263 (ARCADIA 2) who received placebo plus TCS-TCI had at least one treatment-emergent adverse event (serious treatment-emergent adverse events in four [1%] and three [1%], respectively). Ten serious treatment-emergent adverse events possibly related to nemolizumab were reported in five (1%) participants in ARCADIA 2. No deaths occurred.

INTERPRETATION:

Nemolizumab plus TCS-TCI was efficacious and showed statistically and clinically significant improvements in inflammation and itch in adults and adolescents with moderate-to-severe atopic dermatitis. Nemolizumab might offer a valuable extension of current therapies if approved.

FUNDING:

Galderma.

项与 TC-I 相关的新闻（医药）

2024-09-14

·生物谷

化学和生物学的顶尖试剂品牌正计划直接进入中国市场？

近日，一则消息引起了广泛关注。总部位于英国的Watson International公司悄然注册了“凯望”商标，这一动作引发了关于ChemWhat试剂产品即将全面进入中国市场的近日，一则消息引起了广泛关注。总部位于英国的Watson International公司悄然注册了“凯望”商标，这一动作引发了关于ChemWhat试剂产品即将全面进入中国市场的猜测。这一动态不仅激发了人们对其市场策略的好奇心，还引发了对未来科研合作和竞争格局的深思。“凯望”商标的出现，是否预示着中国科研市场将迎来新的变革？国际品牌的进入，将如何影响本土企业的创新能力和市场竞争力？这些问题无疑值得深入探讨，或将对中国科研与产业的发展产生深远影响。 ChemWhat的品牌背景对于国内生物和化学行业的从业者来说，ChemWhat这个名字可能并不如西格玛奥德里奇（Sigma-Aldrich）、梯希爱（TCI）或LGC那样耳熟能详。这些品牌以其广泛的产品种类、稳定的品质和充足的库存，在全球范围内享有盛誉。然而，ChemWhat在某些尖端试剂领域却设定了“标准背后的标准”，拥有其他品牌难以匹敌的独特价值和优势。例如，在半导体领域，由ChemWhat定标的99.9999%（6N）以上纯度的羰基钨和羰基铬等金属催化试剂可以说独步全球。这些高纯度试剂不仅满足了行业对精密制造的严格要求，还推动了技术的不断进步。而更让竞争对手无法望其项背的是，ChemWhat在这些产品上还具备公斤级放大生产的能力；在IVD（体外诊断）原料领域，将铜、铁等金属控制在ppb（十亿分之一）级别的体外诊断试剂原料，至今也没有其他公司能够生产；此外，ChemWhat高质量的药物参考标准品、同位素标记产品、代谢产物以及各种复杂的研究产品，也被广泛地应用于美国、欧洲和印度制药企业的新药研发和申报过程中；而其升华级别的光电材料则以品类齐全、品质卓越而享誉世界。同时，ChemWhat的其他一些试剂也被国际权威机构如美国药典委员会（USP）、美国食品药品监督管理局（FDA）、欧洲药品质量管理局（EDQM）等作为标准参考试剂。这不仅彰显了ChemWhat产品的高质量和可靠性，还提升了其在国际市场上的声誉。而ChemWhat的很多诊断试剂产品，则被用作罗氏（Roche）、雅培（Abbott）、西门子（Siemens）、积水（Sekisui）、默克（Merck）的定标产品。正如某诊断试剂公司的高管所言：“ChemWhat不仅仅是在提供试剂；它在提供定义标准的基准。如果你在寻找常规试剂，ChemWhat可能不是你的最佳选择。然而，如果你在寻找尖端试剂或背后的标准制定者，你应该找ChemWhat聊聊。”（ ChemWhat is not merely offering reagents; it is providing the benchmarks that define the standards. If you are looking for conventional reagents, ChemWhat may not be your choice. However, if you are in search of cutting-edge reagents or the standard-setters behind them, you should consider reaching out to ChemWhat.”）事实上，ChemWhat的某些明星产品即使是对于国内的相关使用者也并不陌生，例如：ChemWhat享誉全球的MDP粘合剂（CAS注册号：85590-00-7），其市场占有率超过80%；用于铁诊断的Ferene试剂（CAS注册号：79551-14-7），早已成为几乎所有布局此产品线的知名诊断试剂公司不可或缺的原料；还有像是2-甲氧基-4-吗啉基重氮苯氯化锌盐（CAS注册号：67801-08-5）、2-甲氧基-5-甲基-4-[(4-甲基-2-硝基苯基)偶氮]苯重氮(T-4)四氯锌酸盐(2:1)（CAS注册号：61966-14-1）、Gal-G2-CNP（CAS注册号：157381-11-8）等都堪称是体外诊断或者试剂公司的定标产品。产品覆盖领域除了在化学试剂方面的独特优势，ChemWhat的产品线还覆盖着多个生物学试剂领域，只不过其生物学产品目前并没有直接进入中国市场，也暂无此计划。其生物学产品包括：蛋白质纯化试剂：ChemWhat提供的蛋白质纯化试剂广泛应用于生物技术和制药行业，用于蛋白质的分离和纯化。其高效、精准的试剂确保了蛋白质在下游应用中的高质量和高纯度，从而推动了蛋白质研究和药物开发的进展。细胞培养试剂：在细胞生物学研究和生物制药的细胞培养过程中，ChemWhat的细胞培养试剂因其卓越的性能而备受信赖。这些试剂支持各种细胞系的生长和维持，为科研人员提供了可靠的实验基础，并助力新药研发和细胞治疗的发展。基因组学试剂：ChemWhat的基因组学试剂在基因组研究和遗传分析中扮演了关键角色。这些试剂包括用于DNA和RNA提取、扩增和测序的高质量试剂，帮助科研人员揭示基因组的奥秘，推动精准医学和个性化治疗的发展。生物标记物：在疾病诊断和生物医学研究中，ChemWhat提供的生物标记物以其高纯度和高灵敏度著称。这些标记物用于检测和监测各种疾病，为早期诊断和治疗提供了重要依据，提升了医疗研究和临床应用的效果。 ChemWhat的生物学试剂因其高纯度、高效性和高稳定性而在全球多个实验室和生物制药企业中得到了广泛应用和高度赞誉。这些试剂不仅提升了研究的准确性和可靠性，还为科学发现和创新提供了有力支持。 AI化学家横空出世当然，最近ChemWhat最引人注目的新闻无疑是其官网集成的AI化学家功能。这一创新引发了中国日报网、中华网、凤凰网、CCTV等多家媒体的广泛报道。AI化学家功能正在革新化学和生物学基础信息的检索方式，显著解决了信息过载、高成本、数据质量和可靠性不足、语言障碍等难题。ChemWhat官方数据显示，截至目前，ChemWhat AI化学家的全球安装量已超过10万，涵盖了手机和桌面电脑平台。这一突破性进展不仅提升了科研效率，还预示着科学研究领域将迎来更加智能化和便捷的未来。未采用这项技术的工程师和研究人员可能会在快速发展的研发环境中逐渐落伍。进入中国市场的战略意图此前，ChemWhat的品牌试剂并未真正进入中国市场，而是通过国内的合作伙伴进行部分产品的销售。而此次注册的中文商标——“凯望”，是否意味着ChemWhat计划在中国市场启动全面布局？如果ChemWhat真的进入国内，将为中国科研机构和生物制药企业带来诸多益处。首先，高质量的试剂将有助于提升科研实验的准确性和可靠性，推动科学研究的深入开展，并树立新的行业标准。其次，ChemWhat的产品将为生物制药企业提供更多创新药物开发的可能性，加速新药研发进程。此外，ChemWhat还可能会举办一系列学术研讨会和技术培训，帮助中国科研人员更好地了解和使用其产品。随着中国政府对科技创新的高度重视和持续投入，中国化学和生物学领域的发展前景十分广阔。如果“凯望”真的意味着ChemWhat的正式进入，那么可以说是恰逢其时，必将为这一快速发展的市场注入新的活力，并为中国科研机构和生物制药企业提供强有力的支持，推动中国生物化学研究和生物制药行业的快速发展。当然，在此消息确定之前，采购ChemWhat的高品质试剂产品仍然只能通过其在中国的合作伙伴江苏沃尔森或者昆山沃森诺克来完成。

诊断试剂

2024-08-07

·生物制品圈

中科院许雪梅团队融合基因佐剂显著增强HPV16治疗性DNA疫苗免疫效果

导读：HPV（人乳头瘤病毒）是一组无包膜的小 DNA病毒，属乳头瘤病毒科，只感染人类，不对其他动物致病。HPV根据感染部位不同可分为嗜皮肤组和嗜黏膜组两大类。嗜黏膜组又根据感染后诱变的良恶性不同，可划分为：诱导上皮组织恶性增生的高危型HPV(例如，HPV16，HPV18等)和诱导上皮组织良性增生的低危型HPV(HPV6，HPV11等）。高危型HPV感染与颈部、肛门生殖器和口咽部恶性肿瘤有关。HPV16是迄今为止全球引起浸润性宫颈癌的主要类型。预防性HPV疫苗（例如 Gardasil 和 Cervarix）已被证明可有效预防 HPV感染，但对预先存在的HPV感染和相关病变没有任何治疗效果。当前对HPV相关的高级别癌前病变和早期癌症的治疗仅限于手术切除，同时存在许多并发症。对于晚期癌症，手术、放疗和化疗效果较差。因此，开发有效的HPV治疗性疫苗来抑制HPV相关癌症的进展变得非常迫切。 HPVE6 和E7是病毒癌蛋白，在HPV感染的癌前细胞和恶性细胞中组成型表达，是理想的肿瘤特异性抗原。最近，几种针对E6和E7的HPV治疗性DNA疫苗通过电穿孔给药可以诱导 CIN2/3 患者高级别宫颈病变的完全消退和病毒清除。这些试验表明，诱导全身性多功能CD8 + T细胞反应的程度是组织病理学消退和清除HPV感染的主要决定因素。 2009年，中国医学科学院基础医学研究所许雪梅团队编码修饰E7和人热休克蛋白 70 （mE7/HSP70）的HPV融合DNA疫苗诱导 E7 特异性 CD8+T 细胞反应。2024年5月13日，许雪梅团队在Research Square上传文章：Enhanced the immunity activity of HPV16 DNA vaccine by the combination CpG oligonucleotides adjuvant cloned into plasmid backbone and IL-28B gene adjuvant，他们采用多种策略，包括将CpG寡核苷酸（ODNs）插入疫苗载体骨架、选择细胞因子基因佐剂、将mE6/HSP70和mE7/HSP70的组合、电穿孔疫苗接种，以进一步提高HPV16 DNA疫苗的免疫效果。 01 DNA疫苗佐剂-细胞因子为增强该HPV DNA疫苗的免疫活性，研究人员想采用细胞因子基因佐剂。先前已有研究证明L-12、IL-15、IL-28B、IFN-γ 和 GM-CSF 等细胞因子的佐剂活性。然而，在不同类型的疫苗或者不同的接种方式背景下，同一细胞因子的佐剂活性往往是不可预测的。IL-15基因佐剂可显著促进HIV DNA疫苗和克氏锥虫DNA疫苗的特异性CD8+T细胞反应。虽然IL-28B基因佐剂能显著增强HIV DNA疫苗、HSV DNA疫苗和流感疫苗的CD8+T细胞免疫反应，但对结核融合蛋白疫苗触发的免疫保护反应没有任何增强作用。GM-CSF基因佐剂显著增强了SARS-CoV-2 DNA疫苗、抗Lewis肺癌DNA疫苗和HPV16 E6/E7 DNA疫苗的免疫活性，但显著抑制了日本脑炎病毒DNA疫苗诱导的抗体水平和保护作用。许雪梅团队曾经证实过IL-15质粒可增强HPV DNA疫苗触发的CD8+T细胞免疫反应，而在此次研究中首次采用使用IL-28B质粒作为HPV DNA疫苗的佐剂。将质粒 mE7/HSP70 与 IL-28B 质粒或 IL-15 质粒或生理盐水混合，采用电穿孔的方式注射到小鼠的股四头肌中，间隔10天，注射两次。最后一次注射后七天，分离脾细胞并用E749-57肽刺激 40 小时。 IFN-γ ELISpot 测定结果显示，加入 IL-28B 或 IL-15 能够显着增加 E7 特异性 IFN-γ 释放。与IL-15佐剂相比，加入IL-28B佐剂可诱导更高的IFN-γ释放。此外，通过实时荧光定量 PCR 分析特异性颗粒酶 B 的 mRNA 水平。同样，与加入 IL-15 佐剂相比，加入 IL-28B 佐剂导致颗粒酶 B 的 mRNA 水平显著升高。因此，在mE7/HSP70 DNA疫苗中，IL-28B质粒佐剂比IL-15质粒更有效。 02 DNA疫苗佐剂-CpG寡核苷酸 CpG ODN（寡聚核苷酸）是TLR9的激动剂，通过刺激人B细胞和浆细胞样树突状细胞来增强适应性免疫反应。质粒DNA的免疫原性可能因骨架中CpG基序或ODN的存在而受到调节和增强。在人类中，已经确定了四类合成CpG ODN，它们在结构和免疫活性上有所不同，它们是A-、B-、C- 和P型。与A型和B型基序相比，在炭疽DNA疫苗中插入 C 型基序可增强更高的细胞介导和保护性免疫反应，而接种C型 CpG修饰疫苗的小鼠可增强 Th1偏向性 T 细胞反应。这些研究表明，CpG 基序适合用作 DNA 疫苗中的“内置”佐剂。此外，研究人员发现添加更多的 CpG 基序拷贝会产生更强的佐剂效果。研究人员合成了一个对人免疫细胞表现出良好刺激活性的B型CpG 基序（5’TCGTCGTTTTGTCGTTTTGTCGTT3），将12 个拷贝的串联序列插入 pVAX1EI 的骨架中，以获得 CpG 修饰的载体 pmVAX1EI。研究人员以 pVAX1EI （无 CpG 基序）和pmVAX1EI（插入CpG 基序）分别为骨架，构建编码mE7/HSP70的两种质粒：pmVAX1EI-mE7/HSP70和pVAX1EI-mE7/HSP70。同时，还构建了编码IL-28B的两种质粒：pmVAX1EI-IL-28B和pVAX1EI-IL-28B两种质粒。用上述质粒采用mE7/HSP70+IL-28B组合免疫小鼠，分离脾细胞并用 E749-57肽刺激。与 pVAX1EI （无 CpG 基序）相比，CpG修饰的质粒诱导的E7特异性IFN-γ更高，分泌的特异性颗粒酶 B 的 mRNA 水平也更高。因此，在后续实验中使用了CpG修饰的载体pmVAX1EI。 03 HPV 16 E6/E7 DNA疫苗联合免疫目前，针对E7或E6癌蛋白的HPV16治疗性疫苗已有报道，而同时针对E6和E7癌蛋白的DNA疫苗相对较少。研究人员想知道在 IL-28B 基因佐剂存在下，E6/E7联合免疫的效果。研究人员发现，与单独接种 mE7/HSP70 或 mE6/HSP70 相比，接种 mE7/HSP70 +mE6/HSP70 诱导的分泌特异性 IFN-γ 的CD8+T 细胞数量显著更高，分泌特异性 IFN-γ 的CD8+T 细胞数量是单独mE6/HSP70或者mE7/HSP70免疫的3.8倍。在联合免疫的基础上，加入IL-28B佐剂更进一步增强分泌特异性 IFN-γ 的CD8+T 细胞数量。从上述结果来看，在IL-28B基因佐剂存在下，接种编码mE7/HSP70+mE6/HSP70的CpG修饰质粒可以诱导最有效的细胞免疫反应。 04 DNA疫苗在小鼠模型中的预防效果在存在或不存在 IL-28B 基因佐剂的情况下，通过电穿孔对 C57BL/6 小鼠进行 mE6/HSP70 +mE7/HSP70 联合免疫，以仅接种IL-28B基因佐剂质粒作为对照。C57BL/6小鼠（每组6只）通过电穿孔用15μg/质粒肌内注射接种两次，间隔10天。最后一次接种一周后，在右侧皮下注射 7.5×104 个 TC-1 细胞，然后每周监测两次肿瘤生长。在攻毒试验中，不管是否接种L-28B基因佐剂质粒，只要mE6/HSP70 +mE7/HSP70 联合免疫的小鼠体内均没有肿瘤生长。相比之下，仅接种IL-28B质粒的小鼠在TC-1注射后16 天开始出现肿瘤，到第60天肿瘤的平均大小约为387 ± 18 mm2。 05 DNA疫苗在小鼠肿瘤模型中的治疗效果每只小鼠皮下注射 7.5×104 个 TC-1 细胞在右侧。3天后，如上所述用质粒对小鼠进行免疫。然后每周监测两次肿瘤生长。在TC-1细胞攻击后的第14天，不管是否接种L-28B基因佐剂质粒，50%的mE6/HSP70 +mE7/HSP70 联合免疫的小鼠体内无肿瘤生长。第32天，在IL-28B基因佐剂存在下，mE6/HSP70 +mE7/HSP70 联合免疫小鼠的无瘤率高达100%，而在没有IL-28B基因佐剂的情况下，mE6/HSP70 +mE7/HSP70 联合免疫小鼠的为67%。到第60天，仅接种IL-28B质粒的小鼠全长出现肿瘤生长，肿瘤的平均大小约为433±27mm2。上述结果表明，在IL-28B基因佐剂存在下，mE6/HSP70 +mE7/HSP70 联合免疫对移植肿瘤表现出最强的免疫清除活性。 06 总结 DNA 疫苗在动物模型中已被证明是有效的，而 DNA 疫苗在人体临床研究中常常表现出没有够的免疫原性。因此，我们需要调节和增强DNA疫苗的免疫效果。有许多策略可以用来增加 DNA 疫苗的免疫原性，包括添加佐剂（细胞因子，CpG 基序，脂质体，脂多糖等），密码子优化，电穿孔及异源初免/加强免疫等。在这项研究中，研究人员采用多种策略来提升HPV16 DNA疫苗的免疫治疗效果：将CpG基序插入质粒载体的骨架中，将mE7/HSP70质粒与mE6/HSP70质粒混合，结合IL-28B基因佐剂，电穿孔接种，可以显著增强CD8+T细胞特异性反应，从而根除C57BL/6小鼠已建立的移植肿瘤。参考文献 [1] zhou Y, Zhang T, Wang Z, Xu X. Preprint from Research Square, 13 May 2024. https://doi-org.libproxy1.nus.edu.sg/10.21203/rs.3.rs-4338069/v1. 识别微信二维码，添加生物制品圈小编，符合条件者即可加入生物制品微信群！请注明：姓名+研究方向！版权声明本公众号所有转载文章系出于传递更多信息之目的，且明确注明来源和作者，不希望被转载的媒体或个人可与我们联系(cbplib@163.com)，我们将立即进行删除处理。所有文章仅代表作者观点，不代表本站立场。

疫苗寡核苷酸信使RNA临床研究

2024-08-05

·精准药物

近10年FDA批准肿瘤靶向共价抑制剂VS可逆性抑制剂

侃言近日，基因泰克在著名期刊Clinical Pharmacology & Therapeutics （医学Q2 | 药学Q1 | IF=6.7 TOP）上刊载了一篇重要综述，对比了过去10年间，FDA批准的肿瘤靶向共价抑制剂（TCIs）和可逆性抑制剂（RIs）临床药理学分析。分别分析了各自的优势和不足，涉及靶点包括：蛋白酶体、BTK、EGFR、FGFR等。 01 近10年，共价抑制剂药物的复苏近10年，见证了共价抑制剂药物的复苏。多种减轻随机共价结合相关的不良反应的方法在药物研发中的应用，刺激了共价抑制剂进一步的发展，尤其是在肿瘤治疗领域。在过去，共价抑制剂最让人头疼的是不加选择地结合可接近的任何亲核残基，导致脱靶等毒副作用；而当前，TCIs使用弱亲电弹头、以及更加优越的设计性骨干支架作为亲和元件，有助于在目标蛋白质活性位点内选择性结合。因此，增强的选择性减轻了主要脱靶的安全性问题，同时保留了TCIs关键临床优势，如延长药物靶点停留时间。 TCIs甚至应用于靶向集中重要的致癌蛋白，如以前被认为是“不可药物”的蛋白质，KRAS。截至2023年12月，在肿瘤治疗领域已有12个TCIs获得FDA批准上市，针对6种不同类型的蛋白质靶标：蛋白酶体、布鲁顿酪氨酸激酶(BTK)、表皮生长因子受体(EGFR)、输出蛋白1（exportin 1）、成纤维细胞生长因子受体(FGFR)、和G12C突变的Kirsten大鼠肉瘤病毒蛋白(KRAS G12C)，如下图。 TCIs理论上的优势： 1、延长作用时间：TCIs通过与目标蛋白形成共价键，可能具有比RIs更长的作用时间，这取决于目标蛋白的周转率而非药物的半衰期。 2、更低的治疗剂量：由于TCIs具有更高的药理学效力，因此可能需要更低的剂量来实现治疗效果。 3、降低非特异性结合风险：TCIs设计为高度选择性地与特定氨基酸残基（如半胱氨酸和赖氨酸）反应，理论上减少了非特异性结合和相关不良事件的风险。 4、减少药物-药物相互作用（DDI）：由于高选择性和低剂量，TCIs可能具有较低的DDI风险。那么，临床上的结果究竟是怎么样的呢？是骡子是马拉出来溜溜！基因泰克的研究人员从四个数据库（Disqover、drug@FDA、DrugBank、PubMed）中，对比了TCIs和RIs在以上四种预期的相关临床药理学特性。 02 TCIs与RIs在临床药理学特性的对比研究人员根据两种方法对FDA批准的肿瘤治疗领域的TCIs和RIs的可用参数进行比较和对比: (i)在所有目标类别中进行汇总分析; (ii)酌情在各自的目标类别中进行分析; 近10年，在肿瘤治疗领域，共有12个TCIs、10个RIs获得FDA批准，如下表。 PK参数对比：吸收、分布、代谢、消除（a):TCIs、RIs达到最大浓度的时间（b):血浆中未结合的组分（c):PK半衰期（d):血浆总放射性(TRA)半衰期/PK半衰期比通过以上对比，总体而言，除了PK半衰期、和TRA半衰期/PK半衰期比存在统计学差异外，TCIs和RIs之间的ADME性质基本相似。未结合AUCss及其临床疗效终点如下图a，计算了每个靶点类别的未结合曲线下面积（AUCss）和临床疗效终点。其中，为了排除潜在的混杂效应，以下比较中只纳入了7个TCIs和6个RIs。而且在表1中列出了患者的详细信息和给药方案。通过以上图表的对比，总体而言，TCIs的未结合AUCss显著低于RIs，TCIs的中位ORR（客观有效率）、DoR（反应持续时间）、PFS（无进展生存率）普遍优于RIs。未结合的AUCss和中位DoR均具有统计学意义。总体安全分析和暴漏-安全关系如下图b，总结了TCIs和RIs的总体安全性分析、和安全-暴漏（E-F）关系分析图。其中根据每个靶标类别中几个常见不良反应(AE）百分比不低于3进行了安全性分析。根据上图，7个TCIs中有5个在统计上有显著的E-S信号；6个RIs中也有5个报告了统计上显著的E-S信号。在某些不良反应中，如EGFR抑制剂导致的腹泻和皮疹、FGFR抑制剂导致的高磷血症等，TCIs似乎显示了更高的不良反应。然而总体而言，不良反应的概率和暴漏-安全关系方面没有明显的差异。体外酶/转运体抑制以及DDI数据如下表，总结了TCIs和RIs的体外酶/转运体抑制数据、以及药物-药物相互作用（DDI）数据。在所有治疗靶点类别中，TCIs和RIs体外酶抑制数据未显示有任何显著模式。除dacomitinib外，每种药物的报告IC50或Ki值从低nM到高μM(或μg/ mL)不等，与抑制剂类型(TCI或RI)无关。总的来说，体外酶/转运体抑制数据和DDI数据对TCIs和RIs没有差异。 03 总结：药代动力学、疗效、安全性对比药代动力学（PK），包括ADME分析首先，TCIs和RIs的达到最大浓度的时间（Tmax）范围大体上重叠；其次，两种抑制剂中具有临床相关食物效应（FE）的药物数量相当；再者，由于口服吸收后的药物分布可能在一定程度上收到血浆蛋白结合的影响，比较TCIs和RIs的游离组分，均观察到大量血浆蛋白结合（>80%）；此外，TCIs血浆TRA半衰期比起PK半衰期高出数倍，而RIs的血浆TRA半衰期或多或少与它们的PK半衰期相似。这表明共价弹头可能导致于血浆蛋白的非特异性结合增加。有效暴露和疗效终点对比主指标为AUCss、DoR、PFS，次指标为ORR。 TCIs的未结合AUCss显著低于RIs；TCIs的中位ORR（客观有效率）、DoR（反应持续时间）、PFS（无进展生存率）普遍优于RIs。安全性对比总的来说，TCIs和RIs之间常见的≥3级AE发生率相似。但有一个例外，在FGFR类别中，TCI（福替替尼）的≥3级磷血症发生率似乎比RI（培伽替尼和消炎替尼）高得多。但是总的来说，也没有足够的证据表明由于TCIs脱靶结合减少而得出安全性获益的结论。就DDI分析而言，也没有足够的证据表明由于共价弹头于CYP酶的非特异性结合，TCIs成为CYP抑制剂的可能性就增加。也就是说，TCIs与RIs在DDI风险上，似乎没有区别。然而，以上分析仅仅从近10年获得FDA批准的肿瘤治疗领域的TCIs和RIs出发，可能有些限制。首先，对应的样本量可能比较小；其次，分析数据仅限于FDA监管文件和公开文献信息；第三，数据来源的患者群体和药物方案来自不同的研究，可能具有差异性。然而，也有几点是值得注意的。如果蛋白质周转率（或PD半衰期）而不是药物PK半衰期确实影响TCIs的临床疗效，那么在未来的TCIs项目中可以评估较少的给药方案。受体占用指标应继续用于支持TCIs的剂量选择。从目标接触跟踪的角度来看，TCIs比RIs具有优势，因为与蛋白质目标结合的TCIs部分可以很容易地跟踪，例如液相色谱-质谱法。最后，尽管出现了蛋白质降解剂，但鉴于TICs优越的类药特性，应该仍然具有相关性，值得重点关注。最近越来越多的TCIs批准，也可能会推动进一步推动对TCIs研发的热情和投入。声明：发表/转载本文仅仅是出于传播信息的需要，并不意味着代表本公众号观点或证实其内容的真实性。据此内容作出的任何判断，后果自负。若有侵权，告知必删！长按关注本公众号粉丝群/投稿/授权/广告等请联系公众号助手觉得本文好看，请点这里↓

上市批准

100 项与 TC-I 相关的药物交易

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