Acquired hemophilia

摘要 目前，多家医药企业利用基因重组技术研发重组人凝血因子Ⅶ，其中NovoSeven和Sevenfact已获批上市，我国有多个研发中的重组凝血因子Ⅶ处于临床试验阶段。本文简要介绍NovoSeven和Sevenfact的临床试验内容，重点分析其针对血友病A/B的临床试验设计关键要素，包括临床试验开展顺序、药动学和药效学研究、给药方案探索、有效性评价指标、安全性评价关注问题等。希望国内医药企业借鉴已上市产品研发经验，结合自身特点和临床实际情况，完成合理的临床试验方案设计并获得足够的临床试验数据，进而充分说明在研产品的临床有效性和安全性特征，最终实现国产重组人凝血因子Ⅶ的成功研制。 关键词 重组凝血因子Ⅶ；临床试验；有效性评价；安全性评价 _ 正文 _ 人凝血因子Ⅶ（coagulation factorⅦ，FⅦ）是一种维生素K依赖型丝氨酸蛋白酶，以406个氨基酸的单链酶原形式存在于体内，在特定情况下152位精氨酸和153位异亮氨酸之间的肽键断裂形成有生物学活性的双链FⅦ。活化的凝血因子Ⅶ（activated FⅦ，FⅦa）主要通过组织因子依赖性作用途径和血小板依赖性作用途径发挥凝血作用[1-2]：FⅦa通过旁路途径参与体内凝血过程，可与组织因子（tissue factor，TF）形成FⅦa⁃TF复合物，进而激活凝血因子FX，促进机体的凝血反应；当给予超生理浓度的大剂量FⅦa时，FⅦa以不依赖TF的形式与活化的血小板表面结合，促进凝血因子的活化和凝血酶的合成。 由于血液中FⅦ含量较低（0.5~2.0mg·L-1，其中FⅦa仅占1%），且半衰期较短（约2.5h），使得规模化制备人血源性FⅦa非常困难[3]。自20世纪80年代以来，多家医药企业利用基因重组技术制备重组活性凝血因子Ⅶ（recombinant activated coagulation FactorⅦ，rFⅦa），Novo Nordisk公司的NN1731和N7⁃GP，Bayer公司的BAY86⁃6150，CSL公司的CSL⁃689，Catalyst Biosciences公司的MarzAA等已经进入临床试验阶段，Novo Nordisk公司的NovoSeven，LFB公司的Sevenfact，AryoGen Pharmed公司的AryoSeven等已获批上市。目前，我国虽然尚无国产rFⅦa获批上市，但是已有研发中的rFⅦa进入临床试验阶段。 本文主要介绍已上市的NovoSeven和Sevenfact相关临床试验内容，重点关注针对血友病A/B受试者的临床试验设计。 1 NovoSeven的主要临床试验 Novo Nordisk公司生产的rFⅦa是活性双链形式，由新生仓鼠肾（baby hamster kidney，BHK）细胞表达，商品名为NovoSeven。上市后，生产工艺变更加入了室温（25℃）稳定剂，药动学（pharmacokinetics，PK）特征、临床有效性和安全性均没有变化，只是商品名变为NovoSeven RT。自20世纪90年代以来，本品已在欧洲（1996年）、美国（1999年）、日本（2000年）等多个国家和地区获批上市[2]，于2002年获批进口我国。基于NovoSeven/NovoSeven RT已完成的多项针对不同适应证人群的临床试验，获批用于伴有或不伴有抑制物的先天性血友病患者、获得性血友病患者、先天性因子Ⅶ缺乏患者和血小板输注无效的格兰茨曼血小板无力症患者的出血治疗和围手术期管理。 1.1 临床PK研究 针对血友病A/B成人和儿童患者：①在15例非出血和出血状态的血友病A/B患者（FⅧ/FⅨ<1%）中进行了单剂量（17.5，35和70μg·kg-1）NovoSeven的PK试验，结果表明本品PK参数在评价剂量范围内呈线性关系[4]。②在5例成年男性（给药剂量90μg·kg-1）和10例（2~12岁）儿童男性（90和180μg·kg-1这2个剂量交叉给药）的伴有或不伴有抑制物重型血友病A患者中进行了推注单剂量NovoSeven的PK试验，结果表明儿童血友病A患者血浆FⅦ增加量与给药剂量成正比，相同给药剂量（90μg·kg-1）的儿童比成人清除速度明显加快，提示可能儿童患者需要更高的给药剂量才能达到与成人患者相同的血浆FⅦ水平[5]。 针对先天性FⅦ缺乏症成人患者：在5例患有严重先天性FⅦ缺乏症（<1%）的患者中进行了单剂量（15，30μg·kg-1）NovoSeven的PK试验，结果显示2种给药剂量的PK参数无显著差异，因此临床给药剂量基于患者体重和血浆量、止血需要FⅦ的量、本品增量回收率等因素设置[6]。 针对健康成人受试者：①在35例健康的高加索人和日本人中进行40，80和160μg·kg-1剂量递增的NovoSeven单剂量PK试验，并根据性别和种族对受试者进行分层分析，PK特征显示与剂量呈等比例关系，但与性别和种族无关[7]。②在22例健康男性受试者中进行双向交叉、单剂量（90μg·kg-1）2种制剂（NovoSeven和NovoSeven RT）的PK试验，结果证明了2种制剂的生物等效性[8]。 1.2 有效性和安全性评价 1.2.1 针对伴有抑制物的血友病A/B患者 1.2.1.1 开放协议使用（open protocol use） 开放协议研究（Study A）是在PK试验开展后不久进行的，是产品研发阶段接受NovoSeven治疗的患者人数最多的临床研究[9-11]。本研究通过“同情用药”计划纳入483例患者，包括（伴有或不伴有抑制物的）血友病A/B患者、FⅧ或FⅨ获得性抑制物的患者、因子Ⅶ缺乏症患者。这些患者的临床情况多样，包括肌肉/关节出血、皮肤黏膜出血、手术预防、颅内出血和其他紧急情况。该计划由Novo Nordisk公司提供给药剂量建议，但最终给药剂量取决于研究者的决定，临床结果未以标准化方式报告[12]。 1.2.1.2 剂量研究（dosing study，Study B） Study B是一项双盲、随机、对照临床试验，评价了35和70μg·kg-1这2种给药剂量NovoSeven治疗伴有或不伴有抑制物的血友病A/B患者关节、肌肉和皮肤黏膜出血时的有效性和安全性[12]。78例患者在治疗中心接受评估后立即（出血后4~18h）接受NovoS⁃even治疗，每隔2.5h重复1次给药（有些患者给药间隔时长至4h），给药后（12±2）h或治疗结束时（以先到者为准）评价止血疗效。根据研究者评估，35μg·kg-1组（35例患者）和70μg·kg-1组（43例患者）的止血效果：极好为59%和60%，有效为12%和11%，部分有效为17%和20%。2个剂量组达到止血效果的平均给药次数为2.8和3.2次。研究没有观察到出血治疗的剂量效应关系。本研究要求患者在医院接受治疗，因此治疗时间的影响未知。 1.2.1.3 外科研究（surgery studies） 评价对伴有抑制物的血友病A/B患者围手术期治疗的有效性和安全性的临床试验包括2部分：Study C和Study D。 Study C是一项随机、双盲、平行临床试验，评价2种剂量NovoSeven（35和90μg·kg-1）对伴有抑制物的血友病A/B接受手术治疗的有效性和安全性[13]。根据止血需要，29例受试者（35μg·kg-1组15例、90μg·kg-1组14例）在术前和术中静脉推注本品，持续至缝合伤口48h内，每隔2h重复给药1次，d3~d5内每隔2~6h重复给药1次。经过最多5d的双盲治疗后，如有治疗必要则以开放标签的试验方式继续维护治疗，每2~6h重复给药90μg·kg-1。疗效评价包括术中和术后缝合伤口（0h）到d5，结果显示97%（28/29）的患者实现了术中止血；48h时90μg·kg-1剂量组和35μg·kg-1剂量组分别有100%（14/14）和73%（11/15）的患者达到止血效果；d5时90μg·kg-1剂量组和35μg·kg-1剂量组分别有93%（13/14）和73%（11/15）的患者达到止血效果，23例患者完成了整个研究[12]。 Study D是一项开放标签、随机、平行临床试验，比较24例接受择期手术的伴有抑制物的血友病A/B患者中静脉推注（bolus intravenous，BI）和持续静脉输注（continuous intravenous，CI）NovoSeven的安全性和有效性。术前BI组（12例）和CI组（12例）均给予90μg·kg-1剂量。BI组的术中到术后d5每2h推注1次，术后d6~d10每4h推注1次，推注剂量为90μg·kg-1；CI组术后前5d输注剂量为50μg·kg-1·h-1，术后d6~d10输注剂量为25μg·kg-1·h-1。对于2个治疗组，在任何24h内均允许2次推注救援剂量90μg·kg-1。结果显示，所有患者术中止血均有效，术后24h时BI组有效率为100%、CI组有效率为83%，术后d5时BI组有效率为92%、CI组有效率为83%，在研究期结束时（术后d10或停止治疗）BI组和CI组的止血效果分别为75%（9/12）和83%（10/12）[12]。 1.2.2 针对先天性FⅦ缺乏症患者 从公司同情用药研究、已发表文献、血友病和血栓形成研究协会（Hemophilia and Thrombosis Research Society，HTRS）登记中收集了相关信息，包括治疗70例FⅦ缺乏症患者的124例次的出血事件、手术和预防治疗数据。NovoSeven剂量范围为6~98μg·kg-1，每2~12h给药1次（但预防治疗的给药频率从bid到每周2次），患者平均接受1~10次药物治疗，总体的治疗有效率为93%[12]。 1.2.3 针对获得性血友病患者 从公司的同情用药研究和HTRS登记中收集了相关信息，共包含4项研究70例患者的113例次出血发作、外科手术及外伤后治疗数据。NovoSeven平均剂量为90μg·kg-1（范围为31~197μg·kg-1），每天平均注射次数为6次（范围为1~10次），总体的治疗（有效和部分有效）有效率为78%（87/112）[12]。 1.2.4 针对格兰茨曼血小板无力症患者 数据来自格兰兹曼血小板无力症登记（Glanzmann's Thrombasthenia Registry，GTR）、HTRS登记和已发表文献，92例患者的266例次出血事件和77例患者的160例次外科手术接受了NovoSeven RT治疗，其中59%（157/266例次）出血事件和59%（94/160例次）外科手术中同时使用其他止血剂。中位给药剂量为90μg·kg-1，给药间隔为3h，总体的治疗有效率为94.4%（出血事件）和99.4%（外科手术）[14]。 2 Sevenfact的主要临床试验 LFB公司生产的rFⅦa是在转基因兔的乳腺中表达，商品名为Sevenfact。本品于2020年4月在美国获批上市，用于成人和青少年（≥12岁）伴抑制物的血友病A/B患者的出血治疗，但不适用于先天性FⅦ缺乏症治疗。美国FDA批准本品上市是基于其递交的针对血友病A/B患者的Ⅰ期临床试验（GTC⁃FⅦa⁃005⁃11）和Ⅲ期临床试验（RB⁃FⅦa⁃006⁃13）的数据。 2.1Ⅰ期临床试验（GTC⁃FⅦa⁃005⁃11） 这是一项单臂、开放标签、剂量递增的Ⅰb期临床试验，评估单次给药（25，75，225μg·kg-1）的PK特征、药效学（pharmacodynamics，PD）特性和用药安全性[15]。共有15例非出血状态下伴有或不伴有抑制物的重度血友病A/B男性成年患者，每个剂量组均要求至少10例受试者。该研究允许受试者以递增的方式暴露于2种剂量，即前10例受试者给予25μg·kg-1的重组人活性凝血因子Ⅶ（rhFⅦa），（30±6）h后经独立的外部数据监测委员会（data monitoring committee，DMC）审查安全性和PD凝血数据，随机选择其中5例受试者和5例新受试者给予剂量75μg·kg-1，在DMC进行了相似的安全性审查后，其余给予25μg·kg-1剂量水平的5例受试者和给予75μg·kg-1剂量水平的5例新受试者给予剂量225μg·kg-1。结果表明，本品具有剂量依赖性PK，PD特征和良好耐受性。基于此试验结果，在Ⅲ期临床试验中选择75和225μg·kg-1这2种剂量进行进一步评估[16]。 2.2 Ⅲ期临床试验（RB⁃FⅦa⁃006⁃13，PERSEPT1） PERSEPT1是一项前瞻性的随机、开放标签、剂量交叉、多中心Ⅲ期临床试验，评估用于青少年和成人血友病A/B患者按需治疗出血的有效性、安全性和PK特性[17]。试验分2个阶段：阶段A将受试者随机分到2种剂量组中（75或225μg·kg-1），主要目标是评估单次给药的安全性，有部分患者参与PK研究；然后进入阶段B，对出血事件进行按需治疗（发现出血症状的4h内），每种初始剂量方案按需治疗3个月后交叉改变剂量再进行3个月的研究，试验周期共6个月。疗效评估终点是12h内持续的临床表现，包括基于四级评分量表的止血疗效评估、是否需要其他止血药物或血液制品、是否需要持续使用研究药物进行治疗以及研究药物给药12h后的疼痛状况。该研究的27例（其中青少年5例）伴有抑制物的血友病A/B患者共发生468例次出血事件（465例轻度/中度出血事件和3例重度出血事件）。75和225μg·kg-1剂量组的止血成功率分别为81.7%和90.8%，与75μg·kg-1剂量相比，225μg·kg-1剂量具有更高的成功率、更低的失败率以及更少的平均给药次数等优点[16]。 2.3 其他临床试验 在ClinicalTrials网站还可以查询到本品的其他试验信息，包括一项随机、开放标签、剂量交叉设计的Ⅲ期临床试验，评估对伴有抑制物的儿童血友病患者出血治疗的PK特性、安全性和有效性研究（PERSEPT2）；一项多中心、单臂的Ⅲ期临床试验评估对伴有抑制物的血友病A/B患者围手术期管理的安全性和有效性研究（PERSEPT3）。 3 对重组FⅦ临床试验的分析 通过上述介绍可以看出，虽然NovoSeven与Sevenfact的上市时间相差20多年，但是2个产品的临床试验重点关注内容基本保持一致，其中有许多非常值得学习和借鉴的内容。 3.1 循序渐进地开展临床试验 NovoSeven的研发较早，自研发开始至上市后陆续开展了多项临床试验。适应证选择方面，先针对相对低危适应证开展临床试验，再结合前期数据用于相对高危适应证的临床试验。本品先后开展了针对血友病A/B患者、针对先天性FⅦ缺乏症患者、获得性血友病患者和格兰茨曼血小板无力症患者等的多项临床试验，基于已完成的临床试验数据，药品监管机构批准其上市用于相应患者的治疗。2022年欧洲EMA补充批准NovoSeven用于当子宫收缩剂不足以止血的严重产后出血，支持新适应证疗效的数据集包括针对孕产妇产后大出血抢救的一项开放标签、随机、对照试验（试验4816）的关键数据和4项非干预性研究的支持性观察数据[18]。 Sevenfact作为新上市产品，目前仅开展了针对血友病A/B患者的临床试验。从各项临床试验开展时间来看，遵循了先开展成年和青少年受试者的临床试验，积累一定的临床试验数据后再开展儿童受试者临床试验的研究顺序。即先完成了针对青少年和成人血友病患者的临床试验（PERSEPT1），现在正在开展针对儿童血友病患者的临床试验（PERSEPT2）。 对于血友病患者来说，NovoSeven先开展用于出血治疗的临床试验，再开展用于围手术期管理的临床试验。Sevenfact也是在评估按需治疗止血的疗效后继续开展了针对围手术期管理的临床试验（PER⁃SEPT3）。经验证围手术期管理有效性的基础上，NovoSeven还开展了2项临床试验（Study C和Study D）比较2种剂量和2种给药方式对围手术期管理的影响。 3.2 充分的PK和PD研究 PK⁃PD研究是整个临床研究的基础和重要组成部分，据此研究结果可以科学地设置给药方案并在随后的确证性试验中加以验证。针对血友病A/B患者的PK试验，2个产品均首选非出血状态的重型血友病患者，谨慎地探索了3个剂量组的PK特征，且均是在完成前一个剂量的安全性评估后再开展下一个剂量组的临床试验。 此外，2个产品针对药学变更均补充了临床PK试验加以验证和说明。NovoSeven上市后变更生产工艺（加入常温稳定剂），为此补充了一项在22例健康受试者中进行的单剂量NovoSeven和NovoSev⁃en RT的PK和生物等效性试验。Sevenfact的临床试验过程中发生生产工艺的变更，Ⅰ期临床试验期间使用的试验药品是工艺A（小规模工艺）制造的，Ⅲ期临床试验期间使用的是工艺B（大规模工艺）制造的，因此在Ⅲ期临床试验中补充了一项在14例受试者中进行的桥接PK研究。 3.3 不断优化和完善给药方案 尽管rFⅦa用于治疗伴有抑制物的血友病A/B患者的止血作用基本明确，但对于不同程度的出血尚需优化最佳的给药方案，包括治疗时间、给药剂量和给药间隔时间等。针对血友病A/B患者的Ⅲ期临床试验，2个产品均设置2个给药剂量组进行有效性评价，虽然增加了受试者数量和/或观察周期，但是也积累了更多的可供分析数据，为临床应用提供了更科学的给药方案。 作为全球首个研发的重组FⅦ，没有同类已上市产品可供安全性和有效性比较，NovoSeven的临床试验开展得非常谨慎，试验内容考察更为全面。在获得PK参数后，最先于1989年开展了“同情用药”的Study A研究，临床观察的实际剂量范围为60~120μg·kg-1、最常用剂量为90μg·kg-1，欧洲EMA和美国FDA均批准本品说明书中给药剂量为90μg·kg-1。在积累了一定数据后开始的Study B临床试验中，患者接受35或70μg·kg-1的静脉注射给药，推注间隔（2.5±0.5）h。为了保障受试者权益，试验中规定每例患者最多治疗4次出血事件，每次出血事件可给予最大剂量至多6次。Study B的临床试验结果进一步证实了NovoSeven的给药方案和止血疗效。获批上市后，NovoSeven仍进行了多项临床试验深入研究rFⅦa的作用机制，探索更优的治疗方案，以便实现快速和可控的止血并提高患者预后质量。经过多剂量探索发现实际使用高剂量是必要的，但是多项临床试验也证明低剂量和高剂量给药方案的有效性和安全性相当，270μg·kg-1和3×90μg·kg-1的给药方案有相似止血功效[19-23]。 Sevenfact与NovoSeven的临床试验内容并不完全相同。基于内皮蛋白C受体（endothelial protein C receptor，EPCR）和FⅦa相互作用可增强FⅦa促发的体内止血，体外研究比较了NovoSeven和Seven⁃fact与EPCR的结合率，结果发现Sevenfact的结合率高25%~30%，且NovoSeven不存在其他结合位点，而Sevenfact可能存在其他次要结合位点[15]。根据前期研究结果并参考NovoSeven临床试验经验，Sevenfact的Ⅰ期临床试验中设置了预期可能出现临床表现的最小剂量和安全剂量范围，还增加了PD的多项检测内容，包括活化的部分凝血活酶时间（activated partial thromboplastin time，aPTT）、凝血酶原时间（prothrombin time，PT）、血小板的凝血酶生成试验（thrombin generation test，TGT）和最大血凝块硬度、凝血酶原片段1和2、D⁃二聚体、凝血酶⁃抗凝血酶复合物等。最后，结合临床前研究和临床PK⁃PD试验结果在Ⅲ期临床试验中设置了更符合Sevenfact自身特点的给药方案，进而当PERSEPT1临床试验进入B阶段后按需治疗出血事件的给药方案针对轻度/中度出血和重度出血有了更为细致的规定[16]。 3.4 选择合理的有效性评价指标 重组人FⅦ用于血友病患者按需治疗出血的主要疗效指标是按照既定的四级评分量表对出血症状和体征的改善进行评价，但2个产品的四级评分量表有不同的侧重点，详见表1。 NovoSeven的疗效评价是基于到医院接受药物治疗后研究者的临床判断，疗效评价的时间（出血停止）基于每次出血事件首次给药的时间长度，在每次给药前、首次给药后8和（12±2）h（除非停止治疗）以及治疗期结束时进行评估。如果研究者判断对第1次或先前输注本品的临床表现与治疗前评估相比“无效”或“部分有效”，则给予第2次或更多剂次。当整体疗效评估时或已给予第6剂次后获得“极好”或“有效”时，终止出血事件的治疗。 Sevenfact的出血治疗大部分是家庭治疗（自我注射），在每次出血事件的首次输注前进行基线评估，在首次给药后的12和24h进行止血疗效评估。四级评分量表是基于固定时间点（12h）进行评估，更便于受试者操作。受试者（和医生，如果有的话）使用四级评分量表评估止血疗效并确定是否需要进一步治疗。四级评分量表记录的“良好”或“极好”反应需要满足以下所有条件：在此出血事件的时间点（12h）之后，不再使用研究药物进行进一步治疗；此出血事件无需其他止血药物治疗；在时间点（12h）之后的出血，无需给予血液制品；超过时间点（12h）后，无法以其他方式解释的疼痛没有增加。如果出血事件在12h内有令人满意的临床表现，但在24h内未达到持续止血，则视为治疗失败，24h后受试者按照医生的指示进行后续给药（其他rFⅦa或活化的凝血酶原复合物浓缩物）。 分析2个产品按需治疗止血疗效评价的区别，NovoSeven的临床试验中要求出现出血症状的4~18h内到医院接受药物的治疗，Sevenfact的临床试验中明确要求出血事件发生后应尽快开始治疗：轻/中度出血事件在发生后4h内必须接受治疗，可选择在家庭接受治疗；严重出血事件发生后4h内可在家庭接受首次给药，但此后需要住院治疗，结果80%的出血事件是在家庭接受治疗。比较来看，临床试验中“到医院接受治疗”是由研究者评估和给药，由此保证了治疗专业性和一致性；“在家庭接受治疗”是由患者或患者家属评估和给药，及早接受治疗的目的是期望在较早的时间点控制出血，进而减小与关节出血事件相关的关节和软骨受损。在家庭接受治疗并不能增加止血疗效，但出血后尽早接受治疗可改善临床结局、减少给药剂量并降低总用药成本，且临床试验中家庭治疗的评估结果可能更贴近上市后的实际使用情况。为了更好地完成临床试验中的“在家庭接受治疗”，需要提前做好充分的家庭治疗培训，有效性评估期间每月返回研究中心进行1次评估，加强患者与研究者的实时交流沟通记录，全流程管控试验药物的规范合理使用。 3.5 长期关注产品的安全性风险 欧洲EMA评估认为使用NovoSeven的不良反应包括静脉血栓栓塞事件、皮疹、瘙痒、荨麻疹、发烧和疗效降低等[24]。Sevenfact临床试验中安全性风险的关注点考虑了多年来NovoSeven临床用药情况，也借鉴了近年来多个在研rFⅦa产品临床试验经验，分析已完成的2项临床试验数据，Sevenfact明确了预期不良事件包括血栓形成、免疫原性和过敏反应。 血栓形成风险方面，考虑到重组人FⅦ不可预测的止血作用[25]，NovoSeven临床试验中加强整个治疗过程中的实验室参数检测来监测疗效、给药频率与血栓形成风险，包括每次出血发作以及每次后续注射之前的血小板计数、纤维蛋白原水平、aPTT和PT，试验中规定如果没有凝血激活的实验室证据，则允许继续治疗。虽然NovoSeven早期研究中无血栓形成事件报告，但对血栓形成的风险仍有担忧。Sevenfact的临床研究加强了凝血功能方面的检测，纳入凝血激活标志物如D⁃二聚体、凝血酶原片段1和2、凝血酶⁃抗凝血酶复合物等，以便监测过度凝血的可能性和血栓形成风险。在临床试验和实际应用中，已有血栓形成危险因素的患者使用时、自身清除率偏低的成年患者使用时、大剂量或重复给药时，均建议谨慎使用并高度警惕血栓形成的潜在风险。 免疫原性风险方面，与所有治疗性蛋白一样，rFⅦa有潜在的免疫原性（抗药抗体、抑制物等）风险。NovoSeven的临床试验检测了针对rFⅦa、BHK细胞蛋白和鼠IgG抗体，Sevenfact的临床试验进行了抗FⅦa抗体、针对宿主蛋白和酪蛋白的特异性抗体检测，关注宿主蛋白残留引起的超敏反应[26]。鉴于抗体检测依赖于测定样本的时间，Sevenfact设置了多个检测时间点，在用药前、用药后24~36h、d14、d28时均进行了免疫原性检测。考虑到抗体检测高度依赖测定方法的敏感性和特异性，因此临床试验前做好了充分的方法学验证。 此外，Sevenfact获批上市后，于2021年4月又开始了一项重点评估针对伴有抑制物的血友病A/B患者出血事件治疗安全性的Ⅳ期临床试验。由此可见，对产品安全性的关注贯穿药物研发全生命周期。 4 总结 近年来，我国制药企业紧跟行业发展趋势，愈加重视新产品研发[27-28]。查询我国“药物临床试验登记与信息公示平台”和相关网站信息，我国已有2个rFⅦa和1个长效rFⅦa进入临床试验阶段，入选的受试者均为成人和青少年先天性血友病A/B患者，已完成的探索性临床试验评价了2/3个剂量单次给药的PK特征，确证性临床试验均是评价按需治疗急性出血的有效性和安全性。从已公布的信息来看，国内医药企业研发的rFⅦa开展了多项临床试验，对临床试验方案中的关键要素也都有各自的细节考虑。 需要提醒的是，在借鉴已上市产品的临床试验方案时，要充分考虑我国的临床实际，规范临床试验的细节设计[29-30]。例如：国内血友病A/B患者的基础疾病状况、日常活动强度、既往按需治疗/预防性治疗习惯、对临床试验的认知等与国外的差异。对于多中心研究，要考虑到不同研究中心的研究者对临床试验方案的执行、治疗标准规范、实验室检测能力等方面的细节差异。 还需要提醒的是，即使药学研究和非临床研究数据提示在研产品与已上市产品高度相似，甚至优于已上市产品的理化特性，临床试验期间仍需密切关注受试者各项指标变化，及时汇总分析阶段性临床试验数据，以便补充和修订临床试验方案，必要时暂停或终止临床试验。如前所述，国外已有多个重组人FⅦ进入临床试验阶段，但其中一些在研产品根据阶段性临床试验有效性或安全性数据提示停止了临床研发，例如：NN1731和BAY86⁃6150因特定氨基酸改变而增强了生物活性，但在临床试验阶段均观察到抗体产生，最终导致试验终止；N7⁃GP通过聚乙二醇化延长了半衰期，但在临床试验中发现缺乏量效反应并且活性较差，同样停止了临床试验。由此可见，与天然FⅦa分子相比，重组制剂分子结构的细微差异即可能影响其生物学特性、有效性和安全性等。 综上所述，本文简要介绍了已上市的重组人FⅦ临床试验、分析临床试验重点关注内容，目的并非引导国内医药企业照搬已上市产品临床试验方案，而是希望国内医药企业借鉴其研发经验，结合在研制剂自身PK⁃PD特征，基于国内的临床实际情况，针对不同的受试者人群设计合理的临床试验方案，注重临床试验期间数据的采集和分析，在保护受试者安全的基础上获得足够的临床试验数据，进而充分验证在研产品的有效性和安全性特征。对于先天性血友病、获得性血友病、先天性FⅦ缺乏和格兰茨曼血小板无力症，在我国都有相当数量的患者用药需求。希望国内医药企业不断探索和创新，成功研制出国产的重组人FⅦ，摆脱本品需要依赖进口的瓶颈，为此类患者提供更多更好的可用药品。 参考文献 详见《中国新药杂志》 2024年 第33卷第13期 识别微信二维码，添加生物制品圈小编，符合条件者即可加入 生物制品微信群！ 请注明：姓名+研究方向！ 版 权 声 明 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RICHMOND, Calif.--( BUSINESS WIRE )--Sangamo Therapeutics, Inc. (Nasdaq: SGMO), a genomic medicine company, today reported on Pfizer Inc.’s announcement of positive topline results from the Phase 3 AFFINE trial ( NCT04370054 ) evaluating giroctocogene fitelparvovec, an investigational gene therapy that Sangamo is co-developing with and licensing to Pfizer for the treatment of adults with moderately severe to severe hemophilia A. Sangamo is eligible to earn from Pfizer up to $220 million in milestone payments upon the achievement of certain regulatory and commercial milestones for giroctocogene fitelparvovec and product sales royalties of 14% - 20% if giroctocogene fitelparvovec is approved and commercialized, subject to certain reductions. Pfizer reported that the AFFINE trial achieved its primary objective of non-inferiority, as well as superiority, of total annualized bleeding rate (ABR) from Week 12 through at least 15 months of follow up post-infusion compared with routine Factor VIII (FVIII) replacement prophylaxis treatment. Following a single 3e13 vg/kg dose, giroctocogene fitelparvovec demonstrated a statistically significant reduction in mean total ABR compared to the pre-infusion period (1.24 vs 4.73; one-sided p-value=0.0040). Key secondary endpoints as defined by the trial protocol were met and also demonstrated superiority compared to prophylaxis. 84% of participants maintained FVIII activity >5% at 15 months post-infusion (one-sided p-value = 0.0086) with the majority of participants having FVIII activity ≥15%, and the mean treated ABR showed a statistically significant 98.3% reduction from 4.08 in the pre-infusion period to 0.07 post-infusion (from Week 12 up to at least 15 months [15-44 months]; one-sided p-value < 0.0001). Throughout the trial, among all dosed participants, one participant (1.3%) returned to prophylaxis post-infusion. In the AFFINE trial, giroctocogene fitelparvovec was generally well tolerated. Transiently elevated FVIII levels ≥150% were observed in 49.3% of dosed participants, as measured via chromogenic assay, with no impact on efficacy and safety results. Serious adverse events were reported in 15 patients (20%), including 13 events reported by 10 patients (13.3%) assessed as related to treatment. Treatment-related adverse events generally resolved in response to clinical management. “ For people living with hemophilia A, the physical and emotional impact of needing to prevent and treat bleeding episodes through frequent IV infusions or injections cannot be underestimated,” said Professor Andrew Leavitt M.D., AFFINE lead investigator, Departments of Laboratory Medicine and Medicine Division of Hematology/Oncology Director, Adult Hemophilia Treatment Center, University of California, San Francisco, CA. “ I’m excited by the strength of these positive results from the AFFINE trial that show giroctocogene fitelparvovec was generally well tolerated, and demonstrate the transformative potential of this gene therapy candidate to provide superior bleed protection compared with routine FVIII prophylaxis, while helping relieve the treatment burden for people living with hemophilia A.” Giroctocogene fitelparvovec is a novel, investigational gene therapy that contains a bio-engineered AAV6 capsid and a modified B-domain deleted human coagulation FVIII gene. The goal of this investigational treatment for people living with hemophilia A is that a single infusion of giroctocogene fitelparvovec may allow them to produce FVIII themselves for an extended period of time, provide bleed protection and reduce the need for routine prophylaxis with intravenous (IV) infusions or injections. i,ii,iii,iv “ We are thrilled with the positive topline results from the Phase 3 AFFINE trial, which demonstrated the potential of giroctocogene fitelparvovec as a one-time gene therapy for people with hemophilia A and provide a potential alternative to the current burden of disease management,” said Nathalie Dubois-Stringfellow, Ph.D, Chief Development Officer at Sangamo. “ These impressive results further validate the power of our genomic technologies and take us one step closer towards what could become Sangamo’s first medicine commercially available to patients. We greatly appreciate Pfizer’s strong leadership of this important program and look forward to their discussions of these data with regulatory authorities.” In this Phase 3 trial, eligible trial participants were initially enrolled in a lead-in study ( NCT03587116 ) and upon successful completion, were enrolled into the AFFINE trial where they received a one-time 3e13 vg/kg dose of giroctocogene fitelparvovec by IV infusion. Participants in the AFFINE trial were screened with a validated assay designed to identify individuals who test negative for neutralizing antibodies to the gene therapy vector. Clinical trial participants will be evaluated in AFFINE over the course of five years, and up to a total of 15 years as part of a long-term follow-up trial. Pfizer reported that analyses of the full Phase 3 dataset from the AFFINE trial are ongoing and additional data will be presented at upcoming medical meetings. Giroctocogene fitelparvovec has been granted Fast Track and Regenerative Medicine Advanced Therapy designations from the U.S. Food and Drug Administration (FDA), as well as Orphan Drug designations in the U.S. and the European Union. Pfizer reported that it will discuss these data with regulatory authorities in the coming months. Pfizer recently received FDA approval for BEQVEZ™ (fidanocogene elaparvovec), its hemophilia B gene therapy for eligible patients. About the AFFINE Trial The Phase 3 AFFINE (NCT04370054) trial is an open-label, multicenter, single-arm trial to evaluate the efficacy and safety of a single infusion of giroctocogene fitelparvovec in adult male participants (n=75 dosed participants) with moderately severe to severe hemophilia A. Trial participants included in the assessments of the key endpoints of the primary efficacy analysis (n=50) completed a minimum six months of routine FVIII replacement prophylaxis therapy during the lead-in study (NCT03587116) providing data to compare with post giroctocogene fitelparvovec treatment. The primary endpoint measures the total ABR (spontaneous and traumatic bleedings, treated and untreated) from Week 12 through at least 15 months following treatment with giroctocogene fitelparvovec compared to total ABR on prior FVIII prophylaxis replacement therapy. For more information, visit clinicaltrials.gov . Giroctocogene fitelparvovec is being developed as part of a collaboration agreement for the global development and commercialization of gene therapies for hemophilia A between Sangamo Therapeutics and Pfizer. In late 2019, Sangamo transferred the manufacturing technology and the Investigational New Drug application to Pfizer. Under the agreement, Pfizer assumed responsibility for pivotal studies, any regulatory activities, and potential global commercialization of giroctocogene fitelparvovec. About Hemophilia A Hemophilia is an inherited, rare bleeding disorder that causes people to bleed for longer than normal due to a deficiency of a protein required for normal blood clotting, known as clotting Factor VIII (FVIII) in hemophilia A. The severity of hemophilia is determined by the amount of the factor in the blood. The lower the amount of the factor, the more likely it is that bleeding will occur, which can lead to serious health problems. v Hemophilia A occurs in approximately 25 in every 100,000 male births worldwide. vi Approximately 55-75% of males with hemophilia A have a moderate to severe form of the disease. vii For people who live with hemophilia A, there is an increased risk of spontaneous bleeding as well as bleeding following injuries or surgery. v It is a lifelong disease that requires constant monitoring and therapy. viii About Sangamo Therapeutics Sangamo Therapeutics is a genomic medicine company dedicated to translating ground-breaking science into medicines that transform the lives of patients and families afflicted with serious neurological diseases who do not have adequate or any treatment options. Sangamo believes that its zinc finger epigenetic regulators are ideally suited to potentially address devastating neurological disorders and that its capsid discovery platform can potentially expand delivery beyond currently available intrathecal delivery capsids, including in the central nervous system. Sangamo’s pipeline also includes multiple partnered programs and programs with opportunities for partnership and investment. To learn more, visit www.sangamo.com and connect with us on LinkedIn and Twitter/X . Forward-Looking Statements This release contains forward-looking statements regarding Sangamo's current expectations. These forward-looking statements include, without limitation, statements regarding, the potential of giroctocogene fitelparvovec to provide superior bleed protection compared with routine FVIII replacement therapy, that a single infusion of giroctocogene fitelparvovec may allow patients to produce FVIII themselves for an extended period of time, Pfizer’s continued advancements of the giroctocogene fitelparvovec program, the potential for Pfizer to complete clinical development, regulatory interactions, manufacturing and global commercialization of any resulting products, the potential for Sangamo to receive development and commercial milestone payments and royalties, and other statements that are not historical fact. These statements are not guarantees of future performance and are subject to risks and uncertainties that are difficult to predict. Sangamo’s actual results may differ materially and adversely from those expressed in these forward-looking statements. Factors that could cause actual results to differ include, but are not limited to, risks and uncertainties related to: the global business environment, healthcare systems and the business and operations of Sangamo and Pfizer,; the research and development process, including the results of preclinical studies and clinical trials; the regulatory approval process for product candidates across multiple regulatory authorities; the manufacturing of products and product candidates; the commercialization of approved products; the potential for technological developments that obviate technologies used by Sangamo and its partners; the potential for Pfizer to breach or terminate its collaboration agreement with Sangamo; the potential for Sangamo to fail to realize its expected benefits from the Pfizer collaboration; and Sangamo’s need for substantial additional funding to operate as a going concern. There can be no assurance that Sangamo will earn any milestone or royalty payments under the Pfizer agreement or obtain regulatory approvals for product candidates arising from this agreement. Actual results may also differ from those projected in forward-looking statements due to risks and uncertainties that exist in Sangamo's and Pfizer’s operations and businesses. These risks and uncertainties are described more fully in Sangamo’s Securities and Exchange Commission, or SEC, filings and reports, including in its Annual Report on Form 10-K for the year ended December 31, 2023, as supplemented by its Quarterly Report on Form 10-Q for the quarter ended March 31, 2024, each filed with the SEC, and future filings and reports that Sangamo makes from time to time with the SEC. Forward-looking statements contained in this release are made as of July 24, 2024, and Sangamo undertakes no duty to update such information except as required under applicable law. i Ohmori T, Mizukami H, Ozawa K, et al. New approaches to gene and cell therapy for hemophilia. J Thromb Haemost . 2015;13(Suppl 1): S133-142. ii Furlan R, Krishnan S, Vietri J. Patient and parent preferences for characteristics of prophylactic treatment in hemophilia. Patient Prefer Adherence . 2015; 9:1687-1694. iii Centers for Disease Control and Prevention. What is hemophilia? October 2023. Available at: https://www-cdc-gov.libproxy1.nus.edu.sg/hemophilia/about/?CDC_AAref_Val=https://www-cdc-gov.libproxy1.nus.edu.sg/ncbddd/hemophilia/facts.html . Last accessed: July 2024. iv Pfrepper, Christian, et al. " Emicizumab for the Treatment of Acquired Hemophilia A: Consensus Recommendations from the GTH-AHA Working Group." Hämostaseologie (2023). v Srivastava A, Santagostino E, Dougall A, et al. WFH guidelines for the management of hemophilia, 3rd Edition; 2020. Haemophilia, 26(S6), 1–158. vi Iorio A, Stonebraker JS, Chambost H, et al. Establishing the Prevalence and Prevalence at Birth of Hemophilia in Males: A Meta-analytic Approach Using National Registries. Ann Intern Med 2019;171(8):540-546. vii WFH. World Federation of Hemophilia Report on the Annual Global Survey 2022. October 2023. ( https://www1.wfh.org/publications/files/pdf-2399.pdf ). viii Brod M, Bushnell DM, Neergaard JS, et al. Understanding treatment burden in hemophilia: development and validation of the Hemophilia Treatment Experience Measure (Hemo-TEM). J Patient Rep Outcomes. 2023;7(1):17.

武田中国与信念医药集团（以下简称信念医药）今日宣布，国家药品监督管理局（NMPA）已正式受理BBM-H901注射液用于治疗血友病B成年患者的新药上市申请（NDA）。BBM-H901注射液是信念医药自主研发和生产的重组腺相关病毒（AAV）基因治疗药物，未来将由武田中国负责该产品在中国内地、中国香港和中国澳门的商业化推广工作。此次里程碑式进展，意味着该款产品有望为中国血友病B患者带来全新的治疗选择。 张磊教授 BBM-H901注射液注册临床研究的牵头研究者、中国医学科学院血液病医院（中国医学科学院血液学研究所）教授 中国血友病B患者群体仍然存在未被满足的医疗需求，目前多使用凝血酶原复合物（PCC）和凝血因子IX用于替代治疗，存在感染风险和给药不便等问题。同时，由于治疗不充分或不规范，中重度患者常见关节出血和畸形。BBM-H901注射液研究的数据已证实其安全性和有效性1,2 ，我们对该产品的上市及其为患者带来的临床获益充满期待！” BBM-H901注射液 以静脉给药的方式将人凝血因子IX基因导入血友病B患者体内持续表达，提高并长期维持患者的凝血因子水平，用于预防血友病B成年患者出血。2022年，BBM-H901注射液被国家药监局药品审评中心纳入“突破性治疗品种”名单。其研究者发起的临床研究（IIT）的研究结果先后发表于国际权威期刊《柳叶刀-血液病学》和《新英格兰医学杂志》；3年以上长期随访结果在2024国际血栓与止血学会（ISTH）大会上以口头报告形式展示3。 本次递交是基于一项多中心、单臂、开放、单次给药注册临床研究（CTR20212816），旨在评估单次静脉输注BBM-H901注射液在≥18岁且内源性凝血因子Ⅸ（FⅨ）活性≤2 IU/dL（即≤2%）的血友病B患者中的安全性和有效性。截至目前，其III期确证性研究阶段的所有受试者均已完成给药后52周访视。 武田长期致力于罕见疾病治疗领域的创新研发，在血友病领域已陆续引入了针对血友病A和获得性血友病的多项治疗方案。2023年，武田中国宣布与信念医药达成血友病B领域独家商业化合作协议，双方将结合各自领域的优势和资源，加速推动BBM-H901注射液的商业化进程，助力血友病B患者获得创新治疗新选择，共同促进基因疗法的产业发展。 审批编号：C-ANPROM/CN/HG/0006 审批日期：2024年7月 注释 1.Xue F, et al. Lancet Haematol. 2022 Jul;9(7):e504-e513 2.Xue F, et al. N Engl J Med. 2022 Oct 27;387(17):1622-1624 3.Xue F, et al.  Sustained efficacy of gene transfer with BBM-H901 in Chinese Hemophilia B patients: results of long term follow up. 2024 ISTH. OC 30.4 声明 1.本资料仅为介绍企业业务及经营活动等情况，并不以宣传任何公司产品和/或服务为目的，更不应被理解为就任何药物、医疗器械及治疗方案的选择提供任何意见或建议。 2. 如欲了解任何公司产品、疾病和/或诊疗等相关信息，请务必咨询医疗卫生专业人士。 3. 本文所述BBM-H901注射液还未在中国获批上市。 关于武田 武田制药（东京证券交易所股票代码：4502）（纽约证券交易所股票代码：TAK）是一家总部位于日本、以价值观为基础、以研发为驱动的全球生物制药公司。武田致力于将科学研发成果转化为高度创新药品，为患者的健康生活和美好未来保驾护航。武田专注于四大治疗领域的药物研发：肿瘤、消化、神经科学及罕见病领域，并针对血液制品及疫苗领域进行专项研发投入。武田始终专注于高度创新药物的研发，通过开拓全新治疗方案、增强合作研发引擎实力，打造一条稳健且形式多样的产品管线，助力改善人们的生活。 更多信息，敬请访问https://www.takeda.com。 关于信念医药 信念医药集团公司（Belief BioMed Inc.），是一家集基因治疗产品研发、生产和临床应用为一体的高科技企业。公司致力于通过安全高效的病毒载体技术为严重遗传疾病和慢性疾病提供更加有效的创新性基因疗法。公司研发了数百种载体关键技术，包括HEK293细胞悬浮无血清培养工艺和全层析规模化纯化工艺，并建立了基因治疗药物商业化生产平台。公司在靶向不同组织的AAV新型衣壳、高效的转基因表达盒设计、先进的临床级载体制造工艺等领域进行了全面布局。同时还建立了丰富的研发管线，治疗领域覆盖血友病等未被满足临床需求的疾病，多个产品管线已经进入临床研究阶段或IND申报阶段。 更多信息，敬请访问：www.beliefbiomed.com。 前瞻性声明 本稿件及与之相关的所分发的任何资料可能含有与武田未来业务、未来状况和运营业绩有关的前瞻性陈述、看法或意见，包括武田的预估、预测、目标和计划。前瞻性陈述常常包含但不限于下列措辞，例如“目标”、“计划”、“认为”、“希望”、“继续”、“预计”、“旨在”、“打算”、“确保”、“将”、“可能”、“应”、“会”、“或许”、“预期”、“估计”、“预测”或类似表述或其否定形式。 本文中的前瞻性陈述仅基于武田截至发布日期的估计和假设。此类前瞻性声明并非是武田或其管理层对未来业绩所做的任何保证，并涉及已知和未知的风险、不确定性和其他因素，包括但不限于：武田全球业务所面临的经济形势，包括日本和美国的宏观经济环境；竞争压力和发展情况；适用法律法规的变动；产品开发项目的成功或失败；监管当局的决策或做出决策的时机；利率和汇率波动；有关已售产品或候选产品安全或功效的索赔或疑问；已收购公司的合并后整合努力的时机和影响；以及能否剥离对武田运营非核心的资产和任何此类剥离的时机，所有这些都可能会导致武田的实际业绩、表现、成就或财务状况与此类前瞻性陈述所描述或暗指的任何未来业绩、表现、成就或财务状况发生重大偏差。 关于以上及可能影响武田结果、业绩、成就或财务状况的其他因素的更多信息，请参阅武田向美国证券交易委员会提交的Form 20-F最新年报“第3项.关键信息—D.风险因素”和其他报告，具体请查阅武田网站https://www.takeda.com/investors/reports/sec-filings/或www.sec.gov。武田的未来结果、业绩成就或财务地位可能与前瞻性陈述所言传或意会的内容有实质性差距。收到这一新闻稿的个人不应对任何前瞻性陈述寄予不适切的依赖。武田没有义务更新本新闻稿中的任何前瞻性陈述或公司可能发布的任何其他前瞻性陈述，除非是法律或证券交易规则所要求。历史业绩并不能代表未来业绩，而且本新闻稿中的武田业绩并不能指代，也并非是武田未来业绩的预估、预测或推测。