HLA-C

今天小编给大家解读一篇2月发表在Journal of Hepatology杂志（IF：25.7/Q1）的文章“Single cell landscape of functionally cured chronic hepatitis B patients reveals activation of innate and altered CD4-CTL-driven adaptive immunity”。在本文中作者结合单细胞数据、流式细胞术和免疫荧光，阐明与慢性乙型肝炎（CHB）和功能治愈（FC）患者相关的免疫病理细胞状态。背景慢性乙型肝炎(CHB)病毒感染影响2.57亿人，主要在亚太地区和非洲地区，每年估计有80万人死于肝硬化和肝癌。慢性乙型肝炎患者很难彻底治愈和清除病毒感染，在患者血清中出现或不出现抗HBs抗体的情况下，病毒表面抗原(HBsAg)的丧失，也叫功能治愈(FC)。病毒感染的清除在很大程度上取决于强大和持久的适应性免疫反应。病毒特异性CD8 T细胞参与急性乙肝病毒感染。然在慢性乙肝患者中，乙肝病毒特异的CD8 T细胞最终耗尽。最近的研究表明，适应性免疫反应的损害除了高抗原负荷外，还与暴露于病毒抗原的时间有关。先天免疫反应在慢性乙型病毒性肝炎中的具体作用仍存在争议，且相对知之甚少。先天免疫反应通常被认为是慢性乙肝患者的功能受损。最近一项研究发现了一种特定的Kupffer细胞(KC)亚群，该细胞在IL2的存在下重新激活了乙肝病毒特异性CD8 T细胞的抗病毒功能。此外，其他研究表明，NK细胞细胞毒活性的增强与肝脏炎症之间存在正相关关系，尤其是在核苷类似物(NA)治疗后清除乙肝表面抗原的患者中。这些研究暗示了先天免疫细胞在慢性乙肝的解决中的潜在功能。尽管最近的研究已经通过不同测序方法探索了CHB不同阶段的肝脏环境的动态情况，但FC患者的疾病相关细胞状态(DAC)仍然难以捉摸。在本文中，作者主要目的是探索持续控制乙肝表面抗原丢失的机制基础。同时用scRNA-seq和多参数流式细胞术检测了每例肝穿刺活检的核心细胞和匹配的PBMCs，并分离了CHB患者或已实现功能性治愈的患者。通过对转录组谱、推断的细胞间相互作用和基于流式细胞术的验证研究的系统分析，作者发现了不同的免疫和上皮细胞状态，如CD4-CTL、NK细胞、中性粒细胞和表达MHC-II类分子的肝细胞，这些细胞可能在FC患者实现和维持HBsAg持续丢失中发挥重要功能。此外，作者首次提供了FC患者中存在cccDNA的直接证据。结果CHB和FC患者肝脏和PBMCs的单细胞图谱作者将CHB患者分为治疗组(n=29)和未治疗组(n=29)，其中检测到病毒HBsAg, CHB患者达到FC (n=9)。FC患者在治疗后(n=7)或自发(n=2)显示病毒HBsAg清除，并在HBsAg消失后7 ~ 84个月进行分析。作者对肝脏活检和患者匹配的PBMCs中分离出的细胞进行了scRNA-seq，以及多参数流式细胞术。并利用多重免疫荧光(mIF)染色和图像分析对来自同一肝活检的组织切片进行了验证研究（图1A）。为了重点分析免疫细胞亚群和HBV特异性T细胞的表型，CHB患者根据其定量HBsAg (qHBsAg)进行分层，高(>10000 IU/ml)，中(1000-10000 IU/ml)，和低(0.05-1000 IU/ml)（表1）。 表1：样本的EASL指南图1 CHB和FC患者的肝脏单细胞转录组图谱和匹配的PBMCs肝脏中适应性和固有免疫细胞的组成有明显的变化CHB (n=15)和FC (n=8)患者的单细胞转录组分析在肝内捕获了47109个细胞，包括26种不同的主要细胞类型/状态，分别是上皮细胞(肝细胞和胆管细胞)、免疫细胞(T细胞、B细胞、NK细胞、单核细胞、巨噬细胞、树突状细胞、中性粒细胞和肥大细胞)、内皮细胞和星状细胞(图1B)。PBMCs主要由17种不同免疫细胞亚型(主要包括T、NK、单核细胞、DCs和B细胞以及干细胞和中性粒细胞)构成(图1E)。FC患者肝内环境中T细胞显著减少，同时NK细胞和中性粒细胞增加(图1D)。而这一现象在PBMCs种并未观察到(图1G)。流式细胞术(图1H)也证实FC患者肝活检中T细胞的减少和NK/NK T细胞群的增加，而外周血则没有这种类似的改变(图1-I)。总体而言，这些观察结果提示，功能治愈的患者肝脏内的免疫细胞组成可能存在特定变化，而这些变化可能并不总是准确地反映在PBMCs中。FC患者表现为CD8 T细胞耗竭减少并出现CD4相关的适应性免疫应答接下来作者细分了主要的T细胞和NK细胞簇，然后对这些细胞类型进行重新聚类(图2A-A’)。确定了不同的细胞亚型，包括CD4辅助性T细胞、CD4细胞毒性T细胞或CD4-CTLs 、CD8效应T细胞、耗竭的CD8 T细胞、CD8记忆T细胞、Treg 细胞、肝脏常驻NK或LR-NK、常规NK或cNK 细胞以及NK T细胞。FC患者中，耗竭的PDCD1+CD8 T细胞显著减少，FOXP3+Treg几乎完全缺失(图2A-D)。耗竭标志物如TIGIT、LAG3和PDCD1在FC患者中显著降低(图2C-D)。而且这种图变化主要反映在肝脏而非PBMCs。与CHB患者相比，FC患者的FOXP3+ Treg频率下降，在肝脏中更明显(图2C)。对肝脏CD8 T细胞进行流式细胞术分析也显示，在FC患者中，PD1+和TIM3+耗竭CD8 T细胞的频率显著较低(图2E)。这不仅体现在CD69+组织驻留CD8 T细胞中，也体现在转运CD69- T细胞中。根据qHBsAg水平对CHB患者进行分层表明，耗竭CD8 T细胞的减少与qHBsAg的减少相关(图2E)。FC的患者中伴随着耗竭的CD8 T细胞和Treg细胞的丢失，CD4-CTL细胞数量增加（表达效应毒性淋巴细胞相关标志物PRF1、GZMA、GZMK、TNF、NCR3）(图2 F-F’)。此外，这些CD4-CTLs表达与终末分化、抗原敏感的CD4 T细胞(IL7R, KLRG1)相关的标记物，这些标记物显示出独特的炎症和细胞毒性效应细胞特征，包括肿瘤坏死因子(TNF)。同时它们也表达NCR3基因，类似于NK样细胞的特征（图2F, F）。流式细胞术分析显示，在组织驻留(CD69+)和转化(CD69-) T细胞中，KLRG1+ CD4 T细胞的频率均增加(图2F”)。低qHBsAg组CHB患者外周血中CD4+KLRG1+细胞比例显著高于高qHBsAg组。如图2G-G'所示，与高qHBsAg患者相比，低qHBsAg患者KLRG1+ CD4细胞中颗粒酶B和穿孔素的表达增加约2-3倍，进一步证实了qHBsAg的丢失可能与CD4-CTL的出现有关。RNA velocity 分析表明，FC患者CD4-CTL的出现和增加很可能是由naïve CD4细胞分化而来(图2H)。轨迹分析也揭示了CD4-CTL和传统CD8 T细胞之间存在明确界限。作者鉴定了两种CD8 T细胞亚群：一种细胞主要在CHB中，也产生耗竭的CD8 T细胞，以PDCD1、LAG3和TIGIT的表达为标志(图2C, D)。FC的标志是耗竭的CD8 T细胞簇明显消失。剩余的CD8 T细胞亚群向NKT和cNK细胞转变。在CMV暴露的情况下也观察到类似的观察结果，CD8 T细胞表现出先天样特征，这归因于BCL11B表达缺失。cNK和NKT细胞簇在FC患者的LR-NK细胞中增加，这表明从CD8到NKT或cNK到LR-NK的转变可能促进固有免疫激活状态。总之，这些数据表明存在与CD4-CTL表达效应蛋白(PRF1, GZMA, IFNG, TNF)和通路(如IL2, STAT5)相关的适应性免疫应答改变。也强调了T细胞的可塑性以获得先天样特征功能。图2 FC患者表现出Tregs缺失、CD8 T细胞耗竭以及cd4相关适应性免疫反应的出现抗原特异性CD4 T细胞在FC患者中作为病毒清除的关键调节因子接下来，作者利用流式细胞术全面表征并比较了在CHB患者(n=17)和FC患者(n=6)肝脏和PBMCs中发现的CD8和CD4 T细胞群的表型。HBV DNA水平和qHBsAg水平之间有很强的正相关。组织驻留(CD69+) CD4和CD8 T细胞显示了记忆样T细胞(CD127+)频率的增加，以及衰老(CD57+)和终末分化(HLADR+)标志物的丧失。这些观察结果再次表明，不仅在免疫表型变化的稳健性方面，而且在两种组织类型(肝脏与PBMCs)之间观察到的模式方面存在显著差异。耗竭和衰老的丧失，加上记忆样T细胞的增加，提示FC患者在缺乏病毒抗原的情况下，CD4和CD8 T细胞的效应表型和增殖能力增加（补充图1C-E）。这些观察结果表明，FC患者耗竭和衰老的丧失，加上记忆样T细胞的增加，提示FC患者在缺乏病毒抗原的情况下，CD4和CD8 T细胞的效应表型和增殖能力增加。补充图1在HBV感染的自然史中，HBV特异性T细胞，尤其是CD8 T细胞与病毒控制相关。作者询问HBV特异性T细胞应答在CHB和FC患者之间是否有差异。利用酶联免疫斑点技术（Enzyme Linked Immunospot Assay,  ELISpot）对HBV特异性T细胞进行去卷积，发现慢性乙型肝炎患者和FC患者的HBV特异性T细胞应答均具有肽-特异性（peptide-specific）。通过细胞内细胞因子染色进行的进一步分析表明，在出现FC的患者中，HBV特异性T细胞主要包含在CD4 T细胞群中，而HBs-特异性CD4 T细胞的出现频率高于相应的CD8 T细胞(图2I)。在所有CHB患者中均发现了核心和HBx-特异性CD8 T细胞，但频率较低(无论qHBsAg水平如何，图2I)。FC患者的pol和HBs特异性CD8 T细胞明显增加。HBV特异性CD4 T细胞(主要是pol和HBs特异性)只在出现FC的患者中观察到(图2I)，这提示在功能性治愈的长期维持中，某些肽-特异性（peptide-specific）T细胞的稳健效应功能具有重要意义。肝内NK细胞在FC患者中表现为启动状态除了CD4-CTLs的增加外，FC患者还表现出经典固有免疫应答的增加。肝脏scRNA-seq数据的分析显示，LR-NK细胞显著增加(图3A-A′)，这些细胞被认为通过分泌细胞因子和参与与各种类型细胞的信号相互作用(如招募DCs到炎症部位，促进抗原交叉呈递，从而重塑肝脏环境。FCGR3A+传统NK (cNK)细胞直接参与抗体依赖性细胞毒性(ADCC)，并且可促进抗病毒T细胞应答，在FC患者中也显示出轻度增加(图3A-A′)。LR-NK细胞和cNK细胞的免疫效应功能均增加，并具有细胞因子-趋化因子分泌特异性（图3B-C）。此外，肝脏中流式细胞术分析显示，随着qHBsAg水平的下降，CXCR6+ CD69+ NK簇逐渐富集(图3D)。在FC患者中，这些细胞中激活性受体(NKp46、CD38、NKG2D和TRAIL)的表达升高和抑制性受体(如PD1和TIM3)表达降低(图3D’-D’’)。在早期的研究中已经报道过CXCR6+ CD69+ NK细胞是scRNA-seq分析中确定的LR-NK细胞的代表。也就是说，部分FC患者的LR-NK细胞还表现出其他抑制性受体的中高表达，如PD1和LAG3(图3D’-D’’)。基于这些标志物，作者确定了CD69+ CXCR6high CD16-(图3D' )和CD69+ CXCR6low CD16+(图3D' )细胞亚群，这些细胞随着HBsAg水平下降而出现，并在FC中富集。作者还发现了另一个由CD69+CXCR6- CD16-标记的细胞群，该细胞中qHBsAg水平较低(图3D'-3D'')。总之，多参数流式细胞术数据表明，组织驻留的NK细胞的效应细胞毒性功能必须被活化和抑制受体的平衡表达仔细调节。图3 FC患者表现出肝内NK细胞的预激状态FC患者肝内髓样环境重塑为免疫活跃状态以上数据表明FC患者的肝脏逐渐向免疫激活状态转变。为了了解患者的全身免疫反应，作者通过Luminex分析了血浆细胞因子、趋化因子和可溶性受体。血浆分析显示，促炎细胞因子和趋化因子如IL -1 β， ENA-78 (CXCL5)， BAFF和MCP-1 (CCL2)逐渐增加，而qHBsAg水平降低。其中，ENA-78是一种上皮中性粒细胞吸引蛋白，已知由内皮细胞产生，募集中性粒细胞、T细胞、B细胞和嗜酸性粒细胞到肝脏，这表明FC患者的低度炎症。中性粒细胞是构成抵御病原体第一道防线的肝内髓系细胞群的关键组成部分。越来越多的证据表明，中性粒细胞可作为固有免疫的长期调节剂，并在病毒感染和消退期间改变免疫环境中发挥作用。因此，作者探索了中性粒细胞的性质和组成在CHB和FC患者的全血和肝室中的变化。如图4A和A'所示，FC患者的全血总体中性粒细胞频率较低。然而，cluster 4(图4A和A′′cl4)显示的成熟亚群似乎在FC患者中频率增加。在不同的全血中性粒细胞亚群中， FC患者的中性粒细胞募集标志物(如CXCR2、CXCL8、CEBPB、NCF和NAMPT)总体下降。然而，在FC患者中，全血cl4中性粒细胞显示出高水平的DUSP1、PTGS2、CEBPB、ISG15、IFIT3、IFITM1和IFITM3的表达(图4B)。与CHB患者相比，FC患者上调的通路显示了通过NFkB、干扰素应答、细胞因子产生的调节、对病毒和模式识别受体通路的应答增加(图4B'和B')。FC患者的肝室中中性粒细胞数量高于CHB患者(图4C-C”)。中性粒细胞的富集可能是由于在肺部疾病和其他组织中经常观察到的中性粒细胞浸润和边集现。此外， 中性粒细胞和内皮细胞的CXCR4-CXCL12相互作用增加，CXCR1/2-CXCL2相互作用减少(图4D)，这意味着在功能治愈的患者中，中性粒细胞运输增加，并且它们长期驻留在肝脏内。FC中性粒细胞中干扰素刺激基因(ISG)的减少表明，它们可能不再积极地参与诱导先天应答(图4E)。然而，这些细胞在病毒再激活过程中反复暴露的情况下，仍有能力分泌关键细胞因子给信号效应细胞(CD4/CD8 T细胞，NK细胞)以清除病毒。此外，作者还分析了MacParland等人整合的健康肝脏中的髓系细胞中炎症基因的表达，并将其与作者自己的scRNA-seq数据进行了比较。FC患者的髓系细胞显示出不同水平的促炎和免疫活性基因(IL1B, TNF, IFNG, TGFB1, NFKB1, IL6和CD80)，而抗炎基因，如IL10的表达似乎在FC患者中比CHB和健康肝脏低得多。此外，髓系细胞的单细胞谱也提示，FC患者的肝脏环境发生了明显的重塑，转变为免疫活动状态。流式细胞术分析证实，FC患者肝脏内的CD14+促炎单核细胞增加，表明存在低级别免疫应答的生态系统。CellPhoneDB分析显示，DC2和FOLR2/VSIG4 KC群体与CD4-CTLs和记忆样CD8细胞均显示出稳健的相互作用(补充图2E-E”)，因此提示它们在诱导主动免疫应答方面的假定功能。总之，这些数据强调了髓系细胞在调节从抗炎环境向免疫活性环境的转变方面的重要功能，其机制可能是通过FOLR2/VSIG4 KCs调节增加的病毒抗原呈递和效应细胞的再教育。重要的是，这些结果强调了中性粒细胞作为FC患者持续病毒清除的重要介质的重要作用，并进一步支持增强的固有免疫反应可能在实现功能性治愈中发挥重要作用的假设。补充图2图4 FC患者肝脏内存在边缘中性粒细胞图5 功能性治愈患者肝细胞中MHC II类分子表达增加FC患者肝细胞表达MHC-IIFC患者肝脏中的免疫细胞谱显示肝脏环境中存在促炎开关，通过LR-NK，cNK和中性粒细胞增加固有免疫应答；通过特异性KCs促进CD4和CD8 T细胞的抗原呈递；以及CD4-CTLs的出现，这些CTL可以被促炎刺激(IL2, TNF, IFNG)激活，并由KC培养。目前的关键问题是，在功能性治愈患者中，CD4-CTL或HBV特异性T细胞如何有效靶向呈递病毒抗原的肝细胞。在这项研究中，作者成功地从15例CHB和8例FC患者中提取了足够数量的肝细胞(n~1850)。肝细胞亚群(图5A-A′′)似乎与FC患者特异性相关。除了HLA-A、HLAB和HLA-C表达外，MHC Il类分子(包括HLA-DPA1、HLA-DPB1、HLA-DRA、HLA-DRB1、CD74和CTSS)也高表达(图5B、C)。总体而言，与CHB患者相比，FC患者中MHC I/MHC ll值较低的肝细胞数量较多。据报道，干扰素治疗可在体外肝细胞(HepG2-NTCP和PHH)和体内小鼠模型中诱导MHC Il类分子表达。通路分析显示，在MHC ll高的肝细胞中，细胞质翻译、抗原呈递和处理、凋亡、白细胞分化信号和淋巴细胞活化等增加(图5D)。在CellPhoneDB分析中，与CHB患者相比，FC患者中肝细胞与LR-NK或CD4-CTLs之间的HLA-C-FAM3C、EGFR-MIF、EGFR-COPA的相互作用减少，而XCR1-XCL1/2、HLA-DPA1-TNFSF9、CD74-COPA、CD74-MIF的相互作用增加(图5E-F)。即使在NUC+/-IFNa治疗后HBsAg仍然为阳性的患者(表1)，与FC (Sloss)患者相比，MHC Il基因(HLA-DRA、HLADRB1、HLA-DPB1)的表达显著减少(图5G)。与此同时，与FC患者相比，接受治疗的非sloss (NSLoss)患者还表现出功能障碍、耗竭的CD4-CTL其效应蛋白(如GZMA、PRF1和TNF)的表达水平较低(图5H)，同时检查点基因(包括PDCD1)的表达水平显著较高(图5H’)。总之，MHC ll高的肝细胞与LR-NKs细胞和活化的CD4-CTL之间的相互作用增强，可能触发靶向免疫应答，从而维持对CHB的长期控制。作者猜想是否有低水平的残留HBsAg由整合DNA合成，或极低水平的残留活性cccDNA可能被anti-HBs抗体掩盖，因此不容易被qHBsAg检测法检出。通过数字微流控PCR对FC患者进行的病毒学研究显示，与CHB相比，FC患者的肝活检中cccDNA水平低50倍，但持续存在(图6A)。此外，尽管FC患者的cccDNA、HBV DNA(图6B)和3.5kb HBV RNA水平较低，但FC患者的3.5kb HBV RNA与cccDNA的比值与CHB患者相似(图6 C-D)。此外，利用HBV-bait捕获富集的病毒序列的单细胞cDNA扩增(sccDNA)证实了数字微流控PCR的结果(图6E-H)。具体来说，在映射到与患者匹配的病毒基因型(图6E-H)后，病毒转录本在CHB(图6E, F)和FC(图6G,H)肝细胞中均有表达。正如预期的那样，从FC样本分离的肝细胞中病毒转录水平比CHB低100-1000倍。总之，这些数据表明，FC患者的残留cccDNA可被积极转录，以支持少量肝细胞内低水平的持续病毒复制。图6 FC患者肝细胞内存在低水平的cccDNA和病毒转录物总结在这项工作中，作者使用了多种方法包括单细胞测序、流式细胞术、ELISpot、细胞内细胞因子染色等等，主要研究了乙肝患者不同治疗结局中的免疫病理标志以及潜在的机制。文章的亮点之一就是数据，作者的患者数据非常丰富,不仅有不同乙肝患者而且测了肝脏组织以及样本匹配的PBMCs。通过单细胞分析肝组织和相匹配患者的PBMCs中疾病相关细胞状态研究，以此来为非功能性治愈患者的潜在机制提供新的见解。另外的一个亮点是，虽然文章以生物信息分析为主，但使用了非常多的湿实验手段，来证明生信分析的结果。识别微信二维码，添加生物制品圈小编，符合条件者即可加入生物制品微信群！请注明：姓名+研究方向！版权声明本公众号所有转载文章系出于传递更多信息之目的，且明确注明来源和作者，不希望被转载的媒体或个人可与我们联系(cbplib@163.com)，我们将立即进行删除处理。所有文章仅代表作者观点，不代表本站立场。

Global thought leaders join advisory team to focus on Mestag’s groundbreaking tertiary lymphoid structure (TLS) induction approach to treat solid tumorsCAMBRIDGE, United Kingdom, Feb. 20, 2024 (GLOBE NEWSWIRE) -- Mestag Therapeutics (“Mestag”), a biotech company harnessing new insights into fibroblast-immune interactions to develop impactful treatments for patients, today announced the appointments of additional distinguished, world-leading advisors to guide the development of its lead program M300, a first-in-class antibody program designed to conditionally induce the formation of Tertiary Lymphoid Structures (TLS) in the tumor. The new appointments expand Mestag’s advisors and comprise a unique group of investigators with extensive experience in the development of novel cancer therapies and specific expertise in the field of TLS biology in cancer. TLSs are aggregates of immune cells which provide a site of entry and education for immune cells in the tumor. The presence of TLS in tumors has recently become recognized as strongly predictive of improved patient outcomes and better response to therapy.1,2,3,4 Susan Hill, PhD, Chief Executive Officer of Mestag Therapeutics, said, “Mestag’s M300 program opens up a new paradigm for the treatment of solid tumors. Advances in understanding TLS biology in cancer, and the associated benefit to patient outcomes, have enabled us to design a first-in-class program with the potential to benefit large numbers of patients with cancer. We are honored to work with such an eminent group of experts in this field to drive the program urgently into the clinic.” The newly appointed M300 advisors comprise Prof. Gabriele Bergers, group leader at the Flanders Institute for Biotechnology (VIB) Center for Cancer Biology and Professor of Oncology at the University of Leuven in Leuven, Belgium; Prof. Julie R. Brahmer, Director of the Thoracic Oncology Program, Professor of Oncology at the Sidney Kimmel Comprehensive Cancer Center at Johns Hopkins, as well as the Marilyn Meyerhoff Professor in Thoracic Oncology; Prof. Jeffrey L. Browning, Research Professor at the Boston University School of Medicine in the Departments of Virology, Immunology and Microbiology and Rheumatology; Prof. Wolf H. Fridman, Professor Emeritus of Immunology at Université Paris-Cité, France; Prof. Catherine Sautès-Fridman, Professor Emeritus at Université Paris-Cité; Prof. Elizabeth M. Jaffee, Professor of Oncology and Deputy Director at The Sidney Kimmel Comprehensive Cancer Center at Johns Hopkins; and Prof. Ignacio Melero, Professor of Immunology at the Academic Hospital of Navarra and at the Center for Applied Medical Research (CIMA) of the University of Navarra. Ignacio Melero, MD, PhD, advisor to Mestag and Professor of Immunology at the Academic Hospital of Navarra and at the Center for Applied Medical Research (CIMA) of the University of Navarra, said, “I look forward to collaborating with Mestag and to be a part of their world-class advisory team. I believe there is potential to develop transformative therapies for patients battling cancer. Mestag’s novel approach leverages known immunobiology, which for the first time, is being translationally harnessed to stimulate an anti-cancer immune environment within cancer tissue. Recent evidence supports the beneficial role of tertiary lymphoid structures in cancer, and the ability of a therapy to safely increase their presence could result in an efficacious intervention in patients with solid tumors.” Biographical information Gabriele Bergers, PhD, is a Professor of Oncology at the University of Leuven and a group leader at the Vlaams Instituut voor Biotechnologie (VIB)-Center for Cancer Biology in Leuven since 2016. Before her move to the VIB, she was a Professor in the Department of Neurological Surgery and a PI in the Brain Tumor Research Center (BTRC) at the Helen Diller Family Comprehensive Cancer Center at the University of California, San Francisco (UCSF), for 20 years. She has made seminal discoveries about perivascular tumor niches regarding the vasculature and the immune cell compartment in regulating neovascularization, inflammation, and TLS formation in cancer and in revealing and understanding intrinsic and evasive resistance mechanisms of tumors to antiangiogenic immunotherapies. Dr. Bergers has received awards, including the Sidney Kimmel, the Sandler Opportunity, UCSF Breakthrough Biomedical Research, and the Judah Folkman. She has acted as an external advisory board member for a number of universities and pharmaceutical companies. Dr. Bergers was the Co-director of the Tumor Microenvironment Brain Tumor Center at UCSF and an advisor to the Max-Planck-Institute for Biomedicine in Muenster, Germany. She was a scientific co-founder of Oncurious. Julie R. Brahmer, MD, is the Director of the Thoracic Oncology Program, Professor of Oncology at the Sidney Kimmel Comprehensive Cancer Center at Johns Hopkins, co-Leader of Cancer Immunology, as well as the Marilyn Meyerhoff Professor in Thoracic Oncology. She also directs the Kimmel Cancer Center on the Johns Hopkins Bayview campus and is co-principal investigator on Johns Hopkins' National Clinical Trials Network (NCTN) cooperative group grant. Dr. Brahmer is an active clinical leader in the treatment of lung cancer and mesothelioma. Dr. Brahmer's research and clinical practice focuses on the development of new therapies for the treatment of lung cancer and mesothelioma. She is a member of the American Society of Clinical Oncology, serves on the board of directors of the Society of Immunotherapy for Cancer, and is the Chair of the Eastern Cooperative Oncology Group (ECOG) Thoracic Committee. She is also on the medical advisory board of several lung cancer patient advocacy groups including LUNGevity, the Lung Cancer Research Fund, and Lung Cancer Research Foundation of America. Jeffrey L. Browning, PhD, is a Research Professor at the Boston University School of Medicine in the Departments of Virology, Immunology and Microbiology and Rheumatology. He has a PhD in biochemistry from the University of Wisconsin. As a research scientist in the immunobiology discovery group at Biogen from 1984 to 2012, he centered on the tumor necrosis factor (TNF) family of regulatory molecules, including the discovery of the lymphotoxin, B-cell activating factor (BAFF) and TNF-like weak inducer of apoptosis (TWEAK) systems, and translation of modulators of the lymphotoxin pathway to the clinic in indications ranging from autoimmune disease and inflammatory bowel disease to oncology. He joined Boston University School of Medicine in 2013, with a current focus on altered vascular and stromal states in the perivascular compartment in the skin of systemic sclerosis and lupus patients and the impact on the pathology. Early in his career, he undertook postdoctoral work in the biophysics department of the University of Basel, Switzerland, using nuclear magnetic resonance to study membrane structure; and in the neurobiology department at the University of California, San Francisco researching the neuromuscular junction. Wolf H. Fridman, MD, is Professor Emeritus of Immunology at Université Paris-Cité. He is an expert in analysis of the tumor microenvironment, demonstrating that context, including functionality, location and density of the immune infiltrate in colorectal tumors, is the major prognostic factor for human cancers. He is involved in developing bioinformatic tools to quantify tumor microenvironment cells used to predict prognosis and immunotherapeutic responses in renal cell and colorectal cancers and sarcomas. His immune classification of soft tissue sarcoma tumors helped demonstrate that TLS and B cell signatures predict favorable clinical outcomes and therapeutic responses to anti-PD-1 therapy better than T cells, findings recently extended to other cancers treated with immune checkpoint blockers. These showed plasma cells generated inside TLS produce anti-tumor antibodies associated with a patient’s response to immunotherapy, opening the way for novel immune-based tools for efficient prognosis and therapy. Catherine Sautès-Fridman, PhD, is Professor Emeritus at Université Paris-Cité. She is the former Director of the Cancer, Immunology and Immunopathology department and Director of the Immunotherapy and Cancer team at Centre de Recherche des Cordeliers. Her research focuses on the heterogeneity of the immune and inflammatory components of the tumor microenvironment to identify new prognostic and theranostic markers. She carried out work in several fields: histocompatibility antigens, demonstration of the association of human leukocyte antigens (HLAs) with beta2-microglobulin and description of the 3rd histocompatibility locus in mice, H-2L and HLA-C in man, receptors for immunoglobulin G antibodies (biological activity and 3D structure), immuno-oncology (role of interleukin-17, TIME profiles of patients at risk of disease progression in localized kidney cancers, role of Tertiary Lymphoid Structures). She is the former President of the French Society of Immunology and European Federation of Immunological Societies. She founded the EFIS-EJI Ita Askonas Award to acknowledge female group leaders in immunology, and she founded the first European Congress of Immunology. She is Editor-in-Chief of La Revue Immunité et Cancer. Elizabeth M. Jaffee, MD, is an internationally recognized expert in cancer immunology and pancreatic cancer. She is Deputy Director of the Sidney Kimmel Comprehensive Cancer Center at Johns Hopkins, Co-Director of the Skip Viragh Pancreatic Cancer Center, and Associate Director of the Bloomberg Kimmel Institute for Cancer Immunotherapy. Her research focus is on developing novel immunotherapies for the treatment and prevention of pancreatic cancer. Prof. Jaffee is a past President of AACR and has served on several committees at the National Cancer Institute. She is Chief Medical Advisor to the Lustgarten Foundation for Pancreatic Cancer Research, and the Inaugural Director of the Convergence Institute for Integrating Technologies and Computational Sciences at Johns Hopkins. She is Chair of President Biden’s Cancer Panel. Ignacio Melero, MD, PhD, is Professor of Immunology at the Academic Hospital of Navarra and at the Center for Applied Medical Research (CIMA) of the University of Navarra. He leads a group working in translational tumor immunotherapy with an emphasis on cell therapy, cytokine gene therapy, and immune-stimulatory monoclonal antibodies. Earlier in his career, Dr. Melero contributed to seminal discoveries in the function of Natural Killer cells, and T-cell co-stimulation via CD137 (4-1BB). Dr. Melero has been awarded the BIAL Prize of Medicine, the Conde de Cartagena Award from the Royal Academy of Medicine, Doctor Durantez LAIR Foundation Award and a CRI research award. He has served on advisory boards of Bristol Myers-Squibb, Roche-Genentech, AstraZeneca, Merck Serono and Boehringer Ingelheim, and holds research grants by Pfizer, Bristol Myers Squibb, and Alligator. About Mestag’s M300 Program M300 is a first-in-class antibody program designed to conditionally induce the formation of Tertiary Lymphoid Structures (TLS) in the tumor. TLSs are aggregates of immune cells that form in tumor tissue as part of our bodies’ natural anti-cancer mechanisms, and drive powerful immune responses by recruiting, educating, and activating new anti-tumor T and B-cells. Fibroblast populations play a key role in the induction and maintenance of TLSs. TLSs in tumors are strongly predictive of both improved patient outcomes across solid tumor types and better response to therapy.1,2,3,4 About Mestag Therapeutics Mestag harnesses new insights into fibroblast-immune interactions to develop impactful treatments for patients. We are progressing a pipeline of sophisticated first-in-class antibodies designed to improve the lives of patients with cancer and inflammatory disease. Together with our collaboration partner Janssen Biotech, Inc., a Johnson & Johnson company, we are also identifying novel targets for future therapies. Our founding investigators comprise global experts in inflammatory disease, cancer, computational biology and fibroblast biology from the University of Oxford, Brigham & Women’s Hospital, Harvard Medical School and Cold Spring Harbor Laboratory. We are supported by leading life science investors SV Health Investors, Johnson & Johnson Innovation – JJDC, Inc., Forbion, GV (formerly Google Ventures) and Northpond Ventures. Mestag is headquartered in Cambridge, UK, and in 2021 was recognized on the Fierce 15 list of innovative biotechnology companies. For further information please visit our website www.mestagtherapeutics.com For enquiries, please contact: Alexandra Santosasantos@wheelhouselsa.com

随着时间的推移，新冠病毒的致病力逐渐减弱，似乎已经远离我们。回想在这场病毒大流行中曾经有无数人病倒，不过还有一些人在“病毒圈”里却仍未感染，甚至感染了也未出现症状，他们真的是网上所说的“天选之子”“新冠超级免疫者”吗？答案就是这些人可能有一张基因王牌！近日，一项新的研究表明，他们携带特定基因变异的可能性是那些出现症状的人的两倍多，这种变异可以帮助他们消灭病毒。该研究题为“A common allele of HLA is associated with asymptomatic SARS-CoV-2 infection”，发表在《Nature》杂志上，首次提供了证据证明无症状 SARS-CoV-2 存在遗传基础。这项研究有助于解开为什么有些人可能感染了 COVID-19 而没有患病的谜团。 来源：https://doi-org.libproxy1.nus.edu.sg/10.1038/s41586-023-06331-x研究表明，至少 20% 的严重COVID-19感染者仍然没有症状。无症状感染的检查为研究人员提供了一个难得的机会来探究早期疾病和促进病毒快速清除的免疫学特征。对无症状感染的特别关注有可能进一步加深我们对疾病发病机制的理解，并支持疫苗开发和探索潜在治疗靶点。已知宿主遗传学与对感染和疾病进展的差异免疫反应有关。尽管大多数感染 SARS-CoV-2 的个体病程较轻或完全无症状，但很少有研究在非住院、前瞻性、社区队列的背景下检查遗传学。人类白细胞抗原 ( HLA ) 区域 (6p21) 是最具多态性且医学上最重要的人类基因组区域。HLA的变异与数百种疾病和病症有关，包括感染。在参与人类免疫反应的众多基因中，HLA变异与病毒感染的关联性最强。值得注意的是，HLA I 类和 II 类等位基因也与 SARS-CoV 引起的严重急性呼吸综合征有关。本研究发现，“新冠超级免疫”的秘密在于人类白细胞抗原（HLA），或者向免疫系统发出信号的蛋白质标记。HLA 编码基因的突变似乎有助于杀病毒 T 细胞识别 SARS-CoV-2 并进行快速攻击。一些携带这种突变基因的人的 T 细胞可以识别这种新型冠状病毒，即使他们以前从未遇到过这种病毒，因为它与他们已经知道的季节性感冒病毒相似。这一发现为药物和疫苗指明了新的目标。为了确定HLA变异是否影响个体在 SARS-CoV-2 感染后保持无症状的可能性，研究人员分析了 5 个高度多态性HLA I 类和 II 类基因（HLA-A、HLA-B、HLA-C、HLA-DRB1、HLA-DQB1）的高分辨率基因分型数据。结果发现，HLA-B*15:01与无症状感染存在显着相关性。此外相关基因型有很强的累加效应。携带两个HLA-B*15:01拷贝的个体保持无症状的可能性是携带其他基因型的个体的八倍以上。总体而言，感染后仍无症状的人中有五分之一 (20%) 携带HLA-B*15:01，而报告有症状的患者中这一比例为 9%。为了确定HLA-B变体如何预防症状，科学家们研究了Covid大流行前从其他人身上收集的血液样本。结果发现，携带 HLA-B*15:01 变异的人还拥有能够更好地识别导致新冠病毒的T 细胞，因为他们记得以前感染过新冠病毒。（引起新冠病毒的 SARS-CoV-2 并不是唯一感染人类的冠状病毒，几种冠状病毒可以引起普通感冒。）这些病毒非常相似，一旦 SARS-CoV-2 感染人体，T 细胞就能迅速采取行动。来源：https://doi-org.libproxy1.nus.edu.sg/10.1038/s41586-023-06331-x一般来说，为了清除人体细胞中的病毒，T 细胞与 HLA 蛋白协同工作。当病毒感染细胞时，HLA 蛋白会提取病毒片段并将其保留在细胞表面。这就像一种信号，标记能够识别威胁的 T 细胞。当其中一个出现时，它会攻击并杀死受感染的细胞。对于携带 HLA-B*15:01 变体的人来说，这个过程似乎比平时更有效，使 T 细胞能够更快地工作，在症状出现之前杀死被病毒感染的细胞。这也就是说，当携带HLA-B变体的人患上季节性冠状病毒引起的感冒时，他们获得了针对类似冠状病毒（包括 SARS-CoV-2）的一定程度的免疫力。来源：https://doi-org.libproxy1.nus.edu.sg/10.1038/s41586-023-06331-x研究人员也指出了该项目的局限性：“因为数据只从白人那里收集，所以我们对基因如何在受新冠疫情影响最严重的有色人种社区中发挥作用的理解存在巨大差距。此外，队列中的所有测试结果和症状都是自我报告的。我们认识到这可能会导致我们的结果出现一些误差。”总之，该研究证明了常见的HLA I 类等位基因HLA-B*15:01与 SARS-CoV-2 无症状感染之间存在强烈且显着的关联。证明了 HLA-B*15:01+大流行前样本中的T 细胞对免疫显性 SARS-CoV-2 肽有反应，该肽与季节性冠状病毒的肽具有高度序列相似性。该结果对于了解早期感染和早期病毒清除的机制具有重要意义，并可能为完善早期疾病的疫苗开发和治疗选择奠定基础。文章来源“生物谷”责编|文竞择校对|文竞择End 往期精选 围观历史性突破！不需卵子和精子就可以合成人类胚胎 热文 富豪用儿子血浆“回春”科学吗？Science：血液牛磺酸缺乏驱动衰老 热文 世界首例！35岁的她，通过机器人操刀移植的子宫，成功诞下宝宝 热文‍为了避免心脏骤停，53岁的他成为“第一个”植入开创性除颤器的心脏病患者 热文 首次披露！175家生物制药公司的薪资数据：薪资中位数达20万美元 点击“阅读原文”，了解更多~