PVALB

编者按 第66届美国血液学会（ASH）年会将于2024年12月7～10日在美国圣迭戈召开。作为血液领域规模最大、覆盖最全面的国际学术会议，每年吸引全球众多血液学专家学者齐聚一堂，共同对血液领域重磅研究进展进行深入探讨与交流。在本届大会上，浙江大学医学院附属第一医院黄健教授团队4项研究成果入选壁报展示（P1769、P1770、P1786、P3180），探索了慢性骨髓增殖性肿瘤预测因素和分层治疗新策略，展示了浙江大学医学院附属第一医院在血液学领域的创新性成果，也为全球学术界提供了具有重要临床价值的新思路和治疗策略。 01 预测慢性期慢性髓性白血病患者无T315I突变生存的列线图：一项多中心回顾性研究 A Nomogram for Predicting T315I-Free Survival in Chronic Phase Chronic Myeloid Leukemia Patients: A Multi-Center Retrospective Study（摘要号：1769） 背景 酪氨酸激酶抑制剂（TKIs）的出现彻底改变了慢性期慢性髓性白血病（CP-CML）的治疗。然而，T315I突变占BCR::ABL1激酶结构域（KD）突变的15%-20%，对患者构成了重大威胁。目前，尚未建立针对CML患者T315I突变的临床预测模型。 目的 本回顾性研究旨在建立一个列线图模型，以预测CP-CML患者的无T315I突变生存概率，帮助临床医生进行早期评估、采取积极措施，从而改善患者预后。 方法 训练队列包括来自24个血液学中心的1466名患者，验证队列包括来自另外20个中心的820名患者，时间跨度为2010年1月到2023年5月。纳入标准：（1）符合CML的诊断标准；（2）年龄超过18岁；（3）随访时间超过12个月。排除标准：（1）出现加速期（AP）或急变期（BP）；（2）缺失关键临床记录；（3）存在除T315I外的其他BCR::ABL1激酶结构域突变。通过多变量Cox回归分析识别独立危险因素，并构建了用于预测无T315I突变生存的列线图。性能评估使用受试者工作特征（ROC）曲线、校准曲线和决策曲线分析（DCA）。 结果 在训练队列中，共有898名患者（61.3%）为男性，中位年龄为50岁[四分位距（IQR）37-60岁]。随访中位时间为3.6年（范围1-24.9年），其中30名患者（2.0%）发生了T315I突变。验证队列包括820名患者，其中23名患者（2.8%）发生了T315I突变，随访中位时间为3.7年（范围1-29.5年）。根据多变量Cox回归分析，外周血原始细胞百分比、异常染色体、达沙替尼、3个月未达早期分子反应（EMR），以及6个月BCR::ABL1>1%被确定为CP-CML患者发生T315I突变的独立危险因素。通过整合上述五个因素，构建了一个列线图模型。训练队列和验证队列的C指数分别为0.894和0.857。训练队列在5年、10年和15年的AUC值分别为0.874、0.925和0.930，验证队列分别为0.864、0.814和0.803。两队列的校准曲线接近理想对角线，反映出良好的准确性。DCA曲线显示在一定范围内具有临床净效益。此外，将得分>128的患者定义为高风险组，将得分≤128的患者定义为低风险组。Kaplan-Meier曲线显示，高风险组患者的无T315I突变生存概率低于低风险组患者。低风险组的5年和10年无T315I突变生存概率分别为99.6%和98.8%，而高风险组的5年、10年和15年无T315I突变生存概率分别为92.9%、83.3%和60.6%。 本回顾性研究建立一个列线图模型，用于预测CP-CML患者的无T315I突变生存概率，帮助临床医生进行早期评估、采取主动措施，并改善患者预后。 02 指导一线伊马替尼治疗的慢性粒细胞白血病患者换药的5年深度分子学反应预测模型：一项大规模、多中心回顾性研究 A Prognostic Model Guiding Treatment Switch for 5-Year Deep Molecular Response in Chronic Myeloid Leukemia Patients Receiving Initial Imatinib: An Extensive, Multi-Center, Retrospective Study（摘要号：1770） 背景 最新的欧洲白血病网络（ELN）推荐强调，对于60岁以下的患者来说，维持无治疗缓解（TFR）和停止治疗尤为重要。实现深度分子反应（DMR）是达到TFR的先决条件。伊马替尼作为第一代酪氨酸激酶抑制剂（TKI），因其能够实现主要分子反应和已确立的长期生存益处，已成为标准的一线治疗。研究表明，第二代TKI可能更容易实现DMR；然而，与伊马替尼相比，它们的毒性仍然是一个显著的问题。鉴于伊马替尼和第二代TKI的特性，需要重新考虑在初始伊马替尼治疗后对患者的治疗优化。 目的 本研究旨在开发一个预后模型，用于DMR的风险分层，以指导是否转换或继续一线伊马替尼的决定。 方法 这项回顾性多中心分析纳入了来自44个中心的925名新诊断的慢性髓性白血病慢性期（CML-CP）患者，他们接受了初始的伊马替尼治疗。构建并验证了一个包含Cox比例风险模型识别变量的预测5年DMR的列线图。此外，通过R中的生存包的“Surv_cutpoint”函数选择了风险分层的临界点。 结果 诊断时人群的中位年龄为49岁（IQR：37.00-61.00），59.8%为男性。在19个月（IQR：11.00-41.00）的中位随访期间，观察到539例（58.27%）MR4.5病例。实现MR4.5的个体中，男性比例较低，白细胞（WBC）和血液中的原始细胞水平较低。与未实现MR4.5的患者相比，他们还具有更高的血红蛋白（HGB）水平，更高的原发性骨髓纤维化（MF）发生率和3个月早期分子反应（EMR）发生率。此外，非MF患者的比例在实现MR4.5患者中显著更高（81.26% vs. 63.99%，P<0.001）。 亚组分析旨在评估MF在不同群体中的预测价值。MF与分层变量之间没有显著的相互作用。有趣的是，只有在调整混杂因素后，年龄≤60岁组中观察到MF与MR4.5之间的反向关联才具有统计学意义（调整后HR=0.55，95% CI：0.40～0.75，P<0.001）。 Cox分析显示，MF、WBC、HGB、PLT和3个月EMR是训练队列中的独立预测因子。随后，这些变量被用来构建预测5年MR4.5无病生存的列线图，并给出了将这个列线图应用于临床场景的示例。研究进一步根据从列线图中计算出的总分数进行了风险分层。患者可以被分为两个风险组：高风险（总分数<156）和低风险（总分数≥156），K-M曲线显示两个风险组之间存在显著差异（P<0.001）。应特别关注总分数<156的患者，因为他们应该被考虑转换为二线治疗，而不是继续伊马替尼治疗。 在训练和验证集中预测5年MR4.5的ROC曲线显示了列线图模型的良好判别能力 [训练队列的AUC：0.72（0.66-0.79），验证队列的AUC：0.74（0.64-0.85）]。此外，训练和验证队列中的校准曲线证实预测概率与实际结果紧密匹配。此外，DCA表明，在不同风险阈值下可实现的临床净效益显示，净效益优于对所有患者进行干预或不干预所有患者。 在这项涉及925名CML个体的回顾性队列研究中，我们开发了一个直观的视觉模型，用于评估5年DMR的概率，以协助临床医生决定是否从伊马替尼转换为二线治疗。 03 比较芦可替尼在较低危和较高危骨髓纤维化患者中的疗效与安全性：一项多中心、单臂、探索性前瞻性研究 Comparing the Efficacy and Safety of Ruxolitinib in Patients with Lower and Higher Risk Myelofibrosis: A Multi-Center, Single-Arm, Exploratory and Prospective Study（摘要号：1786） 背景 COMFORT研究评估了芦可替尼在中危-2和高风险MF患者中的疗效和安全性，而JUMP研究则将研究范围扩大，包括DIPSS分类中的中危-1 MF患者。然而，目前尚无前瞻性研究评估在更为综合的评分系统（如MIPSS-70、MIPSS+V2.0、DIPSS-Plus和MYSEC-PM）分类下低风险和高风险MF患者的疗效和安全性。 目的 本研究旨在评估芦可替尼治疗较低危和较高危MF患者的疗效和安全性。 方法 纳入来自12个血液学中心的≥18岁患者，包括原发性骨髓纤维化明显期（overt-PMF）、原发性骨髓纤维化前期（pre-PMF）、真性红细胞增多症后骨髓纤维化（PPV-MF）或原发性血小板增多症后骨髓纤维化（PET-MF）患者。较低危定义为MIPSS-70≤3、MIPSS+V2.0≤3、DIPSS-Plus≤1、DIPSS≤2或MYSEC-PM<14。主要终点是第48周时，患者脾脏长度减少≥50%的比例。次要终点包括最佳脾脏反应、TSS50的患者比例和安全性。 结果 共有132名患者参加了本研究，其中57名（43.2%）为男性，75名（56.8%）为女性。中位年龄为66.0岁，107名患者（81.8%）为JAK2V617F阳性。35名患者进行了下一代测序（NGS），最常见的非驱动突变是ASXL1（11/35，31.4%）和TET2（11/35，31.4%）。70例患者为较低危组，62例患者为较高危组。较低危组患者年龄较年轻，血红蛋白水平、血小板计数、单核细胞计数和红细胞压积较高，且外周血原始细胞百分比较低，乳酸脱氢酶水平较低，伴随症状较少，输血依赖较低，染色体异常发生率较低。到第48周时，较低危组有45名患者（64.3%），较高危组有34名患者（54.8%）达到脾脏长度减少≥50%。在第48周时，TSS50的比例分别为24.3%和30.7%。在较低危组中，血红蛋白水平从基线的120.7 g/L下降至第8周的108.6 g/L，16周后，血红蛋白水平稳定在约104 g/L；血小板计数从基线的353.0×109/L逐渐下降，在24周时达到低谷值290.5×109/L。在较高危组中，血红蛋白水平从基线的96.4 g/L下降至第8周的低谷值86.8 g/L，随访期间波动在94.9 g/L和88.5 g/L之间；血小板计数从基线的282.8×109/L开始下降，在前4周达到低谷值244.5×109/L。最常见的≥3级血液TEAEs为贫血和血小板减少。最常见的非血液学TEAE为感染，包括肺炎、上呼吸道感染、尿路感染和发热，大多数为1级或2级。值得注意的是，较低危组中仅有2名患者因TEAEs中断了芦可替尼治疗，而较高危组中有6名患者因TEAEs中断治疗，1名患者因疾病进展中断治疗。 芦可替尼是MIPSS-70、MIPSS+V2.0、DIPSS-Plus和MYSEC-PM分类中的较低危MF患者的有效治疗方法，能够改善脾脏和症状反应，并且减少血液学和非血液学治疗相关不良事件。 04 新型JAK2抑制剂OB756治疗真性红细胞增多症患者的安全性和有效性：一项2期、开放标签、多中心临床研究 First in-Class JAK2 inhibitor OB756 Therapy for Patients with Polycythemia Vera : a phase 2, open-label, multicenter study （摘要号：3180） 背景 OB756是一种口服小分子JAK2抑制剂，1期临床研究中显示OB756治疗骨髓增殖性肿瘤（MPN）患者具有临床获益。 目的 本研究为全国多中心2期临床研究，旨在评估OB756治疗真性红细胞增多症患者的安全性和有效性。 方法 在中国11个研究地点进行招募（CTR20201950），入组患者为年龄≥18岁真性红细胞增多症（PV）、ECOG≤2分。入组患者接受OB756 16 mg或20 mg治疗，每日两次，连续28天周期，直到不耐受或疾病进展。主要终点是24周的完全血液学反应（CHR）率。次要终点包括血液学反应（HR）、反应持续时间（DOR）、症状、分子学反应和安全性。 结果 在2020年11月3日至2023年11月15日期间，本研究总纳入66例PV患者，并接受OB756 16 mg BID或20 mg BID治疗（图A）。中位治疗持续时间为508天（范围为29~1066）天。入组患者中位年龄为57岁（44~79岁），其中28/66（42.2%）患者为男性。34/66（51.5%）患者为羟基脲不耐受。基线脾脏中位体积为698.9 ml（范围150.0~4015.7）ml。JAK2 V617F和JAK2外显子12突变的PV患者分别为95.3%（61/66）和0%(0/28)（图B）。 OB756治疗PV患者在EOC3、EOC6和EOC12获得血液学缓解（HR）率分别为90.2%、80.7%和92.3%。在第24周时，OB756治疗PV患者在16 mg BID组和20 mg BID组获得完全血液学缓解率（CHR）分别为23.9%、33.3%。此外，23/62（37.1%）、18/43（41.9%）和10/26（38.5%）患者分别在EOC3、EOC9和EOC12达到CHR（图C）。从基线至实现首次HR的中位时间在16 mg BID组和20 mg BID组分别为1.4个月（95%CI: 0.9~1.8）、1.2个月（95%CI：0.3~1.3）。所有PV患者（30/30,100.0%）在EOC12均获得脾脏应答。EOC6和EOC12的中位脾脏减量分别为-38.9%（-63.8%至21.3%）、-44.1%(-66.1%至-9.8%)（图D）。在分子学反应方面，15/19（78.9%）PV患者在ECO6获得JAK2V617F等位基因减低，11/19（57.9%）患者在ECO6时JAK2V617F等位基因减低≥5%（图E）。OB756具有较高的CHR和HR，快速缩脾，同时减低JAK2V617F等位基因。 最常见的不良反应为1~2级，仅3/66（4.5%）PV患者出现血小板减少症。14例（21.2%）患者出现≥3级不良反应。最常见的≥3级血液学不良反应（≥5%）仅包括贫血（4/66，6.1%）。其他≥3级非血液学不良反应发生率非常低（图F）。仅3例（3/66，4.5%）患者在治疗期间报告血栓形成，无与PV或OB756疾病进展相关的死亡报告。 本研究证实OB756在PV患者中具有良好耐受性，并为PV患者的治疗带来明显临床获益，特别能快速缩小脾脏和较高减低JAK2V617F等位基因负荷。OB756也显示出持久的CHR和较少非血液学不良反应，为PV患者的治疗提供新的选择。此外，一项随机双盲III期研究正在进行中，旨在评估OB756与羟基脲在中国PV患者中的疗效和安全性（CTR20240873）。 黄健教授 浙江大学医学院附属第一医院 医学博士，主任医师，博士生导师 浙大一院血液科行政副主任 浙江省“551”卫生高层次创新人才 浙江省血液病临床医学研究中心副主任兼MPN亚组负责人 浙江省血液慢粒/MPN协作组组长 中国女医师协会靶向专委会常委兼血小板病学组组长 澳大利亚西澳大学和加拿大阿尔伯塔大学留学回国 国家健康科普专家库成员（2024年版） 中华医学会血液学分会第十一届委员会红细胞疾病学组委员 中国女医师协会血液专委员会常委 中国民族医药学会血液病分会常务理事 中国罕见病联盟血友病学组常委 浙江省中西医结合学会血液病分会副主任委员 浙江省医师协会血液科医师分会常委兼罕见病学组组长；MDS/MPN学组副组长； 中国抗癌协会血液病转化医学专委会委员 中国抗癌协会血液肿瘤分会MDS/MPN工作组委员 中国康复医学会血液病康复专业委员会委员 浙江省医学会血液病分会委员；罕见病分会委员 主要业绩： 以第一通讯分别在eClinicalMedicine（中科院1区 IF 15.1）等杂志发表SCI论文30篇，主持国家自然科学基金、浙江省领雁研发攻关计划等项目9项，主持浙江省医药卫生科技创新二等奖1项，以主要成员获得国家科技进步二等奖1项，省科技进步一等奖2项等。 2018年获浙江省首届“优秀血液科医师”称号 2014年-2022年担任浙大四院血液科主任，金华市和义乌市一类医学重点学科带头人 往期推荐 ASH抢先看丨浙江大学医学院附属第一医院血液骨髓移植中心团队20项研究入选，中国血液学研究引领国际新风向 ASH抢先看丨2022 年欧洲白血病网（ELN）急性髓系白血病（AML）风险分层验证 ASH抢先看丨黄河教授团队8项研究入选口头报告，中国智慧闪耀世界舞台 2024 ASH重磅丨六项LBA摘要公布，一文了解血液学最前沿 2024 ASH·共鉴中国智慧丨精彩绽放，中国专家壁报展示第三弹 2024 ASH·共鉴中国智慧丨锐意进取，中国专家壁报展示第二弹 2024 ASH·共鉴中国智慧丨硕果盈枝，中国专家壁报展示第一弹 看世界ASH丨张晓辉教授团队携11项研究精彩亮相，口头报告抢先看 2024 ASH大会摘要公布！70+篇中国学者研究入选口头报告，创历史新高！ （来源：《肿瘤瞭望–血液时讯》编辑部） 声 明 凡署名原创的文章版权属《肿瘤瞭望》所有，欢迎分享、转载。本文仅供医疗卫生专业人士了解最新医药资讯参考使用，不代表本平台观点。该等信息不能以任何方式取代专业的医疗指导，也不应被视为诊疗建议，如果该信息被用于资讯以外的目的，本站及作者不承担相关责任。

编者按 第66届美国血液学会（ASH）年会将于2024年12月7～10日在美国圣迭戈（San Diego）盛大召开。作为全球血液学领域规模最大、涵盖最全面的国际学术盛会之一，每年吸引着成千上万名来自世界各地的专家学者，分享最前沿的血液学进展和突破性临床数据。当地时间11月25日，大会官网公布了本次入选的最新重磅摘要（Late-Breaking Abstracts，LBA）共6项，将由研究者于当地时间2024年12月10日上午7:30至9:00，在会议现场Hall B (San Diego Convention Center)进行报告。本刊第一时间整理这6项LBA的核心要点，供大家提前阅览。 01 LBA-1 标题：Tafasitamab Plus Lenalidomide and Rituximab for Relapsed or Refractory Follicular Lymphoma: Results from a Phase 3 Study (inMIND) 中文标题：坦昔妥单抗联合来那度胺和利妥昔单抗治疗复发或难治性滤泡性淋巴瘤：III期研究（inMIND）结果 汇报人：Laurie H. Sehn（BC癌症中心淋巴瘤中心，加拿大） 研究结论 在来那度胺和利妥昔单抗的基础上加用坦昔妥单抗，显著且有临床意义地改善了无进展生存期（PFS），使复发/难治性滤泡性淋巴瘤（R/R FL）患者的疾病进展、复发或死亡风险降低了57%。尽管总生存期（OS）数据尚不成熟，但观察到了一种有利于塔坦昔妥单抗的趋势。其安全性特征可控，且与预期毒性一致。本研究首次验证了将两种单克隆抗体（抗CD19与抗CD20）联合用于淋巴瘤治疗的有效性。坦昔妥单抗+来那度胺+利妥昔单抗既可在社区环境中使用，也可在学术环境中使用，是R/R FL患者潜在的新标准治疗选择。 02 LBA-2 标题：Identification of Hepatic-like Erythropoietin with Enhanced Activity As a New Cause of Hereditary and Acquired Erythrocytosis 中文标题：识别具有增强活性的肝样促红细胞生成素作为遗传性和获得性红细胞增多症的新原因 汇报人：Betty Gardie[巴黎高等研究实践学院（EPHE），法国] 研究结论 本研究报告了一种名为肝样促红细胞生成素增多症（HEP）的新型继发性红细胞增多症，其特征是产生具有非典型糖基化模式和活性增强的肝样促红细胞生成素（EPO）。这种新型EPO在所有遗传性EPO突变型红细胞增多症患者、与肝病相关的红细胞增多症病例以及新生儿中均有观察到。有趣的是，新生儿体内从更活跃的肝型EPO向肾型EPO的转变，可能解释了生命最初几周内血红蛋白水平显著下降的典型现象。因此，在进行特发性和遗传性红细胞增多症的诊断时，将定量和定性EPO筛查作为生物学检查的一部分是至关重要的。 03 LBA-3 标题：Extended Treatment of Venous Thromboembolism with Reduced- Vs Full-Dose Direct Oral Anticoagulants in Patients at High Risk of Recurrence 中文标题：比较减剂量与全剂量直接口服抗凝药延长治疗高风险复发静脉血栓栓塞症 Francis Couturaud（布雷斯特大学、FCRIN INNOVTE网络，法国） 研究结论 在需要延长抗凝治疗的静脉血栓栓塞症患者中，尚无法证明使用减剂量与全剂量直接抗凝药物在预防静脉血栓栓塞症复发方面的非劣效性。在减剂量组，临床相关出血以及静脉血栓栓塞症复发或临床相关出血的复合终点发生率均低于全剂量组，且这一优势并未因死亡或动脉血栓栓塞事件风险增加而抵消。 04 LBA-4 标题：Andean Enriched NFKB1 Haplotype Reduces Inflammation and Improves Response to Ropeginterferon Alfa-2b in Polycythemia Vera (PV) and Essential Thrombocythemia (ET) 中文标题：富含安第斯特征的NFKB1单倍型可降低真性红细胞增多症（PV）和原发性血小板增多症（ET）患者的炎症水平，并提高对罗培干扰素α-2b的应答率 汇报人：Jihyun Song（亨斯迈癌症研究所，美国） 研究结论 本研究显示，与NFKB1野生型等位基因相比，富含艾马拉族特征的NFKB1 rs230511单倍型可降低真性红细胞增多症（PV）和原发性血小板增多症（ET）患者的炎症、促血栓形成及缺氧诱导因子（HIF）活性。此外，NFKB1 rs230511单倍型还能调节PV和ET患者对罗培干扰素的应答。携带NFKB1 rs230511 T等位基因的患者，其炎症和HIF靶向基因的表达降低，这可能潜在地减少PV和ET患者的炎症和血栓形成风险。携带C/T基因型的患者更有可能实现完全血液学缓解（CHR），这表明这种NFKB1单倍型可能影响罗培干扰素的治疗效果，并可作为评估PV和ET患者治疗应答的潜在生物标志物。这些新的见解对我们理解炎症和促血栓形成过程具有重要意义，并可能为PV和ET的新型疗法提供线索。 05 LBA-5 标题：Outcome of Cerebral Vasculopathy and Cognitive Performances 10 Years Post-Enrollment in the Drepagreffe Trial Comparing Allogeneic Stem Cell Transplantation to Standard-Care in Children with Sickle Cell Anemia and History of Abnormal Cerebral Velocities 中文标题：Drepagreffe试验中接受异体干细胞移植与标准治疗的镰状细胞贫血症伴异常脑血流速度病史患儿的10年脑血管病变情况及认知功能结局比较 汇报人：Françoise Bernaudin（巴黎东部大学，法国） 研究结论 这项首个前瞻性比较试验表明，异体干细胞移植（alloSCT）与标准治疗（SoC）之间的差异在10年后发生了显著变化，其中异体干细胞移植在无症状性脑梗死（SCI)方面提供了更好的一级预防效果，同时改善了患者的社会生活质量、工作记忆和处理速度。 06 LBA-6 标题：Lack of Benefit of Autologous Hematopoietic Cell Transplantation (auto-HCT) in Mantle Cell Lymphoma (MCL) Patients (pts) in First Complete Remission (CR) with Undetectable Minimal Residual Disease (uMRD): Initial Report from the ECOG-ACRIN EA4151 Phase 3 Randomized Trial 中文标题：自体造血干细胞移植（auto-HCT）对首次完全缓解（CR）且无法检测到微小残留病（uMRD）的套细胞淋巴瘤（MCL）患者（pts）无益处：ECOG-ACRIN EA4151 III期随机试验的初步报告 汇报人：Timothy S. Fenske（威斯康星医学院，美国） 研究结论 本次中期分析显示，在高效诱导和维持治疗方案时代，首次完全缓解（CR）且无法检测到微小残留病（uMRD）的套细胞淋巴瘤（MCL）患者并未从巩固性自体造血干细胞移植（auto-HCT）中获益。而诱导治疗后MRD仍为阳性的患者可能从auto-HCT中获益。更长时间的随访对于证实这些发现至关重要。 （来源：《肿瘤瞭望–血液时讯》编辑部） 声 明 凡署名原创的文章版权属《肿瘤瞭望》所有，欢迎分享、转载。本文仅供医疗卫生专业人士了解最新医药资讯参考使用，不代表本平台观点。该等信息不能以任何方式取代专业的医疗指导，也不应被视为诊疗建议，如果该信息被用于资讯以外的目的，本站及作者不承担相关责任。

中文摘要 狂犬病病毒引起的狂犬病是一种在人畜中广泛传播、可感染神经系统且具有致死性的传染病。狂犬病的临床症状主要包括恐水、流涎、狂躁或兴奋等，目前尚无有效治疗手段，发病后100%死亡，狂犬病疫苗仍然是预防和控制狂犬病最有效的策略。此文就中国狂犬病流行病学、狂犬病疫苗株及人用狂犬病疫苗研究进展进行综述，以期为优化狂犬病防控策略提供理论依据。 正文 狂犬病是由狂犬病病毒感染引发的烈性传染病。患者在感染狂犬病病毒的潜伏期无任何症状，发病时患者出现焦虑、头疼、全身发热、感染部位刺痛等症状，而后出现神经兴奋、脉搏加快、流汗、流涎、吞咽困难，进而造成昏迷、麻痹，最终导致死亡。狂犬病的病程持续约1周，因患者神经病变导致神经兴奋阈值降低，在外界轻微刺激，如饮水时，引发肌肉痉挛。狂犬病潜伏期差异大，从数周到数年不等，一般为1~3个月，且儿童发病症状较成人重。狂犬病是最严峻的全球性公共卫生问题之一，目前全球每年约70 000人死于狂犬病。中国属于狂犬病流行地区，狂犬病在我国华南地区高发。目前针对狂犬病尚缺乏有效治疗手段，但通过暴露前或暴露后接种狂犬病疫苗，可以防治狂犬病。了解狂犬病流行情况和现代狂犬病疫苗技术的研究进展，可以更有效地建立狂犬病的防治策略，提高人类健康水平。 1 狂犬病流行病学 1.1 病原学特征 狂犬病病毒属于弹状病毒科，长约180 nm，直径约75 nm。狂犬病病毒由1个内部单元和1个外部单元连接形成。内部单元由核衣壳组成，包括磷蛋白（phosphoprotein，P）、核蛋白（nucleoprotein，N）和病毒聚合酶结合的基因组RNA。外部单元由病毒糖蛋白（glycoprotein，G）的突起和从宿主细胞膜获得的双层脂质包膜组成。内部单元与外部单元由基质蛋白（matrix protein，M）连接。狂犬病病毒具有神经嗜性，对温度敏感，病毒悬液在60 ℃ 30 min或100 ℃ 2 min的条件下即可被完全灭活，也易被日光、紫外线灭活。 1.2 传播途径、发病机制及易感人群 狂犬病可通过恒温动物进行传播，人类狂犬病的感染源包括犬、猫、狐狸和蝙蝠等。人类被携带狂犬病病毒的动物咬伤、抓伤或舔舐黏膜后，可能感染狂犬病病毒。 狂犬病病毒感染机体后，首先感染暴露处的神经细胞，再由神经组织移动至中枢神经，大量增殖并破坏神经系统，使神经系统信号紊乱，出现退行性病变。磷脂酶C、丝裂原活化蛋白激酶1/2、磷脂酰肌醇激酶、蛋白激酶C和酪氨酸激酶可能是狂犬病发病过程中的关键蛋白。狂犬病病毒的发病机制，如狂犬病病毒如何通过破坏细胞运动蛋白完成整个感染周期，还需进一步的研究。 研究表明，人群普遍对狂犬病病毒易感，15岁以下青少年与50岁以上人群发病率均较高，且男性发病人数高于女性。 2 国内常见的狂犬病疫苗株 我国常见的狂犬病疫苗株分别为aG株、CTN-1株、PV-2061株和PM株。狂犬病病毒aG株为北京株在豚鼠脑和原代地鼠肾细胞交替传代获得的地鼠肾适应株；3aG-V株是郑海发等使aG株适应Vero细胞，用豚鼠脑内含3aG-5株病毒的悬液感染Vero细胞后，经适应处理后得到的狂犬病疫苗株。与aG株相比，3aG-V株潜伏期更长，不会在动物脑内形成尼氏体，对动物的致病性也较弱。CTN-1株为1956年从山东淄博的1例死于狂犬病的患者脑组织中提取后经小鼠脑内连续传代，又经KMB-17细胞连续传50代获得的狂犬病疫苗株。PV-2061株是在法国巴斯德研究所分离的固定毒，是在兔脑内传2 061代后，再在Vero细胞上传代得到的Vero细胞适应株。PM株为1882年法国巴斯德研究所分离的固定毒，经兔脑传代保存并在多种细胞传代后获得。 2.1 常见狂犬病疫苗株与国内流行街毒株的相似性分析 aG株的G基因序列与街毒株的G基因序列相似性84%，与PV株、CTN-1株、3aG-V株的G基因序列相似性分别为92%、84%、99%。CTN-1株G基因和N基因的核苷酸序列与国内流行街毒株的核苷酸序列同源性分别为80.4%～94.3%和84.2%～95.0%。PV-2061株与国内流行街毒株的G基因序列同源性为81.91%～98.03%，其N基因序列同源性高于92.44%。PM株与国内流行街毒株同源性较低。我国狂犬病疫苗株与流行街毒株的基因测序结果表明，CTN-1株与我国流行街毒株的N基因序列以及与引起保护性免疫应答的主要抗原G基因序列的相似性均高于PM株、aG株和PV-2061株，CTN-1目前依然是我国生产狂犬病疫苗的备选疫苗株。 2.2 常见狂犬病疫苗株的传代适应性 aG株在不同的细胞株上传代适应性良好。aG株在鸡胚成纤维细胞上传代31代后，病毒滴度为7.17 lg半数致死剂量（median lethal dose，LD50）/ml。在人二倍体细胞上传代，第55代之前，aG株病毒滴度基本维持在7.0 lgLD50/ml以上，且免疫原性较高。在aG株进行狂犬病疫苗生产的传代适应性研究中，aG株在原代地鼠肾细胞上传代44代后，病毒滴度稳定在4.5 lgLD50/0.03 ml。aG株在地鼠肾细胞连续传代后，再经豚鼠脑、地鼠肾细胞交替传代3次获得的3aG-V株，在Vero细胞上进行多次适应传代后，其滴度可达8.3 lgLD50/ml。3aG-V株经多次传代后仍能保持弹状形态，豚鼠和家兔经过该毒株免疫后的血清抗体效价分别达到了2.1～2.4 国际单位（international unit，IU）/ml和4.3～4.5 IU/ml。将3aG-V株在Vero细胞不同传代次数的病毒收获液接种小白鼠脑内后，小白鼠发病潜伏期与狂犬病病毒固定毒株相比无显著变化。 CTN-1株在传代过程中适应性好、病毒滴度高。孙燕等为大规模制备无血清狂犬病疫苗，将CTN-1株在Vero细胞中培养，细胞生长状态良好，收获的平均病毒滴度为6.50 lg 荧光灶单位（fluorescene focus unit，FFU）/ml。而当CTN-1株在鸡胚细胞上传33～58代时，病毒滴度为7.0～7.5 lg FFU/ml，稳定性较好。在CTN-1株用于狂犬病疫苗生产的传代适应性研究中，CTN-1株经过人胚肺二倍体细胞Walvax-2传15～30代后，病毒滴度达7.0 lgLD50/ml。CTN-1株经原代地鼠肾细胞传代适应后，狂犬病病毒滴度为7.0 lgLD50/ml，将CTN-1株传代适应后用于制备疫苗，其效价为6.11～6.55 IU/ml。 PV株在BHK21细胞上传代时，感染后10 d收获的病毒滴度为4.23 lgLD50/0.03 ml，狂犬病病毒PV-2061株在MRC-5细胞上进行连续适应性传代，在10—13 d时，收获的病毒滴度均高于6.5 lgLD50/ml。在PV-2061株进行狂犬病疫苗生产的传代适应性研究中，辽宁成大生物股份有限公司用Vero细胞培养制备的PV-2061株疫苗，病毒平均滴度为7.6 lg LD50/ml。 在PM株进行狂犬病疫苗生产的传代适应性研究中，法国Merieux研究所将PM株在人二倍体细胞MRC-5上适应传代制成疫苗，商品名为Imovax®，对受试者间隔1个月注射2次，所有受试者均产生了抗体，受试者在注射疫苗后49 d产生的中和抗体几何平均滴度为12.90 IU/ml。 2.3 常见狂犬病疫苗株的免疫效果 aG株狂犬病疫苗的免疫效果研究显示，348名志愿者按3针法或5针法接种国内某厂家aG株狂犬病疫苗，期间不良反应较轻，未发生中、重度不良反应，接种3次的27名志愿者和接种5次的30名志愿者在14 d后，抗体阳转率为100%，抗体滴度也分别达到2.89 IU/ml和4.42 IU/ml；34名志愿者第5针次接种国内另一厂家的aG株狂犬病疫苗，期间未发生中、重度不良反应，14 d后抗体阳转率为100%，抗体滴度为3.1 IU/ml。长春生物制品研究所有限责任公司的aG株狂犬病疫苗临床试验中，完成3针接种的118名志愿者14 d后抗体阳转率均为100%，抗体几何平均浓度为9.68 IU/ml。 CTN-1株制备的狂犬病疫苗5针次接种33名受试者14 d后，其中和抗体阳转率均达100%，中和抗体水平为11.94 IU/ml。钱浩等的研究观察到了类似的现象，20名健康受试者接种CTN-1V株制备的狂犬病疫苗14 d后，不良反应率为35% ，中和抗体阳转率达100%，中和抗体水平为13.08 IU/ml。 在辽宁成大生物股份有限公司的PV-2061株疫苗成大速达®的临床试验中，按5针次接种疫苗的502名受试者，首次接种后第45天的抗体阳转率为100%，中和抗体几何平均滴度为9.5 IU/ml，未发生严重不良反应。282名暴露后志愿者采用“2-1-1”接种程序接种成大速达®，并经3年内2剂加强免疫，加强免疫14 d后的抗体阳性率均在99%以上。 蔡勇等报道了成都康华生物制品股份有限公司PM株疫苗HDCV®的保护效力。采用5针法接种的试验组在首次接种后第42天的抗体阳转率为100%，血清中和抗体几何平均滴度为37.575 0 IU/ml，接种疫苗后受试者的不良反应较轻，且不良反应均在72 h内消失。李幸乐等报道13例狂犬病暴露者采用5针法接种HDCV®15 d后，中和抗体水平在17.82 ~258.16 IU/ml范围内，随访半年无人发病。 aG株、CTN-1株、PV-2061株和PM株狂犬病疫苗在免疫效果研究中均可产生较高中和抗体滴度，保护效果较好，且不良反应较轻，均具有良好的安全性和免疫原性。 3 国内已上市人用狂犬病疫苗和研究现状 3.1 国内已上市人用狂犬病疫苗 人用狂犬病疫苗根据细胞培养基质可分为原代细胞培养疫苗和传代细胞培养疫苗。原代细胞没有致瘤风险，但其细胞种类复杂，难以保证细胞质量的一致性，且营养条件要求较高，不能进行生物反应器大规模化培养，外源致病微生物污染的风险较大。传代细胞质量可高度控制，细胞生长条件要求较低，可采用生物反应器大规模生产，大多数病毒可在该类细胞系中繁殖，但有一定的致瘤性，疫苗必须经过纯化，且细胞DNA含量必须达到标准。 我国目前批准上市且仍在使用的人用狂犬病疫苗均为细胞培养疫苗，培养基质分别为Vero细胞、原代地鼠肾细胞和人二倍体细胞（表1）。 疫苗的质量直接关系到国家公共卫生健康与安全，目前上市的狂犬病疫苗在预防狂犬病方面已取得一定的成功。2007年至2023年，我国狂犬病的年发病人数呈现下降趋势，从3 300例下降至131例。 3.2 国内狂犬病疫苗研发现状 人用狂犬病疫苗的发展，经历了以神经组织疫苗、禽胚组织疫苗、细胞培养疫苗、新型佐剂疫苗、基因工程疫苗等阶段。 神经组织疫苗中应用最为广泛的羊脑组织疫苗接种次数多，抗体产生应答慢、水平低，且体内有病毒残留的风险。禽胚组织疫苗存在不良反应率高、免疫保护率低等问题，其中，原代鸡胚细胞狂犬病疫苗由于生产成本较高，产量难提升，价格也相对较高，2019年起已无该疫苗的批签发。细胞培养疫苗是我国目前广泛应用的狂犬病疫苗，不良反应较少，能够安全有效地预防狂犬病。 新型佐剂狂犬病疫苗处于临床研究中。辽宁依生生物制药有限公司自主开发的皮卡佐剂狂犬病疫苗Ⅰ/Ⅱ期临床试验结果显示，采用皮卡佐剂的狂犬病疫苗组中75.00％的受试者在第7天实现了血清阳转，而市售人用狂犬病疫苗对照组只有16.67%的受试者在第7天实现了血清阳转。 狂犬病基因工程疫苗作为1项新兴技术，能够降低成本且简化免疫接种程序。其中，人用狂犬病mRNA疫苗可以通过体液和细胞免疫达到高效的免疫应答，不需要与其他疫苗佐剂联合作用，且可能由其他物质引起的不良反应减少，成本低廉，可用于大规模生产。但狂犬病mRNA疫苗的1项临床试验发生了严重的不良反应，其安全性和有效性仍有待进一步研究。 4 总结与展望 目前我国常用的人用狂犬病疫苗株分别是CTN-1株、aG株、PV-2061株和PM株，均具有良好的安全性和免疫原性。国内的狂犬病疫苗均为灭活疫苗，多以原代地鼠肾细胞、纯化Vero细胞和人二倍体细胞为基质进行狂犬病疫苗的研制。随着研发技术的不断进步，部分新型人用狂犬病疫苗的研发已进入临床试验阶段，新型佐剂疫苗和mRNA疫苗是目前的研究热点。为了响应WHO在2030年彻底根除狂犬病的计划，需采取多方面的措施预防狂犬病的发生，最重要的方式之一是采用暴露前预防和暴露后接种彻底消除狂犬病。更加经济、安全、有效的人用狂犬病疫苗也将进一步被研发以用于保障人类健康。 作者 李美辰1  何成1 综述  周旭2 审校 1上海生物制品研究所有限责任公司第二研究室， 上海 200051；2上海生物制品研究所有限责任公司， 上海 200051 通信作者：周旭， Email：kathzhou@sina.com 引用本文：李美辰, 何成, 周旭. 中国狂犬病疫苗研究进展[J]. 国际生物制品学杂志, 2024, 47(5): 331-335.   DOI: 10.3760/cma.j.cn311962-20231124-00020 识别微信二维码，添加生物制品圈小编，符合条件者即可加入 生物制品微信群！ 请注明：姓名+研究方向！ 版 权 声 明 本公众号所有转载文章系出于传递更多信息之目的，且明确注明来源和作者，不希望被转载的媒体或个人可与我们联系(cbplib@163.com)，我们将立即进行删除处理。所有文章仅代表作者观点，不代表本站立场。