IVNS1ABP

近日，强生杨森宣布停止RSV疫苗的III期临床，退出研究性RSV成人疫苗项目。历数过往研发的RSV疫苗，可谓困难重重，但今年，RSV疫苗或将迎来里程碑式进展。01发现1956年，RSV首次从患有鼻溢液和鼻炎的黑猩猩的鼻腔分泌物中分离出来，1957年，从患有急性下呼吸道感染（ALRTI）的儿童体内分离。RSV被看做是婴儿ALRTI的常见病毒性原因。支气管炎是婴儿RSV感染最常见的临床表现，虽然其通常是自限性的，但对于免疫力低下的婴儿来说造成了大量的住院和重症病例。到1970年，RSV在老年人的长期护理机构中爆发，其对于老年人的危害开始引起人们的重视。由此可见，RSV引起的感染虽然具有自限性，但对于免疫力低下的儿童和老年人会发展为严重的呼吸道感染，因此RSV疫苗接种对象主要为婴幼儿和老年人。但RSV疫苗从发现至今，研发之路并不顺利，患者仍然面临“无疫苗可用”的局面。02破局RSV是一种属于肺病毒科的包膜RNA病毒，有10个基因，编码11种蛋白质。病毒包膜中包含小疏水蛋白（SH）、基质蛋白（M）、融合蛋白（F）和附着糖蛋白（G）；病毒包膜下是基质蛋白（M）；再是核衣壳，包括单链RNA（ssRNA）和核蛋白（N）。RSV基因组：（NS1和NAS2）非结构蛋白；（N）核蛋白；（P）磷蛋白；（M）基质蛋白；（SH）小疏水蛋白，（G）附着蛋白；（F）融合蛋白；（M2）第二基质蛋白；（L）RNA聚合酶[1]RSV结构[1]其中糖蛋白G可使RSV附着在宿主细胞上，糖蛋白F可促进其进入细胞并导致形成合胞体。这两种蛋白能在宿主体内诱发中和抗体，由于G蛋白的高度变异性，F蛋白便成为疫苗开发的主要抗原。但F蛋白有两种表现形式（pre-F和post-F），在研发之初，人们主要选用相对稳定的post-F蛋白作为抗原，但多款疫苗的临床结果并不乐观，甚至有疫苗还起到了加重RSV的作用。后期随着技术的不断发展，人们掌握稳定pre-F蛋白的方法，开始从pos-F转向pre-F，今日，pre-F的抗原位点已成为最有力的中和抗体诱导剂。03趋势根据世界卫生组织（WHO）的估计，全球每年有约3300万-6000万的儿童感染RSV，其中，大约3%至10%的患者需要住院治疗。CDC数据表明，美国每年感染RSV的5岁以下儿童门诊人数达210万，其中有5.8-8万人住院，其中100-300人死亡。一项针对60岁以上的成年人RSV相关的急性呼吸道感染（RSV-ARI）病例研究表明，到2025年，高收入国家的RSV-ARI病例数、住院和院内死亡人数可能分别达到570万（95%CI：300万-1090万）、51万（95%CI：33万-79万）和3.7万（95%CI：18万-74万）。2019年≥60岁成人RSV疾病估计根据《Research and Markets》报告表明，2024-2028年，RSV疫苗和抗体市场将以38.9%的年复合增长率增长，到2028年市场将达到95.3亿美元，其中疫苗市场将占据大部分市场份额（67.5%）。就地区而言，将主要集中于美国、欧洲和ROW地区。其中美国为RSV高发区，将占据近一半的市场份额。RSV感染是呈季节性的，2022年秋季，美国的RSV病例出现早发、高发趋势。针对儿童和老年人的预防性疫苗市场呈现巨大的未满足需求。[2]04现状目前，针对RSV感染仅获批了抗体药物，包括阿斯利康/赛诺菲的Nirsevimab和艾伯维的Palivizumab。而随着技术的发展，越来越多的企业也开始布局RSV疫苗，但多处于临床早期，少数几家步入III期，进展最快的辉瑞和GSK已提交上市申请。以下是几款步入III期的RSV疫苗：辉瑞的PF-06928316b是针对RSV-A型和B型的二价疫苗，GSK和Moderna的为单价疫苗，此外Bavarian的疫苗包含五种不同的RSV抗原，可刺激针对两种RSV亚型（A 和 B）的广泛免疫反应。2022年3月，优瑞医药与Bavarian达成协议，负责MVA-BN在亚太地区的开发与商业化权益。此外，国内一些企业也已开始布局，包括艾棣维欣、嘉晨西海、艾美疫苗、三叶草、百克生物、智飞生物、蓝鹊生物/沃森生物等。扫码查询现货细胞系参考：1. doi:  10.3892/ijmm.2020.46412. doi:  10.1101/2023.01.04.232841953.《RSV疫苗：百亿美元市场的角逐》往期推荐2023全球医药研发全景展望国外主要ADC技术梳理（下）小核酸药市场概览点击下方“药研网”，关注更多精彩内容

这几年中国的首富已经从互联网行业的轮流坐庄，换成了卖水的钟睒睒。而成就钟睒睒的首富地位来自于万泰生物的助推，根据最新年报显示，钟睒睒直接及通过养生堂间接持有万泰生物73.29%股份，持有市值超过800亿元。万泰生物近年来爆炸般的营收正在不断巩固钟睒睒首富宝座。然而时代变革的脚步是迅速的，在新冠疫情已经翻篇之后，万泰生物的业绩是否也将经历过山车？来源：官网超高速增长3月21日，万泰生物发布最新年报，2022年，其总营收111.85亿元，同比增长94.51%；净利润47.36亿元，增长134.28%；归母扣非净利润45.14亿元，增长132.03%。其中，来自疫苗的收入为84.93亿元，同比增长152.55%；来自体外诊断的收入为26.74亿元，增长14.31%。万泰生物2022年营收情况来源：2022年年报从具体产品看，万泰生物的二价HPV疫苗为营收的主力，自2020年5月上市以来，该疫苗产量及销量屡创新高，2022年批签发近3000万支，销量突破2500万支，品牌影响力不断提升，已在各省、自治区、直辖市获得招、补标准入，有效覆盖全国31个省份约2815家区县疾控中心（含ITHC）和24000家社区医院。新冠疫苗方面，2022年年底，万泰生物收获了一款重磅的鼻喷新冠疫苗，该鼻喷新冠疫苗是在双重减毒的季节性流感病毒（CA4-DelNS1）载体内插入新冠病毒保护性抗原的RBD基因序列构建而成的减毒活病毒载体疫苗，经鼻腔喷雾接种，用于预防新冠病毒感染引发的疾病。体外诊断方面，新冠抗原试剂盒为万泰生物贡献了不少收入。2022年3月，万泰生物自主研发生产的新冠抗原检测试剂盒（胶体金法）在国内获批上市，适用于体外检测人口咽/鼻咽/鼻拭子样本中的新型冠状病毒（2019-nCoV）核衣壳蛋白抗原。据年报显示2022年，该产品销售全球20多个国家共计1.55亿人份。除了新冠抗原试剂盒，万泰生物的EB病毒、心肌、感染、优生优育等标志物检测试剂获得21项注册证书，艾滋病毒抗体检测试剂获得欧盟CE认证等。2022年全年，试剂贡献收入24.77亿元，同比增长22.32%。体外诊断仪器方面，万泰生物自主研发的全自动化学发光免疫分析仪（Caris200）、新一代模块化全自动化学发光免疫分析仪（Wan200+），均可配合万泰生物化学发光试剂使用；推进低速小型化全自动化学发光免疫分析仪Wan100及高通量的产品开发，全自动化学发光免疫分析仪（Wan100）获批上市；核酸诊断产品方面，大型全自动多重PCR检测设备和小型快速核酸POCT检测仪器与核酸试剂配套使用。该部分业务2022年贡献收入5133.92万元，同比下降42.99%。从历史财务数据看，万泰生物已经连续三年实现净利润超过100%的超高速增长，这主要得益于HPV疫苗的放量，但随着时间的推移，HPV疫苗的市场格局及竞争也在发生急速的变化。角力HPV疫苗从万泰生物的营收组成看，营收的主力来自于二价HPV疫苗迅速放量，这很大程度上是来自时代的馈赠。2020年11月，WHO发布《加速消除宫颈癌全球2030战略》，计划推动15岁以下的女孩接种HPV疫苗的覆盖率达到90%以上，35-45岁成年女性接受有效的宫颈癌筛查的覆盖率要达到70%以上，筛查之后有病变的妇女至少90%以上需要做合理治疗和合理管理。世界各国云集响应，包括中国在内的194个国家首次共同承诺消除一种癌症。同时，中国中央和地方也出台了众多推进消除宫颈癌的措施和政策，为国内HPV疫苗的研发与推广提供了政策大环境。目前全球范围内，HPV疫苗仅有5款产品，包括默沙东的九价佳达修9和四价佳达修、GSK的二价希瑞适、万泰生物的二价馨可宁以及于2022年获批的沃森生物二价沃泽惠，相对来说比较稀缺。2022年国内HPV疫苗竞争格局来源：国金证券研报从市场竞争格局来看，2022年，国内HPV疫苗以默沙东九价和四价为主，占据市场份额约48%；万泰生物的馨可宁市场份额从2020年的6%，一路过关斩将飙升至2022年的43%，营销能力可谓强悍。但沃森生物的沃泽惠出现以后，万泰生物开始遇到对手。沃泽惠获批才几个月时间，便已斩获7%的市场份额，在可预见的未来，这两款国产HPV疫苗将难免狭路相逢。由于存在巨大而未被满足的市场，这几年布局HPV疫苗的企业也如雨后春笋般地冒出来。截至目前，已有至少15家公司投入HPV疫苗的研发，其中进入临床III期的就有9款。国内HPV疫苗在研管线中，九价HPV竞争最为激烈，在研九价HPV疫苗管线的有5家企业。其中瑞科生物、安百胜生物以及康乐卫士拥有在研二价、三价HPV疫苗，研发管线丰富；四价HPV疫苗在研管线已全部进入临床III期，九价HPV疫苗在研管线中康乐卫士、万泰、瑞科、安百胜率先进入临床III期。国内HPV疫苗研发竞争情况来源：东北证券研报如果从产品布局情况来看，万泰生物在所有HPV疫苗企业中的布局较为合理，未来如果二价HPV疫苗纳入国家免疫计划，利润率可能大幅下降，届时还能依靠九价疫苗创造主要利润，布局阶梯明显，产品策略十分得当。并且，万泰生物的野心远不止国内市场，在其二价HPV疫苗通过WHO PQ认证后，于2022年先后获得摩洛哥、尼泊尔、泰国、刚果（金）的上市许可，于2023年1月获得柬埔寨的上市许可，另外还有数十个国家的注册申报正有序推进中。从目前的市场饱和度看，HPV疫苗还远未达到饱和程度，拥有先发优势的万泰生物，只要产能跟得上，至少还将保持数年的领先优势。但后疫情时代，没有了新冠试剂和新冠疫苗的助力，万泰生物的超高速增长还能保持多久？增长点在哪？除了HPV疫苗，万泰生物还储备了什么重磅品种？万泰生物拥有一款全球独家重组戊肝疫苗益可宁，于2012年上市。但多年来由于社会公众对于戊肝疫苗认知程度低以及戊肝疫苗普及宣传工作较甲肝、乙肝疫苗不足，上市之后多年戊肝疫苗营收占万泰生物总营业收入比重较低，2014-2020年平均批签发量7.4万支左右，2021年批签发量增幅较大，共有7批次约34万支，同比增长729%。2017-2021年戊肝疫苗营业收入情况来源：兴业证券研报显然，戊肝疫苗要扛起万泰生物保增长大旗，十分吃力。在疫情期间，万泰生物的鼻喷新冠疫苗是万众瞩目的一款产品。不同于以产生体液免疫应答为主的肌肉注射疫苗，鼻喷疫苗可以模拟呼吸道病毒天然感染途径，能够激活呼吸道黏膜免疫系统，产生分泌型免疫球蛋白A(sIgA)。sIgA是黏膜表面的免疫屏障，能有效的抑制病原体粘附、定植或侵入黏膜表面，这种免疫排除作用能保护黏膜屏障的完整性和阻断病原体对机体的感染。万泰生物的这款鼻喷新冠疫苗是经鼻腔接种的一款完全创新性疫苗，采用经反向遗传学改造的敲除NS1基因并携带低温适应突变的减毒流感病毒载体，在其敲除NS1基因的位置上插入经密码子优化的2019-nCoV冠状病毒RBD编码序列构建而成。该疫苗病毒感染宿主细胞后，分泌表达的2019-nCoV RBD蛋白，可刺激机体产生针对2019-nCoV的保护性免疫。根据此前万泰生物披露的临床Ⅲ期试验结果显示：鼻喷新冠疫苗的重症以上保护效力为100%。针对无免疫史人群，鼻喷新冠疫苗免疫后3个月内绝对保护效力为55%；针对有免疫史人群，鼻喷新冠疫苗加强免疫后6个月内绝对保护力为82%。这款鼻喷新冠疫苗已于2022年12月2日获批紧急使用。来源：万泰生物官网但时运不济，在该疫苗获批的仅仅5天之后，2022年12月7日我国宣布新冠病毒感染管控措施调整，新冠病毒感染被列入“乙类乙管”。不到一个月的时间里，新冠病毒席卷全国，该鼻喷新冠疫苗还未发力就面临这种局面，十分尴尬。不过，因为这款鼻喷疫苗采用的是流感病毒载体，除了对Omicron等各种新冠病毒关切突变株均有广谱作用之外，小鼠实验显示该疫苗还可广谱保护H1N1和H5N1流感病毒感染。在流感流行趋势加快的当下，该鼻喷疫苗或许将有不错的想象力。研发储备方面，万泰生物的冻干水痘减毒活疫苗完成III期临床试验，正在进行生产申报准备工作；冻干水痘减毒活疫苗（VZV-7D）完成IIa临床现场工作，正在开展IIb临床试验；20价肺炎疫苗于2022年11月通过江苏省疾病预防控制中心伦理审查委员会审查并获得伦理批件，并于2023年2月启动受试者招募工作；重组带状疱疹病毒疫苗、重组三价轮状病毒亚单位疫苗和第三代HPV疫苗、四价肠道病毒灭活疫苗和鼻喷三价新冠-三价流感病毒疫苗正开展临床前药学和药效研究工作。2022年全年，万泰生物研发投入10.99亿元，同比增长61.19%。万泰生物疫苗研发管线来源：东北证券研报结语从目前那些深度参与新冠相关产业链的企业正在经历的情况看，新冠疫苗企业几乎已经无人问津，治疗新冠药物企业已经跌入谷底，新冠检测试剂企业更是陷入巨额应收账款无法回收的绝望境地。可以预见，在体外诊断业务方面，万泰生物也将承受较大的衰退压力。HPV疫苗的增长能否抵消这部分衰退，可能不是特别乐观。后续发展如何，药渡还将持续关注。参考资料1. 万泰生物公告、官网、年报等。2. 东北证券、国金证券、兴业证券等研报。3. 《提前突破内卷，成功出海的万泰生物还能靠HPV疫苗赚多久？》，美柏医健，2022-5-20END👇关注药渡数据媒体矩阵

病毒感染已成为公众健康和安全的严重关切，尤其是最近几年的SARS-COV-2病毒让人们更加重视这一领域。目前，人类病毒感染的防治主要依靠药物和疫苗的结合。然而，不断增长的耐药菌株对目前可用的抗病毒治疗策略提出了挑战，而疫苗接种往往不能预防突变的或新型的病毒。因此，寻找基于靶向或疫苗接种这两种新型药物的前沿抗病毒治疗策略至关重要。PROTAC相对于传统抗病毒药物有高特异性，高效性，使用催化剂量即可降解蛋白（不仅消除蛋白的催化功能，也消除蛋白的骨架功能）等优点，但是也有分子量大，细胞透膜性差和代谢不稳定等缺点。目前还没有PROTACs被批准上市，本文主要总结PROTAC技术在抗病毒药物领域的研发进展。1病毒与PROTACs的发展病毒在20世纪造成了大量死亡。例如，天花导致多达4亿人死亡，1918-1919年西班牙流感大爆发导致约1亿人死亡，人类免疫机能丧失病毒（艾滋病毒）流行病已造成3500万人死亡病例。截至2022年1月25日，COVID-19确诊病例已达到3.52亿例，其中560万人死亡。病毒感染已成为公众健康和安全的严重关切。目前，人类病毒感染的防治主要依靠药物和疫苗的结合。然而，不断增长的耐药菌株对目前可用的抗病毒治疗策略提出了挑战，而疫苗接种往往不能预防突变的或新型的病毒。因此，寻找基于靶向或疫苗接种这两种新型药物的前沿抗病毒治疗策略至关重要。PROTAC技术已被广泛研究用于POI的靶向蛋白质降解治疗疾病，它依赖于使用异型双功能分子将细胞内蛋白质降解机制募集到感兴趣的靶蛋白附近，使靶蛋白泛素化从而被降解（图1）[1]。图1. 基于PROTAC的降解的结构和机制最近， PROTACs作为抗病毒疗法的作用方面取得了许多进展，探索了各种基于PROTAC的抗病毒治疗策略，这些策略具有改善的耐药性特征。2基于PROTAC的抗病毒策略根据病毒的特点和进入宿主细胞繁殖过程，其中一些蛋白可以用作设计PROTACs的靶标蛋白，包括蛋白酶，表面受体蛋白，宿主蛋白，细胞周期蛋白依赖性激酶（CDKs）等（图2）。下面详细介绍基于这些蛋白设计的PROTACs在抗病毒领域的应用。图2. 靶向不同病毒靶标设计PROTACs1PROTAC病毒，一种新型疫苗策略最近，Si等人描述了一种基于PROTAC的新型方法来生成用于疫苗接种目的的人工减毒流感病毒株。他们采用PROTAC技术通过宿主泛素-蛋白酶体系统对流感病毒的选定病毒蛋白进行靶向蛋白质降解，从而显着减弱病毒复制。尽管PROTAC病毒在复制方面存在缺陷，但它们可以引发强大的免疫反应。为了产生减毒的流感PROTAC病毒，他们通过将蛋白酶体靶向结构域（PTD）连接到基质基因片段来设计甲型流感的基因组。PTD是一种具有序列ALAPYIP的七肽，被VHL E3泛素连接酶识别。PTD对病毒蛋白的标记导致招募VHL E3连接酶进行多泛素化，然后由宿主泛素-蛋白酶体系统进行蛋白水解。由于PTD肽通过烟草蚀刻病毒（TEV）切割位点接头肽（ENLYFQG）与病毒蛋白连接，它可以在稳定表达TEV蛋白酶的细胞系中有条件地裂解，从而避免PTD标记的靶蛋白的蛋白水解。因此，流感病毒在稳定表达TEV的细胞系中没有缺陷，产生减毒病毒用于疫苗生产的颗粒（图3）[2]。图3. a. PROTAC病毒的产生示意图；b. PTD的氨基酸和基因序列。蛋白酶体靶向肽以蓝色表示，TEVcs以橙色表示Si等人测试了八种不同的甲型流感蛋白（M1，PB2，PB1，PA，NP，M2，NEP和NS1）用于PTD标记依赖性蛋白水解和MDCK2细胞的复制衰减和PTD切割效率以及保护表达TEV的MDCK2细胞（MDCK-TEVp）的蛋白水解。尽管PTD标记导致MDCK2细胞中八种蛋白质中的每一种都能有效地进行蛋白水解，但PTD切割效率以及MDCK-TEVp中对蛋白水解的保护是高度可变的。这在很大程度上归因于PTD标记蛋白的TEV切割位点的可及性。在八种蛋白质中，M1（M1-PTD）的PTD标记显示MDCK2细胞中M1蛋白的有效蛋白水解，与野生型病毒相比，复制能力降低了>20,000倍。相反，M1-PTD病毒在表达MDCK-TEVp细胞系的TEV中有效复制。他们还测试了M1-PTD诱导小鼠和雪貂免疫反应的能力，并检测了HI（血凝素抑制），NT（中和）、HA（血凝素）和内部保守的核蛋白抗体明显高于接种灭活流感疫苗（IIV）或冷适应型流感疫苗（CAIV）的疫苗。强大而熟练的T细胞免疫反应也由于MHC分子对降解病毒肽抗原的增强呈递而被检测到（图4）。图4. 评估PROTAC病毒M1-PTD在小鼠和雪貂中的免疫原性PROTAC病毒具有作为理想候选疫苗的潜力。理想的疫苗是能够在宿主中达到足够的衰减水平以确保安全性，同时在细胞系中保持强大的免疫原性。与传统方法相比在疫苗生产中，PROTAC利用降解的病毒肽产生蛋白酶体降解途径触发有效的免疫应答。PROTAC技术比其他衰减方法更有效，因为改进了安全性以及功效或生产力的累积损失。传统基于衰减的方法面临的另一个突出挑战是由于快速病毒进化而导致的免疫逃逸。因此，PROTAC技术已成为生产更安全、更有效的疫苗的重要选择。2靶向蛋白酶的PROTAC 病毒编码一种或多种蛋白酶，作为支持压缩基因组复制的典型技术。为了产生成熟的病毒蛋白，病毒基因组用整合的病毒蛋白酶编码多蛋白，该蛋白酶在几个特定位置切割多蛋白。由于它们对繁殖的必要性，病毒蛋白酶是极好的治疗靶标。病毒生命周期和复制取决于病毒蛋白酶。来自不同病毒家族的蛋白酶在结构、催化机制和优选底物方面彼此不同。病毒蛋白酶具有特定的底物偏好可用于设计抑制剂以产生强效和选择性的类药化合物。关于病毒蛋白酶作用的广泛研究暗示了它们在病毒复制阶段的重要性作用。因此，病毒蛋白酶是抗病毒策略中抑制病毒复制的常见靶标。在过去的几十年里，已经开发了针对病毒蛋白酶的各种小分子抑制剂。为了克服耐药性并提高抗蛋白酶小分子抑制剂的疗效，一些研究人员应用了基于PROTAC的靶蛋白降解病毒蛋白酶。Yang等人报道了针对丙型肝炎病毒（HCV）非结构性3/4A（NS3/4A）丝氨酸蛋白酶的PROTAC化合物。特拉匹韦，一种可逆共价抑制剂，与HCV NS3/4A丝氨酸蛋白酶的活性位点结合，用于开发用于该蛋白酶的PROTAC降解剂（图5）。特拉匹韦的晶体结构与病毒蛋白酶显示，其吡嗪环是溶剂暴露的，允许它与CRBN配体通过连接链偶联。所得的基于特拉匹韦的降解剂DGY08-097对HCV NS3/4A蛋白酶选择性抑制和降解[3]。图5. 特拉匹韦和PROTACs的结构3靶向表面受体的PROTAC 病毒包膜是包裹衣壳的脂质双层。它嵌入了许多糖蛋白到其表面，使病毒能够附着在宿主细胞的受体上。另一方面，除了包膜中存在的这些糖蛋白外，许多冠状病毒（CoV）还具有维持病毒复制所必需的独特包膜和膜蛋白。病毒表面蛋白，如血凝素和神经氨酸酶，正在成为抗病毒治疗的新靶标，由于它们与宿主细胞表面的受体明显不同。血凝素是一种凝集素，通过识别细胞表面存在的末端唾液酸残基使病毒附着在细胞表面的受体[4]。神经氨酸酶通过切割病毒包膜上存在的血凝素与宿主细胞膜上的唾液酸残基之间的键，帮助将病毒从一个唾液酸残基转移到另一个唾液酸残基。病毒穿过宿主的细胞膜，直到它识别并附着在适当的细胞受体上，使其进入宿主细胞。同样，神经氨酸酶的活性也使新产生的病毒粒子有可能离开宿主细胞的表面。病毒包膜的任何损坏都可能由于产生还原的氧气而不可逆转地损坏它，因为病毒缺乏修复它们的机制。Zhou等人报告了基于奥司他韦骨架的新型PROTAC分子的设计和合成，以对抗严重的年度流感爆发（图6）[5]。奥司他韦是一种神经氨酸酶抑制剂，可防止宿主细胞新合成的病毒颗粒出来。基于奥司他韦的PROTACs通过泛素-蛋白酶体途径降解神经氨酸酶。图6. 奥司他韦以及PROTACs的结构4靶向宿主蛋白的PROTAC 宿主细胞感染病毒后，病毒劫持宿主细胞合成病毒蛋白和核酸以进行快速繁殖和组装的机器。几种酶是病毒复制和生产力所必需的。这些包括参与各种核酸交易的聚合酶、核酸内切酶和连接酶。抗病毒疗法发展的新转变已经出现在寻找宿主蛋白作为靶标方面。它将能够解决病毒耐药性的死灰复燃问题。此外，由于病毒病原体需要宿主机器来复制其遗传物质，因此成功靶向宿主蛋白将有助于绕过频繁调整经常使用抗病毒药物的障碍，以有效靶向快速突变的病毒基因组。吲哚美辛（INM）是一种非类固醇抗炎药，具有镇痛和解热特性，已知可抑制PGES-2（前列腺素E合酶-2型），这是一种已知参与类花生酸酶的生物合成。Goracci等人报道INM通过脂肪族或聚乙二醇连接链与VHL E3连接酶配体偶联合成的PROTACs[6]。由于这些PROTACs靶向宿主蛋白PGES-2，因此它们有很明显的抗病毒活性（图7）。图7. 吲哚美辛和PROTAC化合物对SARS-CoV-2的抗病毒活性和细胞毒性同样，众所周知，细胞周期蛋白依赖性激酶（CDK）在DNA和RNA病毒的生命周期中发挥重要作用。CDK1、CDK2、CDK3、CDK4/6、CDK5、CDK7和CDK9抑制剂始终对多种病毒（包括HSV、HIV、人巨细胞病毒和SARS-CoV-2）显示出有效的抗病毒活性。Hahn等人报道了CDK9的PROTAC THAL-SNS032（图8）。该PROTAC是通过将E3连接酶CRBN招募到CDK酶附近，使其泛素化，然后降解。THAL-SNS032主要导致CDK9降解，但也导致CDK1、2和7降解[7]。此外，THAL-SNS032还靶向HCMV编码的CDK直系同源物pUL97，其在病毒中起重要作用（图8）。图8. CDK9的PROTAC THAL-SNS032的结构与抗病毒活性3PROTACs抗病毒策略优劣PROTACs由于其特异性，高效性，催化量等作用机制相对于传统抗病毒药物有很大的优势，具体见表1。表1. PROTACs相对于传统抗病毒药物的优势尽管PROTACs比其他小分子抑制剂更强大，并且完全耗尽细胞中所需的靶蛋白，但它们可能会在宿主细胞中引起靶向毒性，并可能损害正常的细胞功能。PROTAC靶向的一些POI可以同时具有酶促功能以及其他支架功能，这些功能可能对正常细胞功能很重要。因此，它们的完全消除可能对细胞有毒。PROTAC对目标蛋白的降解也可能降解与靶蛋白直接或间接相关的蛋白质，导致脱靶效应。如果PROTAC与新底物结合，脱靶效应也会引起新形态相互作用，因此，未来的研究应侧重能够进一步降低PROTACs脱靶毒性。— 小结 — PROTAC技术有望在未来开发有前途的和潜在的下一代抗病毒药物。PROTAC技术对一系列致病蛋白具有扩展的功能，并且可以有效对抗通过突变和适应病毒获得的耐药性。除了现有的已知连接酶集合外，还可以通过探索更多的E3连接酶来进一步扩展该技术，因为E3连接酶机制核心的基因组改变已经加剧了对基于PROTAC的治疗的耐药性。PROTAC技术的也有一些缺点包括分子量大，细胞通透性差和代谢不稳定。CLIPTAC（CLIck形成的蛋白水解靶向嵌合体）技术已被用于尝试解决这个问题[8]。在点击化学中，双功能分子分为两部分：靶蛋白的配体和与连接酶结合的另一部分。这些部件通过在细胞中的快速反应组装形成PROTAC分子。由于这两部分都具有低分子量和改善的细胞通透性，因此它们显着改进了该技术。连接链也会显著影响PROTAC化合物的活性、选择性和成药性。目前已经有很多不同的PROTACs进入临床研究，其中进展最快的是Arvinas的ARV-110和ARV-471，任何一门新的技术的成功都离不开无数人的努力，未来期待PROTAC能在抗病毒领域有更大的应用和发展。参考文献：（上下滑动查看更多）1. Haleema Ahmad , Bushra Zia , Hashir Husain and Afzal Husain, Recent Advances in PROTAC-Based Antiviral Strategies, Vaccines 2023, 11, 270.2. Si, L.; Shen, Q.; Li, J.; Chen, L.; Shen, J.; Xiao, X.; Bai, H.; Feng, T.; Ye, A.Y.; Le Li, L.; et al. Generation of a live attenuated influenza A vaccine by proteolysis targeting. Nat. Biotechnol. 2022, 40, 1370–1377.3. De Wispelaere, M.; Du, G.; Donovan, K.A.; Zhang, T.; Eleuteri, N.A.; Yuan, J.C.; Kalabathula, J.; Nowak, R.P.; Fischer, E.S.; Gray, N.S.; et al. Small molecule degraders of the hepatitis C virus protease reduce susceptibility to resistance mutations. Nat. Commun. 2019, 10, 34684. Suzuki, Y. Sialobiology of Influenza: Molecular Mechanism of Host Range Variation of Influenza Viruses. Biol. Pharm. Bull. 2005, 28, 399–408.5. Xu, Z.; Liu, X.; Ma, X.; Zou, W.; Chen, Q.; Chen, F.; Deng, X.; Liang, J.; Dong, C.; Lan, K.; et al. Discovery of oseltamivir-based novel PROTACs as degraders targeting neuraminidase to combat H1N1 influenza virus. Cell Insight 2022, 1, 100030.6. Desantis, J.; Mercorelli, B.; Celegato, M.; Croci, F.; Bazzacco, A.; Baroni, M.; Siragusa, L.; Cruciani, G.; Loregian, A.; Goracci, L. Indomethacin-based PROTACs as pan-coronavirus antiviral agents. Eur. J. Med. Chem. 2021, 226, 113814.7. Hahn, F.; Hamilton, S.T.; Wangen, C.; Wild, M.; Kicuntod, J.; Brückner, N.; Follett, J.E.L.; Herrmann, L.; Kheimar, A.; Kaufer, B.B.; et al. Development of a PROTAC-Based Targeting Strategy Provides a Mechanistically Unique Mode of Anti-Cytomegalovirus Activity. Int. J. Mol. Sci. 2021, 22, 12858.8. Lebraud, H.; Wright, D.J.; Johnson, C.N.; Heightman, T.D. Protein Degradation by In-Cell Self-Assembly of Proteolysis Targeting Chimeras. ACS Cent. Sci. 2016, 2, 927–934