NFIL3

IL-27是IL-6家族的成员，在结构上与 IL-12 和 IL-6家族相关。其受体IL-27R通过JAK/STAT信号通路传导。IL-6家族6个促癌成员IL-27R由IL-27Rα和gp130链构成，其中gp130还是IL-35、IL-6、IL-11等细胞因子受体的重要组成部分。此外，gp130和IL-27Rα可以在包括NIH3T3细胞、B细胞、T细胞、NK细胞、DC、单核细胞、肥大细胞、内皮细胞和脂肪细胞等细胞中表达。健康人体中，IL-27可由DC、巨噬细胞和单核细胞等APC通过TLR和IFN-γ依赖的方式产生。IL-27在肿瘤、自免和肥胖炎症作用中均表现出多效性。抗肿瘤已报道的作用机制包括：抑制肿瘤作用促进肿瘤作用诱导产生IFN-γ，提高肿瘤特异性CD8+ T细胞的存活率和分化能力激活NFIL3和T-bet来诱导TIM-3表达激活T细胞和NK细胞介导的肿瘤免疫反应激活STAT1，驱动Treg表达CD39，从而发挥Treg促瘤作用促进造血干细胞扩增和分化为M1表型髓系祖细胞激活STAT1，介导PD-L1表达介导CD8+ T细胞免疫反应诱导癌变B细胞凋亡激活NK细胞，通过Fas/FasL依赖诱导肿瘤细胞凋亡与多肌胞嘧啶结合，通过增强TLR3表达诱导肿瘤细胞凋亡通过诱导产生CXCL10和IFN-γ诱导的单核因子，抑制肿瘤组织新生血管形成。通过下调促血管生成相关基因(如VEGFR1、PTGS1、COx-1和FGFR3)和上调抗血管生成相关基因(如IP-10和TIP3)，阻碍肿瘤新血管生成。IL-27被用来预测乳腺癌生存、免疫检查点表达、免疫细胞浸润。联合PD-1/PD-L1、IDO阻断剂可能是更好的策略。J Immunother Cancer. 2023;11(11):e007530. 抑肥胖理论上，IL-27/IL-27Rα信号能够抵御肥胖和胰岛素抵抗的发展，促进产热和能量消耗。但实际上，IL-27在调节脂肪细胞内炎症反应方面具有双重作用。在体外细胞实验中检测到，在TNF-α或LPS刺激下，前脂肪细胞和脂肪细胞均可分泌IL-27。Acta Physiologica Sinica已知机制包括：抑制肥胖发展促进肥胖发展通过WSX-1信号特异性调控小鼠内脏脂肪组织内Treg数量，进而抑制肥胖的发展。在没有炎症因子干预的情况下，IL-27 刺 激 前 脂 肪 细 胞 后， 可 通 过 激 活ERK和JNK/STAT3途径降低MCP-1、IL-6、TNF-α和COX-2经典炎症基因mRNA的表达，抑制炎症反应。当肥胖已诱发炎症时，IL-27会加重脂肪组织内炎症的进展。在HFD喂养的 IL-27Rα敲除小鼠模型中，脂肪组织中IL-6、TNF-α增加，巨噬细胞浸润增加。直接作用于脂肪细胞，通过p38MAPK/PGC-1α 信号通路诱导产热效应子 UCP1 的表达，促进产热，进而调节肥胖。在体外细胞实验中检测到，在 TNF-α或LPS刺激下，前脂肪细胞和脂肪细胞均可分泌 IL-27。体外实验中，在培养基中加入TNF-α后，IL-27能与TNF-α协同作用，显著增加MCP-1、IL-6、COX-2和TNF-α的表达。同时，成人和儿童的IL-27作用也有差异。有研究显示，成人血清IL-27水平会随着肥胖程度的加重而降低，且在减肥成功后 IL-27 的水平恢复正常。但肥胖儿童血浆中则观察到IL-27水平升高。抗自免以类风湿关节炎(RA)为例：抑制促炎因子分泌致病作用在RA发病早期，IL-27可能通过抑制IL-17和IL-6的分泌，延缓RA的进程。可通过诱导FLS表达粘附分子及释放炎症趋化因子加重RA。可通过与IL-6竞争二者共同的受体亚基gp130而自然拮抗IL-6激活mTOR信号通路，导致外周血中B细胞的失调及功能异常。在RA滑膜中， IL-27能抑制TNF-α或者IL-17A刺激下的FLS产生IL-6。能抑制初始CD4+ T细胞分化为Th17细胞，并通过STAT1依赖性途径抑制Th17细胞的发育，进而减少IL-17的产生。抑制TNF-α诱导产生CCL20，间接阻碍包括Th17细胞在内的CCR6+细胞群的募集，从而减少IL-17分泌。肠道驻留的Treg细胞还会在肠道炎症期间产生IL-27，以限制潜在Th17的分化，从而抑制对肠道细菌的促炎作用，并减轻了自身免疫和自体炎症条件下的肠道损伤。值得注意的是，IL-27和IL-10由不同的Treg细胞组产生。IL-27作为Treg细胞来源的肠道Th17反应抑制因子的具体机制尚不明确，可能是通过STAT1和STAT3受体发出信号。Nat Immunol抗病毒IL-27 可以在PBMC、CD4+ T细胞、MDM及DC等不同免疫细胞中阻碍HIV病毒的复制，其作用机制可能包括：通过激活 CD4+ T细胞中的抗病毒蛋白基因；调节Th1/Th2比率；诱导MDM中 IFIG表达；上调巨噬细胞中的免疫限制因子APOBEC3G及BST-2；下调宿主因子 SPTBN1 及抑制 YB-1 的乙酰化发挥其抑制作用，等等。小结目前进展最快的IL-27单抗应该是Surface的SRF388Coherus的casdozokitug，均已进入2期临床。2024年1月，Coherus在公布了casdozokitug联合疗法治疗局部晚期或转移性肝细胞癌的2期数据，ORR为38%(n=29)，其中3例患者实现完全缓解。本周好文推荐如需转载请联系佰傲谷并在醒目位置注明出处·····

大家好，我是浙江大学医学院的王宇浩。 今天我想跟大家分享的是肠道菌群和脂质吸收间的密切关系，也许我们的身体吸收多少脂肪在很大程度上是由我们的肠道菌群所决定的。 现在的年轻人都非常注重自己的形象。 根据中国青年报的一项调查，在大学生群体中，大约45%的人都对自己的身材表示不满意，更有高达62%的大学生或多或少存在着身材焦虑。 能不能只吃不胖？ 因此我们总能在社交媒体上看到一个灵魂拷问：能不能只吃不胖？ 确实美食和苗条的身材往往不能兼得，大多数人都需要管住嘴、迈开腿，才能维持健康的身材和体重。 但是如果我告诉你，世界上有一种动物无论怎么吃都不会胖，你会不会感到非常神奇呢？ 这种动物就是无菌小鼠。 所谓无菌小鼠，就是生长在无菌环境中的小鼠，它们身体中包括肠道在内的所有组织和器官，都没有任何已知的细菌。 我们在研究中发现，即使给无菌小鼠喂食高脂高糖的饲料，它们也能够维持正常的体重。而普通饲养的小鼠在给予了高脂饲料后，只需短短几周便会出现明显的肥胖症状。 这个结果表明，菌群的缺失将严重影响机体对脂质的吸收能力。 肠菌调控脂质吸收！ 因此我们认为，菌群尤其是肠道菌群，很可能是调控机体脂质吸收过程的关键因素。 为什么缺失肠道菌群会导致脂质吸收缺陷呢？ 我们知道，食物中的长链脂肪酸都需要经过肠道吸收，这些脂肪酸被转运进肠道上皮细胞，需要进一步通过加工和包装形成乳糜微粒后，才能被输送至循环系统被各个组织所利用。 而肠腔中存在着数以万亿计共生菌，这些细菌时刻都在与肠道上皮细胞进行着交互。 因此我们认为，肠道菌群对脂质吸收的影响，很可能是通过对肠道上皮脂质吸收关键基因的调控来实现的。 那这些受肠道菌群调控的基因到底是哪些？ 为了解答这个问题，我们分别从无菌小鼠和普通饲养的小鼠肠道分离了肠道上皮细胞，并对两者的转录组进行了测序分析。 结果发现，有非常多的基因表达在缺失肠道菌群的条件下都发生了改变。也就是说，这些基因的表达是受肠道菌群的存在与否调控的。 而我们想寻找的能调控肠道脂质吸收的关键基因，也一定存在于这其中。 那么这些关键基因究竟是哪个呢？ 生物钟基因NFIL3 我们知道，基因可以根据其参与的生理功能进行分类。其中一类基因能够参与机体昼夜节律的调节，被称为生物钟基因。 而生物钟在肠道的脂质吸收过程中发挥了非常重要的作用，它能让肠道根据我们的作息和饮食节律周期性地启动脂质吸收过程。 那么肠道菌群是不是可以通过调控肠道上皮细胞的生物钟基因，来影响肠道的脂质吸收？ 食物中的脂肪酸需要经过吸收、转运、包装等一系列步骤，才能转化成乳糜微粒进入循环系统。而肠道上皮细胞中有一个非常重要的生物钟转录因子，叫核因子白细胞介素3调节因子（NFIL3），这个转录因子能够参与脂肪酸加工包装的每一步调控。 在正常情况下，NFIL3的表达存在着非常明显的节律变化，这个节律也和小鼠的作息保持一致。在白天，小鼠处于睡眠状态，因此NFIL3的表达逐渐降低。而在晚上，小鼠处于觅食状态，NFIL3的表达也逐渐升高，因此促进了肠道对脂肪的吸收过程。 但是我们通过对无菌小鼠肠道上皮细胞的转录组分析发现，缺失肠道菌群能够导致NFIL3的表达显著降低。这表明肠道菌群能通过促进NFIL3的节律性表达，提高肠道对脂质的吸收。 事实也的确如此。 当我们把NFIL3在小鼠的肠道上皮细胞中特异性敲除后，这些小鼠表现出了与无菌小鼠一样不长胖的表型。在喂食了高脂饲料后，依旧保持了很低的体脂率，体型明显小于野生型小鼠，腹部脂肪垫也明显小于野生型小鼠，肝脏也没有出现明显的脂肪肝现象。 因为NFIL3主要调控的是脂质吸收过程，因此当NFIL3被敲除后，肠道上皮中的脂质积累明显降低，肠道组织中的脂质含量明显减少，而留存在粪便中没有被吸收的脂质则明显增多。 以上结果说明，肠道菌群确实能够通过生物钟基因NFIL3调控肠道脂质的吸收。 组蛋白修饰酶HDAC3 但是受肠道菌群调控的基因还有非常多。除了生物钟之外，一定还有其他途径也能被肠道菌群利用，并用以调节脂质的吸收。 于是我们又想到了另一类关键基因表达调控机制，这就是组蛋白修饰。 我们知道，一个基因的转录、激活或抑制，可以由其组蛋白的乙酰化、甲基化等修饰所调控。 因此，肠道菌群很可能也能通过改变某些组蛋白修饰酶的活性或表达，来影响脂质的吸收。 肠道上皮细胞中存在着重要的组蛋白去乙酰化酶3（HDAC3）。它能够通过去乙酰化许多脂质代谢相关基因的组蛋白，激活这些基因的表达，从而提高肠道对脂质的吸收和代谢效率。 因此，肠道菌群是否能够通过HDAC3来调节肠道脂质的吸收？ 通过对无菌小鼠肠道上皮细胞转录组的分析，我们发现，HDAC3的表达确实在无菌小鼠显著降低。这说明，肠道菌群的确能通过HDAC3调控肠道的脂质吸收和代谢。 为了证明这一点，我们同样将HDAC3在小鼠的肠道上皮细胞中进行敲除。敲除HDAC3后的小鼠也表现出了不长胖的表型，在喂食高脂饲料后维持了很低的体脂率，积累了很少的腹部脂肪，以及没有出现明显的脂肪肝症状。 因为HDAC3同样调控了脂质的吸收过程，因此HDAC3敲除的小鼠肠道上皮细胞中的脂质积累也明显少于野生型小鼠，那些没有被吸收的脂质则被留在了粪便中。 所以，这是我们继肠道生物钟后发现的第二条通路。也就是说，肠道菌群还能够通过调控关键的组蛋白修饰酶的表达，来影响肠道的脂质吸收和代谢。 长链非编码RNA Snhg9 那还有没有第三条通路呢？还确实有。 我们最近的研究发现，有一个名为小核仁RNA宿主基因9（Snhg9）的长链非编码RNA，在无菌小鼠肠道上皮细胞的表达显著上升。 那非编码RNA的表达升高，是不是也和无菌小鼠不长胖的表型密切相关呢？ 我们知道长链非编码RNA是一种不翻译蛋白质，但也是在各类生理活动中发挥重要调控作用的一类分子。 因此我们有理由认为，Snhg9在肠道菌群调控脂质吸收过程中也发挥了非常重要的作用。 为了探索Snhg9的功能，我们将Snhg9在小鼠的肠道上皮细胞中特异性地过表达。 我们发现，一旦Snhg9的表达升高了，小鼠也会出现体脂率下降、不易发生饮食诱导的脂肪肝，以及肠道脂质吸收效率显著降低的现象。 这些结果都说明，肠道菌群的确能够通过长链非编码RNA来影响肠道的脂质吸收。而肠道菌群对脂质吸收的调控是一个非常复杂的过程，里面包含了多种机制的参与。 这些结果也在机制上解释了为什么无菌小鼠能够做到怎么吃都不胖的原因。 不要试图用抗生素减肥！ 可能很多人会问，我们能不能通过服用抗生素来减肥呢？答案是万万不可！ 因为滥用抗生素的危害已经被明确报道，滥用抗生素会加速耐药细菌的出现，导致细菌对抗生素产生抵抗，以至于在感染病菌后不再有药可用。这也是目前全球卫生领域面临的最大威胁之一。 因此我们一定要牢记，千万不要试图通过抗生素来减肥！ 其实我们在研究中发现，Snhg9的表达并非在肠道菌群存在的情况下时刻被抑制。当我们改变肠道菌群的组成时，Snhg9的表达会随之发生变化，而该组小鼠的体脂率也会随着Snhg9的表达升高而降低。 因此我们可能可以通过人为改变肠道菌群的组成，比如服用某些能够提高Snhg9表达的益生菌来降低肠道的脂质吸收效率，达到减肥的目的。这也是我们未来的目标。 希望通过我们的基础研究搞清楚肠道菌群调控脂质吸收的分子机制，并且在研究的基础上开发出基于肠道菌群的治疗方法，比如通过益生菌、益生元、菌群移植等手段，在现实中实现治疗或缓解肥胖等代谢性疾病的目的。 我的分享到此结束，感谢聆听！

NKT细胞是体内的自然杀伤T细胞，主要分为1型和2型，具有跨越先天和适应性免疫反应的多种功能。NKT细胞五分型及标志物循环型iNKT是CAR-NKT更优来源NKT细胞疗法靶向肿瘤是更常见的选择，通常选择1型iNKT作为目标细胞。iNKT通过iTCR识别由CD1d提呈的糖脂抗原、招募和反式激活NK细胞和T细胞以及极化免疫抑制TME的直接和间接作用杀伤肿瘤。不过想要通过NKT细胞的作用通路来治疗炎症自身免疫性疾病的药物还较少。2023年12月，GRI Bio宣布其候选产品GRI-0621治疗IPF的2a期临床试验即将开始患者入组。GRI-0621是一种1型恒定NKT（“iNKT”）拮抗剂。通过作为每日一次的口服胶囊，GRI-0621被设计为能够在炎症级联反应的早期抑制iNKT细胞的活性，从而防止细胞因子释放、细胞浸润，阻断疾病进展。NKT细胞已被证明可以在肺纤维化动物模型中驱动IPF病理学。与健康对照相比：IPF患者的BAL中，IFN-γ+、CD45+和整体NKT细胞的数量和比例显著增加；TGF-β1、SPP1和COL1A1显著增加；IPF中NKT细胞总数与气道巨噬细胞总数相关，但和肺功能FVC%无关。Front. Immunol.慢性炎症中NKT细胞作用NKT细胞可分为两类，1型也就是iNKT细胞促进炎症性疾病，而2型NKT细胞在几种慢性炎症性疾病中具有保护作用。组织驻留的iNKT优先定位在肺实质中，主要为三个亚群，分别对应影响1、2、3型免疫通路。NKT1表达T-bet，主要分泌GM-CSF和IFN-γ；NKT2表达GATA3和PLZFhigh，分泌IL-4、IL-5和IL-13；而NKT17则表达RORγt，分泌IL-17A和IL-22。iNKT亚群转录因子表征分泌的细胞因子NKT1 cellsPLZFlowT-bet+CD49a+CD122+CXCR3+CD4 (+/−)IFNγIL-4TNFNKT2 cellsPLZFhiICOS+CD4+IL-4IL-5IL-13NKT17 cellsPLZFintRORγt+ICOS+Syndecan 1+CD4−CCR6+CD103+NRP1+IL-17IL-22GM-CSFTNFNKTfh cellsBCL-6+CXCR5+PD1hiCD4+IL-21NKT10 cellsPLZF−E4BP4+CD49d+PD1+NRP1+IL-10IL-2在急性感染的情况下，iNKT起到保护组织、抑制炎症的作用，但是在过敏性哮喘等免疫相关炎症性疾病中，反而会加剧肺部炎症。在NASH、重型酒精性肝炎、狼疮性肾炎和IPF等一些涉及炎症性纤维化的疾病中：iNKT细胞被慢性激活，并分泌明显更高水平的促炎细胞因子；在损伤后iNKT细胞通过趋化因子受体CXCR6的相互作用而显著积聚；并且，IFN-γ+ iNKT细胞的增加与NAFLD活动评分的进展和患者的纤维化分期相关。iNKT细胞的激活会导致巨噬细胞显著增加、常规T细胞聚集被抑制、星形胶状细胞激活、以及小鼠纤维化组织中IL-1β、IL-6和TNF-α水平降低。Front. Immunol.随着纤维化的进展，慢性炎症组织中的三类iNKT细胞亚群很可能变为由其中一种或者两种亚群占据主导地位。在小鼠中的分布可见下图：Nat Rev Immunol.小结GBI Bio的这款iNKT细胞拮抗剂并未透露具体的拮抗机制，可能是类似TCR之类结合受体的方法。iNKT在肿瘤中的机制较为详细(肿瘤细胞治疗：NKT独特优势及临床进展)，慢性炎症和纤维化也是实体瘤的特征。如果能够准确把握亚群特征，不失为一种快速可行的开发思路。不过除了组织驻留iNKT，循环iNKT也可能会竞争这种拮抗作用，从而削弱对特定器官的治疗效果。参考文献：1.Kumar V, Hertz M, Agro A and Byrne AJ (2023) Type 1 invariant natural killer T cells in chronic inflammation and tissue fibrosis. Front. Immunol. 14:1260503. doi: 10.3389/fimmu.2023.12605032.Crosby CM, Kronenberg M. Tissue-specific functions of invariant natural killer T cells. Nat Rev Immunol. 2018 Sep;18(9):559-574. doi: 10.1038/s41577-018-0034-2. PMID: 29967365; PMCID: PMC6343475.3.https://www.biospace.com/article/releases/gri-bio-commences-patient-enrollment-in-phase-2a-biomarker-study-evaluating-lead-program-gri-0621-for-the-treatment-of-idiopathic-pulmonary-fibrosis-ipf-/4.https://gribio.com/gri-bio-presents-data-supporting-innovative-pipeline-of-nkt-cell-modulators-for-the-treatment-of-high-value-inflammatory-fibrotic-and-autoimmune-diseases/