点击上方的 行舟Drug ▲ 添加关注新拟处方中的辅料对瑞舒伐他汀钙片溶出的影响来源《中国医院药学杂志》2022年7月第42卷第14期作者 宋丽洁,吴青青,陈佩佩,潘玉婷,赵旺明扬子江药业集团有限公司药物研究院摘要目的: 通过对比溶出曲线,研究处方中的辅料对瑞舒伐他汀钙片溶出的影响。方法: 采用粉末直接压片工艺,通过单因素试验,考察处方中乳糖的型号、微晶纤维素的来源、钙盐的种类、交联聚维酮的型号及用量、硬脂酸镁的用量和包衣粉的用量对瑞舒伐他汀钙片溶出的影响。结果: 不同的乳糖型号(T80、PW80、315)、微晶纤维素来源(PH102、M102、102)、硬脂酸镁用量(0.5%、1%、2%)、包衣粉用量(2%、3%、4%)对溶出的影响差异较小,钙盐的种类(磷酸钙、无水磷酸氢钙、碳酸钙)、交联聚维酮的型号(XL、XL-10)及用量(3%、5%)对溶出的影响有一定差异。结论: 处方中的稳定剂及崩解剂对瑞舒伐他汀钙片的溶出有影响,填充剂、润滑剂及包衣粉对溶出影响较小。关键词辅料;瑞舒伐他汀钙片;溶出;直接压片_正文_瑞舒伐他汀钙是一种选择性HMG-CoA 还原酶抑制剂[1],由盐野义(Shionogi)与阿斯利康(AZ)联合开发研制,用于治疗原发性高胆固醇血症、混合型血脂异常症及纯合子家族性高胆固醇血症[2-3],已在全球多个国家和地区上市,剂型为片剂,全球上市规格有2.5,5,10,20,40 mg,国内上市规格为5,10,20 mg。瑞舒伐他汀钙片活性成分为瑞舒伐他汀钙,参比制剂辅料:微晶纤维素、乳糖一水合物、磷酸钙、交联聚维酮、硬脂酸镁以及包衣材料[4]。本品参比制剂中无粘合剂成分,推测为粉末直接压片工艺。粉末直接压片工艺简单易行,节能且高效,该工艺常用辅料[5]的发展及引入,推动了该制剂工艺的发展,使其得以推广。本文以瑞舒伐他汀钙片为研究对象,采用粉末直接压片工艺,以参比制剂为标准,系统研究处方中各辅料对制剂溶出的影响,旨在为仿制药开发和上市后辅料变更提供依据。1材料1.1 仪器HBD-5型固定料斗混合机(迦南科技集团有限公司);C&C800型旋转压片机(北京创博佳维科技有限公司);BG1-5高效包衣机(北京航空制造工程研究所);AT7 Smart 型溶出仪(STOAX);1260型高效液相色谱仪(Agilent)。1.2 试药瑞舒伐他汀钙原料药(山东朗诺制药有限公司,含量100.1%,批号170902001);瑞舒伐他汀钙对照品(中国食品药品检定研究院,含量:97.6%,批号101028-201202);参比制剂(阿斯利康,10 mg 规格,批号131956);乳糖(T80,MEGGLE, 批号L104315215A552); 乳糖(PW80,江苏道宁药业有限公司,批号P181001); 乳糖(315,KERRY,批号8516031051);微晶纤维素(PH102,FMC,批号P216829643);微晶纤维素(102,JRS,批号5610273519);微晶纤维素(M102,明台化工股份有限公司,批号C1808050);交联聚维酮(XL,ASHLAND,批号NPC-0042);交联聚维酮(XL-10,ASHLAND, 批号0001964827);磷酸钙(TRI-CAFOS 250,Budenheim,批号MV5730E);无水磷酸氢钙(DCPA128,PRAYON,批号A057339);碳酸钙(SUDEEP,批号3GH0036);硬脂酸镁(浙江中维药业有限公司,批号180402);薄膜包衣预混剂(32K640002-CN,上海卡乐康包衣技术有限公司, 批号THL52944)。内容由凡默谷小编查阅文献选取,排版与编辑为原创。如转载,请尊重劳动成果,注明来源于凡默谷公众号。2方法2.1 处方工艺处方:瑞舒伐他汀钙、乳糖、微晶纤维素、交联聚维酮、磷酸钙、硬脂酸镁及薄膜包衣预混剂。处方中辅料用量设计参考俄罗斯药监局公布的10 mg规格瑞舒伐他汀钙片(阿斯利康)的辅料用量[6]:乳糖(89.50 mg/片)、微晶纤维素(29.82 mg/片)、磷酸钙(10.90 mg/片)、交联聚维酮(7.50 mg/片)、硬脂酸镁(1.88 mg/片)、薄膜包衣预混剂(组分总和4.50 mg/片)。为便于生产投料的折算,自研制剂在此基础上通过适量优化调整,片芯总质量150 mg,瑞舒伐他汀钙10.40 mg/片,辅料用量:乳糖(90.00 mg/片)、微晶纤维素(30.00mg/片)、磷酸钙(10.60 mg/片)、交联聚维酮(7.50 mg/片)、硬脂酸镁(1.50 mg/片)、薄膜包衣预混剂(组分总和4.50 mg/片)。本实验按照2 000片处方投料。工艺:在混合料斗中顺次加入1/2的乳糖、原料药、微晶纤维素、交联聚维酮和磷酸钙,以10 r·min-1混合20 min;之后加入剩余的乳糖,以10 r·min-1混合20 min;再加入硬脂酸镁,以10 r·min-1混合10 min;最后进行压片和包衣。2.2 溶出方法瑞舒伐他汀钙片在pH1.0盐酸溶液中溶出速率最慢,故以此介质作为筛选条件[7]。按照溶出度与释放度测定法[8](桨法),以pH1.0盐酸溶液为溶出介质(900 mL)、转速50 r·min-1, 温度(37±0.5)℃进行溶出试验,在5,10,15,30,45,60 min取样,测定累积溶出量,绘制溶出曲线。2.3 溶出曲线相似性根据国家药品监督管理局药品审评中心发布的《普通口服固体制剂溶出曲线测定与比较指导原则》中推荐使用的相似因子(f2)法,评价溶出曲线相似度,若50≤f2≤100,表示自研制剂与参比制剂溶出行为相似[9]。指导原则明确了f2法最适合3~4个或更多取样点,且溶出量超过85%的时间点不超过1个,故根据参比制剂及自研制剂的溶出情况,选择5,10,30 min取样点累积溶出量计算f2。2.4 检测方法及验证按高效液相色谱法[10](《中国药典》2020版四部通则0512),参考进口注册标准(JX20050198)[11]溶出度项下的色谱条件,采用外标法以峰面积计算。2.4.1 色谱条件色谱柱:XBridge C18(4.6 mm×150 mm,3.5μm); 以水-乙腈-磷酸(600:400:1)为流动相;检测波长: 242 nm;柱温:40 ℃;流速:1.0 mL·min-1; 进样量:10μL。2.4.2 溶液的制备(1)对照品溶液:精密称取瑞舒伐他汀钙对照品约11 mg,置100 mL量瓶中,加溶出介质溶解并稀释至刻度,摇匀作为对照品贮备液。精密量取对照品贮备液1 mL,置10 mL量瓶中,加溶出介质稀释至刻度,摇匀即得。(2)供试品溶液:取瑞舒伐他汀钙片,照“2.2”项下方法取样10 mL,过0.45μm 水系滤膜,弃去初滤液3 mL,取续滤液即得。(3)空白溶液:取处方量的辅料混合均匀,照“供试品溶液”操作方法,制成空白溶液。2.4.3 专属性分别精密吸取空白溶液、对照品溶液及供试品溶液各10μL,注入液相色谱仪,记录色谱图(图1),结果表明溶出介质及辅料对测定无干扰,方法专属性良好。2.4.4 稳定性精密量取“2.4.2”项下对照品溶液,按“2.4.1”项下色谱条件分别在0,2,4,8,12,16,20,24 h测定其峰面积。以主峰面积计,各时间点主峰面积随时间的增加呈降低趋势(37 ℃条件下, 从0h的100.0%降低到24 h的75.6%;10℃条件下, 从0h的100.0%降低到24 h的91.5%),样品不稳定。以主峰面积和降解产物峰面积的和计算,在37℃和10℃条件下各时间点峰面积相对0h均在98.0%~102.0%范围内, 表明按此法计算,稳定性良好。2.4.5 滤膜吸附取对照品溶液和供试品溶液各2份,一份离心后取上清液,另一份用0.45μm的水系滤膜过滤,分别弃去初滤液0,1,2,3,5 mL后取续滤液进行测定。对照品溶液和供试品溶液在弃去不同体积初滤液后,与离心样品峰面积的比值均在98.0%~102.0%范围内,可认为滤膜对样品无吸附作用,选择弃去初滤液3 mL。2.4.6 线性范围精密量取“2.4.2”项下对照品贮备液适量,加溶出介质,分别稀释成质量浓度为1.12, 2.23, 5.58, 11.17, 16.75, 22.34, 33.50μg·mL-1的7份线性溶液,以溶液浓度为横坐标(X)、峰面积为纵坐标(Y)进行线性回归。瑞舒伐他汀钙在1.12~33.50μg·mL-1浓度范围内,回归方程Y=22 449.655 3 X+822.060 9, r=0.999 9,表明线性关系良好。2.4.7 精密度精密量取“2.4.2”项下对照品溶液,按“2.4.1”项下色谱条件连续进样5次(峰面积为251 593,251 081,250 118,251 196,252 887), 计算峰面积RSD为0.4%,表明方法精密度良好。2.4.8 重复性取6份“2.4.2”项下供试品溶液,按“2.4.1”项下色谱条件测定各样品溶出量(分别为93.08%, 90.69%, 90.02%, 93.88%, 93.54%, 90.59%),计算RSD 为1.9%,表明方法重复性良好。2.4.9 准确度在处方量空白辅料的900 mL pH1.0介质溶出液中,分别加入相当于制剂中药物含量50%、100%、150%的对照品,搅拌混匀,制备低、中、高3种浓度溶液各3份,按“2.4.1”项下的条件进样,记录色谱图,计算回收率(表1)。所有浓度回收率均在98.0%~102.0%范围内,9个回收率数据的RSD为0.8%, 小于2.0%,表明该方法准确度良好。经验证,所建HPLC方法专属性、稳定性、线性、精密度、重复性、准确度良好,适用于瑞舒伐他汀钙片在pH1.0盐酸介质溶出液的测定。3结果3.1乳糖型号的影响乳糖作为填充剂,占比达到60%,选择3种不同厂家乳糖型号制备样品,对比结果,见表2,溶出曲线f2均大于50,与参比制剂相似。表明所选乳糖对处方溶出的影响差异较小,在制剂开发过程中均可作为选择。3.2微晶纤维素来源的影响微晶纤维素作为填充剂,占比为20%,选择3种不同来源、相同型号的微晶纤维素制备样品,对比结果,见表3,溶出曲线f2均大于50,与参比制剂相似。表明所选微晶纤维素对处方溶出的影响差异较小,在制剂开发过程中均可作为选择。3.3交联聚维酮型号及用量的影响交联聚维酮作为崩解剂,在处方中占比较小,为5%,选择不同型号及用量的交联聚维酮制备样品,对比结果,见表4,交联聚维酮XL(3%、5%)处方,溶出曲线f2均小于50,与参比制剂不相似;交联聚维酮XL-10(3%、5%)处方,溶出曲线f2均大于50,与参比制剂相似。表明不同交联聚维酮的型号及用量对处方溶出的影响有一定差异,优选交联聚维酮XL-10,用量为3%~5%。3.4不同类型钙盐的影响钙盐作为稳定剂,占比7.1%,通过稳定片剂微环境(pH),从而抑制内酯的生成[7]。选择不同类型的钙盐制备样品,对比结果,见表5,没有加钙盐的处方和碳酸钙处方,溶出曲线f2<50,与参比制剂不相似;磷酸钙与无水磷酸氢钙处方溶出曲线f2>50,与参比制剂相似。表明不同类型的钙盐对处方的溶出有一定影响,磷酸钙与无水磷酸氢钙的处方可作为选择。3.5硬脂酸镁用量的影响硬脂酸镁作为润滑剂,占比较小,为1%,具有疏水性,能减缓药物的溶出速度。选择不同用量的硬脂酸镁制备样品,对比结果,见表6,溶出曲线f2均大于50,与参比制剂相似。表明硬脂酸镁用量(0.5%、1%、2%)对溶出的影响较小,用量可选择0.5%~2%。3.6包衣粉用量的影响包衣粉可以优化产品外观,改进产品的口味及气味,也能避免速释片剂受潮,用量为片芯的3%。采用同一批片芯,分别在包衣增重2%、3%和4%时取样,对比结果,见表7,溶出曲线f2均大于50,与参比制剂相似。表明不同用量包衣粉(2%、3%、4%)对溶出的影响较小,包衣增重可选择2%~4%。3.7处方重现试验根据以上研究情况,按照相同的处方工艺,重复3次,如表8所示,自研制剂与参比制剂在pH1.0,4.5,6.8及水4种介质的溶出结果见表9~12。结果表明,重现处方样品在pH1.0介质溶出曲线f2均大于50,与参比制剂相似;在pH4.5,6.8和水介质中,15min累积溶出量均大于85%,与参比制剂相似。综上,筛选的处方重现性良好。3.8小结瑞舒伐他汀钙片中各辅料对溶出的影响结果表明:乳糖、微晶纤维素型号及来源、硬脂酸镁用量、包衣粉用量对溶出的影响差异较小,在产品开发及上市后辅料变更中可作为低风险因素控制;交联聚维酮型号及用量、钙盐种类对溶出的影响有一定差异,在产品开发及上市后辅料变更中需作为高风险因素控制。通过处方重现试验,最终筛选的辅料型号及用量可作为本品开发及辅料变更的依据。4讨论4.1 溶出介质的选择瑞舒伐他汀钙属于BCSⅢ类物质,具有高溶解性[12]。根据参比制剂在pH1.0,4.5,6.8及水4种介质中溶出情况,pH1.0介质中溶出速率最慢[7],自研与参比的相似程度不同,最具区分力;其他3种介质中,自研与参比在15min溶出量均达到85%以上[9],溶出相似,无明显区分力。美国FDA公布的溶出方法参照2018年溶出指导原则[13]首选0.1 mol·L-1盐酸溶液(即pH1.0介质)。为使自研与参比在体外溶出相似,减小生物等效性风险,故选择pH1.0介质作为筛选的溶出曲线。4.2 吸收部位瑞舒伐他汀钙绝对生物利用度低,约为20%,绝大部分以原形药从粪便及尿液中排泄[4],目前国内外文献尚无报道其在人体内的具体吸收部位。日本的原研制剂IF文件[14]中显示瑞舒伐他汀钙在大鼠的整个胃肠道吸收程度相同(胃内74.7%、小肠上段82.4%、小肠中段91.9%、小肠下段78.0%、结肠87.3%、直肠78.1%),由此推测其在人体的胃肠道吸收程度与此类似。因此瑞舒伐他汀钙在胃内的溶解情况可能对其吸收有影响,为减小生物等效性风险,应提高自研与参比在pH1.0介质中的溶出相似性。4.3 工艺选择已有文献报道了瑞舒伐他汀钙片制备工艺[15-18],瑞舒伐他汀钙在酸性条件下容易产生降解杂质[7,19],湿法制粒工艺复杂,对产品的稳定性要求较高,风险较大。粉末直压因工艺简单、对产品的稳定性要求低、生产成本低等优点,已逐渐成为制剂工艺的趋势。故本文采用粉末直接压片工艺对处方中的辅料进行研究。4.4 辅料的影响不同的乳糖型号、微晶纤维素来源、硬脂酸镁用量、包衣粉用量的处方在pH1.0介质中溶出曲线均与参比制剂相似。不同处方均在2 min内全部崩解,崩解现象基本一致。推测乳糖和微晶纤维素型号及来源不同,粉体性质有差异,但本质和比例未发生变化,与原料药混合均匀,压片后,原有的粉体性质被破坏、重组,形成结构相似的片剂,故溶出现象及溶出曲线相似。硬脂酸镁和包衣粉占比小,对片剂崩解及溶出难以形成延迟效应,因此溶出曲线相似。钙盐的种类、交联聚维酮的型号及用量的处方在pH1.0介质溶出有差异。磷酸钙与无水磷酸氢钙处方崩解速度与参比制剂基本一致,溶出现象及溶出曲线相似。碳酸钙处方可能是碳酸钙与盐酸反应产生气体导致片剂上浮,且气体在片剂内部导致水分不易进入,崩解剂无法充分发挥作用,致使崩解较慢,影响溶出。交联聚维酮XL比XL-10粒径大,崩解作用更强,在用量较低(3%~5%)时,辅料粒径的作用更加明显,从而导致XL(3%、5%)在前15 min的溶出比参比制剂快,与参比制剂不相似; XL-10粒径小,崩解作用较弱,用量在3%~5%时,崩解作用差异不大,与参比制剂相似。4.5 试验设计及数据分析本文基于粉末直压工艺及原研制剂处方设计试验,采用单因素试验考察辅料对溶出的影响。考虑到乳糖、微晶纤维素型号较多及产品上市后的辅料变更诉求,选择粉末直压用辅料型号,湿法制粒或者干法制粒等用途的型号未列入考察范围,因此有一定的不足。根据指导原则[9],采用非模型依赖法中的相似因子(f2)法进行数据分析及比较,选择3个取样点,f2≥50,溶出行为相似;f2<50,溶出行为不相似。参考文献详见《中国医院药学杂志》2022年7月第42卷第14期文章信息源于公众号凡默谷,登载该文章目的为更广泛的传递行业信息,不代表赞同其观点或对其真实性负责。文章版权归原作者及原出处所有,文章内容仅供参考。本网拥有对此声明的最终解释权,若无意侵犯版权,请联系小编删除。学如逆水行舟,不进则退;心似平原走马,易放难收。行舟Drug每日更新 欢迎订阅+医药大数据|行业动态|政策解读