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2016-04-25·Sheng wu gong cheng xue bao = Chinese journal of biotechnology
[Heterologous expression and characterization of Klebsiella oxytoca lysine decarboxylase].
Article
作者: Li, Naiqiang ; Yu, Lijun ; Xu, Yan
赖氨酸脱羧酶，可以催化赖氨酸脱羧生成戊二胺。戊二胺是重要的平台化合物，可以合成新型聚酰胺材料、脂肪族异氰酸酯等新材料。本研究对来自于产酸克雷伯氏菌的赖氨酸脱羧酶进行异源表达。以pUC18质粒为载体，将来源于产酸克雷伯氏菌的赖氨酸脱羧酶基因ldc 克隆到大肠杆菌，得到菌株LN18。在添加0.5 mmol/L IPTG 的LB 培养基中，对LN18 进行摇瓶培养，发酵液酶活可达到35 U/g 发酵液，从发酵液制备的赖氨酸脱羧酶粗酶蛋白的酶活可以达到30 000 U/g 粗蛋白。产酸克雷伯氏菌赖氨酸脱羧粗酶蛋白大小约80 kDa，粗酶的最适温度和pH 值分别为55 ℃和5.5，与文献中报道的大肠杆菌的赖氨酸脱羧酶CadA 在pH 8.0几乎没有酶活不同，产酸克雷伯氏菌的赖氨酸脱羧酶在pH 8.0 的酶活达到最优pH 下酶活的30%以上。金属离子对酶活有一定的影响，Mg²⁺对酶活有促进作用，Fe²⁺ 、Zn²⁺、Ca²⁺有一定的抑制作用。.
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