抗体药物概论及我国市场发展现状抗体的定义为由抗原(一般为外来蛋白质)刺激后由免疫细胞产生的能与抗原发生特异性反应的免疫性球蛋白,而只针对某一特定的抗原决定簇起作用的抗体称为单克隆抗体(简称单抗)。抗体与靶抗原结合具有高特异性、有效性和安全性。临床用于恶性肿瘤、自身免疫病等各种重大疾病,如果按照其特异性结合抗原或其表位的数量进行分类,抗体药物可分为单克隆抗体、双特异性抗体,甚至有一些三抗或四抗正在研发中。而我国的药典和指导原则对单抗和双抗有明确的定义。人用重组单克隆抗体制品,系指采用各种单克隆抗体筛选技术、重组DNA技术及细胞培养技术制备的单克隆抗体治疗药物,包括完整免疫球蛋白、具有特异性靶点的免疫球蛋白片段、基于抗体结构的融合蛋白、抗体偶联药物等。其作用机制是通过与相应抗原的特异性结合,从而直接发挥中和或阻断作用,或者间接通过Fc效应子发挥包括抗体依赖和补体依赖细胞毒作用等生物学功能。图:单克隆抗体示意图双特异性抗体(bispecificantibody,BsAb,以下称为“双抗”)是通过细胞融合或重组DNA技术制备的人工抗体,可以同时特异性结合两种抗原或同一抗原的两个不同表位。BsAb能够分别识别和结合两种不同的抗原或抗原表位,所以它可以把免疫细胞等效应细胞或细胞因子连接到肿瘤细胞上,进而增强对靶细胞的杀伤作用;可以结合同一肿瘤细胞上的不同抗原表位以增强其结合特异性,同时减少脱靶毒性带来的不良反应;或者结合同一免疫细胞上不同的免疫检查点,同时阻断/激活下游免疫信号通路,激活或抑制免疫细胞。常见的一些双抗技术平台结构示意图(Antibodies 2020, 9, 0065)根据目前FDA已经获批的抗体药物分析,截至2021年6月30日,获批的总数按照靶点和抗体类型进行拆分,FDA共批准122种单抗药物上市,适应症多为抗肿瘤。随着技术的进步以及各类型平台的不断成熟,双抗、ADC以及多抗等多种药物的市场不断扩大。例如双抗在2016-2020以120.4%的复合年增长率快速发展,多抗预期将在2020-2025年迎来增长高峰期,但单抗仍占较大比重。在我国尽管抗体药物产业起步较晚,但是随着近年来高表达细胞株构建,细胞大规模培养工艺,表征分析与质控技术等行业技术壁垒的突破,越来越多的国产抗体药物开始注册临床试验,并成功上市。从适应症和靶点角度来看,我国现有的单抗涵盖的适应症较少,且还存在大量未满足的临床需求。随着研发和审批程序加快,抗体类药物有望覆盖包括心血管、眼科及神经系统在内的更多治疗领域。从抗体药物技术研发角度来看,为了降低抗体药物的免疫原性,抗体开发平台从最开始的鼠源一步步发展,人鼠嵌合,人源化,到全人源抗体。此外,随着DNA重组技术的快速发展,在抗体筛选,scFc工程等方面取得了重大突破,使得例如半衰期延长形式的抗体,增强生物活性的抗体药物等功能多样化的抗体药物得到研发,抗体的开发也逐步走向了,人源化,功能化,小型化,专业化。从国内抗体药物竞争角度来看,我国单抗药物靶点同质化较高,大部分市场份额被跨国公司占据,拥有已被证实的临床价值的创新产品管线的公司应从竞争环境中脱颖而出。抗体药物的法规及过程CMC考量重点相较于基因治疗产品,抗体药物相关法规和政策都推出较早,例如,2001年3月FDA颁布了题为《Monoclonal Antibodies Used as Reagents in Drug Manufacturing》的GMP指南,该指南侧重于在NDAs,ANDAs,INDs,BLAs申报过程中的化学,生产,控制(CMC)问题。指南指出,对于单抗试剂,主要重点是评估以下重点因素:1.生物安全性,特别是评估单抗试剂与来自细胞底物或细胞系来源的外源和/或工艺相关杂质的污染。2.单克隆抗体试剂在原料药生产过程中的性能特征(如对目标分子的活性和特异性)。3.最终原料药和/或药品中可能存在单抗试剂的残留量。CDE团队此前在中国临床药理学杂志中发布的文章也列举了8个需要注意的关键点:临床试验用药物的制备;细胞库;生产用原材料;生产工艺和过程控制;病毒灭活/去除验证;质量研究;稳定性研究;容器密闭系统。此外,由于越来越多的双特异性抗体簇拥上市,同时也对双抗药物的CMC问题,临床和非临床开发问题提出了严格要求。顺应这一现象而生的是CDE和FDA关于双抗药物的指南。2021年5月21日,FDA发布了题为《Bispecific Antibody Development Programs Guidance for Industry》的行业指南。除了一般考虑因素外,该指南还对双特异性抗体开发项目的具体监管、质量、非临床和临床考虑因素提供了建议。主要讨论了双抗在CMC中的独特方面以及临床和非临床开发程序。其中在CMC质量考量方面,指南指出,由于双抗的存在形式多种多样,抗原特异性、亲和力、有效性、与其相关的杂质(如同源二聚体或同源错配物种)以及半衰期、稳定性等都是影响其质量所要考量因素。从IND到BLA的药学评价创新型抗体药物研发进程具有“创试性”(临床试验存在较大的失败风险)、“阶段性”(药学研究可分阶段展开)和“渐进性”(临床期间通常发生工艺变更)的特征,研发过程中常常伴随着失败风险。①创新型单抗药物例如,创新型单抗药物的药学研究随临床试验进程“分阶段”、“渐进式”的开展,药学评价同样遵从药物研发规律。在申请临床阶段药学评价应重点关注受试者的“安全性”, 而注册生产阶段则应全面保证药品的工艺稳健性与质量可控性,符合监管方对于药物内涵的定义。如:“安全、有效和质量可控”或“安全(safety)、纯度(purity)和效力(potency)”。单抗药物在注册生产阶段其药学研究内容应基本完成,与申报临床阶段相比,药学评价在细胞基质、工艺表征和验证、质量研究和控制等方面均提出符合商业化生产阶段特点的更高要求,如:工程细胞系在申报临床阶段可以仅构建主细胞库,特殊情况下甚至是未经单克隆化的细胞池(cell pool),但在申报上市阶段应规范建立三级细胞库, 生产细胞一般应符合“单克隆化”要求。②工艺开发工艺开发方面,申报临床阶段可直接采用平台化的中试工艺,临床期间进行产品特异化的工艺开发。注册上市阶段生产工艺应完成商业化生产工艺的性能确认与工艺验证。③质量研究质量研究方面,申报临床阶段对于产品相关变体(分子大小、电荷异构、翻译后修饰等)可采用报告含量的方式进行初步控制,注册生产阶段则需明确产品相关的杂质或物质,并将限度要求纳入质量控制;同时,应建立反映临床作用机制的生物测活方法并纳入放行标准。稳定性试验考察结果,临床试验阶段只要能够满足临床试验用药的质量控制即可,上市阶段则需要提供全面的稳定性考察数据支持上市产品的有效期和储存、运输条件;病毒去除/灭活工艺,在临床试验申请时重在有效工艺步骤的初步验证,注册生产上市时应完成全面的验证。此外,对于抗体药物生产过程中所接触到高风险的一次性耗材与惯用包材,在产品注册生产时也应完成产品特异性相容研究。④改良型抗体而对于一些在单抗药物基础上进行改良的改良型抗体,其设计依据在于通过分子改构,克服原型蛋白临床局限性。因此,其药学评价应重点关注其“分子改构”的目的、方法与效果。上游构建方面应结合立题依据,在详述分子改构的原因、突变位点的选择依据。质量研究中应结合原型抗体进行比较研究,从结构确证、免疫学活性、生物活性等方面验证分子改构符合预期。如果缺乏与原型抗体(或已上市抗体)的质量比较数据,或证实上述改构不具有功能学意义,是不支持其作为“创新药”生物制品进入临床试验的。⑤双特异性抗体与传统抗体相比,双特异性抗体改变了既往单抗“双价、单靶标”的结合模式。因此,此类创新抗体的质量研究应重点对多个活性区域的结构与功能进行研究,如:肽图中应说明结合不同靶标的轻、重链氨基酸序列及complementarity-determining region特征肽段;功能学研究应说明不同靶标的结合能力和生物活性。此外,还应关注双特异性抗体区别于天然抗体的独特性质。如:BiTE型抗体由于不含恒定区、体内半衰期较短和T细胞激活功能的临床使用剂量小(μg级),临床使用过程中需使用特殊溶解方式和给药装置。图:BiTE型抗体结构示意⑥复方抗体复方抗体是多个单克隆抗体的混合物,可识别病毒颗粒的不同表位,提高临床上的保护效力。由于复方抗体的有效成分为多种单抗,其药学资料应包括提供不同抗体的原材料、生产工艺、质量研究,以及复方制剂的混合方式。质量研究中应结合不同抗体结合表位、生物活性,说明复方组成的立题依据。对于制剂灌装前进行混合的复方抗体,应关注半成品混合工艺的控制;对于单独包装、临用混合的复方抗体,应关注混合配伍后的临床使用稳定性。如图为几款埃博拉抗体鸡尾酒 图片来自:doi.org/10.1038/s41573-022-00495-3小编总结总的来说,尽管抗体类药物经过多年发展,其监管体系等方面已经比较成熟,但越来越多的新型抗体技术的出现使得抗体申报又面临许多新的挑战,例如对于新冠中和抗体的加速审批考量,多抗药物一些重要临床参数的加入,申报阶段临床数据可比性,此外互联网时代eCTD使得申报更需要专业性,可能需要配套软件等等。以信达的信迪利单抗中美申报遭遇的挑战来看,使得临床多元化这一要求可能阻遏抗体药物的成功申请。在美国申报之外,欧盟、日本等地也是药品出海的重要市场。近年来,欧盟质量受权人(Qualified Person)质量审计对抗体药物生产提出高要求。如果某一药企需要把抗体产品的临床样品运到欧洲,需要被欧盟认可的Qualified Person来放行,否则临床产品进不了欧洲市场,这可能对药企造成许多不必要的麻烦。值得一提的是,2021年11月,金斯瑞蓬勃生物南京抗体蛋白药生产基地顺利通过欧盟QP质量审计,标志着金斯瑞蓬勃生物南京抗体蛋白药生产基地已经符合欧盟GMP标准,有能力为国际客户提供高质量的临床样品生产和CMC服务。这是金斯瑞蓬勃生物南京抗体蛋白药生产基地首次欧盟QP质量审计,是对其质量体系符合国内和国际法规要求的持续性验证。截至目前,金斯瑞蓬勃生物南京生产基地已通过来自中国、美国、亚太和欧洲的客户和第三方的多次审计。该欧盟QP审计流程依照Eudralex Vol4(欧盟GMP)法规以及ICH等指导原则,审核范围涵盖质量管理体系、生产管理体系、物料管理、设施设备管理、质量控制、验证和计算机化系统等管理体系。QP审计报告称,金斯瑞蓬勃生物南京生产基地具备高标准的质量管理体系、高度符合标准的设施设备、经验丰富的员工。审计官给予金斯瑞蓬勃生物高度评价,其生产场地完全符合欧盟的监管标准。金斯瑞蓬勃生物GMP生产车间遵循国际领先的设计理念,是真正意义上的“零交叉,单向流”生产线,满足FDA、EMA和NMPA监管要求。车间整体采用了严格的物理隔离措施,可同时进行多种产品的生产。目前,金斯瑞蓬勃生物已经助力抗体药领域客户获得全球临床批件15个。此外,金斯瑞蓬勃生物根据不同目标市场客户和监管要求(包括NMPA,FDA,EMA,ICH和WHO)设计并建立了综合和高效的质量合规体系,以满足不同市场,不同国家的需求。参照PDA TR56,开发并建立特有的与产品生命周期各阶段相适应的质量合规体系(PAC),同时也开发并建立了金斯瑞蓬勃生物特有的CQV客户质量需求管理平台,专注于质量、产品生命各阶段合规和交付价值达成甚至超越客户期待,以合规和高效理念,平衡成本和效率,实现快速申报。图:金斯瑞蓬勃生物CQV管理体系为推动中国创新药高质量发展,助力中国创新药走向更广阔的国际化舞台造福全球患者,2022第三届QbD生物药质量科学大会(点击了解详情)将于8月12-13日在京隆重召开。会议召开前一天,由金斯瑞蓬勃生物主办、佰傲谷承办的“金斯瑞蓬勃生物创新药质量研究案例分析闭门会”将于2022年8月11日在北京朝阳悠唐皇冠假日酒店召开,QbD会前质量研究经典案例剖析,质量高管齐聚一堂,抽丝剥茧,层层深入,既有经验总结,又有新思路启发,我们诚挚的邀请并满心期待着您的到来。参考来源:宋丽娜, 崔靖, 何伍. 创新单抗药物申报临床阶段药学研究关注点[J]. 中国临床药理学杂志, 2021, 37(10):4.刘伯宁, 徐刚领, 罗建辉. 关于我国单抗药物上市阶段药学评价的思考[J]. 药学学报, 2019, 54(11):9.刘伯宁, 罗建辉. 关于创新型抗体药物药学评价的思考[J]. 药学学报, 2017, 52(12):9.金斯瑞蓬勃官网FDA官网EMA官网点击“阅读原文”,进入官网立即报名